質(zhì)量常數(shù)方法應(yīng)用于麩炒蒼術(shù)飲片等級(jí)評(píng)價(jià)研究△

石佳，章軍，趙小亮，荊文光*，張雪婷，劉靜，劉安，馬雙成

1.中國(guó)食品藥品檢定研究院，北京 100050；2.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥研究所，北京 100700；3.中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，北京 100700

麩炒蒼術(shù)為蒼術(shù)炮制品，生品蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù)Atractylodes lancea（Thunb.）DC.或北蒼術(shù)A.chinensis（DC.）Koidz.的干燥根莖[1]。其味辛、苦，性溫，歸脾、胃、肝經(jīng)，主要功效為燥濕健脾、祛風(fēng)散寒，多用于濕阻中焦、脘腹脹滿等[1]?，F(xiàn)代藥理研究表明，蒼術(shù)具有抗心律失常、降血壓、利尿、保肝、抗炎、抗菌、調(diào)整胃腸運(yùn)動(dòng)功能等作用[2-8]，為中醫(yī)臨床常用藥，具有較高的藥用價(jià)值。但近年來，由于需求量大，過度采挖導(dǎo)致蒼術(shù)的野生資源日趨枯竭。經(jīng)市場(chǎng)調(diào)研，麩炒蒼術(shù)相較生品蒼術(shù)在市場(chǎng)上更受歡迎，分析可能是由于經(jīng)麩炒后《中華人民共和國(guó)藥典》（以下簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》）2020年版中蒼術(shù)含量測(cè)定指標(biāo)成分——蒼術(shù)素顯著升高，從而療效更佳[9]。當(dāng)前，市面上的麩炒蒼術(shù)飲片因其臨床療效顯著、應(yīng)用范圍廣泛、飲片數(shù)量逐漸減少造成供不應(yīng)求的市場(chǎng)狀態(tài)。為避免出現(xiàn)以次充好、價(jià)格背離價(jià)值等不良市場(chǎng)現(xiàn)象，亟須一套合理規(guī)范的麩炒蒼術(shù)飲片質(zhì)量等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)。目前，國(guó)家頒布的《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》[10]中指出，蒼術(shù)藥材均為統(tǒng)貨，只規(guī)定了藥材中部直徑的下限，并未對(duì)其等級(jí)劃分提出相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。故麩炒蒼術(shù)飲片的等級(jí)劃分更需盡快明確，為該飲片質(zhì)量控制、市場(chǎng)的規(guī)范提供參考。

質(zhì)量常數(shù)中藥飲片等級(jí)評(píng)價(jià)方法是一種將傳統(tǒng)的外觀形態(tài)指標(biāo)與現(xiàn)代質(zhì)量控制指標(biāo)相結(jié)合的一種綜合性中藥飲片等級(jí)評(píng)價(jià)方法，已成功應(yīng)用于澤瀉、合歡皮、天麻[11-18]等多味中藥的質(zhì)量等級(jí)評(píng)價(jià)中[19]，具有一定的客觀性、強(qiáng)適應(yīng)性和可量化等特點(diǎn)。本研究將該方法應(yīng)用于麩炒蒼術(shù)飲片的評(píng)級(jí)研究中，可為麩炒蒼術(shù)飲片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定提供思路，為該飲片的有序交易提供幫助，將該方法應(yīng)用于不規(guī)則形狀飲片的質(zhì)量分級(jí)，探究其對(duì)不規(guī)則形狀飲片質(zhì)量評(píng)級(jí)的適用性。

1 材料

1.1 儀器

LC-20AT 型高效液相色譜儀（日本島津公司，DGC-20 A 型在線脫氣系統(tǒng)、SIL-20A 型自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)、CTO-20 A 型柱溫箱、SPD-M20A 型二極管陣列檢測(cè)）；KQ-100 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；BS224S 型十萬分之一電子分析天平、TE212-L 型百萬分之一電子分析天平（德國(guó)賽多利斯公司）；6 孔恒溫水浴鍋（浙江余姚電訊儀表公司）；甲醇（美國(guó)Fisher 公司，色譜純）；純凈水（北京娃哈哈分公司）。

