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    染色體易位攜帶者17例的產(chǎn)前診斷及妊娠結(jié)果分析

    2022-06-17 10:25:08易鳳梅馮宗輝姜淑敏向雙芝
    中國臨床新醫(yī)學(xué) 2022年5期
    關(guān)鍵詞:配子重排易位

    易鳳梅, 馮宗輝, 姜淑敏, 諶 燕, 李 敏, 瞿 娟, 向雙芝

    在染色體結(jié)構(gòu)重排中,染色體易位較為常見。對(duì)于染色體易位攜帶者,染色體無缺失/重復(fù),斷裂重接沒有影響基因功能,其臨床表型正常,但生殖細(xì)胞在減數(shù)分裂過程中會(huì)形成3種類型的配子[1]:染色體結(jié)構(gòu)正常配子、與攜帶者有相同染色體結(jié)構(gòu)的異常配子及染色體遺傳物質(zhì)數(shù)量異常的配子。若遺傳物質(zhì)數(shù)量異常的配子與正常配子結(jié)合形成胚胎,會(huì)導(dǎo)致早期流產(chǎn)、胎停、胎兒畸形和染色體病胎兒等,使不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)增加。因此,對(duì)于染色體易位攜帶者夫婦,在妊娠時(shí)應(yīng)通過產(chǎn)前診斷及早發(fā)現(xiàn)遺傳缺陷兒和各種先天性畸形,必要時(shí)及時(shí)終止妊娠,以減少出生缺陷情況的發(fā)生[2]。本研究總結(jié)了我院收治的17例染色體易位攜帶患者及其配偶的臨床資料,為提高臨床醫(yī)師對(duì)本病的認(rèn)識(shí)提供參考。

    1 資料與方法

    1.1一般資料 收集2018年1月至2021年12月懷化市婦幼保健院產(chǎn)前診斷中心經(jīng)產(chǎn)前檢查診斷為染色體易位攜帶的17例患者的臨床資料。其中母源性14例,父源性3例;胎兒胎齡為17~29(20.63±3.82)周。對(duì)17例患者均詳細(xì)詢問孕產(chǎn)史、家族史及接觸史;胎兒均行染色體核型及染色體微陣列分析(chromosome microarray analysis,CMA)。本研究獲懷化市醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn),所有研究對(duì)象知情同意參與。

    1.2納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):(1)經(jīng)外周血染色體核型檢測,胎兒父母之一為染色體易位攜帶者;(2)染色體易位攜帶者表型正常。排除標(biāo)準(zhǔn):病例資料不完善者。

    1.3產(chǎn)前診斷方法 通過羊膜腔穿刺獲取羊水標(biāo)本30 ml,經(jīng)受檢者同意對(duì)親本核型進(jìn)行驗(yàn)證,采集夫妻雙方外周血各2 ml。(1)羊水核型檢測:取羊水20 ml,經(jīng)培養(yǎng)、收獲、制片和G顯帶后應(yīng)用LEICA GSL120自動(dòng)掃描儀(美國徠卡公司)進(jìn)行掃描,用Cytovision核型分析軟件對(duì)核型分裂相進(jìn)行分析。每個(gè)標(biāo)本分析5個(gè)核型,計(jì)數(shù)20個(gè)分裂相,若有嵌合體則需加數(shù)到60個(gè)分裂相。檢查結(jié)果參考國際人類細(xì)胞遺傳學(xué)術(shù)語命名系統(tǒng)(Internation System of Chromosomal Nomenclature,ISCN)[3-4]進(jìn)行判定。(2)外周血核型檢測:取外周血2 ml,經(jīng)培養(yǎng)、收獲、制片和G顯帶后進(jìn)行核型分析。掃描儀及分析軟件同上述羊水核型檢測方法。檢查結(jié)果參考ISCN進(jìn)行判定。(3)羊水細(xì)胞CMA檢測:取羊水10 ml,應(yīng)用全基因組Affvmetrix Cvtoscan 750K Arrav芯片進(jìn)行檢測,操作流程按照Affvmetrix公司提供的標(biāo)準(zhǔn)流程進(jìn)行。檢測胎兒基因組中有臨床意義的拷貝數(shù)變異。

