有機(jī)肥對(duì)垂穗披堿草根際微生物及土壤理化性質(zhì)的影響

馬 坤， 蘆光新*， 鄧 曄， 顏琿璘， 王英成， 趙陽(yáng)安， 張海娟， 周學(xué)麗， 竇聲云

(1.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院， 青海 西寧 810016； 2.中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心， 北京 100080；3.青海省草原改良試驗(yàn)站， 青海 共和 813000)

作為地球的“第三極”，青藏高原具有高海拔、低氣溫、半干旱等特點(diǎn)，特殊的環(huán)境和氣候條件導(dǎo)致該地區(qū)以高寒草原和高寒草甸生態(tài)系統(tǒng)為主[1]。近年來(lái)，由于氣候變化和人為干預(yù)導(dǎo)致該區(qū)域草地生態(tài)系統(tǒng)嚴(yán)重退化[2]，主要表現(xiàn)為草地土壤退化和植被退化[3-4]。因此，提高牧草產(chǎn)量，緩解牧草資源壓力應(yīng)成為相關(guān)研究者主要關(guān)心的問(wèn)題。

其中，施肥是迅速提高草地生產(chǎn)力和改善群落組成，調(diào)節(jié)牧草營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量的措施之一，但是化學(xué)肥料的大規(guī)模施用，造成了一系列的環(huán)境問(wèn)題[5]。有研究指出，有機(jī)肥的施用有利于促進(jìn)土壤有機(jī)質(zhì)含量增加、細(xì)菌生長(zhǎng)及其調(diào)節(jié)土壤微生物群落的組成和多樣性，對(duì)進(jìn)一步增加土壤養(yǎng)分的有效性、提高土壤肥力和提高土壤生產(chǎn)力具有重要意義[6-7]。

土壤微生物在土壤養(yǎng)分循環(huán)過(guò)程的主導(dǎo)作用影響植物多樣性和土壤結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定[8-9]。根際微生物作為土壤微生物重要的組成部分之一，在陸地生態(tài)系統(tǒng)中扮演著重要功能，是陸地生態(tài)系統(tǒng)土壤質(zhì)量、生產(chǎn)力和可持續(xù)性的敏感指標(biāo)，對(duì)植物養(yǎng)分吸收、抵御逆境等方面具有重要作用[10]。近年來(lái)，分子生物學(xué)研究方法的進(jìn)步使得我們能夠在更加精細(xì)的分子水平上確定土壤微生物群落多樣性和組成的變化，越來(lái)越多的國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)青藏高原地區(qū)氮磷肥的添加對(duì)土壤生態(tài)產(chǎn)生的影響做了大量研究，Shi等[11]人通過(guò)對(duì)燕麥(AvenasativaL.)根際微生物多樣性的研究表明，與非根際微生物多樣性相比，根際微生物α多樣性較低。仁增旺姆等發(fā)現(xiàn)氮添加對(duì)垂穗披堿草地上生物量變化無(wú)顯著影響，而磷添加不僅提高披堿草人工草地的地上生物量而且可以防止土壤有機(jī)碳的損失[12]。然而有機(jī)肥對(duì)青藏高原地區(qū)植物微生物群落結(jié)構(gòu)影響的研究報(bào)告相對(duì)較少，因此，本試驗(yàn)采用高通量測(cè)序技術(shù)來(lái)檢測(cè)施用有機(jī)肥對(duì)高寒地區(qū)牧草土壤根際微生物群落多樣性和組成的變化，以期闡釋施用不同濃度梯度有機(jī)肥對(duì)牧草土壤理化和土壤根際微生物多樣性的影響，為今后青藏高原地區(qū)人工增施有機(jī)肥提供理論依據(jù)，也為‘阿壩’垂穗披堿草在高寒地區(qū)的推廣提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

禾本科牧草：來(lái)自四川省川草生態(tài)科技有限責(zé)任公司提供的‘阿壩’垂穗披堿草(Elymusnutans‘Aba’);有機(jī)肥(有機(jī)質(zhì)含量≥45%，N+P2O5+K2O≥5%，pH值 5.5～8.5)：由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)資源學(xué)院提供技術(shù)配方，主要以富含有機(jī)質(zhì)的農(nóng)作物秸稈和家禽糞便為原料，添加生物發(fā)酵劑加工而成。