1.2 試藥

對(duì)照品蒼術(shù)素（C13H10O，江西佰草源生物科技有限公司，批號(hào)：BCY-01000，純度≥98%）。

從主要中藥材交易市場(chǎng)及其道地產(chǎn)區(qū)、主產(chǎn)區(qū)的不同廠家收集不同規(guī)格、不同批號(hào)、不同產(chǎn)地的22 批麩炒蒼術(shù)飲片樣品，經(jīng)中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院劉安研究員鑒定均為正品。樣品信息見表1，22 批麩炒蒼術(shù)飲片樣品形態(tài)見圖1。

圖1 22 批麩炒蒼術(shù)飲片樣品的形態(tài)

表1 22批麩炒蒼術(shù)飲片樣品信息

2 方法

2.1 質(zhì)量常數(shù)

質(zhì)量常數(shù)中藥飲片等級(jí)評(píng)價(jià)方法已應(yīng)用于甘草等多味中藥的等級(jí)評(píng)價(jià)中[11-19]，其主要定義為單位中藥中指標(biāo)成分的質(zhì)量與其飲片厚度平方之比，質(zhì)量常數(shù)越大即飲片質(zhì)量越優(yōu)[11]。

該方法中質(zhì)量常數(shù)等級(jí)劃分方法的基本公式針對(duì)不同形態(tài)飲片有不同程度的變化，故需結(jié)合飲片特點(diǎn)選擇公式。蒼術(shù)飲片在《中國(guó)藥典》2020 年版中描述：“本品不規(guī)則類圓形或條形厚片”[1]。在《七十六種藥材商品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)》中指出其均為統(tǒng)貨，但規(guī)定了藥材中部直徑的下限[10]?！吨兴幉纳唐芬?guī)格質(zhì)量鑒別》中描述：“本品以個(gè)肥大、質(zhì)堅(jiān)實(shí)者為佳”[20]?！吨袊?guó)藥典》1963年版、1977年版、《500味常用中藥材的經(jīng)驗(yàn)鑒別》均以個(gè)大、堅(jiān)實(shí)者為佳[21]。中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)《中藥材商品規(guī)格等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)匯編（226種）》[22]中也以單位質(zhì)量?jī)?nèi)所含蒼術(shù)藥材的個(gè)數(shù)為等級(jí)劃分依據(jù)，即個(gè)大者為佳。《200 種中藥材商品電子交易規(guī)格等級(jí)標(biāo)準(zhǔn)》中對(duì)蒼術(shù)飲片等級(jí)劃分的依據(jù)為“飲片直徑及片大者重量的占比”，即飲片越大越好[23]。且在一定范圍內(nèi)，飲片越薄除了彰顯切制工藝的高超外，還具有較好的溶出度。綜上，在蒼術(shù)傳統(tǒng)等級(jí)評(píng)價(jià)中尤以“質(zhì)重片薄者”質(zhì)佳。

質(zhì)量常數(shù)等級(jí)方法在中藥飲片的等級(jí)劃分中考慮飲片體積（外觀大?。┘昂穸龋ㄇ兄乒に嚕? 個(gè)參數(shù)，針對(duì)不同切制方法所導(dǎo)致切面（切面面積，即體積與厚度之比）形態(tài)各異的飲片有不同程度的變形，如頂?shù)镀什荨㈨樀镀炻榈?，以上原藥材形態(tài)均勻，通?？珊?jiǎn)化為圓柱體或類球形，飲片切面可簡(jiǎn)化為類圓形和矩形，其原藥材形態(tài)是飲片的選擇切制方式的重要原因之一。但蒼術(shù)由于不同原藥材間形態(tài)有所差異，故切制方式上“橫切”“縱切”均有，飲片切面形態(tài)較不規(guī)則，且由于傳統(tǒng)品質(zhì)評(píng)價(jià)上以“質(zhì)重者”質(zhì)佳，故該飲片的等級(jí)劃分上不以體積、切面面積為參數(shù)，選取質(zhì)量為參數(shù)，選擇公式（1）計(jì)算。

