不積跬步，無以至千里

張玨 周洪彬 李文赟 吳虹麗 陳代杰

引文

王文梅出生在一個普通的、經(jīng)濟略微拮據(jù)的家庭。她的成長伴隨著新中國的成立和翱翔，從她的科研生涯經(jīng)歷中，可以循跡新中國醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展歷程。

上海解放時，王文梅老師僅13歲，年幼的她不曾想到日后她會是我國自主研發(fā)的頭孢菌素、一類新藥——頭孢硫脒的發(fā)明人。在和王文梅老師聊到我刊將記載她的科研生涯，特別是頭孢硫脒研發(fā)過程時，王文梅老師說：“我的人生和科研經(jīng)歷本就是平凡的，這些是我的工作和責(zé)任，我只是想把自己的工作做好！”

本文通過整理王文梅老師的錄音，以傳記的形式記錄王文梅老師的科研生涯。一位以堅持心投入工作，平常心面對成績的耄耋老人用她的經(jīng)歷告訴我們：只要方向是對的，剩下的就是努力和堅持！

1 偶入

王文梅老師出生于1936年，也許與很多其他有成就的人不太一樣，她并非從小胸懷天下，心中有大志。當(dāng)她還只是個十多歲女孩時，她想的僅是如何完成她的中等職業(yè)教育課業(yè)，盡快工作，以緩解家庭的經(jīng)濟壓力。但是命運之手幾度將她推向科研之路。

1952年，王文梅準(zhǔn)備入讀上海東南藥職（時過境遷未查到該校全稱）時，她想的是畢業(yè)后可以從事藥房配藥工作，工作環(huán)境干凈，適合女孩子。將要開學(xué)時，接上級通知上海東南藥職與上海廣澄藥職合并，更名為上海醫(yī)藥工業(yè)學(xué)校，這意味著這個新成立學(xué)校的人才培養(yǎng)目標(biāo)不再是藥房配藥員，而是能從事醫(yī)藥研究、生產(chǎn)的專業(yè)技術(shù)人員，命運之手第一次將王文梅老師推向醫(yī)藥研究。

畢業(yè)之際，學(xué)校老師問王文梅是否愿意考大學(xué)時，她拒絕了，當(dāng)時的她只想盡快工作，以緩解家庭經(jīng)濟壓力。在分配到重慶西南制藥廠工作1年后， 1956年國家急需大量人才，除了當(dāng)時的應(yīng)屆高中畢業(yè)生外，還需要從各工、礦企業(yè)和事業(yè)單位抽調(diào)大批人員進入高校培養(yǎng)。由藥廠領(lǐng)導(dǎo)推薦，王文梅作為一名“調(diào)干生”考取了上海華東化工學(xué)院。 這是時代和國家的需要再一次將她推向了科研之路。

時隔經(jīng)年，已無從考證在學(xué)校和工廠推薦王文梅進入高校學(xué)習(xí)的“伯樂”是誰，但是值得思考的是年輕的王文梅身上有怎樣的品質(zhì)，令他們不謀而合幾度推薦？ 也許，多年后王文梅老師這句話可以回答這個問題：“當(dāng)時我就想，我是工作后考的大學(xué)，屬于社會考生，和普通高中畢業(yè)生相比我還是有一定的差距，我就決心好好努力，不要辜負(fù)這個大好的機會”。也許當(dāng)年的“伯樂”正是看到了她的勤奮、堅韌和執(zhí)著，而這些品質(zhì)伴隨王文梅的整個科研生涯。

在王文梅老師的錄音中，“不辜負(fù)”、“我的責(zé)任”、“應(yīng)該堅持”……，是出現(xiàn)頻率最高的詞匯，在此我不想用更高大上的詞匯來替換它們，因為這就是真實的王文梅！

1956年芳華正茂的王文梅邁進了華東化工學(xué)院的大門，就讀于有機系制藥工藝學(xué)專業(yè)。畢業(yè)后王文梅被分配到上海醫(yī)藥工業(yè)研究院（后文簡稱上海醫(yī)工院），她的科研生涯終于拉開帷幕。

