實(shí)時(shí)剪切波彈性成像聯(lián)合血清microRNA-10b表達(dá)量預(yù)測先兆子癇的價(jià)值

姚 路 丁燕燕 馬紅云 白 蓉 馬宗麗

臨床上先兆子癇的發(fā)病率約為5%~10%，通常發(fā)生在妊娠20 周后，以血壓升高、蛋白尿異常等臨床表現(xiàn)為主［1］。先兆子癇是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦和胎兒死亡的重要原因，孕產(chǎn)婦可引發(fā)彌漫性凝血功能障礙、急性腎功能衰竭、肺水腫、胎盤早剝等，胎兒則可引起支氣管肺發(fā)育不良、生長受限、早產(chǎn)等［2］。因此，早診斷、早干預(yù)尤為重要，是控制病情發(fā)展和改善妊娠結(jié)局的關(guān)鍵。有研究［3］建議采用實(shí)時(shí)剪切波彈性成像（shear wave elastography，SWE）評估胎盤彈性，反映胎盤功能，以此預(yù)測先兆子癇。另有研究［4］指出，血清micro RNA-10b（miR-10b）可以預(yù)測先兆子癇。本研究旨在探討SWE聯(lián)合血清miR-10b表達(dá)量預(yù)測先兆子癇的應(yīng)用價(jià)值。

資料與方法

一、研究對象

選取2018年2月至2020年3月于我院就診的120例疑似先兆子癇孕婦，年齡22~36歲，平均（38.52±2.11）歲，孕28~32 周，平均孕（30.05±1.96）周。納入標(biāo)準(zhǔn)：①既往無高血壓病或子癇病史；②分娩次數(shù)≤2 次；③單胎妊娠。排除標(biāo)準(zhǔn)：①代謝性疾病史；②胎盤發(fā)育不良，如巨大胎盤（重量>800 g）、胎盤炎性變化等；③重度貧血（血紅蛋白<60 g/L）；④合并糖尿病、腎功能不全等。120例孕婦分為先兆子癇孕婦35例（觀察組）和正常孕婦85 例（對照組）。先兆子癇診斷參照中華醫(yī)學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科學(xué)分會(huì)2015 年妊娠期高血壓疾病診治指南［5］。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有孕婦均知情同意。

二、儀器與方法

1.SWE 檢查：使用邁瑞Resona 7 彩色多普勒超聲診斷儀，4C-1凸陣探頭，頻率1~6 MHz；熱指數(shù)≤0.1，機(jī)械指數(shù)≤1.4。孕婦排空膀胱取仰臥位，充分暴露腹部，二維超聲定位前壁胎盤中央和邊緣部位，然后切換至SWE 模式，掃描過程中不加壓探頭，平行掃描，感興趣區(qū)大小為10 mm×10 mm，胎盤中央部位的取樣深度為4.0 cm，胎盤邊緣部位的取樣深度為5.4~6.0 cm；待圖像穩(wěn)定后凍結(jié)，再將取樣框置于上述感興趣區(qū)內(nèi)硬度較大區(qū)域，啟動(dòng)定量分析軟件獲得彈性模量值，重復(fù)測量3 次取平均值，每次測量時(shí)間間隔3~5 s。上述操作均由同一具有豐富經(jīng)驗(yàn)的超聲醫(yī)師完成。

2.血清miR-10b 檢測：孕婦于清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血5 ml，離心后取上清液，行定量PCR 檢測，按照RNAi-soTMPlus 試劑盒說明提取血清樣本總RNA，經(jīng)紫外分光光度儀定量和甲醛變性凝膠電泳檢測后，采用RNA 逆轉(zhuǎn)錄試劑盒行逆轉(zhuǎn)錄，最后采用SYBRGreen 熒光定量PCR 檢測試劑盒檢測。其中，目的基因miR-10b相對表達(dá)量根據(jù)2-ΔΔCt法計(jì)算。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

結(jié) 果

一、兩組胎盤彈性模量值和血清miR-10b 表達(dá)量比較

觀察組胎盤中央部位、邊緣部位的彈性模量值均高于對照組，而血清miR-10b 表達(dá)量低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.001）。見表1和圖1。

表1 兩組胎盤彈性模量值和血清miR-10b表達(dá)量比較（）

表1 兩組胎盤彈性模量值和血清miR-10b表達(dá)量比較（）

組別觀察組對照組t值P胎盤彈性模量值（kPa）中央部位34.37±3.96 2.42±1.31 16.522<0.001邊緣部位14.32±4.01 5.96±2.23 17.023<0.001血清miR-10b表達(dá)量35.15±10.02 52.65±15.21 9.15<0.001

二、相關(guān)性分析

相關(guān)性分析顯示，胎盤中央部位、邊緣部位彈性模量值與血清miR-10b表達(dá)量均呈負(fù)相關(guān)（r=-0.445、-0.437，均P<0.05）。

