面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮提取工藝優(yōu)化及抗氧化性評(píng)價(jià)*

袁鳳娟，于 璐，張 萌，王 巖

(齊齊哈爾大學(xué)食品與生物工程學(xué)院，黑龍江齊齊哈爾 161006)

面包樹(shù)(Artocarpusaltilis)是?？?Moraceae)波羅蜜屬(Artocarpus)的常綠喬木，因其可食用的果實(shí)富含淀粉且具有面包狀質(zhì)地而得名[1-3]。面包樹(shù)在中國(guó)主要分布在海南和臺(tái)灣等地[3,4]。面包樹(shù)的葉、根、莖和皮常被用作熱帶地區(qū)的傳統(tǒng)藥物，能夠緩解哮喘、高血壓、腹瀉等疾病[5,6]，同時(shí)也可用作衣服材料、建筑材料和動(dòng)物飼料[7,8]。面包樹(shù)樹(shù)葉富含類黃酮、三萜類等二次代謝產(chǎn)物，其中以異戊二烯類黃酮含量最為豐富[9,10]。許多異戊二烯類黃酮化合物對(duì)多種細(xì)胞系(如小鼠白血病P388、人體鼻咽癌KB、小鼠L-1210和結(jié)腸38等細(xì)胞)有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性，對(duì)花生四烯酸5-脂氧合酶具有抑制作用以及對(duì)致齲細(xì)菌具有抗菌活性[11]?；钚匝芯拷Y(jié)果表明，面包樹(shù)中的類黃酮單體具有抗氧化、抗炎、抗血小板凝集和抑制組織蛋白酶K等生物活性[12-14]。

類黃酮的提取方法主要包括熱水提取法、堿性水溶液提取法、醇提法、超聲波輔助提取法、微波提取法、酶解法、回流提取法和大孔樹(shù)脂吸附法等[15-17]。其中熱水提取法僅限于提取黃酮苷類物質(zhì)，但提取雜質(zhì)較多，回收率較低。堿性水溶液提取法提取出的類黃酮大多具有酚羥基，呈酸性，易在堿性水溶液或醇溶液浸出，同樣存在雜質(zhì)浸出的問(wèn)題。醇提法是目前主要的提取方法，一般認(rèn)為醇濃度增高有利于總類黃酮提取，常見(jiàn)的有冷浸法、滲漉法和回流法。超聲波輔助提取法也是目前主流的提取方法，利用超聲波的空化作用破壞細(xì)胞膜，促進(jìn)類黃酮釋放。此外，根據(jù)不同原理，常用的提取手段還包括微波提取法、酶解法和大孔樹(shù)脂吸附法等。由于各種方法都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，考慮到提取物的性質(zhì)、提取成本、工藝設(shè)備及類黃酮的提取率等因素，本試驗(yàn)擬采用常溫提取法、回流提取法、超聲波輔助提取法提取面包樹(shù)樹(shù)葉中的總黃酮，通過(guò)比較3種不同的提取方法，以類黃酮得率和含量為考察結(jié)果，得到最佳的類黃酮提取工藝，同時(shí)對(duì)提取后的類黃酮成分進(jìn)行抗氧化活性評(píng)價(jià)，以期為面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮化合物的分離純化和生物活性評(píng)價(jià)奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

面包樹(shù)樹(shù)葉在2019年采集于海南省保亭黎族苗族自治縣保城鎮(zhèn)，將采集到的樹(shù)葉在陰暗條件下自然風(fēng)干，粉碎機(jī)粉碎，晾干貯藏。無(wú)水乙醇、冰醋酸、濃鹽酸、氫氧化鈉、磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉均購(gòu)于天津市凱通化學(xué)試劑有限公司，2,2-二苯基-1-間三硝苯基聯(lián)肼(DPPH)、2,2′-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(ABTS)均購(gòu)于上海麥克林生化科技有限公司，其余試劑均購(gòu)于天津市凱通化學(xué)試劑有限公司且均為分析純。

1.2 儀器設(shè)備

DL-360E型超聲波清洗器(上海之信儀器有限公司)，BSA124S型電子分析天平[賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司]，752型紫外可見(jiàn)光分光光度儀(上海光譜儀器有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制定及類黃酮含量和得率的測(cè)定