2 啟航

帶著欣喜到上海醫(yī)工院報到后，留給王文梅的卻是內(nèi)心焦急。焦急于自己與上海醫(yī)工院同仁們差距太大。醫(yī)工院研究人員案頭放的都是厚厚的英文資料，而王文梅學(xué)的是俄文，這意味著她必須從零開始學(xué)習(xí)英文。王文梅說：“那時候我就想，歐美處于醫(yī)藥行業(yè)領(lǐng)先地位，要做好醫(yī)藥研發(fā)，懂得英文是必不可少的，如果我不學(xué)好英語，很難勝任在醫(yī)工院的工作?！庇谑浅松习鄷r間，幾乎所有的空余時間都被王文梅用于學(xué)習(xí)英語和有機化學(xué)，搖擺的老式公交車、寫滿英文單詞的小紙條都見證了她的堅持和執(zhí)著。

剛到上海醫(yī)工院工作時，王文梅被分到血吸蟲病防治小組，時值研究小組正在對一種非銻劑新藥進行中試放大。當(dāng)她跟著研究組去醫(yī)院了解病患情況時，看到患者們痛苦地躺在床上，用充滿希冀與渴求被救治的眼神看著他們，王文梅老師被深深的觸動了。“他們太痛苦了，作為藥物開發(fā)、研究人，有責(zé)任研制出好的藥來幫助患者，解除他們的痛苦！”多年后，回憶起那一幕，王文梅老師仍感嘆道。

20世紀(jì)60年代，是半合成青霉素的“黃金時代”，上海醫(yī)工院成立了半合成抗生素研究小組，王文梅加入了研究團隊。在老師的帶領(lǐng)下，王文梅先后參加了仿制藥氨芐青霉素（氨芐西林）和羧芐青霉素（羧芐西林）研發(fā)的全過程，從小試到中試放大，無菌樣品制備等。通過對這兩個產(chǎn)品研發(fā)的全程參與，王文梅對半合成青霉素的性質(zhì)、合成技巧等有了很多感性認(rèn)識，在工作中受益匪淺。

與此同時，她的科研生涯正一步步邁向那個神奇的“74018”。

20世紀(jì)70年代為響應(yīng)國家號召——“國外有的，我們要有；國外沒有的，我們也要有”，半合成抗生素研究組從仿制藥的研究，轉(zhuǎn)向創(chuàng)新藥物研發(fā)。但是，在那個特殊年代，堅持在單位實驗室工作的人寥寥無幾，而王文梅是其中之一。支持她的依然是那句樸實的話，“沒有別的辦法，我只有堅持”。

青霉素和頭孢菌素類抗生素同屬于β-內(nèi)酰胺類抗生素，都具有高效低毒的特點，相比青霉素而言，頭孢菌素更加穩(wěn)定，化學(xué)修飾部位也更多。因此王文梅所在研究小組選擇以頭孢菌素為出發(fā)點進行衍生物合成研究。但是當(dāng)時沒有最新的國外研究資料可借鑒，研究組只有自行設(shè)計合成衍生物，再請藥理室同仁做初步藥效試驗。那是1974年，編號為“74001”、“74002”、“74003”……的眾多合成衍生物被一一合成，一一試驗，當(dāng)時發(fā)現(xiàn)編號“74018”化合物具有抗菌效果好，血藥濃度高等特點，王文梅認(rèn)為可以對“74018”進行更進一步研究。

但是，在合成藥物研究室的研討中，對“74018”的進一步研究被否定了，“74018“首次被塵封。

3 斬荊

珠玉蒙塵后不久，許文思先生赴任上海醫(yī)工院院長，在聽取王文梅所在研究組關(guān)于“74018”的工作匯報后，許院長當(dāng)即表示對“74018“可以做進一步的研究，鼓勵王文梅老師繼續(xù)向前做。

