• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    ERα基因單核苷酸多態(tài)性與乳腺癌內(nèi)分泌治療藥物引發(fā)子宮內(nèi)膜病變相關(guān)性*

    2021-12-29 09:18:32盛佳鈺李春陽(yáng)江科薛曉紅
    醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2021年1期
    關(guān)鍵詞:內(nèi)分泌基因型位點(diǎn)

    盛佳鈺,李春陽(yáng),江科,薛曉紅

    (上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院乳腺病科,上海 200437)

    乳腺癌是女性常見惡性腫瘤之一,50%~60%乳腺癌患者屬于激素依賴型[1],該類型乳腺癌患者保留全部或部分激素受體及其功能,其發(fā)生和發(fā)展受內(nèi)分泌的影響及調(diào)控。針對(duì)激素受體陽(yáng)性的乳腺癌患者,內(nèi)分泌治療是常見的治療方式。作為一線內(nèi)分泌治療藥物——選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)藥(selective estrogen receptor modulators,SERMs),他莫昔芬(tamoxifen)、枸櫞酸托瑞米芬(toremifene)在抑制雌激素受體(estrogen receptor,ER)陽(yáng)性的乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的同時(shí),卻刺激ER陽(yáng)性的子宮內(nèi)膜細(xì)胞增生,子宮內(nèi)膜腺體表現(xiàn)囊性擴(kuò)張樣水腫或形成息肉,間質(zhì)膠原豐富,而腺上皮細(xì)胞萎縮或化生,使子宮內(nèi)膜呈現(xiàn)出了息肉-增生-惡性變等多樣的變化[2]。對(duì)于內(nèi)分泌治療藥物引起的子宮內(nèi)膜病變,臨床常采用診斷性刮宮治療,目前尚缺乏有效而無創(chuàng)的治療方法,往往導(dǎo)致患者治療依從性差。在臨床實(shí)踐中,筆者發(fā)現(xiàn)同期應(yīng)用內(nèi)分泌藥物治療的乳腺癌患者,其子宮內(nèi)膜病變表現(xiàn)參差不齊。

    雌激素主要通過與α受體結(jié)合發(fā)揮作用,雌激素受體α(ERα)的基因多態(tài)性可以改變雌激素受體的表達(dá)水平及功能,從而影響雌激素的生物學(xué)效應(yīng)。眾多研究均表明[3-5],ERα基因(主要是第一內(nèi)含子上兩個(gè)限制性片段rs9340799、rs2234693)多態(tài)性與發(fā)生子宮內(nèi)膜病變的風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)。因此,本研究將探索 rs9340799、rs2234693位點(diǎn)單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism,SNPs)與他莫昔芬引起的子宮內(nèi)膜病變的相關(guān)性,試圖從中篩選出容易發(fā)生藥物性子宮內(nèi)膜病變的基因類型,以盡早預(yù)防乳腺癌內(nèi)分泌治療藥物引起的子宮內(nèi)膜病變的發(fā)生并為絕經(jīng)前乳腺癌患病群體的精準(zhǔn)治療提供依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1臨床資料 所有病例來自上海中藥大學(xué)附屬岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院乳腺病科2018年3—9月期間門診及住院的乳腺癌患者,共164例。納入標(biāo)準(zhǔn):①長(zhǎng)期居住在長(zhǎng)三角地區(qū)組患者之間無親緣關(guān)系;②符合乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn),并經(jīng)病理細(xì)胞學(xué)診斷證實(shí);③進(jìn)行他莫昔芬或托瑞米芬藥物治療>1年的患者;④完成知情同意及相關(guān)告知。排除標(biāo)準(zhǔn):①無明確乳腺癌病理診斷者;②子宮、卵巢切除者或使用促黃體生成素釋放激素類似物者;③合并子宮內(nèi)膜基礎(chǔ)疾病者及心血管、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病者;④曾經(jīng)發(fā)生過子宮內(nèi)膜不良事件者;⑤未完成知情同意及相關(guān)告知。164例患者平均年齡(46.85±5.90)歲;接受內(nèi)分泌治療1~2年、>2~3年、>3~4年、>4~5年及>5年分別有68,46,23,18,9例;其中病理診斷為浸潤(rùn)性癌的139例,原位癌25例;使用他莫昔芬78例,枸櫞酸托瑞米芬86例。各基因型組臨床資料基線均衡,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    1.2ERα基因SNPs 位點(diǎn)檢測(cè) 所有入組對(duì)象均抽取清晨空腹外周靜脈血2 mL,置于無菌無酶的乙二胺四乙酸抗凝試管,存放于-20 ℃環(huán)境。引物均由生工生物工程(上海)有限公司設(shè)計(jì)并合成,如下:rs9340799-FO 5′-GCAGGCTGGGCTCAAACTA-3′,rs9340799-RO 5′-CTTTCATTACCTCTTGCCGTCT-3′,rs2234693-F 5′-ATCCAGGGTTATGTGGCAAT-3′,rs2234693-R 5′-CTAATAGACTTAATGTTTTTGCAGG-3′。

