基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與分子對(duì)接探討土茯苓治療銀屑病的作用機(jī)制

肖戰(zhàn)說 鄒建華 林建國 崔炳南

摘要 目的：采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法，探索中藥土茯苓治療尋常型銀屑病的“成分-靶點(diǎn)-通路”的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，探討其作用機(jī)制。方法：采用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（TCMSP）結(jié)合文獻(xiàn)報(bào)道，篩選土茯苓的活性成分及作用靶點(diǎn)。通過GeneCards數(shù)據(jù)庫、在線人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫（OMIM）數(shù)據(jù)庫、治療靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫（TTD）數(shù)據(jù)庫、PharmGkb數(shù)據(jù)庫及DrugBank數(shù)據(jù)庫篩選出尋常型銀屑病的相關(guān)疾病靶點(diǎn)。運(yùn)用R語言將藥物成分匹配疾病靶點(diǎn)，通過復(fù)雜可視化網(wǎng)絡(luò)平臺(tái)Cytoscape 3.7.2軟件構(gòu)建“藥物-成分-關(guān)鍵靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)。采用蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（PPI）網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫（STRING）構(gòu)建靶蛋白PPI網(wǎng)絡(luò)，找出關(guān)鍵基因，對(duì)成分-疾病的交集基因進(jìn)行基因本體（GO）及京都基因和基因組百科全書（KEGG）通路富集分析。結(jié)果：網(wǎng)絡(luò)分析顯示，15個(gè)活性成分共涉及有效靶點(diǎn)325個(gè)，86條作用通路，預(yù)測出12個(gè)活性成分、114個(gè)靶點(diǎn)蛋白和20條關(guān)鍵通路與尋常銀屑病相關(guān)。分子對(duì)接結(jié)果顯示核心成分與核心靶點(diǎn)具有較好的結(jié)合能。結(jié)論：土茯苓可能通過作用于IL-17信號(hào)通路及腫瘤壞死因子（TNF）信號(hào)通路等相關(guān)靶點(diǎn)起到治療尋常型銀屑病的功效，本研究初步揭示了土茯苓治療尋常銀屑病的潛在活性化合物與可能作用機(jī)制。

關(guān)鍵詞 土茯苓;銀屑病;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);分子對(duì)接;克銀方

Pharmacological Mechanism of Rhizoma Smilacis Glabrae in Treating Psoriasis Vulgaris Based on Network Pharmacology and Molecular Docking

XIAO Zhanshuo1，ZOU Jianhua2，LIN Jianguo1，CUI Bingnan1

（ Guang′anmen Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100053，China; 2 Xiyuan Hospital of China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100091，China）

Abstract Objective：To explore the component-target-pathway regulatory network of Chinese herbal medicine Rhizoma Smilacis Glabrae in the treatment of psoriasis vulgaris by network pharmacology and with the help of R language.Methods：The active components and targets of Rhizoma Smilacis Glabrae were filtered by Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform（TCMSP） combined with literature research.The targets of psoriasis vulgaris were screened by GeneCards，Online Mendelian Inheritance in Man（OMIM），Therapeutic Target Database（TTD），PharmGkb and DrugBank.The drug component and disease targets were matched using the R language and the drug-component-key target-pathway network was established by Cytoscape 3.7.2.STRING was used to construct the protein-protein interaction（PPI） network，and the key genes were identified by the R language to draw the histogram.Gene Ontology（GO） and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes（KEGG） pathway enrichment analysis were conducted on the component-disease intersection targets.Results：There were 15 active components involving 325 valid targets and 86 pathways，among which 12 active components，114 target proteins and 20 key pathways were predicted to be associated with psoriasis vulgaris.Molecular docking displayed that the core components could well bind to the core targets.Conclusion：Rhizoma Smilacis Glabrae may play a role in the treatment of psoriasis vulgaris by acting on tumor necrosis factor（TNF） and IL-17 signaling pathways.This paper preliminarily revealed the potential active components and possible mechanism of Rhizoma Smilacis Glabrae in the treatment of psoriasis vulgaris，and provided theoretical basis for further experimental studies on the basis of pharmacological mechanism.

