EC、FISH及BTA在膀胱癌鑒別診斷中的價(jià)值及相互關(guān)系

牟江寧，馬永宏，高敬峰，盧冠軍

膀胱癌患者常見(jiàn)臨床癥狀包括血尿、尿痛、尿急、排尿困難等，由于膀胱癌早期臨床癥狀并無(wú)特異性，多數(shù)患者就診時(shí)病情已處于中晚期，導(dǎo)致患者預(yù)后較差，因而及早診斷鑒別及干預(yù)成為改善膀胱癌患者預(yù)后的重要基礎(chǔ)[1]。脫落細(xì)胞學(xué)檢查(EC)是以往腎盂癌的篩查方法，但近些年的臨床實(shí)踐指出該檢測(cè)方式敏感度較低，熒光原位雜交技術(shù)(FISH)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來(lái)的非放射性分子生物學(xué)和細(xì)胞遺傳學(xué)結(jié)合的新技術(shù)，尿膀胱腫瘤抗原(BTA)一直是膀胱癌特異性鑒別抗原之一[2]，上述指標(biāo)在多種惡性腫瘤的鑒別診斷中具有一定的臨床價(jià)值，但普遍存在漏診率高、假陰性率高等缺陷。本研究旨在探究EC、FISH以及BTA對(duì)膀胱癌的鑒別診斷價(jià)值，以期為改善膀胱癌患者預(yù)后提供臨床參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇2018年1月至2020年12月于寧夏醫(yī)科大學(xué)及石嘴山市第二人民醫(yī)院泌尿外科接受治療的80例疑似膀胱癌患者為研究對(duì)象，其中男性60例，女性20例，年齡40～67歲，平均年齡(53.22±2.32)歲。

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)[3]：①入組者均出現(xiàn)血尿或伴隨尿頻、尿急、尿痛等類似膀胱癌臨床癥狀；②入組患者的病歷資料齊全；③意識(shí)清晰能夠配合進(jìn)行調(diào)研；④調(diào)研已報(bào)醫(yī)院倫理學(xué)會(huì)并經(jīng)批準(zhǔn)實(shí)施；⑤入組患者或其家屬已簽署知情同意書(shū)；⑥具有一定的生活自理能力者。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重精神疾病患者；②意識(shí)混亂無(wú)法支持進(jìn)行調(diào)研者；③合并其他惡性腫瘤者；④膀胱癌已出現(xiàn)轉(zhuǎn)移者；⑤預(yù)計(jì)生存期≤6個(gè)月者；⑥合并全身感染者；⑦治療依從性較低者；⑧合并自身免疫系統(tǒng)疾病患者；⑨合并嚴(yán)重肝腎功能不全者。

1.2 干預(yù)方法

1.2.1 EC檢測(cè)：取患者250 mL清潔晨尿送檢，1 h內(nèi)將尿液標(biāo)本進(jìn)行離心后制作細(xì)胞涂片，使用蘇木精伊紅染色后，于光鏡下進(jìn)行細(xì)胞檢查，陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)參考巴氏細(xì)胞分級(jí)法，Ⅲ～Ⅳ級(jí)為陽(yáng)性。

1.2.2 FISH檢測(cè)：取患者50 mL清潔中段晨尿送檢，1 h內(nèi)將尿液標(biāo)本使用氯化鉀溶液進(jìn)行尿液標(biāo)本低滲處理，然后加入甲醇和冰乙酸的混合液，離心后取上層清液，使用SSC溶液進(jìn)行漂洗后再使用70%乙醇玻片脫水，玻片雜交處理后混合10% NP-40/0.4×SCC溶液和30% NP-40/0.4×SCC溶液，震蕩3s后漂洗，干燥后使用復(fù)染劑處理，避光保存20 min后進(jìn)行結(jié)果判讀，判讀標(biāo)準(zhǔn)為熒光信號(hào)計(jì)數(shù)≥2個(gè)點(diǎn)位異常。

1.2.3 BTA檢測(cè)：取患者清晨尿液，分離離心后取上清液，采用雙抗體夾心法依托試劑盒進(jìn)行尿BTA值檢測(cè)，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為出現(xiàn)抗原體復(fù)合物。

1.3 觀察指標(biāo)：對(duì)入組的80例疑似膀胱癌患者均實(shí)施膀胱鏡檢查或診斷性TURBT術(shù)，以鏡檢結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)分別計(jì)算EC、FISH、BTA、EC+FISH+BTA的診斷一致性、靈敏度和特異度，同時(shí)分別繪制上述檢測(cè)方式的ROC曲線并計(jì)算其AUC。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以n(%)表示，組間的差異性比較應(yīng)用Student′s test檢驗(yàn)，對(duì)于計(jì)量資料比較采用χ2檢驗(yàn)，多組間比較差異性采取F檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同檢測(cè)方式診斷結(jié)果比較：EC診斷一致性、靈敏度、特異度分別為41.25%、33.33%和78.57%；FISH診斷一致性、靈敏度、特異度分別為41.25%、34.85%和71.43%；BTA診斷一致性、靈敏度、特異度分別為57.50%、56.06%和64.29%，三種方式聯(lián)合診斷一致性、靈敏度、特異度分別為80.00%、94.12%和83.33%，見(jiàn)表1。