三、ROC曲線分析

ROC 曲線分析顯示，胎盤中央部位、邊緣部位彈性模量值及血清miR-10b 表達(dá)量預(yù)測先兆子癇的AUC 分別為 0.821、0.865、0.772，聯(lián)合應(yīng)用的 AUC 為0.985，均高于各方法單獨(dú)應(yīng)用（Z=4.224、3.690、4.728，均P<0.001）。胎盤中央部位、邊緣部位彈性模量值和血清miR-10b 表達(dá)量預(yù)測先兆子癇的敏感性、特異性分別為51.4%、100%，60.0%、97.6%，100%、50.6%；聯(lián)合應(yīng)用的敏感性、特異性分別為94.3%、100%。見表2和圖2。

圖2 胎盤彈性模量值、血清miR-10b表達(dá)量及其聯(lián)合預(yù)測先兆子癇的ROC曲線圖

討 論

目前臨床對子癇前期的發(fā)病機(jī)制尚未明確，子宮螺旋動(dòng)脈重鑄障礙和胎盤發(fā)育不良為子癇前期早期病理變化，而胚胎期滋養(yǎng)層細(xì)胞侵入性低下與該現(xiàn)象的發(fā)生直接相關(guān)，滋養(yǎng)層細(xì)胞異常分化則會(huì)導(dǎo)致胎盤滋養(yǎng)層浸潤不足及纖維化，在一定程度上增加胎盤硬度［6-7］。因此，準(zhǔn)確評估孕婦的胎盤功能尤為重要，能為臨床預(yù)測先兆子癇提供重要信息。SWE 能實(shí)時(shí)、定量評估活體組織硬度，具有成像穩(wěn)定、重復(fù)性好、分辨率高、無創(chuàng)等優(yōu)點(diǎn)，在鑒別腫瘤良惡性方面已得到廣泛應(yīng)用。研究［8］表明，通過測量胎盤組織的彈性可以評估胎盤功能，能為先兆子癇患者的臨床管理提供重要信息。血清miR-10b 能促使胎盤可溶性血管內(nèi)皮生長因子異常表達(dá)，引發(fā)螺旋動(dòng)脈重鑄障礙，胎盤淺著床，有望成為預(yù)測先兆子癇的生物標(biāo)志物［9］?；诖耍狙芯恐荚谔接慡WE 聯(lián)合血清miR-10b 表達(dá)量對先兆子癇的預(yù)測價(jià)值，以期為臨床診治提供參考。

血清miRNA 是一種調(diào)控靶基因，其在血液循環(huán)中的特異性使其成為疾病早期診斷的分子標(biāo)志物，參與了血管病變、血小板聚集及紅細(xì)胞增多等過程［10］。研究［11］顯示，可溶性血管內(nèi)皮生長因子1 在先兆子癇的發(fā)生、發(fā)展中有重要作用，而血清miR-10b 能起到靶向調(diào)控可溶性血管內(nèi)皮生長因子1 的作用，考慮血清miR-10b也參與了先兆子癇發(fā)生、發(fā)展，通過促使胎盤可溶性血管內(nèi)皮生長因子異常表達(dá)，引起全身毛細(xì)血管內(nèi)皮損傷及胎盤血管重鑄障礙。本研究結(jié)果顯示，觀察組血清miR-10b 表達(dá)量顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），與“血清miR-10b參與先兆子癇發(fā)生、發(fā)展”的結(jié)論一致。

本研究SWE 檢查顯示，觀察組孕婦胎盤中央部位和邊緣部位彈性模量值均高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P<0.05），表明先兆子癇孕婦胎盤組織的生物學(xué)性質(zhì)已發(fā)生改變，這可能是由胎盤梗死、蛻膜血管病變、中間絨毛缺乏、纖維蛋白沉積及胎盤紅細(xì)胞增多等因素引起，SWE 可以準(zhǔn)確檢出上述改變，有望成為臨床評估胎盤功能及預(yù)測先兆子癇的新方法。與陳璐［12］提出“SWE 有望用于評估子癇前期孕婦胎盤功能”的結(jié)論基本一致。但另有研究［13］顯示，計(jì)算彈性模量值并不客觀，當(dāng)胎盤組織不均一，且為非定向組織時(shí)，可能導(dǎo)致測值出現(xiàn)誤差，從而影響臨床判斷。為避免出現(xiàn)誤差影響研究結(jié)果，本研究選擇胎盤彈性模量值聯(lián)合血清miR-10b 表達(dá)量進(jìn)行分析，ROC 曲線分析顯示胎盤彈性模量值聯(lián)合血清miR-10b表達(dá)量預(yù)測先兆子癇的AUC 為0.985，高于各方法單獨(dú)應(yīng)用（均P<0.05），提示聯(lián)合應(yīng)用對先兆子癇有較高的預(yù)測價(jià)值。另外，本研究相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，胎盤中央部位、邊緣部位彈性模量值與血清miR-10b表達(dá)量均呈負(fù)相關(guān)（均P<0.05），說明胎盤彈性會(huì)影響血清miR-10b 表達(dá)量，而血清miR-10b 又會(huì)促使胎盤硬度增加，推測兩者相互影響。

綜上所述，SWE 聯(lián)合血清miR-10b 表達(dá)量在預(yù)測先兆子癇中具有較高價(jià)值，能為臨床診斷提供參考信息。但本研究樣本量偏少，可能存在偏差，今后需進(jìn)一步行大樣本研究。