胎母輸血綜合征早期體外預(yù)測方法研究進(jìn)展

何佳靜

摘要：胎母輸血綜合征（fetomaternal hemorrhage，F(xiàn)MH），發(fā)病隱匿，沒有特異的臨床癥狀，早期不易察覺，直到病程晚期才有明顯的臨床表現(xiàn)，造成了較高的圍生兒死亡率。本文就現(xiàn)有的檢測方法進(jìn)行分析總結(jié)，以求為臨床早期診斷FMH提供可靠的參考依據(jù)，降低圍產(chǎn)兒并發(fā)癥的發(fā)生率及死亡率，現(xiàn)綜述如下。

關(guān)鍵詞：胎母輸血綜合征;Hb F;K-B實(shí)驗(yàn);血紅蛋白電泳;流式細(xì)胞術(shù)

【中圖分類號(hào)】 R457.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2022）10--01

FMH是指胎兒血液通過破損的胎盤絨毛間隙進(jìn)入到母體血循環(huán)，導(dǎo)致胎兒不同程度失血的一組臨床癥候群，發(fā)生在50%～70%的妊娠中。大量胎母輸血可致胎兒貧血、水腫和發(fā)育受限，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致胎兒或新生兒的死亡，圍生兒的病死率高達(dá)33%-50%[1]。該病發(fā)生率低，臨床表現(xiàn)隱匿，早期診斷困難，往往診斷時(shí)胎兒已發(fā)生了嚴(yán)重的貧血。因此，有效、便捷、早期的體外診斷方法在臨床有著迫切的需求。

1 紅細(xì)胞酸洗脫試驗(yàn)（Kleihauer-Betke acid elution assay，KB）

目前為止，K-B實(shí)驗(yàn)是檢測和定量FMH的主要診斷性試驗(yàn)[2]。將母體的外周血制作涂片，在酸性緩沖液中進(jìn)行酸浴，然后經(jīng)沖洗晾干后用伊紅染色，含Hb F的紅細(xì)胞形態(tài)完整，被染成紅色，含Hb A的紅細(xì)胞被破壞洗脫掉后變成空影，故未能被染色，呈蒼白色，顯微鏡下觀察并計(jì)算染成紅色的細(xì)胞百分率，正常值為≤3%。雖然K-B法，是目前國內(nèi)最主流的FMH檢測方法，但是作為勞動(dòng)密集型的純手工實(shí)驗(yàn)，達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化是一個(gè)難題。

2 血紅蛋白電泳

血紅蛋白由四條鏈組成，其中成人紅細(xì)胞中的主要血紅蛋白Hb A是由α2β2組成，胎兒紅細(xì)胞中的主要血紅蛋白Hb F是由α2γ2組成。各血紅蛋白的等電點(diǎn)不同，從而在一定pH緩沖液中所帶的正、負(fù)電荷亦不相同，經(jīng)電泳后各血紅蛋白的移動(dòng)方向不同，從而區(qū)分出不同的血紅蛋白，進(jìn)而計(jì)算其比例。Hb F的含量與含Hb F的胎兒細(xì)胞或F細(xì)胞有良好的相關(guān)性[3] ，因此，可以通過檢測血紅蛋白F的含量來對(duì)胎兒細(xì)胞進(jìn)行確認(rèn)以及定量測定。

3 流式細(xì)胞術(shù)

流式細(xì)胞術(shù)是應(yīng)用特異性標(biāo)記物對(duì)母體外周血中的胎兒紅細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記、定量分析。目前，應(yīng)用到的特異性標(biāo)記物有抗-胎兒HbF抗體、抗-紅細(xì)胞表面抗原以及抗碳酸酐酶抗體等[4]，通過抗體的熒光強(qiáng)度來量化胎兒紅細(xì)胞的數(shù)量。這種方法靈敏度較高、可重復(fù)性強(qiáng)，能夠快速診斷妊娠過程中因各種原因所致的胎兒血進(jìn)入母體的情況。

4 小結(jié)

綜上所述，目前存在的檢測方案均是基于HbF的檢測。但HbF不是胎兒紅細(xì)胞所特有的，也可以是母體自身含較高比例HbF的F細(xì)胞，若妊娠婦女自身存在血液系統(tǒng)疾病，如β地中海貧血，再生障礙性貧血等，F(xiàn)細(xì)胞的水平就可能明顯上升，即使沒有血液系統(tǒng)的疾病，妊娠這一特殊的生理狀態(tài)自身就可能導(dǎo)致部分母體外周循環(huán)中的F細(xì)胞增多[5]，從而干擾以HbF為檢測目標(biāo)的試驗(yàn)。K-B酸洗脫法是復(fù)雜的人工實(shí)驗(yàn)，費(fèi)時(shí)、重復(fù)性低，受實(shí)驗(yàn)條件和人員差異的限制，且不能排除孕婦本身以及血液系統(tǒng)疾病造成的HbF的干擾。同樣的，基于HbF的血紅蛋白電泳技術(shù)也不能排出干擾。而流式細(xì)胞術(shù)高成本，且實(shí)驗(yàn)相對(duì)復(fù)雜，對(duì)人員技術(shù)要求較高，不適用于基層。碳酸酐酶僅在成人紅細(xì)胞內(nèi)分布，結(jié)合HbF的特異性抗體，運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)孕婦外周血進(jìn)行雙抗體標(biāo)記，僅HbF單陽時(shí)才能說明HbF來源于胎兒紅細(xì)胞，提高了流式細(xì)胞術(shù)的特異性，并排除了干擾。那么，將毛細(xì)管血紅蛋白電泳與流式細(xì)胞術(shù)聯(lián)合運(yùn)用，通過使用毛細(xì)管電泳進(jìn)行篩查，能夠經(jīng)濟(jì)高效的實(shí)現(xiàn)FMH的篩查工作;對(duì)篩查結(jié)果進(jìn)一步分析，在識(shí)別β地中海貧血患者的前提下，針對(duì)血紅蛋白F增高的患者進(jìn)一步使用流式細(xì)胞術(shù)鑒別，能夠最終保證FMH確診的準(zhǔn)確性，實(shí)現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)，早診斷，早治療，改善預(yù)后，從而使廣大妊娠人群受益。

參考文獻(xiàn)：

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[4] 楊玉芳，葉紅，羅飛，惠燕，朱文靜.胎母輸血綜合征臨床研究進(jìn)展[J].海南醫(yī)學(xué)，2018，29（21）：3100-3102.DOI：10.3969/j.issn.1003-6350.2018.21.040.

[5] Cormack OM， Guilfoyle F， Flynn CM. The prevalence of an elevated F cell population in a maternal and gynaecology cohort. Transfus Med. 2019;29（5）：369-373. doi：10.1111/tme.12625