金黃色葡萄球菌的檢驗方法

李朝國　張麗娜

對金黃色葡萄球菌所采取的定量檢測措施主要包括3種方式，然而不同的檢測方式其檢測效果也存在一定程度的差異性。其中，GB4789.10-2010檢測方式操作較為復(fù)雜，且檢測時間較久，約需78 h，然而SN/T1895-2007以及快速培養(yǎng)法檢測結(jié)果的獲得時間約24 h。伴隨著金黃色葡萄球菌檢測方式的自動化、快速化發(fā)展與進步，3 M PetrifilmTM 測試片法也隨之發(fā)展，此種檢測方式通過將紙片與膠片等物質(zhì)視為培養(yǎng)基根本載體，將顯色物質(zhì)以及特殊培養(yǎng)基放置在載體智商，隨后對此種病原菌的顯色與生長等方面的情況進行觀察與分析，進而順利結(jié)束對其的檢測。

金黃色葡萄球菌

金黃色葡萄球菌是導(dǎo)致出現(xiàn)食物中毒（細菌性）疾病的一種最為重要的病原菌，有此種病原菌而導(dǎo)致的食物中毒情況的發(fā)生概率僅僅低于大腸埃希氏菌發(fā)生率，在食物中毒（細菌性）疾病中的發(fā)生率大約為33%。通常情況下，臨床認為當(dāng)此病原菌含量遠遠高于105 CFU/g時，則會導(dǎo)致出現(xiàn)腸毒素中毒情況（金黃色葡萄球菌所導(dǎo)致的），臨床癥狀主要表現(xiàn)為惡心嘔吐等不良情況，還伴隨會出現(xiàn)上腹明顯疼痛感以及不良腹瀉狀況，但是在一天至兩天內(nèi)便可恢復(fù)正常。此種病原菌可以導(dǎo)致動物或者人類出現(xiàn)化膿性感染情況，還可能會導(dǎo)致人類發(fā)生食物中毒狀況，且由于金黃色葡萄球菌而導(dǎo)致的食物中毒發(fā)生率逐年呈明顯的上升趨勢，為此應(yīng)該提高對此病原菌的認知與了解。

常規(guī)檢測方式

相關(guān)資料（例如食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)等）中，均進一步明確了對食品中所存在的金黃色葡萄球菌的3種不同檢測措施，其中可以將劃分為2種類型的檢測措施。其一，定性檢驗方式，即主要是按照此病原菌生化特點以及菌落形態(tài)具體特點等內(nèi)容開展檢測工作。其二，計數(shù)檢驗方式，結(jié)合菌落表面相關(guān)內(nèi)容（特點與形態(tài)等）與生化特點開展對應(yīng)的評估與計數(shù)，通常情況下會采取平板計數(shù)檢驗方式與MPN檢驗方式。

MPN計數(shù)檢驗方式

通過對不同肉類食物中所含有的金黃色葡萄球菌實際數(shù)量可知，此種檢測方式檢測檢出率與準(zhǔn)確率均較為良好。然而此種檢測方式往往會受到試劑配制以及培養(yǎng)環(huán)境等各方面不良影響下，導(dǎo)致檢測結(jié)果存在一定差異。

BP平板檢測法

與紙片檢驗法相比，BP平板檢測法其檢出率較高（大約高20%至30%），且此種檢驗方式操作較為便捷，人員成本以及試劑成本花費均較低。常規(guī)檢測方式往往會受到多方面因素影響下，且不確定因素相對較多。在對檢驗樣品進行稀釋時，所應(yīng)用的均質(zhì)袋規(guī)格與材質(zhì)等方面，均會對檢驗樣本中病原菌平均分散度以及生長能力造成一定程度的影響，且加樣體積會對樣品中金黃色葡萄球菌的實際數(shù)量以及濃度大小帶來影響，以至于對食品中金黃色葡萄球菌檢測檢出率與準(zhǔn)確率導(dǎo)致消極影響。