1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)

青海省鐵卜加草原改良試驗(yàn)站位于青海湖西岸，位于東經(jīng)99°35′，北緯37°05′，海拔3 270 m。該地區(qū)屬高山高原氣候，具有光照充足、日照強(qiáng)烈、冬寒夏涼、降雨集中、干旱少雨、風(fēng)大等氣候特征，在青藏高原具有高寒草地生態(tài)環(huán)境的典型性、代表性。年平均氣溫-0.7℃，最熱月(7月)平均氣溫17.5℃，最冷月(1月)平均氣溫-22.6℃，極端溫度-34.3℃。無(wú)霜期平均為78.7 d，無(wú)絕對(duì)無(wú)霜期。日照時(shí)數(shù)2 670 h，≥0℃年積溫1 331.3℃，年降水量368.11 mm，年蒸發(fā)量1 495.3 mm，相對(duì)濕度58%。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)于2020年5月份進(jìn)行，試驗(yàn)共設(shè)3個(gè)處理，3次重復(fù)，每個(gè)小區(qū)面積15 m2(3 m×5 m)，CK為不施有機(jī)肥，50%梯度即每個(gè)小區(qū)施有機(jī)肥量為5.25 kg，75%梯度即每個(gè)小區(qū)施有機(jī)肥量為7.88 kg，具體處理如表1所示。

表1 試驗(yàn)處理信息Table 1 Test processing information

1.4 測(cè)定方法及指標(biāo)

1.4.1樣品采集 采樣時(shí)間為2020年9月12日至13日，進(jìn)行土壤樣品的采集，在每個(gè)樣地隨機(jī)選取3個(gè)采樣點(diǎn)用土鉆鉆取表層土壤(0～15 cm)，去除可見(jiàn)植物殘?bào)w及土壤動(dòng)物后封裝于樣品袋中帶回試驗(yàn)室，一部分保存于4℃冰箱用于理化性質(zhì)測(cè)定，另一部分保存于-80℃冰箱，用于DNA提取。

1.4.2土壤理化性質(zhì)測(cè)定 用于土壤理化性質(zhì)測(cè)定的樣品風(fēng)干、粉碎后，過(guò)0.25 mm孔徑網(wǎng)篩進(jìn)行土壤養(yǎng)分測(cè)定。土壤pH值使用pH計(jì)(pHS-3C)測(cè)定，土壤有機(jī)碳(Soil organic carbon,SOC)用重鉻酸鉀硫酸外加熱法；土壤全氮(Total nitrogen,TN)用半微量凱氏定氮法。

1.4.3土壤微生物群落多樣性和組成測(cè)定測(cè)定 從-80℃的冰箱中取出裝有樣品的無(wú)菌管，在超凈工作臺(tái)中取無(wú)菌管中的土壤10 g，去除植物殘留物和石礫后裝于5 mL的無(wú)菌管中，放于附有冰袋的泡沫箱中寄到中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心，采用16S/ITS擴(kuò)增子測(cè)序分析技術(shù)測(cè)定土壤微生物的多樣性及群落結(jié)構(gòu)。為了研究土壤微生物群落的β-多樣性差異，采用PCA法對(duì)不同施肥梯度下的土壤微生物群落的差異進(jìn)行研究分析，且基于Bray-curtis距離矩陣的NMDS方法對(duì)不同濃度梯度有機(jī)肥的土壤微生物群落β-多樣性的差異分析。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用Excle 2010整理數(shù)據(jù)，運(yùn)用SPSS 26.0進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。采用SigmaPlot 12.5和Origin 2018作圖，圖中數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。所有測(cè)序的原始數(shù)據(jù)均于中科院生態(tài)環(huán)境研究中心鄧曄研究員課題組的Galaxy分析平臺(tái)(http://mem.rcees.ac.cn:8080)完成。

2 結(jié)果與分析

2.1 土壤理化性質(zhì)

