我國部分地區(qū)病死畜禽無害化處理中心病原滅活情況調查

李 鵬，王 娟，趙肖璟，王 棟，任穎超，張喜悅，曾繁鋼，陳小強，蔣正軍，蔡麗娟，王君瑋

（1.中國動物衛(wèi)生與流行病學中心，山東青島 266032；2.內蒙古興安盟動物疫病預防控制中心，內蒙古興安盟 137400；3.扎賚特旗動物疫病預防控制與檢疫中心，內蒙古興安盟 137600）

根據(jù)《農(nóng)業(yè)部關于印發(fā)<病死及病害動物無害化處理技術規(guī)范>的通知》（農(nóng)醫(yī)發(fā)〔2017〕25 號）有關無害化處理技術要點及我國無害化處理產(chǎn)業(yè)發(fā)展情況，我國現(xiàn)有無害化處理中心采用的技術工藝主要包括化制法、高溫法、酸解法、碳化焚燒法和生物發(fā)酵法[1]。為了解這些方法的病死畜禽無害化處理病原滅活情況，根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局工作安排，2020 年對11 個省級行政區(qū)的52 個病死畜禽無害化處理中心（以下簡稱“無害化處理中心”）開展問卷調查和抽樣檢測。抽樣涉及處理終端產(chǎn)物、儲存地點、運輸車輛等環(huán)節(jié)，檢測豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、口蹄疫病毒（FMDV）、非洲豬瘟病毒（ASFV）等4 種病毒核酸污染狀況，并對部分陽性樣品進行病原活性驗證，以期掌握病死畜禽無害化處理終端產(chǎn)物中病毒核酸存在狀況和病原活性狀況，以及因環(huán)境等外部因素導致終端產(chǎn)物污染病原情況，分析終端產(chǎn)物傳播疫病的風險。

1 材料與方法

1.1 調查范圍

項目組對山東、河南、四川、湖南、河北、遼寧、廣東、廣西、江蘇、江西、福建等11 個?。ㄗ灾螀^(qū)）的52 個無害化處理中心（采用化制法39 個、發(fā)酵法11 個、碳化法1 個、酸解法1 個）開展了現(xiàn)場調查和樣品采集，對樣品進行了實驗室病毒核酸檢測，并對陽性樣品進行了病原活性驗證。

1.2 樣品采集

從處理終端產(chǎn)物、產(chǎn)物儲存場所、轉運工具、產(chǎn)物運輸車以及生產(chǎn)車間等不同環(huán)節(jié)，共采集樣品916 份（表1），低溫冷藏運輸至實驗室開展檢測驗證。

表1 病死畜禽無害化處理中心各環(huán)節(jié)樣品分布 單位：份

1.3 病毒核酸檢測

采用PCR 法或熒光定量PCR 法，對樣品進行CSFV、PRRSV、FMDV、ASFV 4 種病毒核酸檢測。

1.4 病原活性檢測

為驗證核酸檢測陽性樣品的病原活性，由國家口蹄疫參考實驗室（蘭州獸醫(yī)研究所）、國家非洲豬瘟參考實驗室（中國動物衛(wèi)生與流行病學中心外來病中心）及中國動物衛(wèi)生與流行病學中心相關職能監(jiān)測室，對核酸陽性樣品（包括出料口、終端產(chǎn)物、儲存環(huán)節(jié)、轉運工具樣品）采用組織細胞培養(yǎng)法進行病毒活性驗證試驗。

1.5 問卷調查

根據(jù)前期文獻研究[2-7]制作電子調查問卷，共發(fā)放調查問卷52 份，發(fā)放問卷全部收回。調查問卷分三部分內容：第一部分為企業(yè)基礎信息，涉及企業(yè)地理信息、資質、監(jiān)管、業(yè)務及運行情況；第二部分為處理工藝及產(chǎn)品信息，涉及處理工藝、工藝參數(shù)、處理產(chǎn)能、病死動物來源與收集、無害化處理產(chǎn)物儲存與銷售、場區(qū)消毒及無害化處理補貼情況；第三部分為企業(yè)自評，涉及無害化處理中心場區(qū)布局、生產(chǎn)管理、人員管理、消毒制度等內容。

2 結果與分析

2.1 問卷調查

2.1.1 處理工藝 52 家無害化處理中心中，75%采用化制法，21%采用發(fā)酵法，2%采用酸解法，2%采用碳化法。此外，部分企業(yè)建有多條生產(chǎn)線，同時使用干法化制與生物發(fā)酵工藝、高溫化制與硫酸分解工藝、干法化制與直接焚燒工藝等。本次調查以實際運行生產(chǎn)線為無害化處理中心分類依據(jù)。

2.1.2 風險因素

2.1.2.1 病死動物來源 無害化處理中心處理的病死動物及動物產(chǎn)品來源于規(guī)模飼養(yǎng)場、散養(yǎng)戶、屠宰場以及執(zhí)法罰沒等環(huán)節(jié)，其中95%的處理中心接收規(guī)模飼養(yǎng)場病死動物，93%的處理中心接收散養(yǎng)戶病死動物，78%的處理中心接收屠宰場病死動物及動物產(chǎn)品，80%的處理中心接收執(zhí)法罰沒病死動物及動物產(chǎn)品等。