后續(xù)研究需要大量經(jīng)費支持，許文思院長特別向國家醫(yī)藥總局申請了10萬元的科研經(jīng)費支持對“74018”的研究； “74018”中試放大受阻，上海第三制藥廠此時給予了大力支持；74018臨床試驗需要無菌藥樣品，蘇州第一制藥廠伸出援手，液體狀的“74018”經(jīng)過無菌過濾、冷凍干燥后，變成無菌粉末，達(dá)到可供臨床研究的標(biāo)準(zhǔn)要求。王文梅所在的研究組對“74018”的研究再次如火如荼地展開。在所有人齊心合力、披荊斬棘的工作熱情中，一切都向著好的方向前進。

3.1 臨床

作為藥品， “74018”的臨床研究非常關(guān)鍵。1976年，上海醫(yī)工院與上海華山醫(yī)院合作對“74018”進行了臨床研究。華山醫(yī)院由時任院長戴自英帶隊，劉裕昆、汪復(fù)、張志玲和張梅芳等上海醫(yī)學(xué)界老專家們當(dāng)時都參與了“74018”的臨床合作項目研究。時隔多年，他們的名字也不應(yīng)被忘記，正是他們將“74018”的第一針注入到自己的體內(nèi)，才得到關(guān)于“74018”的基礎(chǔ)人體生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)，為對“74018”開展深入臨床研究奠定了基礎(chǔ)。

臨床研究表明，頭孢硫脒具有血藥濃度高、臨床效果好等優(yōu)點，主要用于敏感菌引起的呼吸道感染、皮膚和軟組織感染、尿路感染、耳鼻喉感染等，尤其適用于金葡菌、表葡菌、鏈球菌屬和腸球菌等革蘭陽性球菌引起的各種中、重度感染的治療[1-2]。頭孢硫脒結(jié)構(gòu)式參見圖1。

從1999年頭孢硫脒上市，經(jīng)過了20余年的臨床使用，2018年趙金龍等[3]對頭孢硫脒在臨床上的不良反應(yīng)進行了Meta分析，得出結(jié)論依然是與其他同類藥物相比，頭孢硫脒具有臨床安全性相對較好等特點。

3.2 結(jié)晶

“74018”小試樣品，在藥品檢驗中順利通過了一系列檢驗項目，如含量、雜質(zhì)和溶解度等后，卻在色級檢驗上被卡住了。粉狀固體的“74018”溶解后，顏色像醬油湯，連最低標(biāo)準(zhǔn)第9級都挨不上。上海藥檢所錢筠廷滿含心疼的告訴王文梅老師：“王文梅呀！王文梅，我們國家好不容易有了自己的新藥，但是顏色卻是黃色，怎么和國外進口藥比，保質(zhì)期也是問題呀！”解決色級問題的辦法只有一個——制出結(jié)晶！

然而，“74018”的水溶性強，很難得到結(jié)晶。王文梅卻堅持不懈的努力著，“一定要拿到結(jié)晶！”她的堅持，再一次給“74018”機會，終于有一天，實驗瓶里有了白色的結(jié)晶。顯微鏡下一朵朵像雪花一樣晶瑩剔透的結(jié)晶，映襯著王文梅眼中的淚花?！?4018”結(jié)晶的獲得，為產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)，“74018”的純度提高到了98%，顏色由黃色變成了雪白，穩(wěn)定性增強，保質(zhì)期由1年延長到2年……，一切都向著產(chǎn)業(yè)化邁進！

1978年2月3日，上?？茖W(xué)會堂迎來了頭孢硫脒的藥品鑒定會，它被認(rèn)定為我國一類新藥，也是新中國成立以來第一個半合成頭孢類抗生素，在會上“74018”被正式命名為“頭孢硫脒”。

1982年，頭孢硫脒獲得了上海市衛(wèi)生局的試生產(chǎn)批文。

然而等待頭孢硫脒不是大規(guī)模投產(chǎn)、上市，而是6年的冷板凳，頭孢硫脒再次被塵封。因為沒有生產(chǎn)企業(yè)愿意接收它、生產(chǎn)它。多數(shù)藥企對于一個完全由我國自主研發(fā)的新藥持懷疑態(tài)度，不愿冒新藥投產(chǎn)開發(fā)的風(fēng)險。