通過(guò)對(duì)‘阿壩’垂穗披堿草增施不同梯度有機(jī)肥的試驗(yàn)，結(jié)果表明，與CK相比，施肥梯度為50%時(shí)顯著增加土壤總氮含量(P<0.05)，明顯降低土壤pH值(P<0.05)；施肥梯度為75%時(shí)，和對(duì)照相比，土壤有機(jī)質(zhì)含量顯著增加0.77%(P<0.05)，土壤pH顯著降低(P<0.05)。而不同施肥梯度對(duì)氨態(tài)氮、硝態(tài)氮影響不顯著。這一結(jié)果說(shuō)明短期施加有機(jī)肥僅對(duì)土壤總氮、土壤pH值和土壤有機(jī)質(zhì)含量有顯著的影響(表2)。

表2 土壤的基本化學(xué)性質(zhì)Table 2 Basic chemical properties of soils

2.2 土壤微生物多樣性分析

在鐵卜加試驗(yàn)地‘阿壩’垂穗披堿草的9個(gè)樣本中，檢測(cè)到土壤細(xì)菌2 152 310條序列(圖1a)，真菌檢測(cè)到2 032 477條序列(圖1b)，在97%的相似性水平下，所有12個(gè)樣本得到10 648種細(xì)菌分類操作單元(Operational taxonomic unit,OTU)，1945種真菌OTU。對(duì)土壤微生物α多樣性進(jìn)行分析，結(jié)果表明，與不施肥相比，增施有機(jī)肥之后土壤細(xì)菌辛普森指數(shù)(Simpson evenness)顯著增加(P<0.05)，而細(xì)菌豐富度指數(shù)出現(xiàn)下降趨勢(shì)(圖2a，2b)。土壤真菌辛普森指數(shù)(Simpson evenness)呈現(xiàn)出先下降后上升的趨勢(shì)，在有機(jī)肥梯度為75%時(shí)辛普森指數(shù)最大。真菌豐富度指數(shù)因有機(jī)肥的添加呈下降趨勢(shì)。

圖1 土壤樣品微生物OTU稀釋性曲線Fig.1 Soil samples OTU dilution curve of microorganism注：不同顏色代表不同的樣品Note：Different colors represent different samples

圖2 土壤微生物α多樣性Fig.2 Diversity of soil microorganism α.

2.3 土壤微生物群落組成成分

細(xì)菌群落中變形菌門(mén)(Proteobacteria)、放線菌門(mén)(Actinobacteria)、厚壁菌門(mén)(Firmicutes)為主要優(yōu)勢(shì)菌門(mén)，相對(duì)豐度超過(guò)1%。與不施肥相比，在不同施肥處理下土壤中相對(duì)豐度最高的細(xì)菌菌門(mén)存在差異，其中施有機(jī)肥為50%時(shí)放線菌門(mén)(Actinobacteria)相對(duì)豐度最高。在土壤真菌門(mén)群落中子囊菌門(mén)(Ascomycota)為主要優(yōu)勢(shì)菌門(mén)，平均相對(duì)豐度超過(guò)90%。增施有機(jī)肥后子囊菌門(mén)(Ascomycota)的相對(duì)豐度低于CK(87%vs 96%)，施肥量為50%時(shí)擔(dān)子菌門(mén)(Basidiomycota)平均相對(duì)豐度最高為3.25%(CK1.49%)。

對(duì)土壤細(xì)菌和真菌進(jìn)一步在屬水平進(jìn)行群落組成成分比較(圖3c,3d)，土壤細(xì)菌屬的研究結(jié)果表明，節(jié)桿菌(Arthrobacter)、微小桿菌(Exiguobacterium)、假單胞菌(Pseudomonas)、根瘤菌(Rhizobium)增施有機(jī)肥前后相對(duì)豐度無(wú)明顯變化，不動(dòng)桿菌(Acinetobacter)平均相對(duì)豐度增施有機(jī)肥后明顯降低，施有機(jī)肥量50%時(shí)，其平均相對(duì)豐度為0%。對(duì)土壤真菌屬水平的分析表明，土壤真菌不同屬在不同處理下的分布存在較大的差異(圖4 d)，不同處理下的優(yōu)勢(shì)屬也各不相同。赤霉菌屬(Gibberella)、亞隔孢殼屬(Didymella)、裂殖壺菌(Schizothecium)屬為主要優(yōu)勢(shì)屬，相對(duì)豐度在 8.0%～16.5%之間；Kotlabase，Preussia，F(xiàn)usarium屬為次要優(yōu)勢(shì)屬，相對(duì)豐度在 3.02%～6.5%之間。與CK相比，增施有機(jī)肥后Didymella,Schizothecium(裂殖壺菌)、Katabases屬的相對(duì)豐度下降，而赤霉菌屬(Gibberella)、內(nèi)生真菌(Preussia)、鐮刀菌(Fusarium)屬在施肥量為75%時(shí)其相對(duì)豐度最高，分別為17.6%，7.5%，4.4%。

