百合地黃湯藥理作用研究進(jìn)展

朱巳旲，謝鳴

（北京中醫(yī)藥大學(xué)方劑學(xué)系，北京 100029）

百合地黃湯出自《金匱要略·百合狐惑陰陽毒病脈證并治第三》，由百合、生地黃組成，具有滋陰清熱、養(yǎng)心潤肺之功，主治百合病。該方現(xiàn)代臨床已被用于治療神經(jīng)精神、內(nèi)分泌、免疫、心腦血管等系統(tǒng)的多種疾病，取得較好療效，具有一定的研究價(jià)值。近年來，圍繞該方的現(xiàn)代藥理作用開展了較多的實(shí)驗(yàn)研究。本研究通過檢索中國知網(wǎng)（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)庫、維普數(shù)據(jù)庫和PubMed等國內(nèi)外主要數(shù)據(jù)庫近年來有關(guān)百合地黃湯的藥理作用的相關(guān)文獻(xiàn)，系統(tǒng)梳理和評(píng)述百合地黃湯的藥理作用進(jìn)展，以期為該方的臨床應(yīng)用及深入探討該方的作用機(jī)制提供參考。

1 百合地黃湯的藥理作用及其機(jī)制

百合地黃湯的藥理作用涉及改善失眠狀態(tài)、抗焦慮、抗抑郁及抗腫瘤等方面，機(jī)制可能涉及包括促進(jìn)單胺神經(jīng)遞質(zhì)釋放、抑制單胺氧化酶活性、調(diào)節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸功能、抗炎、免疫調(diào)節(jié)及神經(jīng)保護(hù)等多個(gè)環(huán)節(jié)。

1.1 改善失眠狀態(tài)失眠癥是一種常見的神經(jīng)精神類疾病，常與抑郁癥等其他精神障礙類疾病合并出現(xiàn)，以睡眠-覺醒障礙為主要病理機(jī)制[1]，表現(xiàn)為膽堿類神經(jīng)遞質(zhì)、單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、谷氨酸類神經(jīng)遞質(zhì)等分泌紊亂[2-4]，相關(guān)藥物治療可通過調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)的分泌而改善失眠狀態(tài)。

失眠癥屬于中醫(yī)“不寐”范疇，臨床辨證以陰虛火旺證較為多見，用百合地黃湯治療常取得較好的療效[5]。鄭竹宏[6]采用氯苯丙氨酸（PCPA）混懸液腹腔注射建立大鼠失眠模型，研究百合地黃湯對(duì)失眠模型大鼠行為學(xué)及睡眠的改善作用。該實(shí)驗(yàn)將造模成功的SD雄性大鼠隨機(jī)分為模型組、地西泮組（陽性藥物）以及百合地黃湯低、中、高劑量組，同時(shí)另設(shè)正常對(duì)照組。結(jié)果顯示：治療后模型組大鼠體質(zhì)量和曠場(chǎng)得分較治療前均明顯降低（P＜0.05），中央格停留時(shí)間、修飾次數(shù)、糞便顆粒數(shù)和睡眠潛伏期等指標(biāo)均明顯升高（P＜0.05）；與模型組比較，各治療組大鼠的修飾次數(shù)和糞便顆粒數(shù)均明顯降低（P＜0.05），睡眠潛伏期縮短（P＜0.05），百合地黃湯3個(gè)劑量組的睡眠持續(xù)時(shí)間均明顯延長（P＜0.05），地西泮組睡眠持續(xù)時(shí)間無明顯變化。結(jié)果提示百合地黃湯可以改善大鼠的自主行為，并具有縮短失眠模型大鼠的睡眠潛伏期及延長睡眠持續(xù)時(shí)間的作用，且效果優(yōu)于地西泮組。鄭竹宏等[7]進(jìn)一步觀察該方對(duì)失眠模型大鼠神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響，結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠大腦皮層和腦干中多巴胺（DA）含量顯著升高（P＜0.01）；大腦皮層、腦干和海馬的5-羥色胺（5-HT）含量顯著降低（P＜0.01），血清谷氨酸（Glu）/γ-氨基丁酸（GABA）的比值顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，百合地黃湯高、中、低劑量組大鼠大腦皮層DA含量均顯著降低（P＜0.01），腦干和海馬的5-HT含量均顯著升高（P＜0.01）；中、高劑量組大鼠血清中Glu/GABA均明顯降低（P＜0.05）。結(jié)果提示百合地黃湯對(duì)失眠模型大鼠的神經(jīng)遞質(zhì)有一定的調(diào)節(jié)作用，其改善睡眠的作用機(jī)制可能與調(diào)節(jié)體內(nèi)氨基酸遞質(zhì)（Glu和GABA）及相關(guān)腦區(qū)單胺神經(jīng)遞質(zhì)（DA和5-HT）有關(guān)。該課題組[8]進(jìn)一步通過實(shí)驗(yàn)比較百合地黃湯不同萃取部位對(duì)果蠅睡眠的調(diào)控作用。實(shí)驗(yàn)采用12 h內(nèi)羽化未交配的野生型Canton S品系黑腹果蠅的雌蠅為研究對(duì)象，將果蠅采用乙醚麻醉后置于含基礎(chǔ)培養(yǎng)基的培養(yǎng)管中飼養(yǎng)，分為空白組、模型組和百合地黃湯全方組、石油醚部位組、二氯甲烷部位組、乙酸乙酯部位組、水飽和正丁醇部位組，各給藥組再分為高、中、低劑量組，每組32只。除空白組外，其余各組采用光照刺激法建立失眠模型。結(jié)果顯示，模型組果蠅的總睡眠時(shí)間與夜間睡眠時(shí)間明顯短于空白組（P＜0.01）；與模型組比較，陽性藥組果蠅的總睡眠、白天睡眠及夜間睡眠時(shí)間均顯著延長（P＜0.01），百合地黃湯全方組與石油醚部位低劑量組的總睡眠與白天睡眠時(shí)間均明顯延長（P＜0.05），二氯甲烷部位中劑量組和水飽和正丁醇部位低劑量組的總睡眠、白天睡眠及夜間睡眠時(shí)間均明顯延長（P＜0.05），乙酸乙酯部位中劑量組的總睡眠和夜間睡眠時(shí)間延長（P＜0.05）。提示百合地黃湯及其不同萃取部位均有不同程度的促眠作用，其促眠效應(yīng)與萃取部位及劑量有關(guān)。

