加工方式對牛肉蛋白質(zhì)氧化的影響

代媛媛，李美瑩，李 琳，陳瑞琦，查恩輝

（錦州醫(yī)科大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院，遼寧錦州121000）

牛肉中蛋白質(zhì)是人類能量和必需氨基酸的重要來源。加熱溫度是影響牛肉性能和微生物滅活階段的關(guān)鍵因素之一。高壓能有效消除致病菌和食品腐敗菌，提高食品的安全性并延長保質(zhì)期[1]。蛋白質(zhì)在熱處理過程中會經(jīng)歷結(jié)構(gòu)修飾如氧化、聚集、降解和變性。蛋白質(zhì)氧化涉及許多其他精確的化學(xué)修飾，如色氨酸損失、羰基化、羧化和交聯(lián)的形成[2?4]。

近幾年，國內(nèi)外學(xué)者針對肉類在加熱及高壓過程中蛋白質(zhì)氧化測定的部分指標(biāo)研究較廣。曹瑩瑩[5]研究發(fā)現(xiàn)隨著壓力增加，肌球蛋白的疏水基團和巰基含量逐漸增加。Wan等[6]研究結(jié)論得出，溫度從80 ℃升高到90 ℃時，水溶性膠原蛋白含量增加，對牛肉制品的風(fēng)味、口感、嫩度和總體偏好無不良影響。Pang等[7]發(fā)現(xiàn)蒸煮過程中肌球蛋白和肌動蛋白含量的變化相似，說明肌原纖維蛋白的變性在蒸煮損失中起著關(guān)鍵作用。結(jié)果表明，肉類的蒸煮溫度和蛋白質(zhì)變性之間有很強的相關(guān)性，說明加熱溫度引起了肉類蛋白質(zhì)的變化。Scholliers等[8]研究發(fā)現(xiàn)在加熱過程中，牛肉蛋白凝膠特性與疏水相互作用的形成有關(guān)，加熱后肉蛋白表面疏水性的增加證實了這一點。Han等[9]在20~74 ℃條件下測定了蛋白質(zhì)的構(gòu)象和化學(xué)鍵，結(jié)果表明，在55 ℃以上，表面疏水性顯著增強，游離巰基含量降低。Edyta等[10]研究發(fā)現(xiàn)在壓力處理下會導(dǎo)致肉中蛋白質(zhì)的變性和聚集現(xiàn)象。Stéphanie等[11]發(fā)現(xiàn)當(dāng)壓力超過300 MPa時，蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物增加，結(jié)構(gòu)發(fā)生不可逆變化。熱處理對牛肉蛋白質(zhì)氧化、結(jié)構(gòu)和性能的影響國內(nèi)外報道較少，不同部位的牛肉品質(zhì)不同，適宜的加工方法也不同。

因此，本文研究對熱加工過程中不同溫度和70 kPa高壓下不同保壓時間對牛肉中羰基含量、巰基含量、蛋白粒徑、表面疏水性，十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sodium dodecyl sulfate - polyacrylamide gel electrophoresis，SDS-PAGE）和蛋白二級結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，以探究蛋白質(zhì)氧化在熱加工過程中的變化規(guī)律，為選擇合適的原料，實現(xiàn)牛肉價值最大化，以及生產(chǎn)出不同加工方法下質(zhì)優(yōu)價廉的標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

牛腱子、牛肩 錦州新瑪特超市；濃鹽酸、磷酸氫二鈉、氯化鈉、磷酸二氫鈉、鹽酸胍、氯化鎂、甲醇、溴化鉀、冰醋酸、乙醇、甘油、尿素、考馬斯亮藍(lán)染色液 唐山三鼎化工有限公司；溴酚藍(lán)、Tris、β-巰基乙醇、乙酸乙酯、2,4-二硝基苯肼、三氯乙酸、乙二胺四乙酸（EDTA）、2-硝基苯甲酸（DTNB）、十二烷基硫酸鈉（SDS） 煙臺健碩化工有限公司；所有試劑均為分析純。