圖3 土壤微生物群落組成Fig.3 Composition of soil microbial community

圖4 土壤微生物群落主成分分析Fig.4 Principal component analysis of soil microbial community

2.4 土壤微生物群落結(jié)構(gòu)

對(duì)于土壤細(xì)菌來(lái)說(shuō)PCA分析中主成分軸PCA1可以解釋 73.8%的差異，PCA2軸可以解釋 15.8%的群落差異。對(duì)于土壤真菌則是第一主成分軸PCA1解釋了40.1%的群落差異，第二主成分軸PCA2解釋了23.6%的群落變化。這一結(jié)果表明，細(xì)菌群落和真菌群落在不同濃度有機(jī)肥處理下的微生物群落均存在差異，其中有機(jī)肥對(duì)細(xì)菌微生物群落結(jié)構(gòu)的影響比真菌更為明顯。

基于非度量多維尺度(Non-metric multidimensional scaling,NMDS)結(jié)果如圖5所示，NMDS指數(shù)結(jié)果顯示對(duì)照和各處理間細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)明顯不同，顯著性檢驗(yàn)分析進(jìn)一步表明細(xì)菌群落和真菌群落在對(duì)照和各處理之間存在顯著的差異(表3)。施肥明顯改變了細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)，真菌群落結(jié)構(gòu)受有機(jī)肥影響較小。

表3 有機(jī)質(zhì)添加對(duì)土壤微生物群落結(jié)構(gòu)作用的顯著性檢驗(yàn)Table 3 Significance test of the effect of organic matter addition on soil microbial community structure

圖5 基于Bray-curtis距離矩陣的NMDS分析Fig.5 NMDS analysis based on Bray-Curtis distance matrix

3 討論

3.1 施肥對(duì)土壤理化性質(zhì)的影響

施肥是增加土壤肥力的有力措施，其最直接的作用是通過(guò)改變土壤養(yǎng)分含量而間接影響牧草生產(chǎn)力和有機(jī)質(zhì)含量。有研究發(fā)現(xiàn)短期施加無(wú)機(jī)肥可以顯著影響退化羊草(Leymuschinensis(Trin.) Tzvel.)草原土壤速效氮、速效鉀等速效養(yǎng)分的含量，但對(duì)土壤全氮、有機(jī)質(zhì)等指標(biāo)沒(méi)有明顯的改變[14]。劉杏蘭等[15]發(fā)現(xiàn)單施有機(jī)肥可以顯著增加土壤全氮含量。本研究表明，在50%，75%有機(jī)肥施加處理下有助于土壤養(yǎng)分和有機(jī)質(zhì)的積累，且有助于緩解土壤鹽堿化程度，從而對(duì)進(jìn)一步改善土壤養(yǎng)分缺乏、土壤健康狀況和提高牧草產(chǎn)量起促進(jìn)作用。土壤pH值通過(guò)影響土壤溶液中有效離子的濃度來(lái)影響植被生長(zhǎng)[16]，有機(jī)肥可為植被生長(zhǎng)提供養(yǎng)分。大量研究證明，長(zhǎng)期施加無(wú)機(jī)肥會(huì)導(dǎo)致土壤pH值降低，引起土壤酸化，有機(jī)肥替代無(wú)機(jī)肥可以提高深層土壤的肥效和耐酸性，減緩因單獨(dú)施加無(wú)機(jī)肥產(chǎn)生的土壤酸化趨勢(shì)[15,17]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，添加有機(jī)肥梯度在50%，75%時(shí)可有效緩解土壤鹽堿化程度，使土壤pH值趨于中性，進(jìn)而提高土壤健康狀況。

