一例羊口瘡病的診斷與防控

吳雅清 焦玉蘭 劉浩 趙麗霞

摘要：羊肉富含蛋白質(zhì)、VC、鈣、鐵等礦物質(zhì)以及脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)，具備較高的營養(yǎng)價值，能夠增強人體的體質(zhì)和免疫力，對人體健康十分有利，因此羊肉市場需求量較大，這極大地刺激著羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。羊口瘡病是羊養(yǎng)殖中常見的傳染病，又名羊傳染性膿皰病，是由羊口瘡病毒感染引起綿羊和山羊的一種高度接觸性急性傳染病，該病具有傳染性強，危害性大，傳播速度快的特點，且不同地區(qū)分離的病毒抗原性往往也不完全一致。如防治不及時，極容易造成全群感染發(fā)病，給養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。因此，發(fā)生羊口瘡后，養(yǎng)殖場要及時做好有效的診斷與治療，以防病原擴散蔓延，帶來嚴(yán)重?fù)p失?；诖耍疚木脱蚩诏徏膊〉脑\治方法和預(yù)防措施進行了探討及分析。

關(guān)鍵詞：羊口瘡病;診斷與治療;防控

羊口瘡又稱羊傳染性膿皰性皮炎[1]，是由羊口瘡病毒引起的一種高度接觸性、急性人獸共患傳染病，多發(fā)于綿羊和山羊，癥狀以口唇、舌、鼻、乳房等部位形成丘疹、水皰、膿皰和結(jié)成疣狀結(jié)痂為主要特征[2]。成年羊可感染該病但不致死，往往呈散發(fā)式感染，但幼年羊極易感染，尤其是羔羊最容易感染，且發(fā)病率極高，常常會引起羊群集體發(fā)病。該病最早是在18世紀(jì)90年代的歐洲發(fā)生。我國于19世紀(jì)50年代的新疆、甘肅、陜西、內(nèi)蒙一帶最早出現(xiàn)。目前世界上幾乎所有的國家和地區(qū)，只要涉及到養(yǎng)羊業(yè)，都存在此傳染病，以澳大利亞、新西蘭最為嚴(yán)重。我國將其劃為三類動物傳染病。

羊口瘡病毒（ORFV），屬于痘病毒科，痘病毒亞科的副痘病毒屬，含雙股DNA，有囊膜。病毒大小約125～175 nm×200～350nm之間，具有特征性的呈類似編織狀螺旋絲狀結(jié)構(gòu)，其排列大多數(shù)比較規(guī)則，個別也有不規(guī)則排列。該病毒顆粒性狀除橢圓形顆粒外，還有錐形、磚形以及特殊的線團樣球形顆粒。病毒粒子外常有囊膜包裹[3]。

羊口瘡病毒所屬的副痘病毒對外界環(huán)境具有特別強的抵抗力。在干燥低溫的環(huán)境中可存活數(shù)月甚至數(shù)年，ORFV在干燥室溫下其病毒傳染性可保持15年以上;干燥的病料組織，在低溫冰箱保存3年以上，其病毒仍存在傳染性;在潮濕的環(huán)境下，病毒會迅速失去活性。同時，該病毒不耐高溫，對溫度比較敏感。60℃放置30min或者煮沸3min均可使病毒失去活性。ORFV對氯仿、甲醛等消毒劑比較敏感，2%甲醛溶液浸泡20min就可使病毒失去活性。經(jīng)紫外線輻照約15min也會失去活性。

羊口瘡病主要危害綿羊和山羊，以3～6月齡羔羊患病最多。該病一年四季均可發(fā)生，但通常發(fā)生在春季和秋季兩個季節(jié)交替時節(jié)或者炎熱潮濕的夏季，只要羊群感染，該羊群就會常年發(fā)病，且不分性別和品種。病羊和帶毒羊是主要的傳染源，另外，病羊的糞便、污物、皮膚破潰處的膿液均可引發(fā)傳染。獸醫(yī)或放牧飼喂人員通過與病羊接觸而感染。