JD-3電子天平 沈陽龍騰電子有限公司；KH20R高速冷凍離心機 湖南凱達(dá)科學(xué)儀器有限公司；CH6數(shù)字顯示溫度計 上海亞度電子科技有限公司；JJ-2高速勻漿機 常州潤華電器有限公司；HH-4D恒溫水浴鍋 上海比朗儀器制造有限公司；UT6紫外可見分光光度計 屹譜儀器制造有限公司；DYCZ-25D型雙垂直電泳 濟南好來寶醫(yī)療器材有限公司；PHSJ-5型pH計 上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；NKT-N9納米粒度儀 山東耐克特分析儀器有限公司；Great20傅立葉紅外光譜儀 中科瑞捷科技有限公司；FD-1A-50冷凍干燥機 上海爭巧科學(xué)儀器有限公司；高壓鍋 美的公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品預(yù)處理 清洗牛肉，然后去除脂肪和筋膜，切成3.0 cm×4.0 cm×5.0 cm的長方體，放在4 ℃的冰箱備用。處理牛肉分別采用兩種加工方式。

水浴加熱組：水浴鍋溫度設(shè)為 40、50、60、70、80、90、100 ℃，加熱30 min。

高壓保溫組：壓力為70 kPa，溫度為110 ℃，保壓時間設(shè)為15、20、25、30、35 min。

1.2.2 肌原纖維蛋白的提取 參考Zhong等[12]方法稍加修改。將樣品冷卻至室溫，稱取10 g，加入20 mmol/L磷酸鹽緩沖液（含1 mmol/L EDTA，0.1 mol/L NaCl和pH7.0）定容至100mL，混合，搖勻，勻漿后在6000 r/min和4 ℃下離心10 min，取沉淀，加入50 mL 20 mmol/L磷酸鹽緩沖液，在上述條件下離心，重復(fù)3次，然后加入25 mmol/L磷酸鹽緩沖液（含0.6 mol/L NaCl，pH7.0），使沉淀均勻。用四層紗布過濾，濾液為肌原纖維蛋白溶液。以牛血清蛋白為標(biāo)準(zhǔn)，在280 nm處測定吸光度，用雙縮脲法測蛋白濃度（mg/mL）。經(jīng)考察，回歸方程y=0.0501x+0.0022，R2=0.9998。

1.2.3 羰基含量的測定 參考Marco等[13]方法稍加修改。取0.1 mL蛋白溶液和0.5 mL二硝基苯肼（DNPH）（溶劑為2 mol/L HCl），空白樣品不加DNPH，暗室靜置1 h（每20 min搖動1次），加5 mL 20%三氯乙酸，搖勻后，在10000 r/min，15 min條件下4 ℃離心，棄上清。沉淀用1 mL乙酸乙酯-乙醇溶液（1:1）洗滌3次。加入1 mL 6 mol·L?1鹽酸胍溶液，在37 ℃水浴20 min，然后10000 r/min下離心5 min。在370 nm波長處測定吸光度，羰基含量通過22000 L/（mol·cm）的摩爾吸收率計算。

式中：A370為370 nm下的吸光度106為摩爾基礎(chǔ)單位；C為測得的蛋白濃度（mg/mL）。

1.2.4 巰基含量的測定 參考Yang等[14]方法稍加修改。取0.1 mL蛋白溶液、1 mL 50 mmol·L?1Tris-HCl緩沖液（含有1mmol·L?1EDTA、6mol·L?1鹽酸胍，pH8.3）以及10 μL 10mmol·L?1DTNB，混合搖勻，室溫下靜置25 min，在412 nm處測定吸光度。巰基含量由13600 L/（mol·cm）的摩爾吸收率計算。

式中：A412為412 nm下的吸光度；106為摩爾基礎(chǔ)單位；C為測得的蛋白濃度（mg/mL）。

1.2.5 粒徑的測定 參考Zhang等[15]方法稍加修改。利用納米粒度儀測定蛋白質(zhì)粒徑。以去離子水為分散劑，粒子的折射率為1.414，吸收率為0.001。

