熊云梅 王加真 ,2* 劉義富 ,2 秦 中
(1遵義師范學(xué)院生物與農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,貴州遵義 563000;2遵義師范學(xué)院茶葉研究所,貴州遵義 563000;3遵義師范學(xué)院信息工程學(xué)院,貴州遵義 563000)
蟲(chóng)茶又稱(chēng)“茶精”,是我國(guó)特有的一種林業(yè)資源昆蟲(chóng)產(chǎn)品。它是一種由昆蟲(chóng)取食植物葉片后經(jīng)過(guò)體內(nèi)特殊代謝所排出的排泄物,在我國(guó)具有悠久的生產(chǎn)和飲用歷史[1]。蟲(chóng)茶具有清熱、去暑、解毒、健胃以及助消化等功效。我國(guó)蟲(chóng)茶的生產(chǎn)地區(qū)主要在貴州、廣西和湖南等省的一些偏遠(yuǎn)山區(qū),由于生產(chǎn)蟲(chóng)茶的各個(gè)省份的氣候環(huán)境、空氣溫濕度、產(chǎn)茶昆蟲(chóng)種類(lèi)等不同,致使不同產(chǎn)地生產(chǎn)的蟲(chóng)茶的茶湯顏色、各種內(nèi)在成分及含量存在較大差異。不同產(chǎn)地的蟲(chóng)茶品質(zhì)有區(qū)別。蟲(chóng)茶生產(chǎn)一般在每年4月谷雨前后進(jìn)行,即將化香樹(shù)、野山楂、三葉海棠、苦丁茶、樟科植物等的嫩葉采摘后,經(jīng)自然發(fā)酵,產(chǎn)生一種獨(dú)特的氣味,吸引昆蟲(chóng)成蟲(chóng)飛入產(chǎn)卵,并孵化出幼蟲(chóng)啃食樹(shù)葉,將這些幼蟲(chóng)的排泄物過(guò)篩曬干后即制得蟲(chóng)茶[2]。
目前已有諸多研究者對(duì)蟲(chóng)茶展開(kāi)了研究。劉健鋒等[3]在貴州蟲(chóng)茶資源及其利用的現(xiàn)狀調(diào)查中指出,赤水當(dāng)?shù)厣a(chǎn)蟲(chóng)茶的昆蟲(chóng)品種主要為米縞螟、紫斑谷螟和化香夜蛾等。赤水市桫龍蟲(chóng)茶飲品有限公司將赤水蟲(chóng)茶與金釵石斛結(jié)合,制成了一種金釵石斛蟲(chóng)茶,其具有養(yǎng)胃益氣、增強(qiáng)人體免疫力等功效[4]。文禮章等[5]研究指出:化香蟲(chóng)茶是化香夜蛾取食化香樹(shù)葉之后所產(chǎn)生的排泄物經(jīng)過(guò)加工之后所成;化香蟲(chóng)茶茶湯顏色呈現(xiàn)青褐色,略帶渾濁感,其在口感上似青茶味;化香蟲(chóng)茶作為飲品或者藥品開(kāi)發(fā)仍需要更多的人體毒性試驗(yàn)。王 睿等[6]研究指出,化香蟲(chóng)茶中的總黃酮能夠減輕四氯化碳對(duì)肝組織的破壞,保護(hù)肝臟細(xì)胞,具有較好的預(yù)防肝損傷效果。本文對(duì)常見(jiàn)蟲(chóng)茶中的各成分含量進(jìn)行測(cè)定,分析不同產(chǎn)地蟲(chóng)茶的品質(zhì)差異,以期為人們科學(xué)飲茶提供參考。
1.1.1 試樣樣品。供試茶葉品種為廣西化香蟲(chóng)茶和貴州赤水當(dāng)?shù)剞r(nóng)家的赤水蟲(chóng)茶,均為市售。將2種茶樣置于烘箱中干燥后,置于研缽充分研磨,過(guò)100目篩子后制得蟲(chóng)茶茶粉,待用。