StXS培養(yǎng)基

StXS培養(yǎng)基對金黃色葡萄球菌能夠較為快速定量定性檢測，同時成本與市面上所售賣的此種病原菌顯色培養(yǎng)基價格更加便宜，能夠顯著增加實驗室對此病原菌的檢測工作效率與質(zhì)量，有利于降低檢測成本。

分子生物學(xué)檢驗方式

生物芯片技術(shù)檢測

生物芯片技術(shù)主要是通過對基因組于多肽分子等相關(guān)生物體特征性檢驗樣本，根據(jù)對應(yīng)的順序?qū)⑵涔潭ㄓ谥С治锉砻嫔?，進而產(chǎn)生較為密集的二維分子排列順序，其次將等待檢驗生物樣本和其相互雜交，隨后在結(jié)合雜交情況對檢測樣本中所包括的靶分子實際數(shù)量進行分析與總結(jié)。此外，根據(jù)生物公司運行資料克制，生物芯片的實際銷售情況與研發(fā)完善已然成為生物公司重點的業(yè)務(wù)之一，且銷售業(yè)績始終居高不下。

有相關(guān)研究通過史依弘生物芯片法對金黃色葡萄球菌進行檢測工作，檢測結(jié)果表明，生物芯片技術(shù)檢測方式其檢出率遠遠優(yōu)于其他檢測方式，且和基因芯片檢測技術(shù)相比，其所需要的檢測樣本數(shù)量相對比較少，整體檢測工作的質(zhì)量與效率均較高。通過對細胞組織進行超聲破損干預(yù)，從而有效對原核微生物中病原菌（金黃色葡萄球菌）中DNA進行有效提取，有效對特征性靶基因（16S rRNA）進行擴增處理，實現(xiàn)效果較高的基因芯片探針目的?？偠灾?，生物芯片技術(shù)檢驗操作水平相對較高，且具備良好的精準(zhǔn)度，可將其使用在專業(yè)水平較高的研究組織之中。

環(huán)介導(dǎo)等溫擴增反應(yīng)

伴隨著生物大分子DNA相關(guān)研究不斷深入發(fā)展，得知在不通過常規(guī)PCR變性與復(fù)性等相關(guān)環(huán)節(jié)后，便能夠有效促使核酸分子出現(xiàn)擴增情況，為此將此種情況稱之為環(huán)介導(dǎo)等溫擴增反映情況。此種技術(shù)通常需要設(shè)置四種不同的具有較為突出的特異性特點的印務(wù)，利用鏈對DNA聚合酶起到良好的催化功效，從而推動靶基因六個不同區(qū)域出現(xiàn)擴增反應(yīng)，能夠在一個系哦啊是內(nèi)將目的序列快速擴增反應(yīng)至十個拷貝，有利于減少升降溫反應(yīng)下對相關(guān)檢測儀器與設(shè)備所帶來的消極影響。此外，此種檢測方式通常使用于基層檢驗機構(gòu)中進行實驗檢測分析。

聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)檢測

此種檢驗方式主要通過變性以及退火等相關(guān)環(huán)節(jié)進行檢測，且屬于體外快速以及高效擴增目的一種基因檢測技術(shù)。其次，由于微生物之間均具備個人特異性水平看較高的基因（rRNA等）能夠?qū)⑵湟暈榫N特征性靶基因，通常將其使用于分子生物學(xué)鑒定過程中。其中，金黃色葡萄球菌自身所擁有的腸毒素編碼基因（腸毒素與耐熱核酸酶基因等），可將上述各項編碼基因視為此種病原菌特殊性區(qū)域，有利于實驗檢測。

結(jié)語

在受到金黃色葡萄球菌不良感染影響下，會發(fā)生惡心嘔吐等一系列不良癥狀表現(xiàn)，嚴(yán)重的話還可能會造成機體免疫力有所衰退，且白細胞計數(shù)呈下降趨勢，以至于對人們健康造成不良影響。