    對(duì)目標(biāo)片段進(jìn)行聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增,PCR反應(yīng)體系為25 μL,其中基因組DNA模板1 μL,巢式引物Fi 0.5 μL,巢式引物Ri 0.5 μL,dNTP混合物(10 mmol·L-1)0.5 μL,Taq反應(yīng)緩沖液2.5 μL,Taq酶(5 U·μL-1) 0.2 μL,水20 μL。PCR反應(yīng)體系首先在95 ℃預(yù)變性3 min,然后進(jìn)行35個(gè)循環(huán)擴(kuò)增(每個(gè)循環(huán)包括 94 ℃變性30 s、58 ℃退火 30 s、72 ℃ 延伸30~60 s),循環(huán)完畢后進(jìn)行72 ℃ 修復(fù)延伸 10 min。

    PCR產(chǎn)物送于生工(上海)生物工程有限公司進(jìn)行單向測(cè)定,測(cè)序儀型號(hào)為 3730XL (美國(guó) ABI),結(jié)果使用Chromas 軟件分析,見圖 1。

    圖1 ERα基因位點(diǎn)測(cè)序圖 Fig.1 Sequencing map of ERα gene site

    1.3子宮內(nèi)膜病變觀察 B超檢查觀察子宮內(nèi)膜厚度,統(tǒng)計(jì)行陰道診刮患者例數(shù),計(jì)算子宮內(nèi)膜診刮率。

    1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用 SPSS 21.0版 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用PLINK -doc -1.04 對(duì)患者測(cè)序結(jié)果進(jìn)行 Hardy -Weinberg 遺傳基因分布平衡檢驗(yàn)。各基因亞型組間的計(jì)量和計(jì)數(shù)資料差異比較采用方差分析和卡方檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1ERα基因rs9340799、rs2234693位點(diǎn)基因型和等位基因分布 164例患者中,ERα基因rs9340799位點(diǎn),A、G等位基因的分布頻率分別為79%和21%;其中A/A型實(shí)際頻數(shù)106例,A/G型48例,G/G型10例(P>0.05)。ERα基因rs2234693位點(diǎn)中C、T等位基因的分布頻率為42% 和 58%; 其中C/C型實(shí)際頻數(shù)為32例、C/T型為74例、T/T型為58例(P>0.05),說明樣本具有群體代表性。

    2.2ERα基因SNPs與子宮內(nèi)膜厚度及內(nèi)膜診刮比例的關(guān)系 比較 ERα基因rs9340799位點(diǎn)各基因型患者間子宮內(nèi)膜厚度的差異,發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)的3種基因型(A/A、A/G、G/G)組間子宮內(nèi)膜厚度值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.382 0,P<0.05);在G顯性模式下,即A/G、G/G基因型患者子宮內(nèi)膜厚度[(9.63±3.53) mm、(9.00±0.89) mm]均高于A/A基因型患者[(7.73±3.04) mm]。而A/G基因型比A/A基因型患者子宮內(nèi)膜更厚(F=3.614 0,P<0.05)。比較 ERα基因rs2234693位點(diǎn)各基因型患者間子宮內(nèi)膜厚度的差異,發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)的3種基因型(C/C、C/T、T/T)組間子宮內(nèi)膜厚度值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。

    表1 ERα基因SNPs與子宮內(nèi)膜厚度的關(guān)系 Tab.1 Relationship between SNPs of ERα gene and endometrial thickness