3.2 施肥對(duì)土壤微生物群落結(jié)構(gòu)與多樣性的影響

3.2.1施肥對(duì)土壤微生物豐度和多樣性的影響 土壤中的細(xì)菌和真菌通常占土壤微生物總量的90%以上，它們是土壤有機(jī)質(zhì)的分解者和養(yǎng)分動(dòng)態(tài)的主要調(diào)節(jié)劑[18]。土壤微生物對(duì)于維持土壤肥力和土壤生態(tài)系統(tǒng)功能至關(guān)重要，且對(duì)肥料敏感[19]。本試驗(yàn)檢測(cè)到細(xì)菌OTU數(shù)高于真菌，與楊希智等[20]對(duì)高寒地區(qū)土壤微生物的研究結(jié)果相一致。有機(jī)肥的添加可以顯著改變土壤微生物群落多樣性和豐富度，大量研究結(jié)果表明，增施有機(jī)肥可以增加土壤中細(xì)菌和真菌的多樣性和豐富度[21]。長(zhǎng)期施用有機(jī)肥會(huì)降低土壤真菌多樣性組成，使其向擔(dān)子菌門(mén)等方向演替進(jìn)化[22]。這說(shuō)明隨著不同梯度有機(jī)肥的添加，土壤中細(xì)菌與真菌的群落多樣性指數(shù)和豐富度指數(shù)有著不同的變化趨勢(shì)，其中細(xì)菌的群落多樣性指數(shù)在施有機(jī)肥梯度為50%時(shí)最大，真菌的群落多樣性在75%梯度下最大。有機(jī)肥的添加降低了細(xì)菌的豐富度指數(shù)，可能原因是高寒地區(qū)微生物對(duì)短期施加有機(jī)肥的響應(yīng)是一個(gè)錯(cuò)綜復(fù)雜的動(dòng)態(tài)響應(yīng)過(guò)程。

3.2.2施肥對(duì)土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響 ‘阿壩’垂穗披堿草根際微生物群落結(jié)構(gòu)在門(mén)和屬水平上研究結(jié)果表明，在門(mén)水平，細(xì)菌群落中變形菌門(mén)、放線菌門(mén)和厚壁菌門(mén)為主要的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)，與學(xué)者對(duì)草地微生物相關(guān)研究結(jié)果一致[22-23]。施肥梯度為50%時(shí)，明顯增加了放線菌門(mén)的數(shù)量。放線菌門(mén)作為細(xì)菌中占比較大的一類，在相關(guān)有機(jī)物的分解等重要過(guò)程中起著關(guān)鍵作用，有研究證明，放線菌可以合成多種與抗病原菌有關(guān)的抗生素，保護(hù)土壤與根系免受病原菌的侵害[24]。試驗(yàn)結(jié)果顯示，放線菌門(mén)對(duì)有機(jī)肥的敏感性較強(qiáng)，大量的有機(jī)肥可能導(dǎo)致放線菌門(mén)數(shù)量的減少，而變形菌門(mén)和厚壁菌門(mén)對(duì)有機(jī)肥的敏感性弱于放線菌門(mén)，在不同施肥梯度下沒(méi)有顯著差異。真菌門(mén)水平的平均相對(duì)豐度明顯低于細(xì)菌，子囊菌門(mén)為主要優(yōu)勢(shì)菌。稀有菌群有擔(dān)子菌門(mén)、毛霉菌門(mén)等。研究已經(jīng)證實(shí)，擔(dān)子菌門(mén)是真菌中最高等的一門(mén)，分布極為廣泛，它與植物能形成共生菌根，幫助植物更好的生長(zhǎng)[25-26]。增施有機(jī)肥后，子囊菌門(mén)的相對(duì)豐度出現(xiàn)下降，子囊菌門(mén)大多為腐生菌，其最適pH值為弱堿性，可能原因是由于施肥導(dǎo)致pH值下降，進(jìn)而引起子囊菌門(mén)減小，可能是由于高寒地區(qū)牧草根際土壤微生物與菜田中微生物對(duì)外界環(huán)境變化所作出的應(yīng)答機(jī)制不一樣[27]。而擔(dān)子菌門(mén)平均相對(duì)豐度隨著有機(jī)肥的添加，其數(shù)量明顯上升，在施有機(jī)肥梯度為50%時(shí)，數(shù)量達(dá)到最大。當(dāng)時(shí)有機(jī)肥為75%時(shí)又出現(xiàn)下降趨勢(shì)，表明有機(jī)肥的添加對(duì)擔(dān)子菌門(mén)的影響較大，一定量的有機(jī)肥可以明顯提高擔(dān)子菌門(mén)的數(shù)量，當(dāng)有機(jī)肥大量投入后引起毛霉菌門(mén)等一些有害真菌的滋生，不利于土壤保持健康狀況。