Keywords Rhizoma Smilacis Glabrae; Psoriasis vulgaris; Network pharmacology; Molecular docking; Keyin prescription

中圖分類號(hào)：R285.6文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2022.05.011

銀屑病是皮膚科臨床常見的慢性炎癥性皮膚病，是世界性重點(diǎn)防治的皮膚病之一，該病發(fā)病占世界人口的0.1%～0.3%，我國患病率約為0.5%[1]，嚴(yán)重危害患者身心健康。銀屑病的病因現(xiàn)尚未完全清楚，但涉及遺傳、免疫等多方面因素，發(fā)病機(jī)制是以T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)為主，多種免疫細(xì)胞共同參與的免疫反應(yīng)，導(dǎo)致角質(zhì)形成細(xì)胞過度增殖及異常分化，炎癥發(fā)生及血管生成[2]。

中醫(yī)治療銀屑病歷史悠久，通過清熱利濕、涼血解毒、活血祛瘀、薄膚去屑等功效的中藥治療，能達(dá)到較好療效且不良反應(yīng)少[3-5]。中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院于20世紀(jì)70年代開始，在中醫(yī)皮外科專家朱仁康教授的指導(dǎo)下，開展了中醫(yī)藥治療銀屑病的臨床及基礎(chǔ)研究，并研制出了療效顯著的克銀系列方[6-7]，其中克銀三方作為科技轉(zhuǎn)化成果制成克銀丸，成為首個(gè)治療銀屑病的中成藥。

克銀系列方劑中的君藥為土茯苓。土茯苓是百合科藤本植物光葉菝葜的干燥塊莖，初以“禹余糧”之名載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，《滇南本草》首載“土茯苓”之名，李時(shí)珍在《本草綱目》強(qiáng)調(diào)其治療“惡瘡癰腫”之功效?，F(xiàn)代中藥學(xué)將土茯苓歸為清熱解毒藥，其具有解毒除濕、通利關(guān)節(jié)的功效，多用于楊梅毒瘡、肢體拘攣、淋濁帶下，濕疹瘙癢、癰腫瘡毒等疾病[8]。朱仁康教授較早地將土茯苓運(yùn)用在銀屑病的治療中，取得了較好的療效，現(xiàn)土茯苓已經(jīng)成為了治療銀屑病的專病藥。

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)采用“多化合物，多靶點(diǎn)，多途徑”方法，整合醫(yī)學(xué)、生物信息學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等多學(xué)科理論，用以闡釋疾病發(fā)生機(jī)制、藥物主要活性成分以及藥物作用靶點(diǎn)，構(gòu)建“成分-靶點(diǎn)-通路-疾病”網(wǎng)絡(luò)，用于研究中藥的系統(tǒng)作用[9]。本研究將運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法為土茯苓治療銀屑病的微觀作用機(jī)制及物質(zhì)基礎(chǔ)提供全面認(rèn)識(shí)，也為后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究探明方向。

資料與方法

1. 土茯苓活性化合物與相關(guān)靶蛋白的收集及篩選

本研究采用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP）[10]，檢索土茯苓的潛在活性成分及作用靶點(diǎn)。根據(jù)成分的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行初步篩選，其中藥物口服生物利用度（Oral Bioavailability，OB）≥30%且類藥性（Drug Likeness，DL）≥0.18，獲得土茯苓的活性化合物及相關(guān)靶蛋白。

1.2 銀屑病相關(guān)靶點(diǎn)的收集及篩選

通過4個(gè)數(shù)據(jù)庫：GeneCards（https：//www.genecards.org）、治療靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫（Therapeutic Target Database，TTD，http：//bidd.nus.edu.sg/group/cjttd）、PharmGkb（https：//www.pharmgkb.org/）、在線人類孟德爾遺傳數(shù)據(jù)庫（Online Mendelian Inheritance in Man，OMIM，http：//www.omim.org），以“Psoriasis”為關(guān)鍵詞檢索，初步獲得銀屑病的潛在靶點(diǎn)，再通過數(shù)據(jù)庫DrugBank（https：//www.drugbank.ca）收集治療銀屑病的一線用藥的作用靶點(diǎn)，用以補(bǔ)充前4個(gè)數(shù)據(jù)庫所收集的靶點(diǎn)[11]。合并上述5個(gè)疾病數(shù)據(jù)庫中所收集的靶點(diǎn)，刪除重復(fù)部分即得到尋常型銀屑病的相關(guān)靶點(diǎn)。再利用R語言匹配映射藥物活性成分相關(guān)的靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)，繪制韋恩圖（Venn）獲得藥物土茯苓活性化合物潛在作用靶點(diǎn)。

