DAPK3和CDK8在宮頸癌組織中的表達及臨床意義

孫瑞瑞 吳晗 齊艷姝 黃如意 傅鑒乾

[摘要]目的探討死亡相關蛋白激酶3（DAPK3）和細胞周期蛋白依賴性激酶8（CDK8）在宮頸癌組織中的表達及臨床意義。方法選取廈門市第五醫(yī)院2018年1月至2021年1月進行宮頸癌手術治療的患者86例，取手術過程中的宮頸癌組織與癌旁正常組織進行研究，探討宮頸癌組織與癌旁正常組織中DAPK3與CDK8 表達情況、宮頸癌組織中DAPK3與CDK8表達與臨床特征的關系及DAPK3與CDK8表達在宮頸癌組織中的相關性。結果宮頸癌組織DAPK3低表達率（75.58%）明顯高于癌旁正常組織（16.28%），CDK8高表達率（86.05%）明顯高于癌旁正常組織（9.30%），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）;DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中的表達同年齡、病理類型、FIGO分期、分化程度無明顯相關性，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）;DAPK3與CDK8表達在宮頸癌組織中呈負相關，相關性中度（r=-0.552，P=0.000）。結論在宮頸癌組織中DAPK3表現(xiàn)為低表達，CDK8表現(xiàn)為高表達，兩者呈中度負相關，兩者與患者年齡、病理類型等臨床特征不存在相關性，可為臨床提供參考。

[關鍵詞]死亡相關蛋白激酶3;細胞周期蛋白依賴性激酶8;宮頸癌;免疫組織化學;陽性細胞

[中圖分類號]R737.33??? [文獻標識碼]A??? [文章編號]2095-0616（2022）02-0163-04

Expression and clinical significance of DAPK3 and CDK8 in cervical carcinoma tissues

SUN Ruirui??? WU Han??? QI Yanshu??? HUANG Ruyi??? FU Jianqian

Department of Medical Oncology，the Fifth Hospital of Xiamen，F(xiàn)ujian，Xiamen 361101，China

[Abstract]Objective To investigate the expression and clinical significance of death-associated protein kinase 3 （DAPK3）and cyclin-dependent kinase 8 （CDK8）in cervical carcinoma tissues. Methods A total of 86 patients who received surgical treatment of cervical carcinoma in the Fifth Hospital of Xiamen from January 2018 to January 2021 were selected for a study of their cervical carcinoma tissues and the normal tissues adjacent to the carcinoma during the operation. The expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues and the normal tissues adjacent to the carcinoma，the relationship between the expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues and clinical features，and the correlation between the expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues were investigated. Results The low expression rate of DAPK3 in the cervical carcinoma tissues （75.58%）was significantly higher than that in the normal tissues adjacent to the carcinoma （16.28%），and the high expression rate of CDK8 （86.05%）was significantly higher than that in the normal tissues adjacent to the carcinoma （9.30%），with statistically significant differences （P<0.05）. The expression of DAPK3 and CDK8 in the cervical carcinoma tissues had no significant correlation with the age，pathological type，F(xiàn)IGO staging and degree of differentiation，and the differences were statistically insignificant （P>0.05）. The expression of DAPK3 in the cervical carcinoma tissues was negatively correlated with that of CDK8，and the correlation was moderate （r=-0.552，P=0.000）. Conclusion In cervical carcinoma tissues，the expression of DAPK3 is low expression，while the expression of CDK8 is high expression. The two are moderately negatively correlated. There is no correlation between them and the clinical characteristics of the patients such as age and pathological types，etc. These can be reference for clinical practice.

[Key words]Death-associated protein kinase 3;Cyclin-dependent kinase 8;Cervical carcinoma;Immunohistochemistry;Positive cell

宮頸癌臨床發(fā)病率高，侵襲性強，預后差，其病死率在婦科惡性腫瘤中僅次于乳腺癌[1]。宮頸癌的致病因素復雜，一般認為是由于人乳頭狀病病毒（human papillomavirus，HPV）的持續(xù)感染及癌基因與抑癌基因表達異常引起的[2]。死亡相關蛋白激酶3（death-associated protein kinases 3，DAPK3）與細胞周期蛋白依賴性激酶8（cyclin-dependent kinase 8，CDK8）分別屬于機體細胞抑癌基因與癌基因表達的產(chǎn)物，DAPK3高度表達可抑制細胞集落形成，從而促進細胞凋亡叫CDK8作為人體周期素依賴性激酶家族的一員，則通過與中介體結合，從而發(fā)揮促癌功能[4]。臨床發(fā)現(xiàn)DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中存在著基因表達失調(diào)，兩者與宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展密切相關。但目前宮頸癌組織DAPK3和CDK8表達情況的共同研究較少，且相關研究中未提及DAPK3和CDK8兩者表達情況的相關性。本已經(jīng)為進一步探討DAPK3和CDK8 在宮頸癌組織中的表達及臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1??? 資料與方法