根據(jù)羊只患病部位的不同，在臨床上可分為唇型、蹄型和外陰型三種類型，其中唇型是最常見的臨床型。該病病程通常持續(xù)14～22d，病羊往往由于飼喂困難導(dǎo)致機體極度衰竭，導(dǎo)致死亡，給養(yǎng)羊?qū)I(yè)戶帶來極大的損失，嚴(yán)重?fù)p害養(yǎng)殖業(yè)的經(jīng)濟效益[4]。

2020年6月4日，保定市徐水區(qū)某養(yǎng)羊戶養(yǎng)羊200余只，3～4月齡羔羊口唇出現(xiàn)了小結(jié)節(jié)，筆者來到現(xiàn)場對其進行診治。初步懷疑該羊群感染了唇形傳染性膿皰病毒，現(xiàn)就該病發(fā)病情況、診治等匯報如下：

1 羊口瘡病的臨床表現(xiàn)

羊傳染性膿皰病主要以口唇病變?yōu)橹?，該病病例癥狀首先表現(xiàn)在嘴唇周圍出現(xiàn)了很多小丘疹，之后在上唇或鼻鏡上會出現(xiàn)散發(fā)性的小紅斑點，逐漸長成丘疹性結(jié)節(jié)，進而生長成小水泡，最終形成膿瘡，破裂后形成疣狀硬痂。結(jié)痂后，會在其下部出現(xiàn)肉芽組織增生，這是鑒別羊口瘡病的主要癥狀[5]。

2 病例的診斷

2.1 臨床診斷表現(xiàn)

一般從臨床癥狀來看，患羊口瘡病的羊會出現(xiàn)體溫升高，漿液從鼻腔內(nèi)流出，因身體不適導(dǎo)致運動減少，經(jīng)常躺在廄舍墻角，且常常伴有咳嗽，而且在被趕時咳嗽癥狀更加明顯。以上癥狀出現(xiàn)2～3d后，咳嗽進一步加重，鼻腔內(nèi)流出深紅色或暗紅色鼻液，干燥后形成污垢。病羊在被按壓胸部時，其反應(yīng)更加敏感和痛苦。聽診肺部有喘鳴和支氣管呼吸性啰音。此外，羊群內(nèi)大多數(shù)羊只出現(xiàn)口腔結(jié)痂、口腔糜爛、被毛粗亂、精神萎靡等癥狀，部分養(yǎng)只出現(xiàn)頭頸部伸直，身體后拱癥狀。

本病例中，病羊的口角、上唇部位首先出現(xiàn)了許多散在的小紅斑，且病羊伴隨流涎癥狀。個別患病羊的紅斑有逐漸變成丘疹性結(jié)節(jié)的跡象，隨后形成水皰或膿皰甚至潰爛，潰爛后變成黃色或棕色的疣狀結(jié)痂?？谇火つこ霈F(xiàn)的水泡、膿皰和潰爛，導(dǎo)致病羊的飼喂、咀嚼和吞咽十分困難，進而影響病羊的正常飼喂。該患病羊群體溫未見異常（見圖1）。根據(jù)以上臨床癥狀初步診斷為羊口瘡病唇形。

2.2 實驗室診斷

實驗室常用的診斷方法有細(xì)菌分離培養(yǎng)、革蘭氏染色和鏡檢、PCR檢測等[6-8]。根據(jù)本案例的臨床表現(xiàn)，筆者初步懷疑為羊口瘡，之后采用PCR實驗室檢測方法進行診斷。

1）病樣采集 以2020年6月4日徐水臨床診斷為羊口瘡病的病羊為研究對象，從每個病例的口腔和嘴唇采集約100mg結(jié)痂病變組織。收集的組織加入約2mL無菌生理鹽水，研磨后收集1mL勻漿，-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2）病毒基因組DNA提取 應(yīng)用北京全式金生物科技有限公司生產(chǎn)的病毒DNA提取試劑盒，取病變組織樣本200μL勻漿液，按照試劑盒操作說明進行樣品病毒基因組DNA提取。

3）引物合成及反應(yīng)體系 參照文獻報道的羊口瘡病毒H2L基因設(shè)計引物[9-11]，上下游引物分別為ORFV-decF：CGA ACT TCC ACC TCA ACC ACT C，ORFV-decR：CCT TGA CGA TGT CGC CCT TCT。