1.2 抗抑郁作用抑郁癥是常見的精神障礙類疾病，多以顯著而持久的心境低落為主要臨床特征。其發(fā)病機(jī)制主要涉及中樞神經(jīng)系統(tǒng)5-羥色胺能神經(jīng)元和去甲腎上腺素能神經(jīng)元功能紊亂[9]、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子分泌失衡[10]、HPA軸功能失調(diào)[11]以及炎癥。中醫(yī)臨床運(yùn)用本方治療抑郁癥有一定療效[12]。

Chen M L等[13]通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討百合地黃湯（BDT）抗抑郁作用的機(jī)制。該實(shí)驗(yàn)將雄性小鼠分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性藥對(duì)照組以及百合地黃湯低、中、高劑量組共6組，空白對(duì)照組、模型對(duì)照組給予蒸餾水，陽性藥對(duì)照組給予地西帕明，BDT低、中、高劑量組分別給予不同劑量的百合地黃湯提取物粉末。于最后一次治療后2 h通過對(duì)各組動(dòng)物實(shí)施強(qiáng)制游泳測(cè)試（FST）和懸尾實(shí)驗(yàn)（TST）建立小鼠抑郁模型，之后進(jìn)行開場(chǎng)測(cè)試（OFT）和利血平試驗(yàn)，并測(cè)定小鼠腦內(nèi)單胺神經(jīng)遞質(zhì)的水平。結(jié)果顯示，與模型對(duì)照組比較，BDT高劑量組和陽性藥對(duì)照組小鼠的FST、TST固定時(shí)間及上瞼下垂程度均明顯降低（P＜0.05或P＜0.01），BDT各組與陽性藥對(duì)照組OFT中的穿越和飼養(yǎng)次數(shù)均無顯著性差異；模型對(duì)照組小鼠腦組織NA和5-HT水平均顯著降低（P＜0.01）；與模型對(duì)照組比較，BDT高劑量組的小鼠NA、5-HT、5-羥吲哚乙酸（5-HIAA）和5-HT轉(zhuǎn)換率（5-HIAA/5-HT）均顯著升高（P＜0.05），中劑量組5-HT顯著升高（P＜0.05），陽性藥對(duì)照組去甲腎上腺素（NA）和5-HT均顯著升高（P＜0.05）。結(jié)果提示百合地黃湯具有抗抑郁樣作用，涉及對(duì)中樞單胺能神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)。