式中，A為質(zhì)量常數(shù)，m為飲片平均質(zhì)量，c為指標(biāo)成分含量，h為飲片平均厚度。

《中國(guó)藥典》2020 年版中含量評(píng)價(jià)指標(biāo)為蒼術(shù)素，因此，A即飲片優(yōu)劣與m、c成正比，與h成反比。

2.2 麩炒蒼術(shù)樣品形態(tài)參數(shù)的測(cè)定

在麩炒蒼術(shù)的商品規(guī)格中，其飲片質(zhì)重者為佳，結(jié)合公式（1），從每批麩炒蒼術(shù)飲片樣品中隨機(jī)選取3 組，每組選取100 個(gè)麩炒蒼術(shù)飲片為測(cè)量對(duì)象，求出其m；以螺旋測(cè)微器測(cè)量其h。

2.3 麩炒蒼術(shù)樣品的含量測(cè)定

蒼術(shù)素為作為蒼術(shù)中的主要有效成分，具有健脾功效，可能是蒼術(shù)健脾的物質(zhì)基礎(chǔ)之一，也是蒼術(shù)麩炒后含量顯著升高的成分[9]?！吨袊?guó)藥典》2020年版中規(guī)定含蒼術(shù)素不得少于0.30%[1]。

2.3.1 色譜條件選用Thermo BDS HYPERSIL C18色譜柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇-水（79∶21）為流動(dòng)相；柱溫：40 ℃；流速：1 mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：340 nm。理論板數(shù)按蒼術(shù)素峰計(jì)算應(yīng)不低于5000[1]。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 取蒼術(shù)素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成質(zhì)量濃度為20 μg·mL-1的溶液，即得。

2.3.3 供試品溶液的制備 取本品粉末（過三號(hào)篩）約0.2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率：250 W，頻率：40 kHz）1 h，放冷，再稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3.4 測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。

3 結(jié)果與分析

3.1 麩炒蒼術(shù)飲片樣品的形態(tài)參數(shù)測(cè)定結(jié)果

麩炒蒼術(shù)飲片的形態(tài)參數(shù)結(jié)果詳見表2，該飲片的厚度為0.34～0.53 cm，變化幅度較小，可知切制工藝的差異性較小，分析可能與麩炒蒼術(shù)飲片質(zhì)地軟硬相關(guān)，從而便于控制切制規(guī)格。22 批麩炒蒼術(shù)飲片中2 和17 號(hào)樣品厚度最大，9 號(hào)樣品厚度最小，其厚度分布圖詳見圖2。麩炒蒼術(shù)飲片平均質(zhì)量為0.63～1.36 g，變化幅度較大，分析可能與該飲片為切制前藥材個(gè)體差異較大相關(guān)。22 批飲片中14號(hào)樣品質(zhì)量最小，3 號(hào)樣品質(zhì)量最大，其質(zhì)量分布圖見圖3。

圖2 22批麩炒蒼術(shù)飲片的厚度分布

表2 22批麩炒蒼術(shù)的形態(tài)參數(shù)及計(jì)算結(jié)果

3.2 麩炒蒼術(shù)飲片指標(biāo)成分含量測(cè)定結(jié)果

在《中國(guó)藥典》2020 年版中規(guī)定含蒼術(shù)素不得少于0.20%[1]。對(duì)所收集的22 批麩炒蒼術(shù)樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果顯示，該22 批麩炒蒼術(shù)飲片均符合《中國(guó)藥典》2020 年版規(guī)定，其質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.22%～0.52%，變化幅度差異較大。22 批麩炒蒼術(shù)飲片中含量最高的為16號(hào)樣品，最低為19號(hào)樣品，最高者與最低者相差1倍，見表2，含量分布圖見圖4。

3.3 質(zhì)量常數(shù)