參照Meda等[18]的方法繪制蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線。稱取配置的0.2 mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別取1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL于10 mL離心管中，加入0.3 mL 5% NaNO2搖勻，靜置6 min，再加入0.3 mL 10% AlCl3，靜置6 min。然后加入4.0 mL 10% NaOH，用蒸餾水定容至10 mL，靜置15 min，于510 nm處測(cè)定反應(yīng)液的吸光度，以吸光值為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液中蘆丁的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)作標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)曲線方程y=1.2457x+0.0171,R2=0.999 8，計(jì)算樣品中的類黃酮含量。取3組平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算類黃酮得率，類黃酮得率的計(jì)算公式如下：類黃酮得率(%)=類黃酮濃度C(mg/mL)×提取液總體積V(mL)/樣品質(zhì)量M(g)×103×100%。

1.3.2 不同提取方式對(duì)類黃酮得率和含量的影響

準(zhǔn)確稱取面包樹(shù)樹(shù)葉粉末10 g，放入500 mL燒杯中，在固液比1∶8 (g/mL)、乙醇溶液體積分?jǐn)?shù)80%、提取時(shí)間2 h的條件下進(jìn)行提取，分別采用以下3種方式：常溫提取法、回流提取法(70℃)、超聲波輔助提取法(70℃)。將3種提取方式所得的溶液分別在4 000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心30 min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，倒出上清液，水浴加熱蒸干后，放入恒溫干燥箱得到干燥物，每個(gè)處理方式重復(fù)3次。按照1.3.1節(jié)的方法計(jì)算出類黃酮的得率和含量。

1.3.3 單因素試驗(yàn)

準(zhǔn)確稱取干燥的面包樹(shù)樹(shù)葉粉末5 g，放入100 mL燒杯中，選取提取時(shí)間(20 min、40 min、60 min、80 min、100 min)、固液比[1∶4 (g/mL)、1∶6 (g/mL)、1∶8 (g/mL)、1∶10 (g/mL)、1∶12 (g/mL)]、乙醇體積分?jǐn)?shù)(60%、70%、80%、90%、100%)、提取溫度(40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃)、提取次數(shù)(1次、2次、3次、4次、5次) 5個(gè)因素進(jìn)行單因素試驗(yàn)，按照1.3.2節(jié)得到的最佳提取方式進(jìn)行提取，將所得溶液在4 000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心30 min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，倒出上清液，水浴加熱蒸干后放入恒溫干燥箱中得到干燥物，平行3次試驗(yàn)。按照1.3.1節(jié)的方法計(jì)算出類黃酮的得率和含量。

1.3.4 響應(yīng)面優(yōu)化

按照Box-Benhnken中心組合試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，采用Design-Expert 8.0.6軟件設(shè)計(jì)響應(yīng)面試驗(yàn)，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以提取時(shí)間(X1)、乙醇體積分?jǐn)?shù)(X2)、固液比(X3)、提取溫度(X4)為自變量。根據(jù)前期試驗(yàn)，確定提取時(shí)間40-100 min、乙醇體積分?jǐn)?shù)70%-100%、固液比1∶6-1∶12 (g/mL)、提取溫度60-90℃為取值區(qū)間，并以編碼值+1、0、-1分別代表自變量的高、中、低水平。面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率為YA，試驗(yàn)自變量因素編碼及水平見(jiàn)表1。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)自變量因素編碼與水平

1.3.5 DPPH自由基清除率測(cè)定

參照Thaipong等[19]的測(cè)定方法，首先取2 mL不同濃度的樣品溶液與2 mL 0.1 mmol/L的DPPH溶液混勻，在黑暗條件下反應(yīng)30 min，于517 nm測(cè)量吸光度(Ai)；其次將2 mL 不同濃度的樣品溶液與2 mL無(wú)水乙醇混勻，在黑暗條件下反應(yīng)30 min，于517 nm測(cè)量吸光度(Aj)；最后將2 mL 0.1 mmol/L的DPPH無(wú)水乙醇溶液與2 mL無(wú)水乙醇做對(duì)照，在黑暗條件下反應(yīng)30 min，于517 nm測(cè)量吸光度(A0)。DPPH自由基清除率(K)的計(jì)算公式如下：K=[1-(Ai-Aj)/A0]×100%。

1.3.6 ABTS+自由基清除率測(cè)定

參照Re等[20]的測(cè)定方法，首先將7 mmol/L ABTS溶液與13.24 mg過(guò)硫酸鉀混合16 h，生成ABTS+自由基溶液；其次將所得溶液冷藏后稀釋，在734 nm處測(cè)量吸光度(Xi)；然后將1.0 mL不同濃度的樣品溶液與1.9 mL ABTS+自由基溶液混合，放置7 min后，于734 nm處測(cè)量吸光度(Xj)；最后將1.0 mL不同濃度的樣品溶液與1.9 mL 無(wú)水乙醇溶液混合，放置7 min后于734 nm處測(cè)量吸光度(X0)。ABTS+自由基清除率(R)的計(jì)算公式如下：R=[1-(Xi-Xj)/X0]×100%。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Design-Exper 8.0.6、Statistix 8軟件分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)，采用Graphpad Prism 7軟件繪圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取方式對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率和含量的影響