1.1.2 試驗(yàn)試劑。供試試劑有蒸餾水、0.01 mol/L鹽酸溶液、酒石酸鐵溶液、2%茚三酮溶液、堿式乙酸鉛溶液、4.5 mol/L硫酸溶液、pH值為7.5的索倫遜緩沖液、蒽酮溶液、濃硫酸溶液、50%乙醇、50%丙酮。
1.1.3 儀器與設(shè)備。試驗(yàn)儀器有UV-9000S紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、UV-7250c紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、DHG-9140型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、Eppendorf低速離心機(jī)、電子天平(精確度為0.000 1 g)、超聲波清洗器。
1.2.1 樣品制備。用分析天平準(zhǔn)確稱(chēng)取0.100 0 g茶樣于試管中,每種茶樣均設(shè)4次重復(fù)。加10 mL沸騰蒸餾水,封上保鮮膜,水浴煮沸45 min,每隔15 min振搖1次,煮好后冷卻靜置24 h,吸取上清液置于離心管中,在13 400 r/min條件下離心3 min后取出,備用。
1.2.2 測(cè)定指標(biāo)。茶樣測(cè)定指標(biāo)包括水浸出物、茶多酚、游離氨基酸、咖啡堿、可溶性糖、葉綠素等,測(cè)定方法如下。
(1)水浸出物的測(cè)定。在樣品制備前用分析天平準(zhǔn)確稱(chēng)取事先編號(hào)的干燥試管,經(jīng)1.2.1步驟后,將試管及茶粉放入烘箱中,在120℃條件下烘干24 h,烘干后稱(chēng)取試管及茶粉的重量,利用下述公式計(jì)算蟲(chóng)茶樣品中水浸出物的含量:
式中,W1為平行稱(chēng)取干燥試管2次后取得的平均試管重(g);W2為茶粉樣品平均重量(g);W3為烘干后平均茶粉及試管重(g)。
(2)茶多酚含量的測(cè)定。采用酒石酸鐵比色法測(cè)定,即取經(jīng)1.2.1處理所得的茶湯1 mL,注入25 mL容量瓶中,加4 mL蒸餾水和5 mL酒石酸鐵溶液后,用pH值7.5的緩沖液定容至刻度線,混勻,以空白試劑作參比溶液,采用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)于波長(zhǎng)540 nm處測(cè)定吸光度值。
(3)游離氨基酸含量的測(cè)定。采用茚三酮比色法進(jìn)行測(cè)定。準(zhǔn)確吸取1.2.1所制得的茶湯1 mL置于試管中,加pH值7.5的索倫遜緩沖液0.5 mL和2%茚三酮溶液0.5 mL,混勻置于沸水中加熱15 min,冷卻后轉(zhuǎn)入50 mL容量瓶中,加入蒸餾水定容至刻度線,靜置15 min,在570 nm處以空白試劑作參比溶液,測(cè)定其吸光度值。
(4)咖啡堿含量的測(cè)定。根據(jù)《茶 咖啡堿測(cè)定》(GB/T 8312—2013),采取紫外分光光度法測(cè)定咖啡堿含量。用移液管準(zhǔn)確吸取1.2.1制得的茶湯0.5 mL于50 mL三角瓶中,加入0.01 mol/L鹽酸溶液1 mL、堿式乙酸鉛溶液0.25 mL、4.5 mol/L硫酸溶液0.1 mL,再加入24 mL蒸餾水,混勻靜置,待澄清后過(guò)濾。吸取上清液8 mL注入10 mL離心管中,每個(gè)樣品平行量取2份,置于試管架上待測(cè)。以空白試劑作參比溶液,并于274 nm條件下測(cè)定其吸光度值。
