P73蛋白在胃癌及癌旁正常組織中的異常表達(dá)

鄭鵬才,謝小強(qiáng)，蘇 波 (長江大學(xué)醫(yī)學(xué)院， 湖北 荊州 434023)

郭華雄，楊 勇 (長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院病理科，湖北 荊州 434020)

P73蛋白在胃癌及癌旁正常組織中的異常表達(dá)

鄭鵬才,謝小強(qiáng)，蘇 波 (長江大學(xué)醫(yī)學(xué)院， 湖北 荊州 434023)

郭華雄，楊 勇 (長江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院病理科，湖北 荊州 434020)

目的 ：檢測胃癌及癌旁正常組織中P73蛋白的表達(dá)，探討P73蛋白的表達(dá)在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用。方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測50例胃癌組織中P73蛋白表達(dá)并與30例癌旁正常組織中P73蛋白的表達(dá)進(jìn)行比較。結(jié)果：癌旁正常組織中P73蛋白表達(dá)率為21%；高分化胃癌與低分化胃癌組織中P73蛋白的表達(dá)率分別為55.5%、68.8%，呈遞增性高表達(dá)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出癌旁正常組織與胃癌組織P73陽性表達(dá)率有顯著性差異(Plt;0.01)。結(jié)論：P73蛋白異常表達(dá)在胃癌的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用。并可作為胃癌早期診斷，判斷預(yù)后的新的分子生物學(xué)指標(biāo)。

胃癌；癌旁組織；免疫組織化學(xué)；P73蛋白表達(dá)

P73蛋白是在1997年發(fā)現(xiàn)的和P53具有十分相似的結(jié)構(gòu)和功能的新基因，屬于P53家族的成員，隨后的研究認(rèn)為P73基因在腫瘤的發(fā)生中的作用機(jī)制可能是：P73基因編碼區(qū)發(fā)生堿基突變[1]; P73基因的雜合性缺失[2]; P73基因異常表達(dá)[3]；P73基因甲基化[4]。近來的系列研究證實(shí)了該基因的存在，研究表明P73在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、預(yù)后等方面起重要作用。本研究旨在應(yīng)用免疫組織化學(xué)S-P法檢測P73蛋白在胃癌及癌旁正常組織的表達(dá)情況，探討P73蛋白在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1標(biāo)本 本研究中所有標(biāo)本均來源于荊州市中心醫(yī)院病理科2001年至2006年6月存檔蠟塊。胃癌50例，其中男性41例，女性9例；年齡40～76歲，平均年齡57.8歲。臨床病理診斷為高分化腺癌18例，低分化腺癌32例：有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者14例，無轉(zhuǎn)移者36例。獲取癌旁正常組織30例，作為對(duì)照。所有標(biāo)本均經(jīng)10%福爾馬林液固定，常規(guī)石蠟包埋，制備厚4μm切片。

1.1.2主要試劑 兔抗人P73多克隆抗體及SP試劑盒購自武漢博士德生物工程有限公司。

1.2方法每例選取1～3張4μm厚的切片采用免疫組化S-P法檢測P73蛋白的表達(dá)，染色步驟嚴(yán)格按試劑盒說明進(jìn)行。結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)：P73以細(xì)胞漿內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒呈陽性(DAB色源)。每張切片隨機(jī)選擇5個(gè)高倍視野(×400),每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，陽性細(xì)胞數(shù)lt;10%為陰性(-),11%～24%為弱陽性(±)；≥25%為陽性()；gt;50%為強(qiáng)陽性()。用已知的陽性切片作為陽性對(duì)照。

1.3統(tǒng)計(jì)方法數(shù)據(jù)比較采用χ2檢驗(yàn)，Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1P73蛋白在胃癌及癌旁組織的表達(dá)在癌旁正常組織中P73蛋白的表達(dá)率為21%(7/30)，主要著色部位在胞漿(見第92頁彩色圖版Ⅶ之圖1)，按制定標(biāo)準(zhǔn)為弱陽性；在胃癌組織中P73蛋白表達(dá)率為64.%(32/50),其中高分化胃癌組織中P73蛋白的陽性表達(dá)率為55.5%(10/18)；低分化腺癌組織中P73蛋白的陽性表達(dá)率為68.8%(22/32)，主要著色部位在胞漿(見第92頁彩色圖版Ⅶ之圖2、3)。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出癌旁正常組織與胃癌組織之間P73蛋白的陽性表達(dá)差異有顯著性(Plt;0.01)；而高分化胃癌與低分化胃癌組織之間P73蛋白的陽性表達(dá)無顯著性差異(Pgt;0.05)(見表1)。

2.2P73蛋白表達(dá)與胃癌的生物學(xué)特征本研究結(jié)果表明P73蛋白的陽性表達(dá)與癌旁正常組織有關(guān)系，與病人的年齡、腫瘤的大小、分化程度無明顯差異，但隨著腫瘤的惡性程度增高而呈遞增性增高。

圖1 癌旁正常組織弱陽性 圖2 高分化腺癌陽性 圖3 低分化腺癌陽性

表1 P73蛋白在胃癌及癌旁組織中的表達(dá)

3 討 論

P73基因是新發(fā)現(xiàn)的腫瘤抑制基因定位于1P36、33[5]，它由13個(gè)外顯示和12個(gè)內(nèi)盒子組成具有7個(gè)同源異構(gòu)體。在結(jié)構(gòu)與功能上與P53具有高度的同源性，具有相似的生物學(xué)行為。均可通過轉(zhuǎn)錄激活P21基因來實(shí)現(xiàn)抑制細(xì)胞生長，促進(jìn)細(xì)胞凋亡的功能[6]。

據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[7]P73的表達(dá)在前列腺癌、膀胱癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等惡性腫瘤組織中此基因頻繁丟失、突變。而在肝癌、胃癌等惡性腫瘤中很少突變，表達(dá)率低[8，9]提示P73蛋白可能具有組織特異性，但尚無定論。Min-Jukang等人[10]的研究表明突變的P73在胃癌組織中呈高表達(dá)，提示P73基因與癌變的過程有關(guān)。本研究結(jié)果顯示P73蛋白在胃癌中的陽性表達(dá)率顯著高于癌旁組織中的表達(dá)(Plt;0.01)，由此提示P73蛋白基因高表達(dá)可能是胃癌發(fā)生的熱點(diǎn)基因變化，在胃癌的發(fā)生中起重要作用。P73蛋白在高分化胃癌與低分化胃癌組織中陽性表達(dá)率雖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但仍提示P73陽性表達(dá)率與癌組織分化程度有相關(guān)性。

我們檢測到的胃癌組織中P73蛋白陽性表達(dá)率(64.%)與以前的報(bào)告雖有差異，但究其原因可能與病例的多少或研究方法不同有關(guān)。其機(jī)制尚待進(jìn)一步探討。本研究發(fā)現(xiàn)P73蛋白表達(dá)在胃癌的發(fā)生，發(fā)展過程中起重要作用；與胃癌組織的分化程度有相關(guān)性，提示P73蛋白可作為胃癌早期診斷，判斷惡性程度、預(yù)后的一種新的分子生物學(xué)指標(biāo)。

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[編輯] 何 勇

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2009.04.011

R446.8

A

1673-1409(2009)04-R027-02

2009-11-02

鄭鵬才(1955-)，男，湖北天門人，教授，從事病理學(xué)教學(xué)與研究工作。