    比較 ERα基因rs9340799位點(diǎn)各基因型患者間子宮內(nèi)膜診刮比例的差異,發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)的3種基因型(A/A、A/G、G/G)組間子宮內(nèi)膜診刮比例差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=20.750 0,P<0.05)。其中,A/G基因型患者子宮內(nèi)膜診刮比例(45.83%)高于A/A及G/G基因型患者(15.09%,0.00%)(χ2=16.800 0,7.384 0,P<0.01)。 較ERα基因rs2234693位點(diǎn)各基因型患者間子宮內(nèi)膜診刮比例的差異,發(fā)現(xiàn)該位點(diǎn)的3種基因型(C/C、C/T、T/T)組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表2。

    表2 ERα基因 SNPs 與子宮內(nèi)膜診刮比例的關(guān)系 Tab.2 Relationship between SNPs of ERα gene and endometrial diagnostic curettage rate

    2.3ERα基因SNPs 與不同內(nèi)分泌藥物治療患者子宮內(nèi)膜厚度及內(nèi)膜診刮比例的關(guān)系 根據(jù)患者服用藥物不同,將患者分為他莫昔芬組和枸櫞酸托瑞米芬組,比較 ERα基因rs9340799位點(diǎn)及rs2234693位點(diǎn)各基因型患者間子宮內(nèi)膜厚度及診刮比例的差異是否與服用的內(nèi)分泌藥物種類有關(guān)。發(fā)現(xiàn)同一基因型患者,不同藥物組間無論是子宮內(nèi)膜厚度還是診刮次數(shù)均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

    但是,在接受枸櫞酸托瑞米芬治療的患者中,子宮內(nèi)膜厚度與 rs9340799位點(diǎn)SNPs存在相關(guān)性,A/G基因患者的子宮內(nèi)膜厚度較純合基因型A/A、G/G型厚(F=1.553 0,P<0.05),見表3。且無論是他莫昔芬還是枸櫞酸托瑞米芬組,rs9340799 位點(diǎn)SNP與內(nèi)膜診刮率均呈顯著相關(guān)性(χ2=13.690 0,16.850 0,P<0.01),見表4。

    表3 ERα基因 SNPs 與不同內(nèi)分泌藥物子宮內(nèi)膜厚度的關(guān)系 Tab.3 Relationship between SNPs of ERα gene and endometrial thickness in patients treated with different endocrine drugs

    表4 ERα基因 SNPs 與不同內(nèi)分泌藥物治療患者子宮內(nèi)膜診刮率的關(guān)系 Tab.4 Relationship between SNPs of ERα gene and endometrial scraping rate in patients treated with different endocrine drugs

    2.4ERα基因SNPs與首次子宮內(nèi)膜診刮時(shí)間的關(guān)系 根據(jù)接受內(nèi)分泌藥物治療發(fā)生首次子宮內(nèi)膜診刮時(shí)間將受試者分為1年以下、1年及以上兩組,分別分析首次發(fā)生子宮內(nèi)膜診刮的時(shí)間與ERα基因SNPs的關(guān)系。發(fā)現(xiàn)首次子宮內(nèi)膜診刮時(shí)間與rs9340799位點(diǎn)SNPs存在顯著相關(guān)性(χ2=27.160 0,P<0.01)。同一基因型患者間比較,A/G基因型患者1年內(nèi)出現(xiàn)內(nèi)膜診刮事件數(shù)明顯多于1年以上者(χ2=4.724 0,P<0.05),見表5。

    表5 ERα基因SNPs與首次子宮內(nèi)膜診刮時(shí)間的關(guān)系 Tab.5 Relationship between SNPs of ERα gene and the time of first endometrial scraping

    3 討論

    他莫昔芬及枸櫞酸托瑞米芬在抑制ER陽(yáng)性乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)的同時(shí),也刺激ER陽(yáng)性子宮內(nèi)膜細(xì)胞增生。有研究報(bào)道[6],乳腺癌患者手術(shù)后口服他莫昔芬引起子宮內(nèi)膜息肉及子宮內(nèi)膜增生的發(fā)病率分別為5%~35%及4.7%~16%,而子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率為0.8%~5%。由此可見,SERMs對(duì)不同靶器官具有不同的作用,在乳腺腫瘤組織中發(fā)揮抗雌激素作用,而對(duì)子宮內(nèi)膜則表現(xiàn)為弱雌激素樣作用,能引起一系列子宮內(nèi)膜病變。對(duì)于此類乳腺癌內(nèi)分泌治療引起的藥物性子宮內(nèi)膜病變,孕激素治療的安全性仍存疑慮,因此,臨床上絕大多數(shù)的患者和醫(yī)生都會(huì)選擇通過暫時(shí)停止內(nèi)分泌治療及刮宮來明確診斷并降低子宮內(nèi)膜厚度[7]。在近10年的內(nèi)分泌藥物治療過程中,許多乳腺癌患者常常需經(jīng)歷數(shù)次的刮宮治療,有創(chuàng)性操作嚴(yán)重影響患者內(nèi)分泌治療的依從性。