22批麩炒蒼術(shù)飲片的質(zhì)量常數(shù)計(jì)算結(jié)果見表2，若將飲片分為3 個(gè)等級(jí)，一等品為質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果在前20%的飲片，二等品為質(zhì)量評(píng)價(jià)結(jié)果在20%～50%的飲片，其余為三等品，其對(duì)應(yīng)的評(píng)定結(jié)果：一等麩炒蒼術(shù)A≥2.70，二等麩炒蒼術(shù)1.69≤A＜2.70，三等麩炒蒼術(shù)A＜1.69。22 批麩炒蒼術(shù)飲片中有1 批符合一等品標(biāo)準(zhǔn)，11 批符合二等品標(biāo)準(zhǔn)，其余為三等品。22 批麩炒蒼術(shù)飲片的質(zhì)量分布圖、枸櫞酸含量分布圖、質(zhì)量常數(shù)分布圖、百分質(zhì)量常數(shù)見圖3～6。

圖3 22批麩炒蒼術(shù)飲片的質(zhì)量分布

圖4 22批麩炒蒼術(shù)飲片的枸櫞酸含量分布

圖5 麩炒蒼術(shù)飲片的質(zhì)量常數(shù)分布

圖6 麩炒蒼術(shù)飲片的百分質(zhì)量常數(shù)分布

通過分析麩炒蒼術(shù)飲片各評(píng)價(jià)指標(biāo)與等級(jí)關(guān)系，討論3 個(gè)關(guān)鍵指標(biāo)對(duì)麩炒蒼術(shù)飲片等級(jí)劃分的影響，結(jié)果見表3。從數(shù)據(jù)可知，c在等級(jí)間差異性不大，m/h、h在3 個(gè)等級(jí)間差異較為明顯，是影響飲片等級(jí)的關(guān)鍵指標(biāo)，即飲片“質(zhì)重片薄者”質(zhì)佳，與傳統(tǒng)等級(jí)劃分相一致。從單批飲片來看，質(zhì)量最大的3，雖然含量也較高，但由于切制太厚，綜合評(píng)價(jià)遜于9；16 雖然含量較高，但由于其質(zhì)量較小，被評(píng)為三等飲片。該飲片等級(jí)劃分研究采用質(zhì)量常數(shù)等級(jí)方法將外觀形態(tài)指標(biāo)和內(nèi)在含量指標(biāo)相結(jié)合，合理地將其劃分為3 個(gè)等級(jí)，豐富數(shù)據(jù)不受時(shí)間空間限制，做到全程量化，利于分析、比較、傳承，使等級(jí)劃分具有全面性、科學(xué)性、客觀性。

表3 麩炒蒼術(shù)飲片各評(píng)價(jià)指標(biāo)與等級(jí)關(guān)系

4 討論

蒼術(shù)初以“術(shù)”載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品，其歷史悠久。蒼術(shù)應(yīng)用于諸多古代經(jīng)典名方中，如除濕胃苓湯、清上蠲痛湯、完帶湯，并在此次新型冠狀病毒肺炎中醫(yī)防治方案中作為主要中藥，其應(yīng)用甚廣、需求量較大，但由于人為因素及蒼術(shù)自身的生物學(xué)特性，如授粉障礙及種群自身恢復(fù)能力差等原因[24]，使得蒼術(shù)的野生資源日趨枯竭，造成供不應(yīng)求的市場(chǎng)狀態(tài)，市場(chǎng)上也出現(xiàn)一些以次充好的現(xiàn)象。因此，建立一套合理規(guī)范的麩炒蒼術(shù)飲片的質(zhì)量等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)及劃分方法為當(dāng)前市場(chǎng)迫切所需，也為該飲片質(zhì)量控制、市場(chǎng)的規(guī)范提供依據(jù)與參考。