1.2.6 表面疏水性的測定 參考Zhu等[16]方法稍加修改。取1 mL蛋白溶液，加入40 μL溴酚藍(lán)溶液（1 mg/mL），振蕩10 min，4 ℃下2000 r/min離心15 min，取上清稀釋10倍，在595 nm處測定吸光度?？瞻讓φ諡?0 mmol/L磷酸鹽緩沖液。表面疏水性計算公式如下：

式中：A空白為空白組的吸光度；A樣品為樣品組的吸光度。

1.2.7 SDS-PAGE凝膠電泳 參考Shi等[17]方法稍加修改。電泳采用10%分離膠和5%濃縮膠。每個時期的上樣液量為5 μL，初始電泳電壓為75 V，樣品進(jìn)入分離膠后，升壓至100 V，電泳結(jié)束后剝離膠片，考馬斯亮藍(lán)染色30 min，再用脫色液脫色3次。

1.2.8 傅里葉變換紅外光譜測定 參考Kun等[18]方法稍加修改。蛋白樣品在?20 ℃冷凍5 h，然后在冷凍干燥機中干燥12 h，取1 mg樣品放入研缽再和100 mg溴化鉀充分研磨成細(xì)粉。在模具內(nèi)使分布均勻，將模具水平放置在模座上，加壓至10 t/cm2，保持1 min，用傅里葉紅外光譜儀進(jìn)行分析，條件為：光譜范圍：500~4000 cm?1，分辨率：4 cm?1，掃描積累32次。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Office 2019進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及圖表繪制，計算標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同加熱方式對蛋白羰基含量的影響

羰基的形成是蛋白質(zhì)氧化的一個明顯標(biāo)志，反映了蛋白氧化損傷的程度。由圖1可見，隨著溫度的升高和保壓時間的延長，蛋白質(zhì)羰基含量逐漸增加。在蒸煮和高壓加熱過程中，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，大部分肌漿蛋白、肌球蛋白和肌動蛋白變性，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)遭到破壞，導(dǎo)致鐵等過渡金屬離子釋放?；钚匝鹾蜔o氧自由基是由催化劑或前體產(chǎn)生的，包括一些血紅素、過渡金屬離子和各種氧化酶。這些自由基攻擊蛋白質(zhì)，催化蛋白質(zhì)氧化，導(dǎo)致羰基含量增加[19]。羰基值的增加也可能是脂質(zhì)氧化的產(chǎn)物。肽骨架裂解成短肽和蛋白質(zhì)也可以與還原糖反應(yīng)生成羰基。熱處理后的牛肉肌原纖維蛋白發(fā)生蛋白質(zhì)氧化反應(yīng)，由于水浴持續(xù)加熱時間較長，更容易誘導(dǎo)肉中脂肪氧化和蛋白質(zhì)羰基的形成。但高壓下升溫速度快，可能導(dǎo)致脂肪氧化和羰基氧化水平低于水浴加熱。牛腱子的羰基含量較牛肩低，是由于牛腱子脂肪含量較牛肩低，所以氧化程度較低。Xiong等[20]發(fā)現(xiàn)超高壓與熱處理相結(jié)合時，豬肉脂肪氧化程度增加，這可能是蛋白質(zhì)氧化的誘因之一。

圖1 不同加熱方式對蛋白羰基含量的影響Fig.1 Effect of different heating methods on protein carbonyl content

2.2 不同加熱方式對蛋白巰基含量的影響

肌原纖維蛋白中存在大量巰基，氧化條件下易轉(zhuǎn)化為二硫鍵，造成巰基含量下降。所以，巰基對維持蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性起著重要作用。

由圖2A可知，隨著溫度的升高，巰基含量先升高后降低。熱加工過程影響肌動球蛋白的解離程度，40~60 ℃可以導(dǎo)致肌動蛋白解離，60 ℃是促進(jìn)肌動蛋白解離的最佳溫度，因此60 ℃時巰基含量最高[21]。當(dāng)溫度繼續(xù)升高時，肌動球蛋白構(gòu)象改變，巰基被氧化成二硫鍵，使巰基含量降低。從圖2B可以看出，巰基含量隨著保壓時間的增加而減少。這表明肌原纖維蛋白在高壓處理下打開，巰基通過二硫鍵聚集。因為在高壓處理下巰基暴露在分子表面，與空氣中的氧充分結(jié)合形成二硫鍵致使巰基減少[22]。萬紅兵等[23]發(fā)現(xiàn)，在牛排的油炸過程中，熱處理對巰基和二硫鍵的含量有顯著影響，牛肉蛋白中巰基含量先升高后降低。