1.1??? 一般資料

選取廈門市第五醫(yī)院2018年1月至2021年1月進行宮頸癌手術治療的患者86例，取手術過程中的宮頸癌組織與癌旁正常組織進行研究。納入標準：①均經(jīng)病理檢查初次確診為宮頸鱗癌或?qū)m頸腺癌;②根據(jù)國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO）宮頸癌分期（2018年）[5-6]為I～II期。排除標準：①手術之前進行過化療、免疫藥物治療等治療的患者;②其他惡性腫瘤或惡性腫瘤病史者;③腦梗死、心肌梗死等重大疾病或重大疾病病史。本研究用組織均為病理診斷后剩余的新鮮無壞死組織，組織的獲取取得患者或其家屬的知情同意，研究獲得醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準。86例患者年齡23～83歲，平均（52.45±15.77）歲;病理類型：腺癌34例;鱗癌52例;FIGO分期：I A 13 例，I B 35例，II A 20例，II B 18例;分化程度：高分化32例，中分化23例，低分化31例。

1.2??? 方法及評價標準

所有組織標本新鮮取材后，經(jīng)10%甲醛水溶液固定至少24 h，采用全自動組織脫水機（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型號：Leica ASP300S）脫水，組織包埋機（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型號：Leica HistoCore Arcadia）進行石蠟包埋，平推式切片機（Leica Biosystems Nussloch GmbH，型號：Leica SM2010 R）進行切片。采用免疫組織化學（immunohistochemistry，IHC）法檢測DAPK3 和CDK8表達情況[7]，DAPK3免疫組化試劑盒購自上海圻明生物科技有限公司，CDK8免疫組化試劑盒購自上海雅吉生物科技有限公司。在400倍光學顯微鏡（美國SWIFT三目光學生物顯微鏡，型號：SW380T ）下觀察宮頸癌組織與癌旁正常組織切片，任意選取6個視野，每個視野觀察100個細胞。其中，CDK3為核染色蛋白，細胞核出現(xiàn)著色視為陽性細胞;DAPK3表達于胞漿，細胞質(zhì)出現(xiàn)著色視為陽性細胞。陽性細胞百分數(shù)評分標準叫陽性細胞數(shù)≤5%為0分;>5%、≤20%為1分;>20%、≤50% 為2 分;>50%、≤75% 為3 分;>75% 為4分。著色程度強弱評分標準[9]：無著色為0分;輕度為1分;中度為2分;重度為3分。表達強度=著色程度強弱評分×陽性細胞百分數(shù)評分?？傇u分≤5分為低表達，>6分為高表達。

1.3統(tǒng)計學方法

2??? 結果

2.1??? 宮頸癌組織與癌旁正常組織中DAPK3與CDK8表達情況比較

宮頸癌組織DAPK3低表達率（75.58%）明顯高于癌旁正常組織（16.28%），CDK8高表達率（86.05%）明顯高于癌旁正常組織（9.30%），差異有統(tǒng)計學意義（P <0.05），見表1。

2.2??? 宮頸癌組織中DAPK3與CDK8表達與臨床特征的關系

DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中的表達與年齡、病理類型、FIGO分期、分化程度無明顯相關性（P >0.05），差異無統(tǒng)計學意義，見表2。

2.3??? DAPK3與CDK8表達在宮頸癌組織中的相關性分析

DAPK3與CDK8表達在宮頸癌組織中呈負相關，相關性中度（r=-0.552，P=0.000），見表3。

3??? 討論

宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展同機體癌基因和抑癌基因的表達息息相關，了解和掌握細胞癌基因和抑癌基因的表達有利于腫瘤疾病的診斷和治療[10]。DAPK3作為DAPK家族中的一員，其基因?qū)儆?號常染色體的抑癌基因，在許多腫瘤組織中表達失調(diào)[11]。臨床表明DAPK3是一種多域結構蛋白，與細胞增殖、死亡等信號傳導途徑相關聯(lián)，其過度表達具有抑制細胞集落形成、促進細胞凋亡的生物學能力[12]。而與DAPK3相反，CDK8作為CDK家族的一員，是原癌基因的產(chǎn)物，其參與細胞周期調(diào)控、細胞分裂等過程，其過度表達可以加快癌細胞的生長和分裂進程[13]?？梢姡谂R床宮頸癌疾病的診斷和治療過程中，對DAPK3與CDK8表達情況的了解和探討具有重要意義。