目前，對(duì)麩炒蒼術(shù)飲片的等級(jí)劃分較少，但研究者對(duì)蒼術(shù)藥材及其飲片的等級(jí)劃分、質(zhì)量控制研究諸多，如佘金明等[25]利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)蒼術(shù)揮發(fā)油中的化學(xué)成分進(jìn)行分析控制。沈娟等[26]以氣相色譜法（GC）測(cè)定揮發(fā)油控制不同采收期蒼術(shù)質(zhì)量；許俊華等[27]應(yīng)用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀進(jìn)行無機(jī)元素測(cè)定分析，對(duì)不同產(chǎn)地蒼術(shù)進(jìn)行質(zhì)量控制；屈愛桃等[28]鑒別及考察蒼術(shù)藥材，采用薄層色譜法（TLC）建立蒼術(shù)藥材薄層色譜指紋圖譜。但以上研究主要以內(nèi)在成分作為依據(jù)，對(duì)外觀形態(tài)有所忽略。朱思敏等[29]確定的等級(jí)劃分標(biāo)準(zhǔn)基本體現(xiàn)了本草記載及市場(chǎng)上蒼術(shù)藥材以“個(gè)大、雜質(zhì)少、有效成分含有量高”為優(yōu)的分級(jí)觀點(diǎn)，在把控外觀性狀的同時(shí)，對(duì)蒼術(shù)藥材的內(nèi)在質(zhì)量進(jìn)行控制，與本研究思路相似，但該研究對(duì)于蒼術(shù)外觀形態(tài)的把控上略為復(fù)雜，且指標(biāo)間存在一定重疊性，且未能應(yīng)用于飲片。

中藥飲片作為藥品的一部分，具有專屬性、復(fù)雜性、質(zhì)量嚴(yán)格性，不能只以商品規(guī)格的角度對(duì)其進(jìn)行等級(jí)劃分。質(zhì)量常數(shù)中藥飲片等級(jí)劃分方法將傳統(tǒng)指標(biāo)、現(xiàn)代質(zhì)量控制指標(biāo)進(jìn)行量化并有機(jī)結(jié)合，結(jié)果清晰明了、操作簡(jiǎn)單易行，利于理解、應(yīng)用、比較和傳承。在對(duì)麩炒蒼術(shù)飲片的等級(jí)劃分過程中，經(jīng)質(zhì)量常數(shù)等級(jí)劃分方法所分的飲片等級(jí)與其出廠等級(jí)不一致，如16、21≥原等級(jí)為一等品，質(zhì)量常數(shù)等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果分別為三等品、二等品。17≥原等級(jí)為二等品，質(zhì)量常數(shù)等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果為三等品。18≥原等級(jí)為三等品，質(zhì)量常數(shù)等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果為二等品。13、19、20 號(hào)樣品原等級(jí)為統(tǒng)貨，質(zhì)量常數(shù)等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果分別為二等品、三等品、三等品。14、15 號(hào)樣品原等級(jí)為選貨，質(zhì)量常數(shù)等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果均為三等品。結(jié)合等級(jí)評(píng)價(jià)結(jié)果中各參數(shù)可知，等級(jí)劃分結(jié)果與原廠不符，結(jié)合實(shí)際情況分析原因：一是飲片等級(jí)劃分評(píng)價(jià)指標(biāo)不一致，原廠的等級(jí)劃分指標(biāo)僅為外觀形態(tài)，而質(zhì)量常數(shù)方法評(píng)價(jià)指標(biāo)包括自然生長(zhǎng)形態(tài)、切制工藝及指標(biāo)成分含量；二是目前國(guó)家并無相關(guān)等級(jí)劃分準(zhǔn)則，故各廠家等級(jí)劃分方法及結(jié)果各異。蒼術(shù)飲片以質(zhì)量常數(shù)方法進(jìn)行等級(jí)劃分，在一定程度上將飲片的外觀形態(tài)及內(nèi)在指標(biāo)成分含量相結(jié)合，為飲片等級(jí)綜合性評(píng)價(jià)提供新的參考。

本研究結(jié)果旨在為麩炒蒼術(shù)飲片質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)的建立、優(yōu)質(zhì)優(yōu)價(jià)的實(shí)現(xiàn)提供一定的參考，在對(duì)麩炒蒼術(shù)飲片等級(jí)評(píng)價(jià)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行豐富的同時(shí)，也將質(zhì)量常數(shù)中藥飲片等級(jí)劃分方法的應(yīng)用范圍進(jìn)一步擴(kuò)大，證明該方法的科學(xué)性、合理性，為下一步實(shí)驗(yàn)研究提供一定基礎(chǔ)與支撐。