“你不知道嗎？”女人笑笑，“我接近他的目的就是為了讓你和他老婆拆伙。既然任務已經(jīng)完成，我當然不會再留在他的身邊?！?/p>

2.1.2.2 病死動物種類 所有無害化處理中心均處理病死生豬，其中一半以上的企業(yè)還處理病死牛、羊和禽類，還有將近半數(shù)的企業(yè)處理野生動物、毛皮動物等其他動物及動物產(chǎn)品。

2.1.2.3 病死動物收集運輸 93%的無害化處理中心自行收集病死畜禽，32%的企業(yè)接收政府收集的病死畜禽，29%的企業(yè)接收養(yǎng)殖戶自送的病死畜禽；17%的企業(yè)有政府配備病死畜禽收集車輛，88%的企業(yè)自備病死畜禽收集車輛，10%的企業(yè)還會租賃車輛開展病死畜禽收集工作；93%的病死畜禽收集車輛為密閉式貨車，剩余7%為開放式貨車。

2.1.2.4 終端產(chǎn)物儲存 44%的無害化處理中心將肉骨粉貯存在密閉環(huán)境（庫房），其余56%的企業(yè)貯存在半封閉環(huán)境（車間）；85%的企業(yè)采用封裝方式貯存肉骨粉，剩余15%的企業(yè)采用散放方式貯存肉骨粉；54%的企業(yè)采用人工封裝方式包裝肉骨粉，其余46%的企業(yè)采用機械封裝方式包裝肉骨粉。

2.1.2.5 廠區(qū)和生產(chǎn)區(qū)布局 15%的無害化處理中心設立了病死畜禽運輸車輛專用入口、內部通道及洗消設施，其余企業(yè)則混用同一入口、車輛消毒設施及生產(chǎn)通道，生產(chǎn)區(qū)內的不同生產(chǎn)環(huán)節(jié)之間未實現(xiàn)完全隔離，投料間、處理車間、儲存間之間，或者有通道相連，或者共用空間，人員和工具在污區(qū)和凈區(qū)間交叉流動。

2.1.2.6 終端產(chǎn)物類型與銷售 無害化處理產(chǎn)物分為肉骨粉、油脂、動物蛋白氨基酸原液、骨炭等。終端產(chǎn)物大多銷售至有機肥產(chǎn)業(yè)，部分銷售至化工行業(yè)。通過本次問卷調查，以及與高校相關專業(yè)老師、無害化處理行業(yè)人員交流和網(wǎng)絡信息查閱，仍然有無害化處理的肉骨粉進入飼料產(chǎn)業(yè)的情況。

2.2 病毒核酸檢測

2.2.1 總體情況 檢測結果顯示：916 份樣品中，共有301 份檢出病毒核酸陽性，占32.86%。其中，ASFV 核酸陽性257 份，占28.06%；CSFV 核酸陽性61 份，占6.66%；FMDV 核酸陽性16 份，占1.75%；PRRSV 核酸陽性1 份，占0.11%（表2）。由結果可以看出，無害化處理中心終端產(chǎn)物和環(huán)境中這4 種病毒都有一定的陽性檢出，其中ASFV核酸陽性檢出率最高，說明ASFV 污染較嚴重。

表2 4 種病毒核酸陽性檢出情況

2.2.2 無害化處理中心病毒核酸陽性分布情況由表3 數(shù)據(jù)分析，36.54%（19/52）無害化處理中心的終端產(chǎn)物樣品、67.31%（35/52）無害化處理中心的產(chǎn)物儲存場所樣品中，檢出ASFV 核酸陽性，說明ASFV 核酸污染面較廣；其他3 種病毒核酸陽性污染的無害化處理中心較少，說明這3 種病毒污染面得到有效控制或污染面較小。

表3 檢出病毒核酸陽性在無害化處理中心數(shù)量分布 單位：個

表4 不同環(huán)節(jié)樣品中病毒核酸陽性樣品分布情況

2.2.4 不同處理工藝陽性樣品分布情況 39 個采用化制法的處理中心終端產(chǎn)物中，43.30%（48/97）的樣品為病毒核酸陽性，11 個采用發(fā)酵法的處理中心終端產(chǎn)物中，73.91%（17/23）的樣品為病毒核酸陽性（表5），表明化制法和發(fā)酵法存在病原污染風險；而采用碳化法和酸解法的處理中心終端產(chǎn)物樣品，未發(fā)現(xiàn)核酸陽性，表明以上兩種處理法能夠徹底破壞病毒核酸。