(5)可溶性糖含量的測(cè)定。采用蒽酮-硫酸法測(cè)定可溶性糖含量。以空白試驗(yàn)樣品為參比,以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(6)葉綠素含量的測(cè)定。將50%乙醇和50%丙酮按1∶1比例混合制成溶液,提取蟲(chóng)茶樣品中的葉綠素,再利用分光光度計(jì)測(cè)定吸光度值,利用公式計(jì)算葉綠素含量。
從表1可以看出,赤水蟲(chóng)茶中水浸出物含量為44.620%,化香蟲(chóng)茶中的水浸出物含量為24.170%,兩者存在顯著差異。赤水蟲(chóng)茶中可溶性糖含量高達(dá)12.871%,而化香蟲(chóng)茶可溶性糖含量比赤水蟲(chóng)茶低,其含量?jī)H為2.914%,2種茶樣可溶性糖含量存在顯著差異。赤水蟲(chóng)茶中游離氨基酸含量為2.410%,化香蟲(chóng)茶游離氨基酸含量為1.135%,2種樣品的游離氨基酸含量存在顯著差異。化香蟲(chóng)茶的茶多酚含量相對(duì)較低,僅為6.353%,赤水蟲(chóng)茶中的茶多酚含量為11.807%,2種茶樣的茶多酚含量存在顯著差異。茶葉的酚氨比即茶葉中茶多酚含量與氨基酸含量的比值,在一定程度上反映茶葉品質(zhì)的好壞。赤水蟲(chóng)茶酚氨比為4.912 0,化香蟲(chóng)茶酚氨比為5.597 0,2種茶樣的酚氨比存在顯著差異。研究顯示,當(dāng)茶葉的酚氨比達(dá)到8.74時(shí),茶葉開(kāi)始出現(xiàn)苦味。因?yàn)?種茶樣的酚氨比均在6.0以下,所以蟲(chóng)茶一般不具有綠茶的澀味。咖啡堿是茶葉中構(gòu)成茶湯滋味的一種重要的呈味物質(zhì),茶葉中咖啡堿含量越高,茶葉品質(zhì)越好。2種茶樣的咖啡堿含量均較少,赤水蟲(chóng)茶咖啡堿含量(0.895%)略高于化香蟲(chóng)茶(0.717%),兩者存在顯著差異。
表1 不同產(chǎn)地蟲(chóng)茶的功能成分比較
葉綠素是綠色植物光合作用的基礎(chǔ)物質(zhì),反映植物的生長(zhǎng)發(fā)育和營(yíng)養(yǎng)狀況。從表2可以看出,化香蟲(chóng)茶總?cè)~綠素含量為2.070%,赤水蟲(chóng)茶總?cè)~綠素含量為1.826%,赤水蟲(chóng)茶的總?cè)~綠素含量比化香蟲(chóng)茶低;化香蟲(chóng)茶的葉綠素a、b含量高于赤水蟲(chóng)茶,同時(shí),赤水蟲(chóng)茶的葉綠素a與葉綠素b的比值高于化香蟲(chóng)茶。
表2 不同產(chǎn)地蟲(chóng)茶的葉綠素含量比較
本文研究發(fā)現(xiàn),赤水蟲(chóng)茶的水浸出物含量、茶多酚含量、游離氨基酸含量、咖啡堿含量、可溶性糖含量均高于化香蟲(chóng)茶。
茶葉的水浸出物是茶葉中的茶多酚類(lèi)、游離氨基酸類(lèi)、咖啡堿等水溶性物質(zhì)的總和,是茶湯中的主要呈味物質(zhì),其含量高低標(biāo)志茶湯的滋味濃郁程度[7]。赤水蟲(chóng)茶中的水浸出物含量達(dá)到了44.62%,化香蟲(chóng)茶中水浸出物含量只有24.17%,兩者水浸出物含量具有顯著差異,即赤水蟲(chóng)茶的茶湯滋味比化香蟲(chóng)茶茶湯滋味更濃郁。一種高品質(zhì)的好茶其品質(zhì)不是由某種單一成分決定的,而是由多種內(nèi)在成分決定的。蟲(chóng)茶中茶多酚類(lèi)、游離氨基酸類(lèi)以及咖啡堿的含量也是決定蟲(chóng)茶品質(zhì)的重要組成部分。