烏骨雞細菌混合感染的病原分離鑒定

文│劉敏 李歐 徐立朋 康超（吉林省白城市動物疫病預防控制中心）

近年來，沙門氏菌和大腸桿菌混合感染呈逐年上升趨勢，對烏骨雞養(yǎng)殖業(yè)造成很大的危害，降低了養(yǎng)殖效益。因此，烏骨雞沙門氏菌病和大腸桿菌混合感染的分離鑒定和實驗室檢查對養(yǎng)殖業(yè)有很重要的影響。本研究對大腸桿菌和沙門氏菌進行分離培養(yǎng)試驗，為高效敏感藥物的選擇奠定基礎，并通過科學的治療與預防措施來提高烏骨雞群抗病能力，以此提高養(yǎng)殖效益。

一、試驗材料

1.試驗病料。病死烏骨雞的心臟、肝、腸管、氣囊、肺組織、腎等。

2.主要儀器。立式壓力蒸汽滅菌器、生物安全柜、電熱恒溫干燥箱、電子天平、微波爐、生物顯微鏡等。

二、研究方法

1.剖檢變化。解剖死亡烏骨雞發(fā)現(xiàn)，心包膜增厚，心包液增多、混濁，在心包膜表面有淡黃色纖維凝固物，有的與胸膜發(fā)生粘連有纖維素性滲出，心肌出血；肺腫大呈紅黃色，部分雞肺有1～2厘米壞死灶；肝腫大，色澤不勻，并有針尖大白色壞死灶，表面覆蓋有黃白色纖維素性滲出物；腸道有輕度炎癥，十二指腸有出血性腸炎變化，盲腸扁桃體腫脹出血；嗉囊積食，有酸臭液體腫大；腎腫大，有出血點，有尿酸鹽沉積。

2.培養(yǎng)基的制備。

（1）稱取改良馬丁肉湯培養(yǎng)粉12.6克、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)粉17.8克、ss培養(yǎng)粉35克、麥康凱培養(yǎng)粉30克，分別溶于400毫升的開水中，用于制備肉湯培養(yǎng)基、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、ss培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基。再分別放入微波爐高溫度加熱5分鐘，反復3次，之后將培養(yǎng)液共同高壓滅菌30分鐘，冷卻后澆入已滅菌過的平板培養(yǎng)皿中備用。

（2）將研碎的病料（肝、脾、等）先接種在營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)試管中，37℃恒溫培養(yǎng)24小時。長出的病原菌分別接種于普通瓊脂平板、ss瓊脂培養(yǎng)基和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上，恒溫箱培養(yǎng)18小時。

（3）培養(yǎng)后挑取有明顯特征的菌落。以劃線法再次接種于培養(yǎng)基上。再37℃恒溫培養(yǎng)24小時。培養(yǎng)24小時后，分離到2種不同菌落，分別命名為Ⅰ和Ⅱ。

三、試驗結果

1.細菌分離培養(yǎng)。經(jīng)過培養(yǎng)分離出兩種菌，分別為菌Ⅰ和Ⅱ菌，培養(yǎng)特性見表1。

表1 菌Ⅰ和菌Ⅱ的培養(yǎng)特性及菌落特征

2.生化鑒定結果。

（1）菌I生化鑒定結果。經(jīng)過多種生化試驗后，對菌Ⅰ表現(xiàn)出的各種反應進行觀察、記錄結果見表2。

表2 菌I生化試驗結果

（2）菌Ⅱ生化鑒定結果。經(jīng)過多種生化試驗后，對該菌Ⅱ所表現(xiàn)出的各種反應進行觀察、記錄結果見表3。

表3 菌Ⅱ生化試驗結果

3.結果。試驗確定菌I為大腸桿菌，菌Ⅱ為沙門氏菌。

四、結論

試驗表明，對病死烏骨雞采取的病料進行病原分離鑒定，發(fā)現(xiàn)大腸桿菌和沙門氏菌為主要病原菌，從而指導雞場進行準確用藥，達到精準治療的目的。