    然而并不是每一例服用SERMs藥物的乳腺癌患者均會(huì)發(fā)生子宮內(nèi)膜病變,即使發(fā)生內(nèi)膜病變,在內(nèi)分泌藥物使用時(shí)間相同的情況下,患者內(nèi)膜增厚及病變的程度也差異巨大。早期將這種情況的解釋歸于個(gè)體對(duì)于內(nèi)分泌調(diào)節(jié)功能的差異,近年來,遺傳因素受到人們的重視和認(rèn)可。雌激素主要通過與α受體結(jié)合發(fā)揮作用,ERα的基因多態(tài)性可以改變雌激素受體的表達(dá)水平及功能,從而影響雌激素的生物學(xué)效應(yīng)。本研究探索他莫昔芬或枸櫞酸托瑞米芬內(nèi)分泌治療(>1年)的乳腺癌患者ERα基因 rs9340799、rs2234693位點(diǎn) SNPs 與藥物引起的子宮內(nèi)膜病變的相關(guān)性,研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),ERα基因rs9340799位點(diǎn)3個(gè)亞型(A/A、A/G、G/G)患者的子宮內(nèi)膜厚度值及陰道診刮比例比較均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其中,A/G基因型患者子宮內(nèi)膜平均厚度和陰道診刮比例均高于A/A及G/G基因型患者(P<0.05)。而ERα基因rs2234693位點(diǎn)的3個(gè)基因亞型(T/T、C/T、C/C)患者的子宮內(nèi)膜厚度及陰道診刮比例均差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。進(jìn)一步本研究還發(fā)現(xiàn),他莫昔芬和枸櫞酸托瑞米芬兩種不同的SERMs藥物所引起的子宮內(nèi)膜增厚及陰道診刮比例并無明顯差異。但是,在接受枸櫞酸托瑞米芬治療的受試者中,子宮內(nèi)膜厚度與 rs9340799位點(diǎn)SNPs存在相關(guān)性(P<0.05)。且無論是他莫昔芬組還是枸櫞酸托瑞米芬組,rs9340799 位點(diǎn)SNPs與內(nèi)膜診刮數(shù)均呈顯著相關(guān)性(P<0.01)??梢姡珽Rα基因rs9340799位點(diǎn)A/G亞型患者時(shí)子宮內(nèi)膜病變的高發(fā)人群。此外,還發(fā)現(xiàn)首次子宮內(nèi)膜診刮時(shí)間與rs9340799位點(diǎn)SNPs存在顯著相關(guān)性(P<0.01)。同一基因型患者間比較,A/G基因型患者1年內(nèi)出現(xiàn)內(nèi)膜診刮事件數(shù)明顯多于1年以上者(P<0.05)。由此可見,他莫昔芬和枸櫞酸托瑞米芬引起的子宮內(nèi)膜病變基本相同,因此,臨床上當(dāng)患者出現(xiàn)子宮內(nèi)膜增厚的情況時(shí),進(jìn)行兩種藥物間的更換意義不大。而攜帶有子宮內(nèi)膜病變易感型基因——A/G基因的患者,其子宮內(nèi)膜事件發(fā)生時(shí)間較早(多在1年內(nèi)),臨床可以針對(duì)該部分患者進(jìn)行中醫(yī)藥的預(yù)防干預(yù),或者提前予以卵巢去勢(shì)。