圖2 不同加熱方式對蛋白巰基含量的影響Fig.2 Effect of different heating methods on protein sulfhydryl content

2.3 不同加熱方式對蛋白粒徑的影響

粒徑是反應(yīng)蛋白聚集狀態(tài)的一個指標(biāo)，在一定程度上可以反映反應(yīng)蛋白在降解過程中的狀態(tài)。

由圖3可知，隨著溫度的升高和保壓時間的延長，蛋白質(zhì)的粒徑逐漸增大。在80 ℃、保壓25 min時，牛腱子的粒徑最大，而在70 ℃、保壓25 min時，牛肩的粒徑最大；繼續(xù)加熱，蛋白質(zhì)的粒徑逐漸減小，這進(jìn)一步說明在熱加工過程中，蛋白質(zhì)在加熱的作用下首先形成聚集現(xiàn)象。另一方面，然后持續(xù)加熱，蛋白質(zhì)變性，使其中一些不耐熱的化學(xué)鍵發(fā)生斷裂，減弱了交聯(lián)作用，結(jié)果蛋白質(zhì)聚集體被部分破壞，因此粒徑變小[24]。在高壓過程中，當(dāng)時間在15~25 min時，蛋白質(zhì)進(jìn)一步變性，蛋白質(zhì)膨脹程度增加，變性蛋白通過分子內(nèi)或分子間的相互作用增強了蛋白質(zhì)的聚集程度，形成的聚集物尺寸增大，導(dǎo)致蛋白質(zhì)粒徑增大；隨著時間的進(jìn)一步增加，蛋白質(zhì)的聚集率增加，打破了蛋白質(zhì)變性率和聚集率之間的平衡，形成的聚集體無序，不能形成較大的聚集體，或者形成的聚集體不穩(wěn)定，不能保持原來的形態(tài)，導(dǎo)致粒徑減小[25]。

圖3 不同加熱方式對蛋白粒徑的影響Fig.3 Effect of different heating methods on protein particle size

2.4 不同加熱方式對蛋白表面疏水性的影響

蛋白質(zhì)的表面疏水性反映其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性，并影響蛋白凝膠形成。疏水相互作用對蛋白凝膠的形成和蛋白結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性起著非常重要的作用。

由圖4A得出，隨著溫度的升高，蛋白質(zhì)的表面疏水性逐漸增加，在80 ℃時牛腱子達(dá)到最大值，在70 ℃時牛肩達(dá)到最大值，然后隨溫度升高而降低。其原因可能是隨著溫度的升高，蛋白質(zhì)疏水側(cè)鏈的暴露程度增加，使蛋白質(zhì)的水溶性環(huán)境變?yōu)槭杷原h(huán)境，導(dǎo)致表面疏水性增加。70~80 ℃后肌球蛋白變性，肌原纖維蛋白聚集體與側(cè)鏈之間發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生沉淀[26?27]。隨著蛋白質(zhì)聚集度的增加，少量疏水基團被再次包埋，疏水基團的結(jié)合降低了表面疏水性。從圖4B可以看出，蛋白質(zhì)的疏水性隨著保壓時間的增加而增加。壓力使肌原纖維蛋白展開，暴露出蛋白質(zhì)的疏水殘基，同時壓力可誘導(dǎo)蛋白質(zhì)表面出現(xiàn)特殊氨基酸殘基，導(dǎo)致疏水性增加。表面疏水性變化也可能是因為蛋白質(zhì)的降解。

圖4 不同加熱方式對蛋白表面疏水性的影響Fig.4 Effect of different heating methods on hydrophobicity of protein surface