周湘樂[14]觀察百合地黃湯對(duì)慢性不可預(yù)見性應(yīng)激（CUMS）抑郁大鼠模型血清炎癥因子及其海馬5-HT表達(dá)水平的影響。實(shí)驗(yàn)采用孤養(yǎng)加慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激法復(fù)制大鼠抑郁模型，將造模成功后的大鼠隨機(jī)分為模型組、百合地黃湯高劑量組、百合地黃湯低劑量組、陽性藥對(duì)照組（氟西汀灌胃）。結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠血清白細(xì)胞介素（IL）-1β水平顯著升高，海馬5-HT水平顯著下降（均P＜0.01）；與模型組比較，百合地黃湯高劑量組與陽性藥對(duì)照組大鼠血清IL-1β水平均顯著下降，海馬5-HT均顯著上升（均P＜0.01）。提示百合地黃湯抗抑郁機(jī)制可能與其降低炎癥因子和調(diào)節(jié)中樞單胺神經(jīng)遞質(zhì)有關(guān)。管家齊等[15-16]觀察了百合地黃湯對(duì)小鼠CUMS抑郁模型的影響。實(shí)驗(yàn)采用孤養(yǎng)加慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激法復(fù)制小鼠抑郁模型。小鼠被隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、阿米替林組、百合地黃湯高劑量組和百合地黃湯低劑量組，測(cè)定各組小鼠的體質(zhì)量、腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)DA和5-HT以及外周血中血清皮質(zhì)醇（CORT）與促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）的含量。結(jié)果顯示，較之于正常對(duì)照組，模型對(duì)照組小鼠體質(zhì)量增加緩慢（P＜0.01），腦內(nèi)DA和5-HT含量均顯著降低（P＜0.01），血清CORT、ACTH水平顯著升高（P＜0.01）；與模型對(duì)照組比較，百合地黃湯高劑量組和阿米替林組小鼠的體質(zhì)量增加（P＜0.05），百合地黃湯高劑量組小鼠的腦組織DA和5-HT的含量均顯著增加（P＜0.01），其低劑量組5-HT含量顯著增加（P＜0.05），百合地黃湯高、低劑量組的CORT與ACTH均顯著降低（P＜0.05）。結(jié)果表明百合地黃湯有改善抑郁模型動(dòng)物的體質(zhì)量、增加其腦組織DA和5-HT含量及降低血清CORT、ACTH的作用，提示其抗抑郁作用可能與調(diào)節(jié)腦單胺類遞質(zhì)和下丘腦-垂體-腎上腺（HPA）軸功能有關(guān)。

薛劍[17]進(jìn)一步觀察了百合地黃湯抗抑郁作用及機(jī)理。實(shí)驗(yàn)以雌性大鼠體質(zhì)量、糖水消耗量、開場(chǎng)實(shí)驗(yàn)等為觀察指標(biāo)，用孤養(yǎng)加慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激法復(fù)制抑郁癥模型。模型大鼠分別給予不同劑量的百合地黃湯及鹽酸氟西汀，檢測(cè)各組動(dòng)物的行為學(xué)指標(biāo)（糖水試驗(yàn)和開場(chǎng)試驗(yàn)）和海馬組織與前額葉皮質(zhì)（mPFC）的單胺類遞質(zhì)及半胱氨酸蛋白酶（Caspase-3）、磷酸化環(huán)磷酸腺苷（p-CREB）、環(huán)磷酸腺苷（CREB）、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（Bcl-2）的蛋白表達(dá)，觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)。結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠體質(zhì)量明顯減輕，糖水偏愛度下降，曠場(chǎng)試驗(yàn)中的中央路徑的路程變短，海馬和mPFC區(qū)的5-HT、DA、NE水平均顯著降低（P＜0.05），Glu/GABA升高（P＜0.05），Caspase-3 mRNA表達(dá)增強(qiáng)，Bcl-2、BDNF、CREB和p-CREB表達(dá)下調(diào)；腦組織凋亡細(xì)胞顯著增加，區(qū)域結(jié)構(gòu)明顯破壞，細(xì)胞層數(shù)明顯減少，椎體細(xì)胞和顆粒細(xì)胞的細(xì)胞帶紊亂，細(xì)胞空泡化，胞膜破裂及胞核變小或核固縮。與模型組比較，百合地黃湯3個(gè)劑量組和陽性藥對(duì)照組的大鼠體質(zhì)量均增加，糖水偏愛度提高，中央路徑路程變長；相關(guān)腦區(qū)的5-HT、DA、NE濃度均顯著升高（P＜0.05），Glu/GABA比值降低（P＜0.05）；Caspase-3 mRNA表達(dá)下調(diào)，Bcl-2、BDNF、CREB和p-CREB表達(dá)上調(diào)（P＜0.05）；凋亡細(xì)胞數(shù)量減少，上述腦組織病理損傷也明顯減輕。結(jié)果表明百合地黃湯對(duì)于抑郁大鼠腦組織具有一定的保護(hù)作用，其作用可能涉及增強(qiáng)神經(jīng)營養(yǎng)因子的表達(dá)、調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)水平及抗細(xì)胞凋亡等多個(gè)環(huán)節(jié)。