    2 結(jié)果

    17例染色體易位攜帶者中母源性14例,父源性3例。14例有胎?;蛱航Y(jié)構(gòu)異常史;1例為首次妊娠,胎兒結(jié)構(gòu)異常;2例為首次妊娠[輔助生殖胚胎植入前遺傳學(xué)檢測(preimplantation genetic test,PGT)],獲正常兒。15例涉及2條非同源染色體;2例涉及3條以上復(fù)雜染色體重排(complex chromosome rearrangements,CCR)。產(chǎn)前診斷胎兒核型及CMA結(jié)果中不平衡易位7例,平衡易位9例,核型正常1例(經(jīng)輔助生殖PGT)。妊娠結(jié)局:引產(chǎn)8例,分娩正常兒9例。見表1。

    表1 17例染色體易位攜帶者產(chǎn)前診斷結(jié)果及妊娠結(jié)局

    續(xù)表1

    3 討論

    3.1染色體平衡易位是指兩條染色體分別發(fā)生斷裂,斷裂片段相互交換位置后重接,無遺傳物質(zhì)增加或減少[1],其表型多為正常,但在生殖細(xì)胞減數(shù)分裂的過程中,易位的染色體將會(huì)配對(duì)形成四射體[5],在減數(shù)分裂后期,可進(jìn)行鄰位、對(duì)位和3∶1分離而形成18種配子[6]。其中僅1種配子是完全正常,1種為平衡易位的攜帶者,其余16種均為不平衡易位。因而大部分胚胎以(部分)單體或(部分)三體而致流產(chǎn)、胎停或畸形兒。本研究病例1~7及病例10~17為涉及2條染色體的易位攜帶。病例1~7產(chǎn)前診斷胎兒核型見不平衡易位衍生染色體,CMA檢測見大片段重復(fù)及部分三體,為明確致病,行引產(chǎn)終止妊娠。而病例10~17胎兒染色體核型遺傳自父母平衡易位,CMA未檢測到致病拷貝數(shù)變異,分娩正常胎兒。上述病例中大多有不良孕產(chǎn)史,其中病例2有4次胎停、2次畸形兒引產(chǎn)史;病例3有3次胎停、1次死胎史,無健康兒出生。因此,對(duì)于有2次及以上不良孕產(chǎn)史的染色體易位攜帶者,建議盡早行輔助生殖PGT,減少反復(fù)流產(chǎn)對(duì)母體的傷害。

    3.2CCR通常指涉及2條或2條以上染色體,至少含有3個(gè)斷裂點(diǎn)的染色體結(jié)構(gòu)畸變[7]。分類方法有多種[8],最常見的分類方法是根據(jù)重排類型及復(fù)雜程度將CCR分為3種類型:(1)三方重排,涉及3條染色體3個(gè)斷裂點(diǎn)的重排,多數(shù)家族遺傳和母系傳播,最為普遍;(2)雙重雙向易位,2組獨(dú)立且簡單的染色體易位并存;(3)特殊類型CCR,具有更加復(fù)雜的染色體結(jié)構(gòu)重排,產(chǎn)生多條衍生染色體[9-10]。

