流化床制粒法制備替米沙坦片工藝研究

楊 敏，祖 文，李 君，沈柏汐

（1.內(nèi)蒙古自治區(qū)烏蘭察布市中心醫(yī)院，內(nèi)蒙古 烏蘭察布 012000； 2.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010110）

替米沙坦片為血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑，臨床用于治療高血壓。與其他類抗高血壓藥物相比，替米沙坦的受體作用專一，抗高血壓作用顯著，利尿作用良好，能改善急性心肌梗死，安全性及耐受性良好，且不良反應(yīng)少，無血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑類藥物的干咳副作用［1］。替米沙坦原研藥商品名為Micardis（美卡素），由德國Boehringer Ingelheim 制藥公司研制，并于2002 年在國內(nèi)批準上市。為提高仿制藥療效，原國家食品藥品監(jiān)督管理總局于2017年提出仿制藥質(zhì)量和療效一致性評價，對國內(nèi)各大藥企仿制藥的生產(chǎn)研究提出了更高要求，也為藥物制劑科研工作提供了新的機會。替米沙坦原料藥黏性較高，使用普通濕法制粒很難獲得理想的顆粒，而使用干法制粒，替米沙坦的溶出效果又不理想。參考文獻［2 - 5］，把替米沙坦制成鈉鹽制劑，可極大地改善其溶出度。本研究中以適當溶劑將替米沙坦與氫氧化鈉反應(yīng)成鹽，采用流化床制粒法，將藥物溶液與適宜輔料混合，制成理想的顆粒［6-9］，且為了提高替米沙坦片的穩(wěn)定性，將其進行包薄膜衣處理。以替米沙坦片的累積溶出率為考察指標，研究替米沙坦片的制備工藝；并考察自制替米沙坦片與原研替米沙坦片（美卡素）在不同溶出介質(zhì)中的溶出過程，采用f2因子法進行比較，驗證工藝的可行性，為工業(yè)化大生產(chǎn)及一致性評價提供參考?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

BP211D 型電子天平（德國賽多利斯公司，精度為萬分之一）；WBF-3G 型流化床造粒包衣機（重慶英格造粒包衣技術(shù)有限公司）；ZP-7型旋轉(zhuǎn)壓片機（上海超億制藥機械設(shè)備有限公司）；YD - 35 型片劑硬度儀、RC - 806 型溶出試驗儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；TU-1901 型雙光束紫外可見分光光度計（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）；Ⅱ型高效包衣機（深圳市信宜特科技有限公司）。

1.2 試藥

替米沙坦原料藥（浙江華海藥業(yè)股份有限公司，歐盟CEP 標準，批號為526110002）；甘露醇160c（法國羅蓋特公司）；微晶纖維素PH101（安徽山河藥用輔料有限公司）；硬脂酸鎂EMPROVE，氫氧化鈉（藥用級），均購自德國默克公司；聚維酮K30（美國ISP技術(shù)有限公司）；羧甲基淀粉鈉VIVASTAR P（德國JRS 醫(yī)藥有限公司）；葡甲胺（西安力邦精細化工有限公司，藥用級）；歐巴代Ⅱ（上海卡樂康藥用輔料有限公司）；替米沙坦片（上海勃林格殷格翰藥業(yè)有限公司，商品名為Micardis，規(guī)格為每片80 mg，批號為001834）；95%乙醇（新鄉(xiāng)市先豐醫(yī)藥新材料有限公司，批號為20190712）。