本研究中，宮頸癌組織DAPK3低表達率明顯高于癌旁正常組織（P<0.05），CDK8高表達率明顯高于癌旁正常組織（P<0.05），提示DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中表達失調(diào)，兩者與宮頸癌的發(fā)生有著密切關系;宮頸癌組織中DAPK3出現(xiàn)低表達和CDK8出現(xiàn)高表達的可能性更大，而癌旁正常組織中DAPK3出現(xiàn)高表達和CDK8出現(xiàn)低表達的可能性更大，預示著DAPK3低表達情況與CDK8 高表達情況可以預測宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展，在臨床宮頸癌診斷與治療中具有一定的參考價值[14]。DAPK3與CDK8在宮頸癌組織中的表達同年齡、病理類型、FIGO分期、分化程度均無明顯相關性（P>0.05），提示DAPK3與CDK8表達失調(diào)與患者年齡、病理類型、FIGO分期、分化程度等臨床特征均無明顯線性相關，意味著DAPK3與CDK8的表達不受患者病理類型、分化程度等臨床特征的影響;同時也表明DAPK3與CDK8的表達主要與宮頸癌的發(fā)生密切相關[15]。DAPK3與CDK8表達在宮頸癌組織中呈負相關，相關性中度（r=-0.552，P=0.000），提示在宮頸癌組織中DAPK3與CDK8表達是存在相關性的，并且是呈中度的負相關，將出現(xiàn)此消彼長現(xiàn)象。同時結果中顯示，86例宮頸癌組織中有65例出現(xiàn)DAPK3低表達和CDK8高表達，提示DAPK3低表達患者往往也具有CDK8高表達情況，預示患者抑癌基因與癌基因表達會同時出現(xiàn)失調(diào)現(xiàn)象;而宮頸癌組織中DAPK3出現(xiàn)低表達，同時CDK8出現(xiàn)高表達，將有利于癌細胞的增殖和生長[16]。由此可知，DAPK3與CDK8的表達情況對于預示宮頸癌的發(fā)生與發(fā)展具有非常重要的意義，能夠為宮頸癌疾病的發(fā)生提供早期依據(jù)，對于宮頸癌癌細胞的增殖情況也具有提示作用。但因為本研究臨床數(shù)據(jù)較少，且入選患者均為宮頸癌早期手術患者，故存在一定的局限性，僅能為臨床提供一定參考。在今后的臨床相關研究中，可能需要增加樣本量，擴大FIGO分期范圍，來進行進一步的研究和探討。

綜上所述，在宮頸癌組織中DAPK3表現(xiàn)為低表達，CDK8表現(xiàn)為高表達，兩者表達情況呈中度負相關，兩者表達情況與患者年齡、病理類型、FIGO分期、分化程度均不存在相關性，可為臨床提供參考。

[參考文獻]

[1]段正秀.宮頸癌組織中microRNA-124表達量和癌細胞生長及侵襲的相關性分析[J].中國全科醫(yī)學，2020，23（S1）：170-172.

[2] Olusola P，Banerjee HN，Philley JV，et al.Human Papilloma Virus-Associated Cervical Cancer and Health Disparities[J].Cells，2019，8（6）：622.

[3] Thomas F，Holmes KB，Kreuz S，et al.DAPK3 participates in the mRNA processing of immediate early genes in chronic lymphocytic leukaemia[J].Mol Oncol，2020，14（6）：1268-1281.

[4]陳燕.周期蛋白依賴性激酶8在宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變中的作用[J].山西醫(yī)藥雜志，2017，46（12）：1395-1397.

[5]魯琦，張震宇.國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟2018年版子宮頸癌分期標準的解讀[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2019，54（10）：718-720.

[6] Wright JD，Matsuo K，Huang Y，et al.Prognostic Performance of the 2018 International Federation of Gynecology and Obstetrics Cervical Cancer Staging Guidelines[J].Obstet Gynecol，2019，134（1）：49-57.

[7]魯自鑫，王玉，王莉.DAPK3和CDK8在宮頸癌組織中的表達及與預后的關系研究[J].實用癌癥雜志，2021，36（4）：559-562.

[8]史艷平，史素娥.DAPK3、c-Myc在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達特征及對患者預后的影響[J].醫(yī)藥論壇雜志，2018，39（8）：88-90.

[9]肖欣，保玉心，肖慶邦，等.DAPK3和Gli1蛋白在子宮內(nèi)膜癌組織中表達的研究[J].中國婦產(chǎn)科臨床雜志，2019，20（5）：55-56.

[10]李昭，郭葉青，林穎.PERK、Nrf2、HO-1蛋白在早期宮頸癌組織中的表達及其意義[J].醫(yī)學臨床研究，2019，36（2）：322-323.

[11]白閃閃.宮頸癌組織中DAPK3的表達及其與患者預后的關系[D].鄭州：鄭州大學，2019：4-5.

[12] Trinath，P，Das，et al.Activation of AKT negatively regulates the pro-apoptotic function of death-associated protein kinase 3 （DAPK3）in prostate cancer[J].Cancer Letters，2016，377（2）：134-139.

[13] Zhang Q，Chen Z.lncRNA UASR1 sponges miR107 in colorectal cancer to upregulate oncogenic CDK8 and promote cell proliferation[J].Oncology Letters，2020，20（6）：1.

[14]孟俠，王靜依，向睿，等.宮頸癌組織中死亡相關蛋白激酶3mRNA的表達變化及其臨床意義[J].山東醫(yī)藥，2020，60（18）：53-55.

[15]李舒雯，徐俊裕，王信人，等.細胞周期蛋白依賴性激酶8及其抑制劑在抗腫瘤治療中的研究進展[J]. 國際藥學研究雜志，2020，47（5）：323-330.

[16]王坤，王大維，王浩，等.惡性腫瘤中CDK8基因的研究進展[J].臨床與實驗病理學雜志，2018，34 （1）：80-82.