使用不同的提取方式測(cè)定面包樹(shù)樹(shù)葉中的類黃酮得率和含量的結(jié)果如圖1所示。常溫提取下的類黃酮得率為3.23%，類黃酮含量為0.318 5 mg/mL。超聲波輔助提取下的類黃酮得率為4.77%，含量為0.686 8 mg/mL，回流提取方式下的類黃酮得率為4.21%，含量為0.510 8 mg/mL。通過(guò)比較可以看出，超聲波輔助提取法在類黃酮得率及含量?jī)蓚€(gè)指標(biāo)上均高于其他兩種方式，因此采用超聲波輔助提取法進(jìn)行下一步試驗(yàn)。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

2.2 提取時(shí)間對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率和含量的影響

隨著提取時(shí)間的增加，類黃酮得率逐步上升，60 min后處于緩慢的上升趨勢(shì)(圖2)。當(dāng)提取時(shí)間為100 min時(shí)，類黃酮的得率達(dá)到最大值。隨著時(shí)間的增加，類黃酮含量呈先上升后下降的趨勢(shì)，80 min時(shí)類黃酮含量最高，而后下降可能是由于隨著提取時(shí)間的增加，類黃酮含量已趨于飽和狀態(tài)，類黃酮結(jié)構(gòu)改變使其含量下降。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

2.3 固液比對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率和含量的影響

由圖3可知，在固液比為1∶4 (g/mL)時(shí)類黃酮得率較低，因?yàn)榇藭r(shí)溶劑過(guò)少，已達(dá)到飽和狀態(tài)，還有大量溶質(zhì)未溶解。隨著固液比增加，得率呈先上升后逐漸下降的趨勢(shì)，當(dāng)固液比達(dá)到1∶10 (g/mL)時(shí)類黃酮得率最高。在固液比為1∶4-1∶6 (g/mL)時(shí)，隨著溶劑增加，類黃酮含量明顯增多；在固液比為1∶6-1∶8 (g/mL)時(shí)類黃酮含量趨于穩(wěn)定；在固液比為1∶8-1∶12 (g/mL)時(shí)，類黃酮含量呈明顯下降趨勢(shì)，固液比為1∶8 (g/mL)時(shí)類黃酮含量最高。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

2.4 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率和含量的影響

隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大，類黃酮得率和含量均呈先上升后下降的趨勢(shì)，在乙醇體積分?jǐn)?shù)為90%時(shí)，類黃酮得率和含量最高(圖4)。分析原因可能是由于乙醇體積分?jǐn)?shù)越大，與溶質(zhì)碰撞的概率就越大，使類黃酮得率和含量達(dá)到最高，而后乙醇體積分?jǐn)?shù)超過(guò)了類黃酮的最佳提取條件，導(dǎo)致提取效果下降。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

2.5 提取溫度對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率和含量的影響

隨著提取溫度的升高，類黃酮得率呈先上升后下降的趨勢(shì)(圖5)。提取溫度在60-80℃時(shí)處于穩(wěn)定狀態(tài)，在80℃時(shí)類黃酮得率最大，而超過(guò)80℃時(shí)明顯下降，可能是因?yàn)闇囟瘸^(guò)了乙醇的沸點(diǎn)，提取劑容易揮發(fā)，導(dǎo)致提取能力降低，從而影響類黃酮得率。隨著提取溫度的升高，類黃酮含量顯著上升，當(dāng)溫度為70℃時(shí)，類黃酮含量最高，而高于80℃類黃酮含量明顯下降。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

2.6 提取次數(shù)對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率和含量的影響

隨著提取次數(shù)的增加，類黃酮得率逐漸增大，但是在第2次提取后，類黃酮得率雖然上升，但是增速明顯變緩，直到第5次提取時(shí)類黃酮得率達(dá)到最高(圖6)。類黃酮含量隨著提取次數(shù)的增加呈先上升后緩慢下降的趨勢(shì)，分析原因可能是由于第2次提取時(shí)部分類黃酮沒(méi)有從溶劑中完全提取出來(lái)，使之后的類黃酮含量緩慢上升。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

2.7 響應(yīng)面分析法優(yōu)化

從單因素試驗(yàn)結(jié)果可以得出，在面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮提取過(guò)程中，類黃酮得率與含量呈相同的變化趨勢(shì)，因此單因素試驗(yàn)以得率(YA)為指標(biāo)對(duì)整個(gè)工藝進(jìn)行優(yōu)化，Box-Benhnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)結(jié)果如表2所示。