趙慧敏等[18]觀察了百合地黃湯合酸棗仁湯對(duì)抑郁癥模型大鼠海馬及炎癥因子的影響。實(shí)驗(yàn)將Wistar大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型組、鹽酸氟西汀組、百合地黃湯合酸棗仁湯（百合30 g、生地黃30 g、酸棗仁30 g、茯苓10 g、川芎10 g、知母10 g、甘草6 g）高、中、低劑量組共6組，采用孤養(yǎng)加慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激法復(fù)制大鼠抑郁模型，檢測(cè)治療前后大鼠血清腫瘤壞死因子α（TNF-α）、IL-6、IL-1及腦海馬BDNF含量。結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組比較，模型組和其他各組大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α含量明顯升高（P＜0.05），海馬BDNF水平明顯下降（P＜0.05或P＜0.01）；與模型組比較，百合地黃湯合酸棗仁湯高、中劑量組和氟西汀組大鼠血清IL-1、IL-6、TNF-α含量明顯下降，海馬BDNF水平均顯著升高（均P＜0.01）。表明百合地黃湯與酸棗仁湯合方有一定的抗抑郁作用，對(duì)抑郁大鼠的腦組織具有一定的保護(hù)作用，其作用可能與增強(qiáng)神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF的表達(dá)和調(diào)節(jié)炎癥因子有關(guān)。

趙洪慶等[19]觀察百合地黃湯對(duì)焦慮性抑郁癥模型大鼠海馬神經(jīng)元突觸可塑性的影響。實(shí)驗(yàn)將SD大鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、文拉法辛組（6.75 mg/kg）、百合地黃湯高劑量組（8.64 g/kg）和百合地黃湯低劑量組（4.32 g/kg）。采用慢性束縛應(yīng)激（6 h）聯(lián)合皮質(zhì)酮（30 mg/kg）的方法建立焦慮性抑郁癥模型，給藥結(jié)束后進(jìn)行行為學(xué)測(cè)試，采用Golgi-Cox染色和電鏡技術(shù)分別觀察腦組織突觸的樹突棘形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)變化，免疫熒光法檢測(cè)海馬突觸結(jié)構(gòu)蛋白突觸素1（synapsin-1）和突觸后致密蛋白95（PSD-95）的表達(dá)，Western blot法檢測(cè)功能蛋白突觸囊泡蛋白（SYP）和認(rèn)知缺陷突觸相關(guān)蛋白（SynGap）的表達(dá)。結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組大鼠高架十字迷宮測(cè)試開放臂的比例（OE）和開放臂停留時(shí)間（OT）均顯著減少（P＜0.01），自主活動(dòng)次數(shù)顯著降低（P＜0.01）；強(qiáng)迫游泳不動(dòng)時(shí)間顯著延長（P＜0.01）；海馬樹突棘密度及分枝長度均降低，突觸數(shù)量減少，結(jié)構(gòu)損傷明顯，synapsin-1和PSD-95、SYP和SynGap表達(dá)均顯著降低（P＜0.01）。與模型組比較，百合地黃湯各劑量組和文拉法辛組的上述行為學(xué)指標(biāo)均明顯改善，其中百合地黃湯高劑量組和文拉法辛組突觸損傷明顯減輕，海馬synapsin-1和PSD-95、SYP和SynGap表達(dá)顯著增加（P＜0.01）。提示百合地黃湯能明顯改善焦慮性抑郁癥模型大鼠的焦慮和抑郁樣行為，對(duì)海馬突觸可塑性有一定調(diào)節(jié)作用。