3.3 東渡

潛心研究多年的頭孢硫脒再次被擱置后，王文梅先后又做了一些其他的研究。1986年王文梅被公派赴日本東京微生物化學(xué)研究所（后文簡稱微化所）進行合作研究。可能源于對女性地位認(rèn)知的文化差異，王文梅初到日本時，是被多數(shù)微化所研究人員看不起的，與同期的男性訪問學(xué)者不同，她的簽證只給了半年，住宿還需要自行解決……

初到微化所，王文梅的任務(wù)是完成神經(jīng)氨酸苷酶抑制劑siastatin B的全合成及其絕對構(gòu)型的推定。合成的路線和方法由日本導(dǎo)師提供，王文梅負(fù)責(zé)具體的合成工作。剛開始，日本導(dǎo)師只給了她合成路線的第一步要求她完成。在成功完成后，她的工作能力被導(dǎo)師認(rèn)可，將后續(xù)的反應(yīng)路線給她。合成實驗一直有條不紊地進行，直到第五步磺?；磻?yīng)，反應(yīng)卻怎么也不能發(fā)生。王文梅向日本導(dǎo)師匯報，導(dǎo)師考慮更改合成路線。但是王文梅經(jīng)過思考，她告訴日本導(dǎo)師請再給她一個星期的時間，試試通過更換化學(xué)試劑，提高反應(yīng)活性……等操作能否成功，最終她的堅持和努力完成了第五步反應(yīng)，使得研究可以按照原計劃合成線路繼續(xù)進行。日本導(dǎo)師表面上雖然沒對王文梅的工作表示贊許，卻默默將她的名字寫入到參加當(dāng)年在京都舉行的抗生素國際會議名單中，在專家云集的國際會議上，王文梅勇敢地發(fā)言，再次贏得微化所同仁的認(rèn)可。會后回到微化所，她被通知，簽證由半年延長到一年。

后來當(dāng)王文梅即將離開日本回國時，日本導(dǎo)師興奮地感嘆，如果沒有當(dāng)時王文梅的堅持，siastatin B的合成研究還不知道能否進行，即使進行也不知道能到哪一步。關(guān)于siastatin B合成相關(guān)研究報道在幾年后的國際會議上被給予高度評價，其研究簡報刊登在美國J Am Chem Soc[4-5]。

一日王文梅正在微化所的防爆實驗室完成一個氧化反應(yīng)試驗，突然間從反應(yīng)瓶中躥出火苗，燃燒起來?？吹讲讳P鋼門反射出的火光，實驗室外的日本男同事拎著滅火器站在門口卻不敢進去。在實驗室里的王文梅立刻脫下工作服，采用緊急處理方式，一個人在里面將火撲滅。當(dāng)她整理好實驗室后，走出去，外面的同事們紛紛豎起拇指。此后，她被微化所同事稱為像“阿信”一樣的女人——堅強與勇敢的代表。如今談到此事時，王文梅老師說：“其實當(dāng)時我也沒有時間想太多，只擔(dān)心如果真把實驗室燒壞了，這不是我個人的事情，我當(dāng)時是中國派往日本的訪問學(xué)者，我必須將火撲滅！”

研究工作繼續(xù)進行著，一年簽證時間很快到了，她從事的siastatin B合成工作已經(jīng)接近尾聲。微化所所長想請她留下繼續(xù)做研究，但是被王文梅拒絕了，她的家人在等她，她在中國的研究項目在等她。

回國之前，微化所化學(xué)部部長邀請她一起去參觀日本第一制藥廠，當(dāng)車子駛?cè)胫扑帍S大門時，廣場上升起了中國和日本的國旗；進入研討會議室時，王文梅看到會議桌上也安放了中國和日本國旗。此時的王文梅已不再是那個被日本研究者低看的中國女人，而是被他們尊重的中國學(xué)者。