回歸模型顯著性檢驗(yàn)見(jiàn)表3。對(duì)表2中的試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，得到類黃酮得率的二次多元回歸方程(模型)YA=0.084+3.260X1-3.191X2+2.527X3-7.284X4-6.556X1X3-2.482X1X4+3.611X2X3-2.681X2X4-4.408X3X4-0.019X12-0.018X22-0.022X32-0.017X42。對(duì)方程進(jìn)行F檢驗(yàn)可得出，失擬檢驗(yàn)F失擬=5.63F0.01(14，4)=2.39，檢驗(yàn)極顯著，能夠較好地反映面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率與4個(gè)影響因素之間的關(guān)系，同時(shí)復(fù)相關(guān)系數(shù)R2=0.952 6，說(shuō)明采用此模型分析面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮的得率是可行的。

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

表3 回歸模型顯著性分析

回歸方程系數(shù)顯著性檢驗(yàn)如表4所示，X4、X12、X22、X32、X42項(xiàng)對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮得率的影響極顯著(P<0.01)，X1、X2、X1X2、X1X3、X3X4項(xiàng)對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉中類黃酮得率的影響顯著(P<0.05)，其他因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響不顯著。根據(jù)回歸方程系數(shù)顯著性檢驗(yàn)可以得出影響類黃酮提取程度的因素大小為提取溫度(X4)>提取時(shí)間(X1)>乙醇體積分?jǐn)?shù)(X2)>固液比(X3)。

表4 回歸方程系數(shù)顯著性檢驗(yàn)

2.8 交互作用因素分析

響應(yīng)曲面分析與優(yōu)化模型中各因素交互作用對(duì)響應(yīng)值YA的影響如圖7所示。曲面越彎曲說(shuō)明該因素對(duì)類黃酮得率的影響越顯著。從圖7(a)可以看出，提取時(shí)間對(duì)類黃酮得率的影響最大，而乙醇體積分?jǐn)?shù)影響最小。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)不變時(shí)，隨著時(shí)間的增加，類黃酮得率亦增加，說(shuō)明面包樹(shù)樹(shù)葉中的類黃酮逐漸溶解在乙醇中，當(dāng)溶劑達(dá)到飽和狀態(tài)時(shí)，提取得率逐漸下降。從圖7(b)可以看出，當(dāng)溫度不變時(shí)，隨著提取時(shí)間的增大，面包樹(shù)樹(shù)葉中的類黃酮得率亦增加；當(dāng)提取時(shí)間到達(dá)一定值時(shí)，類黃酮得率反而呈下降趨勢(shì)。當(dāng)提取時(shí)間一定時(shí)，溫度越高，得率越大。從圖7(c)可以看出，曲面彎曲程度最小，說(shuō)明固液比和提取溫度的交互作用對(duì)類黃酮得率影響最小。

圖7 乙醇體積分?jǐn)?shù)、提取時(shí)間、提取溫度和固液比對(duì)類黃酮得率影響的等高面和響應(yīng)曲面分析

2.9 響應(yīng)面方程驗(yàn)證

響應(yīng)面軟件得出的最佳提取工藝為乙醇體積分?jǐn)?shù)86.15%、固液比1∶8.3 (g/mL)、提取溫度74.03℃、提取時(shí)間71.33 min，類黃酮得率為8.56%。以此條件進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，類黃酮得率為8.87%，理論與實(shí)際得率誤差為0.31%，此時(shí)類黃酮含量為0.93 mg/mL。

2.10 DPPH自由基清除能力

隨著質(zhì)量濃度的增大，類黃酮提取物和抗壞血酸對(duì)DPPH自由基的清除能力逐漸增強(qiáng)(圖8)。當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)到0.6 mg/mL時(shí)，類黃酮提取物和抗壞血酸對(duì)DPPH自由基的清除能力最大，分別為89.62%和97.89%。類黃酮提取物對(duì)DPPH自由基的IC50值為0.23 mg/mL。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

2.11 ABTS+自由基清除能力

隨著質(zhì)量濃度的升高，面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮提取物和抗壞血酸對(duì)ABTS+自由基表現(xiàn)出強(qiáng)烈的清除作用(圖9)。且當(dāng)質(zhì)量濃度為0.06 mg/mL時(shí)，清除率均達(dá)到最大，類黃酮提取物和抗壞血酸對(duì)ABTS+自由基的清除率分別為90.26%和97.87%。類黃酮提取物對(duì)ABTS+自由基的IC50值為0.024 mg/mL。