Zhang H X等[20]觀察百合地黃湯的抗抑郁活性及其分子機(jī)制，將雄性C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、百合地黃湯組和氟西汀組，以孤養(yǎng)加慢性溫和不可預(yù)知應(yīng)激法復(fù)制小鼠抑郁模型，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)各組小鼠前額皮質(zhì)組織（mPFC）中5-HT、DA、NE、Glu、GABA以及CORT、IL-6、IL-1β、TNF-α的水平，并對(duì)mPFC中差異基因表達(dá)進(jìn)行分析，采用實(shí)時(shí)熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組小鼠mPFC中5-HT、NE、DA、GABA和Glu的水平均顯著降低（P＜0.05），CORT、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平均顯著升高（P＜0.01）；與模型組比較，百合地黃湯組及氟西汀組小鼠mPFC中5-HT、NE、DA、GABA和Glu的水平均顯著升高（P＜0.05），CORT、IL-1β、IL-6和TNF-α的水平均顯著降低（P＜0.05）。與正常組比較，模型組及各給藥組mPFC中均存在35個(gè)差異基因；與模型組比較，百合地黃湯組mPFC中Calml4等16個(gè)基因顯著上調(diào)、Nr1d1等10個(gè)基因明顯下調(diào)，氟西汀組mPFC組織中有5個(gè)基因顯著上調(diào)、4個(gè)基因顯著下調(diào)。富集分析結(jié)果顯示，表達(dá)基因涉及神經(jīng)營養(yǎng)因子、胰島素、促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）-Akt信號(hào)通路和GABA能突觸、谷氨酸能突觸、苯丙胺成癮及晝夜節(jié)律等生物調(diào)節(jié)。qRT-PCR結(jié)果與高通量測(cè)序結(jié)果一致。結(jié)果提示百合地黃湯的抗抑郁作用與其對(duì)單胺神經(jīng)遞質(zhì)、促炎細(xì)胞因子以及Glu/GABA的調(diào)節(jié)作用有關(guān)，可能通過神經(jīng)營養(yǎng)因子、胰島素信號(hào)通路及GABA能突觸等多個(gè)途徑發(fā)揮作用。

1.3 抗焦慮作用焦慮癥是以焦慮情緒為主要表現(xiàn)的神經(jīng)癥，其發(fā)病機(jī)制與腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)（包括5-HT、DA、NE、GABA、神經(jīng)肽Y等）紊亂[21]、內(nèi)分泌失調(diào)[22]和免疫功能紊亂[23]密切相關(guān)。本方臨床常被用于焦慮癥的治療[24]。

方歡樂等[25]觀察了百合地黃湯對(duì)焦慮小鼠行為的改善作用及其機(jī)制。實(shí)驗(yàn)將SPF級(jí)雄性小鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、地西泮（DZP）組和百合地黃湯高、中、低劑量組，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定各組小鼠腦內(nèi)GABA和Glu的含量。結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組比較，百合地黃湯高劑量組小鼠在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中進(jìn)入開臂內(nèi)運(yùn)動(dòng)時(shí)間和次數(shù)以及在開場(chǎng)試驗(yàn)中進(jìn)入中央?yún)^(qū)的次數(shù)均顯著增加（P＜0.05）；中、高劑量組小鼠腦組織內(nèi)GABA的含量顯著增加而Glu含量降低（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)果表明百合地黃湯具有一定的抗焦慮作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)中樞氨基酸遞質(zhì)GABA和Glu的含量有關(guān)。

張永華與胡霖霖[26-27]觀察百合地黃湯對(duì)創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙（PTSD）大鼠的干預(yù)作用。實(shí)驗(yàn)將雄性SPF級(jí)SD大鼠分成空白組、模型組、氟西汀陽性藥對(duì)照組、百合地黃湯3個(gè)不同劑量組，共6組；以單一延長應(yīng)激法（single prolonged stress，SPS）建立大鼠PTSD模型，采用高架十字迷宮（EPM）和曠場(chǎng)（OF）試驗(yàn)進(jìn)行行為學(xué)評(píng)定，檢測(cè)海馬5-HT含量、神經(jīng)元核受體、糖皮質(zhì)激素受體（GR）和鹽皮質(zhì)激素受體（MR）比值（GR/MR）的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，模型組大鼠EPM試驗(yàn)中進(jìn)入開臂次數(shù)和停留時(shí)間明顯減少，OF試驗(yàn)中活動(dòng)距離、直立與修飾次數(shù)及排便量均降低（P＜0.01），海馬組織5-HT和GR水平降低（P＜0.01）；經(jīng)治療后，百合地黃湯各劑量組和氟西汀組大鼠的上述行為學(xué)指標(biāo)均明顯改善，海馬5-HT增加，MR表達(dá)上調(diào)，GR表達(dá)下調(diào)（P＜0.01）。結(jié)果提示百合地黃湯有改善PTSD大鼠焦慮狀態(tài)的作用，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)海馬5-HT水平和皮質(zhì)醇相關(guān)受體的表達(dá)有關(guān)。