多年后，王文梅老師聊到她的科研生涯時說：“我為什么要把這一段經(jīng)歷說出來呢？其實我在日本的研究工作與頭孢硫脒沒有什么關(guān)系，但是我憑借自己的努力和能力，從一個不被日本研究者看得起的女人，變成被他們尊重的中國學(xué)者，這種轉(zhuǎn)變增強了我的自信心，對我回國后的工作無形中起著很大的推動作用，在后來的工作中，再大的困難，我都覺得我可以克服”。

4 秋實

回國后，上海當(dāng)?shù)匾廊粵]有的藥廠接手頭孢硫脒產(chǎn)業(yè)研發(fā)。20世紀(jì)80年代的改革開放中，廣東成為市場經(jīng)濟的弄潮兒。廣州白云山制藥廠（后文簡稱白云山廠）在此過程中慢慢發(fā)展起來。相比其他地區(qū)藥廠，他們具有更前瞻的視野，希望能投資頭孢硫脒的產(chǎn)業(yè)化開發(fā)，這給頭孢硫脒的面世帶來了希望。

“中國市場上幾乎所有的頭孢菌素類產(chǎn)品都是由外國人發(fā)明，并在國外使用后引進的。唯獨頭孢硫脒是我們中國人發(fā)明，并首先在中國臨床使用”，時任白云山廠的廠長謝彬說。剛起步不久的白云山廠在設(shè)備、設(shè)施等條件上都比不上當(dāng)時的諸多上海藥廠，但是正是他們這種國人的自豪、自信和拼搏精神才能在后期的研發(fā)中，克服重重困難，最后獲得成功。 1988年，上海醫(yī)工院與廣東白云山制藥廠正式開始合作，產(chǎn)業(yè)化開發(fā)頭孢硫脒。

在對頭孢硫脒的工業(yè)化擴大生產(chǎn)中，為解決頭孢硫脒的不穩(wěn)定性，在王文梅帶領(lǐng)下，會同白云山廠的研究人員一起，研制出特殊生產(chǎn)工藝流程。通過雙方的共同努力，頭孢硫脒規(guī)模化生產(chǎn)的純度、色級都得到大幅度提升，生產(chǎn)時間也被縮短。

但是在做到無菌制備和分裝時，當(dāng)時的廣東白云山制藥廠無法提供合格的無菌操作室，研發(fā)受阻。后來經(jīng)多方打聽，得知上海第一醫(yī)學(xué)院下屬的紅旗制藥廠有無菌室。王文梅和白云山制藥廠的研發(fā)人員一起，利用紅旗制藥廠春節(jié)放假停工的空擋，借用無菌操作室，爭分奪秒完成無菌制備和分裝工藝研究。

經(jīng)過11年的產(chǎn)業(yè)化研發(fā)，1999年頭孢硫脒以商品名“仙力素“正式上市；頭孢硫脒被載入2005年版《中國藥典》。2006年“仙力素”生產(chǎn)量是1120萬支，銷售額超億元。張峰等[6]分析“仙力素”的營銷策略，認(rèn)為作為第一代頭孢菌素類抗生素“仙力素”（頭孢硫脒）能不同于其他抗生素產(chǎn)品，銷量節(jié)節(jié)攀升，成功經(jīng)驗與優(yōu)勢在于包括專利技術(shù)、唯一對腸球菌有效的頭孢菌素、治療各種革蘭陽性球菌的感染首選藥，以及白云山制藥廠準(zhǔn)確的市場定位與營銷。

從1974年合成的“74018”化合物，到2005年的”仙力素“載入《中國藥典》，歷經(jīng)31年，終破繭成蝶。頭孢硫脒是我國研制成功的第一個頭孢菌素類抗生素[7]，也是截至目前唯一由我國自行研制的頭孢菌素類抗生素。2005年，“結(jié)晶頭孢硫脒及其制備方法和用途”獲得上海市科技進步一等獎，王文梅作為第一完成人還被評為第二屆“上海發(fā)明家”。2006年“新頭孢菌素——頭孢硫脒”獲得國家技術(shù)發(fā)明獎二等獎，王文梅又被評為“2006年中國醫(yī)藥行業(yè)十大創(chuàng)新人物”。