1.3 土茯苓-成分-銀屑病關(guān)鍵靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

將土茯苓的活性化合物對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)基因匹配銀屑病相關(guān)靶點(diǎn)基因，交集基因即是土茯苓治療銀屑病的關(guān)鍵靶點(diǎn)。運(yùn)用Cytoscape軟件（Version 3.7.2）構(gòu)建“藥物-成分-關(guān)鍵靶點(diǎn)”關(guān)系網(wǎng)絡(luò)。通過構(gòu)建這一網(wǎng)絡(luò)對(duì)土茯苓治療銀屑病作用機(jī)制進(jìn)行可視化，初步展示藥物-成分-疾病靶點(diǎn)之間的聯(lián)系。

1.4 土茯苓成分-銀屑病靶點(diǎn)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建

運(yùn)用STRING數(shù)據(jù)庫（https：//string-db.org/Version 10.5）預(yù)測蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用（Protein-protein Interaction，PPI）關(guān)系。將交集靶點(diǎn)提交至STRING數(shù)據(jù)庫，研究物種選擇人類（Homo sapiens），最小互相作用閾值設(shè)定為“highest confidence>0.9”，其余默認(rèn)設(shè)置，將獲得的PPI關(guān)系結(jié)果用TSV格式導(dǎo)出，再用Cytoscape軟件可視化分析，得到土茯苓成分-銀屑病靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)。

1.5 基因本體分析及京都基因和基因組百科全書通路分析

利用Bioconductor平臺(tái)（http：//bioconductor.org/biocLite.R）和R語言ggplot2包對(duì)獲得的基因進(jìn)行基因本體（Gene Ontology，GO）富集分析和京都基因和基因組百科全書（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes，KEGG）通路分析，并繪制出柱狀圖和氣泡圖。

1.6 核心成分與核心靶點(diǎn)的分子對(duì)接

選取核心成分與核心靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接。核心成分化合物結(jié)構(gòu)通過PubChem數(shù)據(jù)庫獲取，Chem3D軟件對(duì)化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行3D化處理。核心靶點(diǎn)通過蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫（Protein Data Bank，PDB）獲取，利用Pymol軟件對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行去除水分子、分離蛋白和小分子處理。再通過Autodock Vina軟件進(jìn)行分子對(duì)接，得出相關(guān)能量的計(jì)算結(jié)果。最后利用Pymol軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行可視化處理。

2 結(jié)果

2. 土茯苓潛在活性化合物收集及篩選

在TCMSP數(shù)據(jù)庫中共檢索到74個(gè)土茯苓化學(xué)成分，篩選設(shè)定為OB≥30%，DL≥0.18，獲得15個(gè)活性化合物。見表1。

2.2 土茯苓有效成分治療銀屑病的潛在作用靶點(diǎn)預(yù)測

從GeneCards數(shù)據(jù)庫共獲得3 730個(gè)銀屑病靶點(diǎn)，結(jié)合TTD數(shù)據(jù)庫、PharmGkb數(shù)據(jù)庫、OMIM數(shù)據(jù)庫以及DrugBank數(shù)據(jù)庫補(bǔ)充相關(guān)靶點(diǎn)，刪除重復(fù)部分共獲得3 791個(gè)銀屑病相關(guān)靶點(diǎn)。通過TCMSP數(shù)據(jù)庫篩選有效成分對(duì)應(yīng)的作用靶點(diǎn)，去除無效和重復(fù)靶點(diǎn)后，得到土茯苓有效成分作用靶點(diǎn)325個(gè)。利用UniProt平臺(tái)進(jìn)行基因ID與基因Symbol的轉(zhuǎn)換，對(duì)有效成分對(duì)應(yīng)的基因名稱進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。將篩選的土茯苓有效成分靶點(diǎn)與銀屑病靶點(diǎn)取交集，繪制韋恩圖，得到土茯苓成分-銀屑病共同靶點(diǎn)114個(gè)。見圖1。