1.4 免疫調(diào)節(jié)作用基于本方用于干燥綜合征[28]和婦女更年期[29]的經(jīng)驗(yàn)，宋陳惠等[30]觀察了加味百合地黃湯（主要由百合30 g、生地黃30 g、白芍15 g、雞血藤15 g、砂仁9 g、炙甘草10 g組成）顆粒劑對(duì)干燥綜合征模型NOD/Ltj小鼠血清γ-干擾素（IFN-γ）的影響。實(shí)驗(yàn)將NOD/Ltj小鼠隨機(jī)分為模型組、正常對(duì)照組、中藥組，另設(shè)C57BL/6J小鼠為正常組。結(jié)果顯示：與正常對(duì)照組比較，模型組小鼠的組織形態(tài)學(xué)評(píng)分和血清IFN-γ水平均顯著升高（P＜0.05或P＜0.01）；與模型組比較，中藥組小鼠血清IFN-γ水平顯著降低（P＜0.01），但組織形態(tài)學(xué)評(píng)分無顯著性差異。提示該方有下調(diào)干燥綜合征模型小鼠血清IFN-γ水平的作用。

周欣等[29]探討雌激素聯(lián)合百合地黃湯對(duì)更年期綜合征婦女生殖內(nèi)分泌及免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用。該臨床觀察將更年期綜合征患者172例隨機(jī)分為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組各86例。試驗(yàn)組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用加味百合地黃湯（主要由百合60 g、生地黃15 g、丹參30 g、川芎20 g、菊花15 g組成）治療，比較2組患者治療前后的臨床癥狀，檢測(cè)T淋巴細(xì)胞CD亞群、白細(xì)胞介素2（IL-2）及血清性激素[黃體生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）、雌二醇（E2）、睪酮（T）、催乳素（PRL）]水平的變化。結(jié)果顯示治療后2組患者的癥狀均有所改善，試驗(yàn)組總有效率達(dá)100%，明顯高于對(duì)照組的82.56%（P＜0.05）。2組患者T細(xì)胞CD亞群中的CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比例和外周血中IL-2活性及E2水平均較治療前顯著升高（P＜0.05），CD8+、FSH及LH水平下降，且組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)果表明在治療更年期綜合征的療效和提高患者免疫及卵巢功能方面，加味百合地黃湯與雌激素聯(lián)用優(yōu)于單用雌激素。

1.5 抗腫瘤作用趙參軍等[31]臨床觀察到百合地黃湯對(duì)腫瘤有一定療效。包素珍等[32]采用實(shí)驗(yàn)研究觀察百合地黃湯（百合24 g、生地黃18 g，濃縮至含生藥1 g/mL）對(duì)肝癌H22荷瘤小鼠的抑瘤作用。實(shí)驗(yàn)將昆明種小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組、化療組以及中藥高、中、低3個(gè)劑量組。結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組小鼠體質(zhì)量無明顯變化，脾質(zhì)量顯著下降（P＜0.01）。與模型組比較，化療組小鼠體質(zhì)量、瘤質(zhì)量及脾質(zhì)量均顯著下降（P＜0.01）；百合地黃湯高、中、低各劑量組小鼠體質(zhì)量與脾質(zhì)量均有一定上升趨勢(shì)，瘤質(zhì)量均呈不同程度的降低，且中、高劑量組降低明顯（P＜0.05）。結(jié)果提示百合地黃湯具有一定的抑瘤和脾臟保護(hù)作用。

葉開升等[33]觀察了加味百合地黃湯（百合30 g、生地黃15 g、生黃芪30 g）按7.5、15、30 g/（kg·d）不同劑量（分別相當(dāng)于成人劑量的6、12、24倍）口服對(duì)肝癌H22小鼠增殖細(xì)胞核抗原（PCNA）蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果顯示，中藥高劑量組和化療組（環(huán)磷酰胺，CTX）小鼠的瘤細(xì)胞的PCNA蛋自表達(dá)呈弱陽性（±），與模型組比較有顯著性差異（P＜0.01），提示加味百合地黃湯可降低PCNA蛋白的表達(dá)，抑制腫瘤細(xì)胞增殖。進(jìn)一步研究[34]發(fā)現(xiàn)，采用該方中劑量對(duì)Lewis肺癌小鼠模型動(dòng)物連續(xù)給藥14 d，可顯著抑制肺癌，抑瘤率為34.52%，抗轉(zhuǎn)移率為32.14%（P＜0.01），瘤組織中的P53蛋白表達(dá)無明顯變化（P＞0.05），PCNA細(xì)胞陽性數(shù)和Cyclin D1陽性率顯著降低（P＜0.01）。提示加味百合地黃湯有一定的抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用，其機(jī)制可能與抑制PCNA和Cyclin D1蛋白表達(dá)及影響細(xì)胞周期有關(guān)。