2 方法

2.1 替米沙坦片處方及制備工藝

處方組成：替米沙坦片處方見表1。

表1 替米沙坦片處方（mg）Tab.1 The formulation of Telmisartan Tablets（mg）

制備工藝：取處方量葡甲胺、氫氧化鈉、聚維酮K30，精密稱定；將替米沙坦混懸于少量95%乙醇溶液中，緩慢加入上述水溶液中，充分攪拌至替米沙坦完全分散溶解，再用適量95%乙醇進一步稀釋，作黏合劑，備用；將處方量的甘露醇160c、微晶纖維素pH101、羧甲淀粉鈉VIVASTARP 加入流化床中，預(yù)熱至物料溫度約40 ℃；通過蠕動泵泵入黏合劑造粒，待黏合劑噴完，維持物料溫度約30 ℃10 min進行干燥；收集干燥顆粒，過24 目篩整粒；整粒后按收集顆粒的質(zhì)量與實際處方投料量比折算加入潤滑劑二氧化硅、硬脂酸鎂，混勻；用旋轉(zhuǎn)壓片機壓片，7 mm 沖頭壓片，硬度為20～40 N，得替米沙坦素片；在高效包衣機上進行薄膜包衣，增重約8%，即得替米沙坦片。

2.2 正交試驗及結(jié)果

正交試驗設(shè)計：預(yù)試驗時，通過單因素試驗發(fā)現(xiàn)，氫氧化鈉用量（A）、甘露醇用量（B）和羧甲基淀粉鈉用量（C）對替米沙坦片溶出影響較大。參照2.1 項下處方組成，使用正交試驗設(shè)計助手3.1 軟件設(shè)計L9（34）正交試驗，因素水平見表2。溶出介質(zhì)采用900 mL 磷酸鹽緩沖液（pH 7.5），采用槳法（75 r/ min）測定溶出曲線［10-13］，分別于5，10，15，30，45 min 時取樣；采用紫外-可見分光光度儀于290 nm 波長處測定吸光度，計算累積溶出率，繪制溶出曲線。依據(jù)2015年版《中國藥典（四部）》制劑通則下特殊檢查，以替米沙坦15 min 的累積溶出率［14］為評價指標。

表2 L9（34）正交試驗因素水平（mg）Tab.2 Factors and levels of the L9（34）orthogonal test（mg）

結(jié)果：見表3和表4。由表4可知，因素A和因素C的不同水平對替米沙坦片溶出的影響差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），因素B 的不同水平對替米沙坦片溶出的影響差異無統(tǒng)計學(xué)意義，故替米沙坦片溶出的顯著性差異影響因素次序為C ＞A ＞B，其最優(yōu)處方組合A2B1C2的體外溶出曲線最理想，即每片含氫氧化鈉3.5 mg、甘露醇40 mg、羧甲淀粉鈉5 mg。

表3 L9（34）正交試驗結(jié)果Tab.3 Results of the L9（34）orthogonal test

表4 正交試驗方差分析結(jié)果Tab.4 ANOVA results of the orthogonal test

驗證試驗：按優(yōu)選的制備工藝制備3 批放大樣品，每批制備2 000 片。按2.2.1 項下溶出試驗方法測定3 批樣品的累積溶出率，3 批放大樣品的溶出曲線基本一致，在15 min 內(nèi)均完全崩解，且累積溶出率超過80%?？梢姡磧?yōu)化工藝制備的替米沙坦片處方工藝穩(wěn)定，累積溶出率符合藥典要求，重復(fù)性好。詳見圖1。

圖1 pH 7.5磷酸鹽緩沖液中3批樣品溶出試驗結(jié)果Fig.1 Dissolution test results of the three batches of samples in PBS with pH 7.5

2.3 不同溶出介質(zhì)中累積溶出率

按正交試驗確定的最佳處方工藝制備3批樣品，選擇其中1 批樣品與原研藥美卡素按2015 年版《中國藥典（四部）》通則0931第二法［15-18］溶出度測定法作相似性比較。分別以0.1 mol/L 鹽酸溶液、pH 7.5 磷酸鹽緩沖液和水各900 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75 r/min，依法測定，分別于5，10，15，30，45 min 時取樣10 mL（每次取樣后補加等溫、等體積的新鮮溶出介質(zhì)），濾過，精密量取續(xù)濾液2 mL，置10 mL 容量瓶中，用相應(yīng)溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，按2015 年版《中國藥典（四部）》通則0401 紫外-可見分光光度法，于290 nm 波長處測定吸光度；另取替米沙坦對照品，精密稱定，加溶出介質(zhì)溶解并定量稀釋成質(zhì)量濃度為10μg/mL 的溶液，同法測定，計算累積溶出率。詳見圖2。