    3.3隨著細(xì)胞及分子遺傳學(xué)在生育問題中的應(yīng)用,相關(guān)研究報(bào)道日益增多。國內(nèi)代鵬等[11]分析了33例CCR攜帶者類型,并總結(jié)了累及不同染色體和斷裂點(diǎn)的相關(guān)咨詢及生育指導(dǎo)。有研究報(bào)道,大約70%的CCR攜帶者表型正常,20%~25%有先天性畸形和(或)智力低下,5%~10%在產(chǎn)前診斷時(shí)發(fā)現(xiàn)[12]。本研究中病例8和病例9為表型正常的涉及三方重排的CCR攜帶者,因胎停行外周血染色體核型檢查而被發(fā)現(xiàn)。病例9染色體核型:46,XX,t(4;12)(q21.1;q24.31)t(4;16)(p12;q13),胎停1次,第2次自然受孕,行產(chǎn)前診斷胎兒染色體核型為46,XN,t(4;16)(p12;q13),胎兒單核苷酸多態(tài)性微陣列(single nucleotide polymorphism array,SNP array)分析未檢測到染色體微缺失微重復(fù)片段,胎兒4、16號(hào)染色體易位遺傳自表型正常的母親,為平衡易位,小孩現(xiàn)1歲,外觀發(fā)育及智力均正常。以三方重排易位為例,理論上配子種類有64種,完全正常和平衡配子占1/32。本研究中病例9在第2次自然受孕即獲一正常后代,表明人類卵子發(fā)生對(duì)CCR有一定處理能力[8]。據(jù)報(bào)道,精子熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)分析顯示,完全正?;蚱胶獾呐渥诱?5%甚至更高[13];而雙重相互易位攜帶者理論上獲得正常配子和平衡配子的概率更低[14]。特殊CCR因涉及易位、插入和倒位等畸變,配子類型更為多樣,對(duì)生育影響也為多樣性。本研究中病例17染色體核型:46,XY,t(7;9)(q22;q21)inv(9)(p11q21),其丈夫?yàn)?、9號(hào)染色體相互易位,9號(hào)染色體臂間倒位,為特殊CCR。前2次自然受孕胎停,后行輔助生殖,取卵3次,共獲卵40枚,培養(yǎng)成囊胚4枚,行PGT檢查,3枚囊胚為染色體部分單體或三體,僅1枚囊胚為整倍體符合移植。于孕17周產(chǎn)前診斷,胎兒核型為46,XN,羊水CMA未見異常,獲得表型正常后代。在CCR中男性遺傳少見,主要由于CCR攜帶者常伴精子形成障礙或停滯導(dǎo)致不育或低生育[15]。有研究顯示,20例男性CCR攜帶者被證實(shí)有生育能力,但發(fā)生不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)高[16]。對(duì)于CCR攜帶者在尋求輔助生殖技術(shù)時(shí),可考慮PGT或供精人工授精方法生育正常后代。大多數(shù)家族性CCR通過女性攜帶者遺傳[8]。本研究中病例8胎兒染色體核型:46,XN,t(2;12;7)(q31;q24.1;q32),孕婦涉及2、12、7號(hào)三方染色體易位,胎兒染色體易位及基因組微缺失片段均遺傳自其母親,另孕婦本人智力偏低,兩次妊娠胎兒發(fā)育異常,要考慮染色體易位造成重要基因截?cái)嘁l(fā)嚴(yán)重疾病表型的發(fā)生[17]。多條染色體復(fù)雜易位,重要基因被打斷的概率增加,不良妊娠結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)增加。目前常規(guī)染色體G顯帶核型分析及染色體微陣列技術(shù)難以明確斷裂點(diǎn),可以通過FISH明確斷裂位點(diǎn)[18]。現(xiàn)有報(bào)道配對(duì)二代測序、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (polymerase chain reaction,PCR)斷點(diǎn)分析技術(shù)及三代測序等技術(shù)均可有效檢測染色體易位斷裂區(qū)域,幫助獲得正常后代[19-22]。

    綜上所述,染色體易位攜帶者的妊娠不良結(jié)局風(fēng)險(xiǎn)高,應(yīng)行產(chǎn)前診斷排除不平衡易位。對(duì)于反復(fù)流產(chǎn)者可選擇PGT或供精人工授精(男性染色體異位攜帶)獲取正常后代,以減少出生缺陷發(fā)生。

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