1.6 體外神經(jīng)元的保護(hù)作用陳鋼[35]采用體外實(shí)驗(yàn)觀察百合地黃湯（百合與生地黃按4∶3比例組方，水煎劑濃縮至浸膏）對(duì)損傷的PC-12細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、三磷酸腺苷（ATP）及蛋白含量、細(xì)胞膜電位等的變化，探討該方對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。實(shí)驗(yàn)采用血清剝奪法培養(yǎng)PC-12細(xì)胞（即培養(yǎng)基中不加血清）制作營養(yǎng)缺乏細(xì)胞模型，檢測(cè)不同濃度百合地黃湯（1.5、3、6、12、24、48 mg/mL）干預(yù)下的細(xì)胞存活率，結(jié)果顯示該方濃度為3 mg/mL時(shí)可使模型細(xì)胞存活率提高23%，且可顯著提高模型細(xì)胞蛋白含量及ATP含量，改善損傷細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，但對(duì)細(xì)胞膜電位無明顯影響。

1.7 調(diào)節(jié)心理亞健康狀態(tài)者的分子生物學(xué)指標(biāo)Tian J S等[36]篩選符合心理亞健康狀態(tài)臨床診斷的患者，招募健康志愿者為對(duì)照組，每組各30名。藥物干預(yù)組給予百合地黃湯（百合30 g、生地黃20 g，水煎，濃縮為200 mL）。采集并分析干預(yù)組患者治療前后的癥狀自評(píng)量表（SCL-90）評(píng)分及兩組的血漿代謝物。觀察期間藥物干預(yù)組8名患者失訪，最后該組實(shí)際樣本為22例。結(jié)果顯示，較之于健康對(duì)照組，治療前亞健康狀態(tài)者的血漿差異代謝物涉及6種標(biāo)志物[苯丙氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸、氧化三甲胺（TMAO）、N-乙?；堑鞍缀蜋幟仕猁}的代謝物]和9種潛在標(biāo)志物（包括氨基酸類的異亮氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺和酪氨酸，能量代謝相關(guān)分子的檸檬酸和葡萄糖，其他代謝分子有N-乙酰糖蛋白和TMAO）。百合地黃湯干預(yù)組的患者SCL-90評(píng)分較干預(yù)前顯著降低（P＜0.05），血漿代謝物中的潛在生物標(biāo)記物水平接近正常，其中纈氨酸、谷氨酰胺、TMAO和苯丙氨酸水平恢復(fù)至正常，與干預(yù)前比較差異有顯著性（P＜0.05）。結(jié)果提示心理亞健康狀態(tài)者存在血漿代謝物水平的異常變化，百合地黃湯對(duì)其有調(diào)整作用。

2 百合地黃湯的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究進(jìn)展

網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)分析技術(shù)獲得的該方潛在藥理作用中有部分與臨床和實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相符，但仍有部分尚待驗(yàn)證。

趙蕾等[37-38]借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)預(yù)測(cè)百合地黃湯發(fā)揮干預(yù)作用的活性成分及其靶點(diǎn)，尋找并篩選臨床血漿樣本中與百合地黃湯干預(yù)陰虛型心理亞健康療效相關(guān)的差異代謝物及其通路，構(gòu)建“代謝物－代謝通路－通路靶點(diǎn)－作用靶點(diǎn)－活性成分”網(wǎng)絡(luò)，將藥物活性成分、靶點(diǎn)預(yù)測(cè)與代謝組學(xué)結(jié)果進(jìn)行關(guān)聯(lián)，探討百合地黃湯干預(yù)陰虛型心理亞健康的可能作用機(jī)制。結(jié)果顯示，在百合地黃湯中篩選出11個(gè)活性成分，涉及神經(jīng)和免疫等21個(gè)靶點(diǎn)，這些靶點(diǎn)主要參與了GABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、cAMP信號(hào)通路以及單胺轉(zhuǎn)運(yùn)等相關(guān)生物過程；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）代謝組學(xué)分析共指認(rèn)出氨基酸、有機(jī)酸等44個(gè)內(nèi)源性代謝產(chǎn)物，其中有8個(gè)為與療效相關(guān)的差異代謝物，主要涉及脂質(zhì)代謝、能量代謝以及氨基酸代謝；通過液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）代謝組學(xué)分析找到與百合地黃湯干預(yù)效果相關(guān)的14個(gè)差異代謝物，主要涉及氨基酸代謝和脂肪酸代謝這兩大類。采用3種代謝組學(xué)手段[核磁共振（NMR）、GC-MS、LC-MS]共得到27個(gè)差異代謝物，對(duì)其進(jìn)行整合篩選，得到有直接互作關(guān)系的3條通路，即丙酮酸鹽代謝、苯丙氨酸代謝和酪氨酸代謝；百合地黃湯的主要活性成分涉及梓醇、地黃苷A、甾體皂苷、豆甾醇和β-谷甾醇。結(jié)果提示百合地黃湯干預(yù)陰虛型心理亞健康的主要藥理活性成分為梓醇、地黃苷A、豆甾醇、β-谷甾醇、甾體皂苷，其作用涉及氨基酸代謝、能量代謝、脂肪酸代謝以及神經(jīng)遞質(zhì)合成等代謝通路，參與調(diào)控的作用靶點(diǎn)為GLO1、