表1 不同檢測(cè)方式診斷結(jié)果比較

2.2 不同檢測(cè)方式診斷價(jià)值比較：聯(lián)合檢測(cè)的一致性、靈敏度以及特異度均明顯高于任一單獨(dú)檢測(cè)，(P<0.05)，而3種單獨(dú)檢測(cè)方式在診斷價(jià)值方面差異不明顯(P>0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同檢測(cè)方式診斷價(jià)值比較

2.3 不同檢測(cè)方式ROC曲線繪制：以鏡檢病檢結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，并作為狀態(tài)變量，對(duì)EC、FISH、BTA以及EC+FISH+BTA四種檢測(cè)方式作為檢驗(yàn)變量，繪制ROC曲線，就單一檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值進(jìn)行比較，結(jié)果顯示EC、FISH、BTA以及EC+FISH+BTA的AUC分別為0.7734、0.8613、0.8848和0.9551(P<0.05)，見(jiàn)表3和圖1(封三)。

表3 不同檢測(cè)方式ROC曲線分析

3 討論

及早準(zhǔn)確的診斷及干預(yù)是改善膀胱癌患者預(yù)后的重要基礎(chǔ)，盡管膀胱鏡檢以及尿細(xì)胞學(xué)檢查目前仍是膀胱癌早期診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但由于膀胱鏡檢具有侵入性，尿細(xì)胞學(xué)的敏感度較低，因而目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者都在致力于尋求新的腫瘤標(biāo)志物，用于膀胱癌的早期診斷[4]。本研究將80例疑似膀胱癌患者納入研究，以膀胱鏡檢結(jié)果為“金標(biāo)準(zhǔn)”，評(píng)估分析了EC、FISH以及BTA在膀胱癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值，結(jié)果顯示，EC診斷一致性、靈敏度、特異度分別為41.25%、33.33%和78.57%，F(xiàn)ISH診斷一致性、靈敏度、特異度分別為41.25%、34.85%和71.43%，BTA診斷一致性、靈敏度、特異度分別為57.50%、56.06%和64.29%，這提示單獨(dú)檢測(cè)的診斷價(jià)值有限，誤診率、漏診率均較高。學(xué)者王元元[5]等將120例疑似腎盂癌患者納入研究并進(jìn)行了EC、FISH以及BTA檢測(cè)，結(jié)果顯示EC診斷靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度分別為36.73%、77.27%和44.17%，F(xiàn)ISH診斷靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度分別為38.78%、72.73%以及45.00%，BTA診斷靈敏度、特異度和準(zhǔn)確度分別為62.24%、63.64%和62.50%，這與本研究結(jié)果類似。本文進(jìn)一步通過(guò)聯(lián)合診斷發(fā)現(xiàn)，EC+FISH+BTA診斷一致性、靈敏度、特異度分別為80.00%、94.12%和83.33%，明顯高于任一單獨(dú)檢測(cè)方式，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本文作者認(rèn)為，EC是臨床上常用的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)手段，但早期膀胱癌腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)組織較淺，在尿液中找到陽(yáng)性脫落細(xì)胞的概率較低，因而雖然EC特異度高，但敏感度較低[6]。FISH主要利用熒光標(biāo)記進(jìn)行探測(cè)，相對(duì)EC診斷敏感性更高，但FISH受患者個(gè)人因素影響較大，如患者存在泌尿道細(xì)菌感染，則其也會(huì)出現(xiàn)自發(fā)熒光現(xiàn)象，進(jìn)而造成假陽(yáng)性率，影像診斷準(zhǔn)確性[7]。BTA主要是對(duì)特異性蛋白開(kāi)展檢測(cè)，正常個(gè)體的BTA表達(dá)較低，在篩查早期前列腺癌中具有一定價(jià)值，但如果個(gè)體合并泌尿系結(jié)石、泌尿系感染或前列腺增生，則其出現(xiàn)BTA陽(yáng)性的可能性也較高，因而其診斷準(zhǔn)確性也有一定局限性[8]。文中聯(lián)合檢測(cè)的方式綜合了EC、FISH以及BTA的優(yōu)點(diǎn)，在診斷準(zhǔn)確性、靈敏度和特異度方面有了顯著的提高，通過(guò)繪制ROC曲線可以發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)AUC為0.9551，顯著高于其他任一單獨(dú)檢測(cè)，說(shuō)明聯(lián)合檢測(cè)臨床應(yīng)用價(jià)值較高。