茶多酚是一類(lèi)存在于茶樹(shù)中的多元酚混合物,是構(gòu)成茶葉色、香、味的主要化學(xué)物質(zhì),決定著茶葉的保健功能[8]。有研究表明,茶葉中的總茶多酚含量與發(fā)酵程度成反比。茶葉在發(fā)酵過(guò)程中多酚類(lèi)物質(zhì)會(huì)發(fā)生氧化、聚合,形成茶黃素和茶紅素等茶色素[9],而蟲(chóng)茶制作過(guò)程中存在一個(gè)發(fā)酵和昆蟲(chóng)取食后在昆蟲(chóng)體內(nèi)消化代謝的過(guò)程,從而導(dǎo)致赤水蟲(chóng)茶、化香蟲(chóng)茶2種蟲(chóng)茶樣品中的茶多酚含量均低于普通綠茶,但赤水蟲(chóng)茶茶多酚含量仍高于化香蟲(chóng)茶??Х葔A是茶葉中一種重要的風(fēng)味物質(zhì)及生理活性成分,是構(gòu)成茶湯滋味的重要物質(zhì),具有興奮神經(jīng)、驅(qū)除疲勞等功效。有研究指出茶葉中咖啡堿含量與茶葉品質(zhì)成正相關(guān),即茶葉中咖啡堿含量越高,茶葉品質(zhì)越好[10]。孫月華等[11]研究表明紅茶中的咖啡堿含量大于綠茶中的咖啡堿含量。本文試驗(yàn)結(jié)果顯示,赤水蟲(chóng)茶、化香蟲(chóng)茶中的咖啡堿含量均較低,但赤水蟲(chóng)茶中咖啡堿含量仍稍高于化香蟲(chóng)茶。氨基酸是茶葉中呈現(xiàn)鮮爽口感的主要物質(zhì),決定著茶葉的香氣和滋味,是影響茶葉品質(zhì)的一種重要成分[12]。同時(shí),茶葉中含有的人體必需氨基酸種類(lèi)及多少也是評(píng)判茶葉品質(zhì)好壞的一部分因素,但是由于試驗(yàn)條件限制,本試驗(yàn)未能涉及蟲(chóng)茶中氨基酸種類(lèi)的測(cè)定。此外,根據(jù)王海利等[13]的研究結(jié)果可知,茶葉中的酚氨比與茶滋味濃度、茶滋味鮮度和茶滋味醇度成負(fù)相關(guān);同時(shí),與茶葉中茶多酚、游離氨基酸等單一指標(biāo)相比較,酚氨比更能反映茶滋味。
葉綠素是高等植物進(jìn)行光合作用的一種基礎(chǔ)色素,植物中總?cè)~綠素含量以及葉綠素a/葉綠素b比值大小常常作為研究植物生長(zhǎng)發(fā)育的生理指標(biāo)。與各功能成分相比,不同產(chǎn)地蟲(chóng)茶中各種色素含量呈現(xiàn)相反趨勢(shì)。根據(jù)本文數(shù)據(jù)可知,化香蟲(chóng)茶中的葉綠素a、葉綠素b的含量以及總?cè)~綠素含量均高于赤水蟲(chóng)茶。蟲(chóng)茶是由某種昆蟲(chóng)取食后經(jīng)過(guò)體內(nèi)一系列代謝后所排出的糞粒,最后經(jīng)過(guò)加工后所制成的一種茶制品,其在制作過(guò)程中有一個(gè)發(fā)酵過(guò)程,導(dǎo)致蟲(chóng)茶中各類(lèi)色素含量較低,且低于市售的各種普通綠茶。
綜上所述,赤水蟲(chóng)茶的相對(duì)品質(zhì)優(yōu)于化香蟲(chóng)茶。一方面,赤水蟲(chóng)茶中的水浸出物含量高于化香蟲(chóng)茶,且兩者具有明顯差異;另一方面,赤水蟲(chóng)茶中的氨基酸、茶多酚含量較高且比例適宜。茶多酚具有消除人體體內(nèi)自由基、延緩衰老等諸多作用。因此,赤水蟲(chóng)茶具有更高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。