為更深層次明確有機(jī)肥肥對(duì)高寒地區(qū)土壤微生物群落的影響，本研究進(jìn)一步對(duì)細(xì)菌和真菌在屬水平進(jìn)行群落組成成分比較，土壤中細(xì)菌和真菌在屬水平均具有較高的平均相對(duì)豐度。在細(xì)菌屬水平上，增施有機(jī)肥后，不動(dòng)桿菌屬相對(duì)豐度顯著下降，在施有機(jī)肥梯度為50%時(shí)，不動(dòng)桿菌為零。大量試驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)不動(dòng)桿菌為病原菌，可能對(duì)植株及人體造成不同程度的傷害[28]，一定量的有機(jī)肥可以抑制不動(dòng)桿菌的發(fā)生，改善土壤中微生物生態(tài)。對(duì)真菌屬的豐度分析表明，赤霉菌屬、亞隔孢殼屬、裂殖壺菌屬為主要優(yōu)勢(shì)菌，赤霉菌可以分泌赤霉素，促進(jìn)植物莖的生長(zhǎng)；亞隔孢殼屬屬于子囊菌綱，是一類腐生菌[29]；裂殖壺菌中二十二碳六烯酸含量高，是一類極具工業(yè)化前景的微生物資源[30]。增施有機(jī)肥后，主要優(yōu)勢(shì)菌發(fā)生明顯變化，當(dāng)施肥梯度達(dá)到75%時(shí)，赤霉菌屬含量明顯上升。亞隔孢殼屬和裂殖壺菌數(shù)隨著不同梯度有機(jī)肥的添加，呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)。Kotlabase，preussia(內(nèi)生真菌屬)和Fusarium(鐮刀菌屬)為次要優(yōu)勢(shì)菌，其中內(nèi)生真菌作為一類重要的微生物資源可以在植物體內(nèi)生存又不會(huì)傷害植物，大量研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)生真菌可以顯著提高植物抵御鹽脅迫的能力[31]。本試驗(yàn)得出不同梯度的有機(jī)肥處理可以顯著影響內(nèi)生真菌屬相對(duì)豐度的變化，當(dāng)施肥梯度為75%時(shí)，內(nèi)生真菌屬平均相對(duì)豐度達(dá)到最大，這可能是由于有機(jī)肥的添加可以為內(nèi)生真菌的繁衍提供適宜的生存環(huán)境，從而促進(jìn)了內(nèi)生真菌的繁衍。

有機(jī)肥劑量不同的土壤中，微生物群落結(jié)構(gòu)也相應(yīng)出現(xiàn)區(qū)別[32]，β多樣性結(jié)果顯示細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)對(duì)不同劑量有機(jī)肥的響應(yīng)比真菌更為敏感，武發(fā)思等[33]研究發(fā)現(xiàn)有機(jī)肥對(duì)根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)的改變作用明顯，本試驗(yàn)結(jié)果同時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)菌群落組成受有機(jī)肥劑量的影響較大，其具體的演變進(jìn)化趨勢(shì)是后續(xù)試驗(yàn)研究的重點(diǎn)。

4 結(jié)論

高寒地區(qū)增施有機(jī)肥對(duì)‘阿壩’垂穗披堿草土壤理化性質(zhì)和土壤微生物養(yǎng)分有明顯的改善。使用50%有機(jī)肥，不僅提高了土壤全氮的含量，降低土壤pH值，還可以顯著增加土壤優(yōu)勢(shì)菌放線菌、擔(dān)子菌門(mén)的相對(duì)豐度，明顯抑制了病原菌不動(dòng)桿菌的相對(duì)豐度。添加75%有機(jī)肥，可以顯著增加土壤有機(jī)質(zhì)含量，降低pH值，明顯提高真菌屬水平一些促進(jìn)植物生長(zhǎng)發(fā)育的相關(guān)菌群赤霉菌屬、內(nèi)生真菌屬等。此研究結(jié)果為青藏高原地區(qū)有機(jī)肥的推廣提供了理論支撐。