    既往研究主要集中于自然內(nèi)分泌失調(diào)導(dǎo)致雌激素水平異常的女性人群[3,8],鮮少涉及藥物引起雌激素水平改變所致的子宮內(nèi)膜病變與ERα基因多態(tài)性的關(guān)系,它與自然雌激素水平改變所導(dǎo)致的子宮內(nèi)膜病變是否存在差異也無從考證。本研究發(fā)現(xiàn),ERα基因rs9340799位點(diǎn)A/G亞型患者是SERMs藥物引起子宮內(nèi)膜病變的高發(fā)人群。但與GEORGOPOULOS等[9]的研究結(jié)果不一致。進(jìn)一步查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),針對(duì)不同人群開展的研究,其結(jié)果也存在諸多不一致[3]。分析原因,主要考慮由于人種及地區(qū)的差異導(dǎo)致的雌激素受體基因表達(dá)呈現(xiàn)明顯的差異。所以本研究將目標(biāo)人群限定為長(zhǎng)期生活在長(zhǎng)三角地區(qū)的無親緣關(guān)系的乳腺癌患者,從一定程度上規(guī)避了因人種、地區(qū)差異引起的基因改變。但在整個(gè)研究過程中,有32例患者月經(jīng)不定期,甚至長(zhǎng)期不來潮,行婦科B超檢查的時(shí)間較難把握,可能造成子宮內(nèi)膜厚度檢測(cè)的偏差。由于本次研究所收集的病例數(shù)較少,不適合進(jìn)行分層分析,下一步研究中,將擴(kuò)大樣本量,按月經(jīng)情況進(jìn)行分層分析,將進(jìn)一步消除由于婦科B超檢測(cè)時(shí)間造成的誤差。