2.5 SDS-PAGE凝膠電泳結(jié)果

肌原纖維蛋白主要由副肌球蛋白（100 kDa）、肌鈣蛋白（75 kDa）、肌動蛋白（43 kDa）、肌球蛋白重鏈（200 kDa）等組成。

肌原纖維蛋白經(jīng)高溫高壓后進(jìn)一步降解，造成其變性。如圖5所示，隨著溫度升高，牛腱子中的肌原纖維蛋白出現(xiàn)降解和聚集，導(dǎo)致許多電泳條帶在245~75 kDa范圍內(nèi)明顯模糊，甚至消失。隨著溫度的升高，200 kDa處的肌球蛋白重鏈帶顏色逐漸變淺，在50~80 ℃時可以看到條帶密度的明顯變淺，這可能是由于高溫加熱，導(dǎo)致蛋白質(zhì)之間產(chǎn)生了相互作用，在90~100 ℃溫度下條帶基本消失，表明溫度過高使得蛋白質(zhì)的變性和聚集速度加快，肌球蛋白重鏈結(jié)構(gòu)被破壞，使其分解，說明肌球蛋白重鏈具有不耐熱性，這可能是由于某些蛋白質(zhì)隨著溫度的升高而變性所致，高溫使肌球蛋白重鏈分解，形成分子量小的肌球蛋白輕鏈，肌動蛋白也分解成原肌球蛋白，造成條帶顏色變淺。另外，由于肌球蛋白重鏈在加熱后聚集成大分子，不能進(jìn)入電泳條帶，因此在凝膠濃縮液的上界面無法觀察到大分子蛋白形成的條帶，使蛋白條帶顏色變淺[28?29]。而在40 ℃時43 kDa處的肌動蛋白略有降解，但隨溫度的升高，沒有觀察到肌動蛋白條帶的顯著差異，可能是肌動蛋白通過非共價鍵與肌球蛋白相互作用，如疏水相互作用。也可能是肌動蛋白聚合導(dǎo)致變性，形成聚集體，氫鍵、疏水相互作用、二硫鍵和由內(nèi)源轉(zhuǎn)化酶誘導(dǎo)的?-（γ-谷氨酰）賴氨酸鍵是形成蛋白質(zhì)聚集體的主要化學(xué)鍵。進(jìn)一步說明肌球蛋白的熱穩(wěn)定性沒有肌動蛋白比高[30]。此外，35~45 kDa范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)條帶數(shù)量隨溫度升高急劇增加，這表明在此期間也發(fā)生了蛋白水解降解。

圖5 不同溫度下牛腱子蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳圖Fig.5 SDS-PAGE electrophoresis of bovine tendon protein at different temperatures

如圖6所示，隨著保壓時間的延長，肌球蛋白重鏈條帶顏色變淺甚至消失，可能是肌球蛋白重鏈對壓力不穩(wěn)定，高壓導(dǎo)致這些蛋白質(zhì)降解，抑制肌球蛋白的交聯(lián)，從而使肌原纖維蛋白解聚作用，溶解度降低。而肌動蛋白的條帶一直存在，在15 min時略有降解，隨后顏色加深，在35 min時條帶顏減弱，表明肌動蛋白在高壓加熱過程中部分分解。Zhang等[31]的電泳結(jié)果表明，鰱魚魚糜凝膠在加熱過程中MHC帶的強度隨著加熱溫度和時間的增加而急劇下降，而25~35 kDa范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)條帶數(shù)量急劇增加。

圖6 不同保壓時間對牛腱子蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳圖Fig.6 SDS-PAGE electrophoresis of aponeurosis protein with different pressure holding time

不同熱處理引起蛋白質(zhì)降解的差異與傳熱介質(zhì)有關(guān)，不同于蒸煮加熱過程中由外到內(nèi)的傳熱方式，高壓使極性分子在加熱過程中通過摩擦產(chǎn)生熱量，而高壓加熱速率較快，因此結(jié)構(gòu)破壞最為嚴(yán)重，造成蛋白質(zhì)降解嚴(yán)重。然而，SDS-PAGE結(jié)果顯示，在蒸煮過程中，蛋白質(zhì)的降解相對溫和。