2.3 土茯苓-成分-銀屑病關(guān)鍵靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建分析

土茯苓與銀屑病相關(guān)的潛在有效成分12個(gè)分別為：Beta-Sitosterol、Naringenin、Stigmasterol、4，7-Dihydroxy-5-Methoxyl-6-Methyl-8-Formyl-Flavan、（-）-Taxifolin、（2R，3R）-2-（3，5-Dihydroxyphenyl）-3，5，7-Trihydroxychroman-4-One、Isoengelitin、Astilbin、Taxifolin、Diosgenin、Cis-Dihydroquercetin、Quercetin。通過Cytoscape軟件可視化分析土茯苓潛在活性化合物以及114個(gè)關(guān)鍵靶基因，構(gòu)建了“藥物-潛在活性成分-關(guān)鍵作用靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖”。見圖2。圖中粉紅色代表土茯苓成分化合物，綠色代表疾病靶點(diǎn)，藍(lán)色代表藥物，紅色代表疾病。結(jié)果顯示，連接度前5的關(guān)鍵靶點(diǎn)基因?yàn)镻TGS2、PTGS1、RELA、RXRA、BCL2。連接度前5的藥物有效成分為：槲皮素（Quercetin）、柚皮素（Naringenin）、薯蕷皂苷元（Diosgenin）、Β-谷甾醇（Beta-Sitosterol）、紫杉醇（Taxifolin）。

2.4 關(guān)鍵靶點(diǎn)基因PPI網(wǎng)絡(luò)分析

在STRING數(shù)據(jù)庫平臺(tái)中導(dǎo)入土茯苓治療銀屑病的114個(gè)潛在靶點(diǎn)基因，物種選擇人類，獲得表達(dá)蛋白之間相互作用的關(guān)系網(wǎng)絡(luò)。結(jié)果表明，PPI網(wǎng)絡(luò)包括114個(gè)節(jié)點(diǎn)，257條邊。見圖3。繪制前30位核心基因的柱狀圖。得出AKT1、JUN的鄰接節(jié)點(diǎn)均為27個(gè)靶蛋白基因，IL6、MAPK1、RELA的鄰接節(jié)點(diǎn)均為25個(gè)靶蛋白基因，MAPK3的鄰接節(jié)點(diǎn)為24個(gè)靶蛋白基因，EGFR的鄰接節(jié)點(diǎn)為19個(gè)靶蛋白基因，證明以上幾個(gè)基因在整個(gè)PPI網(wǎng)絡(luò)中位于調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的核心，可能在藥物活性成分參與治療銀屑病過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。見圖4。

2.5 土茯苓中關(guān)鍵靶點(diǎn)基因生物功能分析

GO注釋結(jié)果顯示，土茯苓作用的關(guān)鍵基因富集后排名靠前的生物學(xué)功能主要為細(xì)胞因子活性、細(xì)胞因子受體結(jié)合、受體配體活性，其余依次為血紅素結(jié)合、核受體活性、轉(zhuǎn)錄因子活性、直接配體調(diào)節(jié)的序列特異性DNA結(jié)合、磷酸酶結(jié)合、四吡咯結(jié)合、抗氧化活性、激酶調(diào)節(jié)活性、泛素樣蛋白連接酶結(jié)合、RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等。圓點(diǎn)越大，富集越多，P值越小，表明該生物功能的富集顯著性越可靠，顏色越紅。見圖5。表明土茯苓可以通過調(diào)控多種生物過程發(fā)揮治療銀屑病的作用。

2.6 土茯苓關(guān)鍵靶點(diǎn)基因富集通路分析

通過注解及分析共得到159條作用通路，根據(jù)P值分析，其中與疾病相關(guān)的有20條。主要富集通路為腫瘤壞死因子（TNF）信號(hào)通路、IL-17信號(hào)通路、糖尿病并發(fā)癥的AGE-RAGE信號(hào)通路、流體剪切應(yīng)力與動(dòng)脈粥樣硬化、前列腺癌、卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染，同時(shí)還涉及乙肝、膀胱癌、胰腺癌、丙肝、人巨細(xì)胞病毒感染、甲型流感、信號(hào)通路等通路，表明土茯苓潛在活性成分靶點(diǎn)基因可以作用于不同的通路，可以拓展治療不同疾病通路。P值越小，表明該差異表達(dá)基因在此條通路中富集顯著性越可靠，顏色越紅。見圖6。此處根據(jù)P值列出了與銀屑病相關(guān)度較可靠的2條關(guān)鍵通路。見表2。