如今，在回顧自己50多年科研生涯中，王文梅老師說到：“50多年的工作，我感覺我的成功主要源于每個工作都是腳踏實地，認(rèn)真去做，非常重視實踐、分析和總結(jié)，然后再實踐、再分析和再總結(jié)，以此類推循環(huán)上升，不要放棄，要相信自己，勇于實踐，一定要有自信心，要相信自己！”

附：王文梅的主要研究成果及獲得榮譽

1.重大工藝創(chuàng)新項目：半合成抗生素品種羅紅霉素、鹽酸頭孢他美酯、氨芐青霉素、羧芐青霉素、丁胺卡那霉素以及頭孢菌素關(guān)鍵中間體GCLE等。

2.東莨菪生物堿（中藥麻醉催醒劑）、siastatin B（神經(jīng)氨酸苷酶抑制劑）的全合成。

代表性論文

（1）新的半合成抗菌素——硫脒頭孢菌素（C-18）的研究，《醫(yī)藥工業(yè)》1978年。

（2）β-內(nèi)酰胺族抗菌素的研究——Ⅱ.7-脒硫乙酰胺基頭孢菌素衍生物的合成，《藥學(xué)學(xué)報》1981年。

（3）β-內(nèi)酰胺族抗生素的化學(xué)合成概況，《國外醫(yī)藥抗生素分冊》1996年。

（4）β-內(nèi)酰胺族抗菌素的研究——Ⅲ.7-脒硫乙酰胺基頭孢菌素酸亞砜衍生物的立體定向合成，《藥學(xué)學(xué)報》1982年。

（5）Siastatin B， a potent neuraminidase inhibitor： The total synthesis and absolute configuration. J Am Chemi Soe，1988年。

（6）神經(jīng)氨酸苷酶抑制劑Siastatin B的全合成及其絕對構(gòu)型的推定，《中國醫(yī)藥工業(yè)雜志》1989年。

（7）頭孢菌素類衍生物的中間體合成研究，《中國抗生素雜志》1994年。

（8）羅紅霉素的研究和生產(chǎn)，《中國抗生素雜志》1997年。

（9）3-碘代甲基頭孢菌素重要中間體GIE的合成，《中國藥物化學(xué)雜志》2001年。

（10）C-3位含硫甲基頭孢菌素中間體的合成，《中國醫(yī)藥工業(yè)雜志》2002年。

參考文獻(xiàn)

[1]戴自英， 汪復(fù)， 張志林， 等. 硫脒頭孢菌素的實驗和臨床研究[J]. 上海醫(yī)學(xué)， 1978， 1： 32-36.

[2]李仲興， 王秀華， 孟曉潔， 等. 國產(chǎn)頭孢硫脒對224株凝固酶陰性葡萄球菌的體外抗菌活性研究[J]. 中國抗生素雜志， 2005， 30（2）： 107-111.

[3]趙金龍， 陳國銘， 鐘曉瑩， 等. 頭孢硫脒不良反應(yīng)的Meta分析[J]. 中國抗生素雜志， 2018， 43（6）： 750-758.

[4]西村吉雄， 王文梅，近藤信一， 等. 神經(jīng)氨酸苷酶抑制劑Siastatin B的全合成及其絕對構(gòu)型的推定[J]. 中國醫(yī)藥工業(yè)雜志， 1989. 20（7）： 307-313.

[5]Yoshio Nishimura， Wang W M， Shinichi Kondo， et al. Siastatin B， a potent neuraminidase inhibitor： The total synthesis and absolute configuration[J]. J Am Chemi Soe， 1988， 110： 7249-7259.

[6]張峰. 廣州白云山制藥股份有限公司仙力素（頭孢硫脒）營銷策略研究[D]. 南京： 南京理工大學(xué). 2004.

[7]王文梅. 我國自行研制的頭孢菌素——頭孢硫脒[J]. 世界臨床藥物，2003， 24（3）： 179-181.