Different letters indicate significant differences (P<0.05)

3 討論

采用傳統(tǒng)工藝提取面包樹(shù)樹(shù)葉中的類黃酮成本較高，類黃酮得率和純度也較低，而采用超聲波輔助提取法不僅可以縮短提取時(shí)間，還能提高提取效率，且有效成分也易于分離純化?？追降萚21]采用綠色新型低共熔溶劑結(jié)合超聲波輔助提取法提取廢棄蘋(píng)果葉中總黃酮的效果最好，得率為7.06%。劉小娟等[22]采用超聲波輔助提取衢枳殼總黃酮，得率為6.21%。本研究以常溫提取法、回流提取法和超聲波輔助提取法3種方法提取面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮化合物，發(fā)現(xiàn)超聲波輔助提取法在類黃酮得率及含量?jī)蓚€(gè)指標(biāo)上均高于其他兩種方式，分析其原因可能是超聲波提高了分子的熱運(yùn)動(dòng)頻率，使分子間的碰撞次數(shù)增多，進(jìn)而使溶質(zhì)更易溶于溶劑中。本研究使用超聲波輔助提取法和響應(yīng)面分析法優(yōu)化得到面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮的最佳提取工藝，類黃酮得率為8.87%，表明超聲波輔助提取法能顯著提高面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮的提取量，試驗(yàn)優(yōu)化得到的技術(shù)參數(shù)穩(wěn)定可靠。

提取條件對(duì)提取工藝效果有較大的影響，各提取方法原理不盡相同。根據(jù)本試驗(yàn)得出的最佳提取工藝條件進(jìn)行以下分析：隨著提取時(shí)間的延長(zhǎng)，類黃酮物質(zhì)與溶劑的接觸越充分，得率逐漸升高，但到達(dá)一定時(shí)間后，由于細(xì)胞內(nèi)外類黃酮溶質(zhì)的濃度差達(dá)到平衡，得率逐漸趨于穩(wěn)定；隨著固液比的增大，溶質(zhì)更易于擴(kuò)散至膠束溶液中，膠束溶液用量越大，類黃酮得率越高；提取溫度的升高有利于分子熱運(yùn)動(dòng)速率的提升，有利于類黃酮分子在乙醇中溶解，但溫度過(guò)高，會(huì)加劇乙醇的揮發(fā)，同時(shí)易破壞類黃酮的部分結(jié)構(gòu)；乙醇是公認(rèn)的提取類黃酮的綠色溶劑，根據(jù)“相似相溶”的原理，乙醇濃度在80%左右時(shí)與類黃酮苷元的極性相似[23,24]。

類黃酮化合物廣泛存在于各種植物中，是一類具有發(fā)展前景的天然植物抗氧化劑。唐靜月等[25]研究鐵皮石斛花總黃酮對(duì)DPPH自由基、ABTS+自由基的清除能力發(fā)現(xiàn)，總黃酮含量與抗氧化活性具有相關(guān)性。趙旭萍等[26]研究發(fā)現(xiàn)，多羽鳳尾蕨中總黃酮提取物具有較強(qiáng)的DPPH自由基清除能力。本研究結(jié)果表明，當(dāng)提取物質(zhì)量濃度為0.6 mg/mL時(shí)，面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮對(duì)DPPH自由基、ABTS+自由基的清除率分別為89.62%、90.26%，表明面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮具有良好的抗氧化性，可為后續(xù)相關(guān)抗氧化劑的研究提供參考依據(jù)。但是面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮的具體化學(xué)成分種類及含量仍需進(jìn)一步研究，以期為抗氧化劑的研究奠定理論基礎(chǔ)。

4 結(jié)論

本研究通過(guò)比較3種提取方式得出超聲波輔助提取法為面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮的最佳提取方法，在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，采用響應(yīng)面分析法對(duì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，得出最佳提取工藝條件為乙醇體積分?jǐn)?shù)86.15%、固液比1∶8.3 (g/mL)、提取溫度74.03℃、超聲時(shí)間71.33 min，各個(gè)因素對(duì)面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮提取的影響順序?yàn)樘崛囟?提取時(shí)間>乙醇體積分?jǐn)?shù)>固液比?？寡趸囼?yàn)結(jié)果顯示，面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮對(duì)DPPH和ABTS+自由基具有較高的清除性能，且當(dāng)質(zhì)量濃度達(dá)到最大時(shí)，可得到與抗壞血酸相當(dāng)?shù)目寡趸Ч?。綜上可知，面包樹(shù)樹(shù)葉類黃酮含量與其抗氧化性存在極大的相關(guān)性，具有廣闊的發(fā)展利用空間。