2.7 分子對(duì)接

選取核心化合物中排名靠前的槲皮素（Quercetin）、柚皮素（Naringenin）、薯蕷皂苷元（Diosgenin）、Β-谷甾醇（Beta-Sitosterol）、紫杉醇（Taxifolin）依次與核心治療靶點(diǎn)AKT1、PTGS2、IL-6、MAPK1、EGFR對(duì)接，配體與受體的結(jié)合能均≤-6.0 kcal/mol（ kcal=4 186 J），表明結(jié)合穩(wěn)定。對(duì)接活性最好的為Beta-Sitosterol與AKT1的結(jié)合，其次是Diosgenin與EGFR的結(jié)合。見表3，圖，7。

3 討論

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合了生物信息學(xué)知識(shí)，是基于疾病、蛋白質(zhì)靶點(diǎn)和藥物相互作用網(wǎng)絡(luò)的系統(tǒng)分析方法，廣泛運(yùn)用于預(yù)測中醫(yī)藥治療相關(guān)疾病的機(jī)制，有效推動(dòng)了中藥復(fù)方及單體的研究[12-13]。本研究通過生物網(wǎng)絡(luò)分析方法，探索土茯苓治療銀屑病的核心機(jī)制。

本研究較為直觀地展現(xiàn)土茯苓中12個(gè)化合物成分、114個(gè)靶蛋白、20條作用通路和銀屑病間的關(guān)聯(lián)。土茯苓作用于銀屑病靶基因的主要活性成分為槲皮素（Quercetin）、柚皮素（Naringenin）、薯蕷皂苷元（Diosgenin）、Β-谷甾醇（Beta-Sitosterol）、紫杉醇（Taxifolin）。槲皮素是部分天然植物的類黃酮成分，具有抗炎，抗氧化，抗癌，心臟保護(hù)，肝臟保護(hù)等多種作用，有研究表明，槲皮素可能通過抗氧化、抗炎、抗增殖活性[14]、抑制核因子κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的激活[15]、調(diào)節(jié)腸道菌群[16]等途徑而起到治療銀屑病的作用。柚皮素為柑橘類黃酮成分，能夠抑制IL-6過表達(dá)、緩解鱗屑和表皮增生、修復(fù)皮膚屏障功能[17]、抑制TNF-α激活的炎癥途徑[18]，若運(yùn)用甲氨蝶呤治療銀屑病時(shí)，柚皮素還能抑制此藥誘導(dǎo)的肝毒性[19]。薯蕷皂苷能抑制核因子κB及HaCaT細(xì)胞的生長，并通過調(diào)節(jié)胱天蛋白酶-3，Bax和Bcl-2蛋白的表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，同時(shí)還能減少角質(zhì)形成細(xì)胞中VEGF-α的表達(dá)而部分抑制血管形成[20]。β-谷甾醇屬于植物甾醇中重要組成，可以具有類似激素樣的抗炎作用，但無激素類藥物不良反應(yīng)[21]。紫杉醇具有多種藥理活性，可以抑制HaCat細(xì)胞異常增殖，同時(shí)抑制Notch1和Jak2/Stat3途徑來調(diào)節(jié)輔助性T細(xì)胞的分化，從而治療銀屑病[22]。其中Jak（哺乳動(dòng)物Janus激酶）是治療銀屑病的自身免疫性炎性疾病的靶標(biāo)，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及轉(zhuǎn)錄激活因子3（STAT3）參與調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖分化、惡性轉(zhuǎn)化、成活和凋亡等基本細(xì)胞生物學(xué)過程[23]。綜合上述研究結(jié)果，說明本研究中篩選出的活性成分具有抗炎、抗增殖、抑制血管生成、修復(fù)皮膚屏障功能，從而達(dá)到治療銀屑病的作用。提示在后續(xù)土茯苓等治療銀屑病的現(xiàn)代化制劑研發(fā)中，應(yīng)該最大限度地保留有效活性成分。