2.6 不同加熱方式對肌原纖維蛋白二級結(jié)構(gòu)的影響

常見的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)可分為α-螺旋、β-折疊、β-螺旋和無規(guī)卷曲。在高溫高壓作用下，蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，造成不可逆轉(zhuǎn)變。蛋白質(zhì)紅外光譜主要集中在1600~1700 cm?1的酞胺Ⅰ帶，這是蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)最敏感的區(qū)間，常用來分析蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)[32]。

由圖7可知，牛肉肌原纖維的酰胺A帶由3448 cm?1向3423 cm?1移動，這可能是酰胺A帶的N-H伸縮振動和氫鍵締合的形成，改變了位移，說明氫鍵產(chǎn)生變化。不同溫度處理組和不同保壓時間組的蛋白酰胺Ⅰ帶的吸收峰形狀相似，但兩個波數(shù)位置不同，說明傳統(tǒng)水浴加熱肌球蛋白的二級結(jié)構(gòu)不同于高壓肌球蛋白。隨著溫度的增加和保壓時間的延長，不同溫度下牛腱子酰胺Ⅰ帶從1658 cm?1變?yōu)?616 cm?1，牛肩酰胺Ⅰ帶從1656 cm?1變?yōu)?618 cm?1，而高壓下牛腱子酰胺Ⅰ帶從1653 cm?1變?yōu)?622 cm?1，牛肩酰胺Ⅰ帶從1652 cm?1變?yōu)?622 cm?1，說明加熱后牛肉肌原纖維的α-螺旋結(jié)構(gòu)先轉(zhuǎn)變?yōu)闊o規(guī)則卷曲結(jié)構(gòu)，再轉(zhuǎn)化為β-折疊。加熱導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性，從而破壞羰基和氨基之間的氫鍵，α-螺旋分裂，可能向無規(guī)則卷曲和β-折疊轉(zhuǎn)化。在加熱后期，水分子隨著二級結(jié)構(gòu)的膨脹而遷移，疏水基團和巰基的暴露提供了較大的空間。此時，蛋白質(zhì)逐漸聚合，β-折疊結(jié)構(gòu)開始分解，分子間的疏水作用形成無規(guī)則卷曲[33]。可以看出，隨著熱處理溫度的升高和保壓時間的延長，酰胺Ⅰ帶的峰值位置向低的波數(shù)移動，這反映了蛋白質(zhì)在熱處理過程中的變性和蛋白質(zhì)從α-螺旋轉(zhuǎn)化為無規(guī)則卷曲和β-折疊。

圖7 不同加熱方式對肌原纖維蛋白二級結(jié)構(gòu)的影響Fig.7 Effect of different heating methods on secondary structure of myofibrillar protein

3 結(jié)論

隨著溫度的升高，蛋白羰基含量逐漸增加，巰基含量呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢，蛋白粒徑增大，蛋白表面疏水性先增大后減小。隨著保壓時間的延長，蛋白羰基含量增加，巰基含量減少，蛋白粒徑先增大后減少，蛋白疏水性逐漸增加。SDS-PAGE研究發(fā)現(xiàn)，隨著溫度升高，肌球蛋白重鏈發(fā)生了降解明顯，而肌動蛋白加熱后開始略有降解，隨著溫度升高沒有明顯的變化趨勢；在高壓條件下，肌球蛋白重鏈條帶逐漸減弱甚至消失，而在不同保壓時間肌動蛋白條帶無明顯變化。與高壓相比，在蒸煮過程中，蛋白質(zhì)的降解相對溫和。紅外結(jié)果表明，隨著溫度的升高和保壓時間的延長，酰胺Ⅰ帶的峰值位置向低的波數(shù)移動，反映蛋白質(zhì)在熱處理過程中的變性和蛋白質(zhì)從α-螺旋轉(zhuǎn)變?yōu)闊o規(guī)則卷曲和β-折疊。本文為不同部位的牛肉精深加工精確工藝參數(shù)的設(shè)定提供了有力的理論依據(jù)。