2.4 f2 因子相似度比較

以時間對累積溶出率的平均值作溶出曲線，并比較自制樣品和美卡素在不同溶出介質(zhì)中溶出曲線的f2因子相似度。f2值的范圍為0～100，f2越大，2 條曲線的相似性越高。美國食品藥物管理局和歐洲藥物評審組織規(guī)定，若受試劑與參比制劑的溶出曲線間的f2值不小于50［19］，則認為兩者相似。在不同溶出介質(zhì)0.1 mol/L鹽酸溶液、水、pH 7.5 磷酸鹽緩沖液中，f2因子分別為57，71，75?？梢?，自制替米沙坦片體外溶出特征與原研藥美卡素具有相似性。

3 討論

替米沙坦片的溶出度與其成鹽程度密切相關(guān)，只有在成鹽反應(yīng)充分的情況下，其溶出度才能達到最佳。替米沙坦在水中幾乎不溶，故替米沙坦原料藥不能和氫氧化鈉、葡甲胺直接在水中反應(yīng)成鹽。聚維酮K30 既有黏合劑作用，又能起到穩(wěn)定不溶性顆粒的作用，故先將氫氧化鈉、葡甲胺溶于水，再加入聚維酮K30 使之形成大分子膠體溶液。替米沙坦預(yù)先分散在乙醇溶液中，再將2種溶液混合，防止因直接倒入而發(fā)生聚集結(jié)團現(xiàn)象，可達到最佳分散的效果，使替米沙坦和氫氧化鈉有效接觸面積大大增加，在葡甲胺的增溶作用下，替米沙坦可完全分散溶解。

流化床制粒法又稱作一步制粒法，其原理是通過鼓風(fēng)將物料吹起流動混合，對不同輔料的粒徑和堆密度要求較高，需要將輔料粉碎至粒徑和堆密度基本相同。進藥液時需要加大風(fēng)量，使物料流動加快，使之更加均勻、快速地吸附藥液，聚集成大小均勻的顆粒，進液完成后，顆粒干燥過程中需要降低鼓風(fēng)風(fēng)量，防止顆粒在干燥過程中重新碰撞摩擦形成細粉，影響壓片效果。該方法可很好地解決替米沙坦難以制粒的問題，所得顆粒均勻，可壓性好。

正交試驗設(shè)計可研究多因素、多水平的試驗，在藥物制劑處方設(shè)計中尤其重要，前期只需通過幾個處方設(shè)計便能尋找出處方中影響較大的因素。通過正交試驗不僅能減少處方的設(shè)計數(shù)量，快速確定影響因素對制劑的影響是否具有顯著性差異，確定最優(yōu)處方中各輔料最佳用量，還可顯著提高試驗效率，降低研發(fā)成本。

由2.4項下結(jié)果可知，試驗處方工藝制備的替米沙坦片和原研藥（美卡素）在3 種體外溶出介質(zhì)中的溶出f2因子均在50以上，且在水和磷酸鹽緩沖液的溶出介質(zhì)中f2因子在70 以上，具有高度相似性。在鹽酸介質(zhì)中本法制備的替米沙坦片累積溶出率與其在水和磷酸鹽緩沖液介質(zhì)中的溶出曲線基本一致，故本法制備的替米沙坦片在不同溶出介質(zhì)中對其溶出度的影響較小，在人體內(nèi)的胃和小腸中均能很好地崩解釋藥。按本法制備的替米沙坦片可為工業(yè)化大生產(chǎn)研究和一致性評價提供試驗基礎(chǔ)。

A.0.1 mol / L鹽酸溶液 B.水 C.pH 7.5磷酸鹽緩沖液圖2 自制與原研替米沙坦片在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線A.0.1 mol/L of Hydrochloric acid solution B.Water C.PBS with pH 7.5Fig.2 Dissolution profiles of self-made and original-patented telmisartan in different dissolution media