MAOA、MAOB。

丁騰等[39]應(yīng)用LC-MS、GC-MS技術(shù)分析百合地黃湯化學(xué)成分，利用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺(tái)（TCMSP）分析搜集化學(xué)成分、靶點(diǎn)信息，通過療效藥靶數(shù)據(jù)庫（TTD）、比較毒理基因組學(xué)數(shù)據(jù)庫（CTD）搜集與靶點(diǎn)相關(guān)聯(lián)的疾病，并以抑郁癥為目標(biāo)進(jìn)行篩選，基于Cytoscape軟件進(jìn)行“化學(xué)成分-靶點(diǎn)-疾病”的網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建，通過DAVID在線分析，對(duì)靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG通路分析，并探究其藥效成分和作用機(jī)制。結(jié)果顯示，通過超高效液相色譜四極桿飛行時(shí)間串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-Q-TOF/MS）分析得到32種化合物，采用GC-MS技術(shù)得到20種化合物；利用“化學(xué)成分-靶點(diǎn)-疾病”模型預(yù)測(cè)其化學(xué)成分治療抑郁癥相關(guān)通路有5條和其相關(guān)靶點(diǎn)有31個(gè)，這些靶點(diǎn)基因涉及神經(jīng)活性的受體-配體相互作用、5-羥色胺能突觸、核因子-κB（NF-κB）信號(hào)通路、鈣信號(hào)傳導(dǎo)途徑等，推測(cè)該方通過調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、神經(jīng)遞質(zhì)分泌、神經(jīng)細(xì)胞凋亡等過程發(fā)揮其抗抑郁作用。

3 小結(jié)

基于上述有關(guān)百合地黃湯的藥理作用和已經(jīng)了解到的相關(guān)分子調(diào)控機(jī)制，梳理百合地黃湯的藥理作用機(jī)制概況，結(jié)果見圖1。

圖1 百合地黃湯的藥理作用機(jī)制概述圖示Figure 1 Outline of the pharmacological actions of Baihe Dihuang Decoction

百合地黃湯現(xiàn)代臨床已被廣泛運(yùn)用于治療多種疾病，提示其具有較為廣泛的藥理作用，但目前開展的藥理實(shí)驗(yàn)研究僅涉及部分內(nèi)容。近年來的研究表明，百合地黃湯具有改善失眠狀態(tài)、抗焦慮、抗抑郁等藥理作用，其機(jī)制可能涉及增加單胺類神經(jīng)遞質(zhì)釋放、抑制單胺氧化酶活性、調(diào)節(jié)HPA軸功能，抗炎及免疫調(diào)節(jié)等多個(gè)方面，為該方臨床用于神經(jīng)精神系統(tǒng)疾病的治療提供了一定藥理學(xué)依據(jù)。該方還具有抑制腫瘤的作用，提示其在抗腫瘤方面的潛在價(jià)值，但目前研究剛起步。新近開展的采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)與疾病分子網(wǎng)絡(luò)分析技術(shù)對(duì)本方作用機(jī)制的探討，將有助于預(yù)測(cè)該方的潛在藥理作用及其臨床運(yùn)用范圍，從分子藥理學(xué)層面理解其臨床療效，其中部分預(yù)測(cè)與臨床和實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果基本相符，但部分預(yù)測(cè)仍有待進(jìn)一步驗(yàn)證。