PCR擴增體系為（50μL）：病毒DNA模板5μL，2×Premix Taq酶25μL，上游引物2.5μL，下游引物2.5μL，無菌ddH2O 15μL。反應(yīng)條件：94℃ 變性2min;94℃、50s，56℃、40s，72℃、30s，40個循環(huán)擴增;72℃延伸5min，4℃ 1min。

同時，設(shè)無菌ddH2O為空白對照，陽性病料（河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院提供）為陽性對照，同時進行DNA提取和PCR擴增。擴增產(chǎn)物用0.8%瓊脂糖凝膠電泳進行檢測。

4） PCR檢測結(jié)果 0.8%瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示獲得了507bp特異性目的條帶（圖2），證實該疾病即為羊口瘡。

3 羊口瘡病防控與治療

3.1 發(fā)病羊立即隔離治療

經(jīng)臨床和實驗室診斷確診為羊口瘡病后，應(yīng)立即將病羊隔離治療，對病羊的飼喂更換適口性好、適口的軟飼料，保證充足的飲水，補充維生素，以提高羊群免疫力和抗應(yīng)激能力。同時，在飼料中可添加適量的食鹽，以減少羊只啃墻的行為，防止發(fā)生因異物造成皮膚外傷感染。為減少皮膚受傷，還要及時挑揀出飼料和墊草中的硬物。對患病的羊舍要及時進行徹底清理、消毒。一般選用2%～3%氫氧化鈉溶液、8%～10%石灰乳、20%～25%的草木灰溶液徹底消毒用具和羊舍。消毒后的羊舍，最好閑置一段時間后，再引入羊群進行飼養(yǎng)[12]。

發(fā)病羊按照抗病毒、防止繼發(fā)感染和對癥治療的原則進行治療。首先用水楊酸軟膏軟化痂或用4%硫酸銅溶液清洗結(jié)痂部位。去除結(jié)痂后用0.1%～0.2%的高錳酸鉀溶液沖洗創(chuàng)面，再用甲紫溶液、碘甘油、冰硼粉或紅霉素軟膏涂抹，1～2次/d，直至痊愈。選用黃芪多糖等抗病毒藥物與地塞米松注射液，混合肌注，1次/d，連用3d。為了防止繼發(fā)感染，可用阿莫西林、環(huán)丙沙星等抗生素注射，1～2次/d，連用2～3d[13]。

3.2 中藥治療

目前，選用中獸藥治療羊口瘡病，也達(dá)到了良好的治療效果，主要遵循疏風(fēng)散熱，清熱解毒的治療原則。

1）外用方劑：臨床上常用的中藥蒲公英，具有清熱解毒，消腫散結(jié)的功效，可用于羊口瘡病的治療。將新鮮采集的蒲公英搗碎備用，或者晾干的蒲公英混合雄黃搗碎備用。將患畜瘡口清洗干凈后，涂抹于患處，3次/d，直至治愈;

2）內(nèi)服方劑：蒲公英清熱解毒，消腫散結(jié)，利尿通淋;金銀花清熱解毒，涼散風(fēng)熱;魚腥草清熱解毒，清癰排膿，利尿通淋;紫花地丁清熱解毒，涼血消腫。這幾個藥一起使用有清熱解毒、治療癰癥的功效。

蒲公英、金銀花、魚腥草、紫花地丁各30g，將上述中草藥加入適量水煎熬成藥液混以飼料喂服給病羊，1次/d，連續(xù)服用3～5d，具有很好的療效[14]。

4 討論

羊口瘡病具有發(fā)病急、傳播速度快的特點。所以，一旦發(fā)病，要迅速采取措施，以防止疫病波及羊群，給養(yǎng)殖戶造成巨大經(jīng)濟損失。首先，在引進種羊方面，要禁止從疫區(qū)引進。如果引進羊只情況不詳，可考慮隔離2～3周，期間要及時對羊只進行檢疫，確定為健康無疫病感染種羊。其次，要做好羊群的免接種工作，以預(yù)防該疫病的發(fā)生和擴散;對羊舍及飼喂環(huán)境，要及時清理打掃，做好日常消毒工作，保持環(huán)境衛(wèi)生，以降低疫病發(fā)生幾率。

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