表5 化制法和發(fā)酵法處理終端產(chǎn)物樣品中病毒核酸陽性樣品分布情況 單位：份

2.3 病原活性檢測

將出料口、終端產(chǎn)物、產(chǎn)物轉運工具及產(chǎn)物儲存環(huán)境樣品中的104 份病毒核酸陽性樣品（80份ASFV 核酸陽性、10 份FMDV 核酸陽性、13 份CSFV 核酸陽性、1 份PRRSV 核酸陽性），采用細胞培養(yǎng)法進行病毒分離培養(yǎng)后，經(jīng)實驗室檢測，均未發(fā)現(xiàn)活病毒，表明經(jīng)過上述工藝無害化處理后，病死動物中的這4 種病毒被完全滅活，達到了無害化處理目的。

2.4 風險因素分析

根據(jù)上述調查結果分析，無害化處理中心仍存在動物病原外泄的風險。風險因素具體包括：第一，無害化處理中心作為病死動物集中處理場所，病原種類繁雜，關聯(lián)養(yǎng)殖場戶多，且目前絕大多數(shù)無害化處理中心車輛洗消設施建設和運行尚不規(guī)范，病原經(jīng)未有效消毒的車輛和人員從無害化處理中心擴散到養(yǎng)殖場的風險會長期存在。第二，處理前的病死動物和處理后的終端產(chǎn)物之間未采取嚴格的隔離措施，因而存在終端產(chǎn)物被活病原二次污染的風險。第三，若終端產(chǎn)物在被動物病原污染的情況下被用作陸生動物飼料，會造成疫病擴散，讓無害化處理目標失效。

3 建議

3.1 規(guī)范無害化處理中心建設

制定出臺無害化處理中心建設與管理相關技術規(guī)范。目前，我國僅有《病死及病害動物無害化處理技術規(guī)范》，規(guī)定了除發(fā)酵法以外的無害化處理技術規(guī)范，但在無害化處理中心建設、管理、運維方面仍未有基于生物安全管控的可參照標準。多數(shù)無害化處理中心根據(jù)同行經(jīng)驗或設備廠家意見進行建設，以致場區(qū)和生產(chǎn)區(qū)布局，以及人員車輛通道設計等方面存在缺陷。同時，一些無害化處理中心存在車間衛(wèi)生狀況差、人員混崗等管理問題，進一步加大了致病病原泄露風險。

建議國家盡快出臺無害化處理中心建設、管理、運維技術規(guī)范體系，特別是輻射面廣的無害化處理中心建設布局和管理技術規(guī)范；指導無害化處理中心科學設計功能區(qū)、生產(chǎn)區(qū)各環(huán)節(jié)、場區(qū)通道等的布局；建立和落實生物安全管理制度，降低無害化處理中心因場區(qū)生物安全缺陷而導致的致病病原外泄風險。

3.2 加強無害化處理中心日常監(jiān)管

本次調查發(fā)現(xiàn)，無害化處理中心均建立了生產(chǎn)記錄制度，對病死畜禽收集、處理、產(chǎn)物銷售等工作內容進行記錄、存檔，并能夠保存兩年以上，但仍存在無害化處理中心病毒核酸污染嚴重的情況，反映出無害化處理中心生產(chǎn)和人員管理制度及生產(chǎn)消毒措施等方面仍存在較大短板。

建議加強對無害化處理中心日常生產(chǎn)的指導與監(jiān)管，針對生產(chǎn)制度執(zhí)行、工作人員管理及廠區(qū)消毒措施等方面開展生物安全指導，督導企業(yè)嚴格按照無害化處理技術規(guī)范要求進行操作，在采樣監(jiān)測病死動物的同時抽檢環(huán)境樣品，降低因無害化處理中心日常生產(chǎn)管理不到位導致的動物病原泄露風險。

3.3 加強無害化處理產(chǎn)物監(jiān)管

根據(jù)國家《飼料原料目錄》關于肉骨粉的相關規(guī)定，禁止將無害化處理得到的肉骨粉作為肉骨粉飼料進入動物養(yǎng)殖環(huán)節(jié)。但據(jù)了解，仍有少量終端產(chǎn)物銷售至飼料行業(yè)。建議國家進一步組織研究無害化處理產(chǎn)物資源化利用技術規(guī)范和方式路徑，制定相關管理制度，嚴格查處無害化處理肉骨粉飼料化非法利用問題，杜絕因無害化處理產(chǎn)物使用而導致的動物疫病傳播風險（包括反芻動物肉骨粉進入反芻動物食物鏈的風險）。

4 結論

調查發(fā)現(xiàn)，化制法、發(fā)酵法、碳化法、酸解法均可滅活ASFV、CSFV、FMDV 和PRRSV 4 種病毒，但由于存在廠區(qū)和生產(chǎn)區(qū)布局不盡科學，管理措施不夠規(guī)范等問題，部分無害化處理中心自出料口到產(chǎn)物運輸車等環(huán)節(jié)均存在病毒核酸污染情況，進而存在終端產(chǎn)物被病原二次污染，或者病原隨產(chǎn)物運輸車擴散出去的風險。故建議畜牧獸醫(yī)部門進一步規(guī)范無害化處理中心建設，強化日常監(jiān)管和無害化處理產(chǎn)物監(jiān)管，降低病原傳出風險。