土茯苓的活性成分作用靶點(diǎn)與114個(gè)主要蛋白有很強(qiáng)的相互作用，其中AKT1、JUN、IL-6、MAPK1、RELA、MAPK3與EGFR為關(guān)鍵靶蛋白，且與其他多個(gè)蛋白發(fā)生相互作用。其中蛋白激酶B（AKT）是角質(zhì)形成細(xì)胞增殖的關(guān)鍵上游分子，抑制AKT可有效改善銀屑病的治療效果[24]。JUN蛋白是角質(zhì)形成細(xì)胞增殖分化和細(xì)胞因子產(chǎn)生的重要調(diào)節(jié)劑，當(dāng)JUN蛋白缺失時(shí)會(huì)導(dǎo)致S100A8和S100A9的高表達(dá)，從而使角質(zhì)形成細(xì)胞過度增殖和異常分化，在JUN蛋白缺乏的同時(shí)也會(huì)使表皮生長因子受體（EGFR）表達(dá)降低[25]。促分裂原活化的蛋白激酶（MAPK）在接受細(xì)胞因子、生長因子、應(yīng)激信號(hào)以及致癌刺激后被激活，增強(qiáng)JUN活性，從而調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化及凋亡[26]。RELA在胚胎發(fā)生過程中控制表皮發(fā)育，能通過抑制先天性免疫介導(dǎo)的炎癥而調(diào)節(jié)表皮穩(wěn)態(tài)[27]，還能保護(hù)表皮角質(zhì)形成細(xì)胞免于凋亡[28]。白細(xì)胞介素-6（IL-6）是由T細(xì)胞、B細(xì)胞、髓樣細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生的多功能炎癥介質(zhì)，在某些條件下可以刺激角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖，而IL-6的高表達(dá)能直接導(dǎo)致銀屑病表皮增殖，并影響真皮中部分免疫細(xì)胞的功能[29-30]。由此土茯苓潛在活性成分治療銀屑病的關(guān)鍵作用可能是上調(diào)JUN、RELA表達(dá)及下調(diào)EGFR、IL-6、MAPK的表達(dá)，抑制角質(zhì)形成細(xì)胞增殖、血管生成及抑制炎癥。

通過對(duì)土茯苓治療銀屑病的114個(gè)疾病靶點(diǎn)進(jìn)行GO生物過程富集，顯示土茯苓可以通過細(xì)胞因子活性、細(xì)胞因子受體結(jié)合、受體配體活性，以及血紅素結(jié)合、核受體活性、轉(zhuǎn)錄因子活性、直接配體調(diào)節(jié)的序列特異性DNA結(jié)合、磷酸酶結(jié)合、四吡咯結(jié)合、抗氧化活性、激酶調(diào)節(jié)活性、泛素樣蛋白連接酶結(jié)合、RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等等發(fā)揮治療作用。KEGG分析提示，影響上述生物過程最主要可能是IL-17信號(hào)通路及TNF信號(hào)通路。IL-17分子主要由輔助性T17細(xì)胞（Th17）產(chǎn)生，IL-17是銀屑病發(fā)病的重要因素，能激活角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞凋亡，IL-17A刺激樹突狀細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生IL-6，IL-17F也能誘導(dǎo)角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生IL-6[31]。同時(shí)IL-17也能通過刺激成纖維細(xì)胞產(chǎn)生血管來促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和血管生成[32]。研究表明通過抑制IL-17信號(hào)通路，能達(dá)到較好的治療銀屑病效果，如蘇金單抗、依克珠單抗、布羅達(dá)單抗等生物制劑均是以此信號(hào)通路為靶向[33-34]。TNF-α可幫助炎癥細(xì)胞穿透血管壁，激活血管內(nèi)皮細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，并調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)和炎癥，同樣被認(rèn)為是IL-6的有效誘導(dǎo)劑[35-36]。由此，推測土茯苓治療銀屑病可能通過抑制IL-17信號(hào)通路及TNF信號(hào)通路，從而恢復(fù)角質(zhì)形成細(xì)胞功能，而達(dá)到銀屑病的治療效果。

綜上所述，本研究初步揭示了土茯苓治療銀屑病功效的潛在活性成分及其可能的作用機(jī)制，不僅為臨床運(yùn)用土茯苓治療銀屑病提供了科學(xué)依據(jù)，也為發(fā)掘土茯苓的潛在作用機(jī)制提供了新的方向。本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法對(duì)土茯苓主要藥效成分治療銀屑病的作用機(jī)制提供了預(yù)測理論基礎(chǔ)，但是其進(jìn)一步的機(jī)制還須在此基礎(chǔ)上通過生物學(xué)的技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，如動(dòng)物或細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，進(jìn)而能更確切地深入研究土茯苓治療銀屑病的主要調(diào)控靶點(diǎn)。

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（2021-02-22收稿 本文編輯：魏慶雙）