    猜你喜歡
    內(nèi)分泌基因型位點(diǎn)
    鎳基單晶高溫合金多組元置換的第一性原理研究
    上海金屬(2021年6期)2021-12-02 10:47:20
    CLOCK基因rs4580704多態(tài)性位點(diǎn)與2型糖尿病和睡眠質(zhì)量的相關(guān)性
    前列腺癌的內(nèi)分泌治療
    什么是乳腺癌的內(nèi)分泌治療?
    二項(xiàng)式通項(xiàng)公式在遺傳學(xué)計(jì)算中的運(yùn)用*
    首都醫(yī)科大學(xué)內(nèi)分泌與代謝病學(xué)系
    穩(wěn)住內(nèi)分泌
    西安地區(qū)育齡婦女MTHFRC677T基因型分布研究
    BAMBI基因敲除小鼠的繁育、基因型鑒定
    含內(nèi)含子的核糖體蛋白基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)情況分析
    三级国产精品片| av视频在线观看入口| 大话2 男鬼变身卡| 欧美一级a爱片免费观看看| av在线天堂中文字幕| 国产精品99久久久久久久久| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 网址你懂的国产日韩在线| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 久久国内精品自在自线图片| 色吧在线观看| 蜜臀久久99精品久久宅男| 91狼人影院| 午夜亚洲福利在线播放| 欧美又色又爽又黄视频| 亚洲欧美成人精品一区二区| 午夜激情福利司机影院| 99在线视频只有这里精品首页| 六月丁香七月| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久精品91蜜桃| 成人午夜精彩视频在线观看| 日韩一区二区三区影片| 91久久精品国产一区二区成人| 国产一区二区三区av在线| 岛国毛片在线播放| av线在线观看网站| 亚洲av免费高清在线观看| 亚洲精品国产成人久久av| 欧美日韩在线观看h| 亚洲电影在线观看av| 国产精品野战在线观看| 免费看av在线观看网站| 亚洲欧美清纯卡通| 亚洲18禁久久av| 中文天堂在线官网| 国产午夜精品论理片| 午夜精品国产一区二区电影 | 国模一区二区三区四区视频| 欧美精品国产亚洲| 国产不卡一卡二| 亚洲成色77777| 国产成人精品一,二区| 国产在视频线在精品| 能在线免费观看的黄片| 国产成人福利小说| 日韩欧美精品v在线| 精品酒店卫生间| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 久久久久久久久久黄片| av免费观看日本| 寂寞人妻少妇视频99o| 老司机影院毛片| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 欧美97在线视频| 国产视频内射| 综合色av麻豆| 亚洲欧美精品专区久久| 又粗又爽又猛毛片免费看| 伊人久久精品亚洲午夜| 高清毛片免费看| 成人性生交大片免费视频hd| 国产成人福利小说| 只有这里有精品99| 国产高清不卡午夜福利| 在线观看66精品国产| 国产成人午夜福利电影在线观看| 精品久久久久久成人av| 三级国产精品片| 国产精华一区二区三区| 精品一区二区三区视频在线| 观看美女的网站| 最近视频中文字幕2019在线8| 亚洲av免费在线观看| 亚洲美女视频黄频| 国产免费福利视频在线观看| 一级黄色大片毛片| 国产精品不卡视频一区二区| 十八禁国产超污无遮挡网站| 老司机福利观看| 国产中年淑女户外野战色| 日韩高清综合在线| 久久精品久久精品一区二区三区| 嫩草影院新地址| 国产黄a三级三级三级人| 丰满人妻一区二区三区视频av| 精华霜和精华液先用哪个| 色噜噜av男人的天堂激情| 国产三级中文精品| av播播在线观看一区| 久久99蜜桃精品久久| 国产成人精品久久久久久| 国产亚洲5aaaaa淫片| 国产av码专区亚洲av| 亚洲电影在线观看av| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 精品国内亚洲2022精品成人| 精品久久久久久久久久久久久| 久久精品影院6| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | a级毛片免费高清观看在线播放| 高清av免费在线| 黑人高潮一二区| 3wmmmm亚洲av在线观看| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产三级在线视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 看免费成人av毛片| 久久久久国产网址| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 国产亚洲精品av在线| 久久人妻av系列| 欧美一级a爱片免费观看看| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲久久久久久中文字幕| 色视频www国产| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 一级av片app| 又爽又黄无遮挡网站| 久久精品国产亚洲网站| 婷婷色av中文字幕| 日韩 亚洲 欧美在线| 三级毛片av免费| 成人av在线播放网站| 午夜激情福利司机影院| 久久草成人影院| 中文字幕制服av| 国产精品一区www在线观看| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 国产亚洲一区二区精品| 人妻少妇偷人精品九色| 日韩亚洲欧美综合| 18禁动态无遮挡网站| 乱系列少妇在线播放| 在线免费观看不下载黄p国产| 插阴视频在线观看视频| 久久午夜福利片| 性插视频无遮挡在线免费观看| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 成年女人永久免费观看视频| 男女边吃奶边做爰视频| 久久人人爽人人爽人人片va| 有码 亚洲区| 少妇的逼好多水| 免费观看性生交大片5| 最近2019中文字幕mv第一页| 女人被狂操c到高潮| 国产在线一区二区三区精 | 亚洲经典国产精华液单| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产一区二区在线观看日韩| 亚洲av成人av| 免费观看性生交大片5| 最后的刺客免费高清国语| 少妇熟女欧美另类| 青春草国产在线视频| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产片特级美女逼逼视频| 免费搜索国产男女视频| 免费搜索国产男女视频| av女优亚洲男人天堂| 国产乱来视频区| 欧美成人免费av一区二区三区| 最近最新中文字幕大全电影3| 成人午夜精彩视频在线观看| 特级一级黄色大片| 国产免费福利视频在线观看| 日韩欧美 国产精品| 中文天堂在线官网| 黄片无遮挡物在线观看| 只有这里有精品99| 国产高潮美女av| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 国产精品女同一区二区软件| 亚洲精品国产av成人精品| 男人和女人高潮做爰伦理| 精品一区二区三区视频在线| 成人二区视频| 欧美极品一区二区三区四区| 精品久久久久久久久久久久久| 久久久精品大字幕| 午夜精品一区二区三区免费看| 特级一级黄色大片| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 国产av一区在线观看免费| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 日本欧美国产在线视频| videossex国产| 嫩草影院新地址| 日韩高清综合在线| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲欧美精品综合久久99| 国产免费又黄又爽又色| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产色婷婷99| 国产综合懂色| 不卡视频在线观看欧美| 黄色日韩在线| 中文字幕av成人在线电影| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲自拍偷在线| 午夜a级毛片| 少妇的逼好多水| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| av在线播放精品| 午夜精品在线福利| 99热这里只有是精品在线观看| 高清在线视频一区二区三区 | 欧美激情国产日韩精品一区| h日本视频在线播放| 中文字幕av成人在线电影| 国产不卡一卡二| 一级二级三级毛片免费看| 好男人视频免费观看在线| 午夜精品在线福利| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产免费又黄又爽又色| 97超碰精品成人国产| 色综合色国产| 久久精品人妻少妇| 久久亚洲精品不卡| 99在线人妻在线中文字幕| 男女边吃奶边做爰视频| 色播亚洲综合网| 国产真实乱freesex| 国产视频内射| 欧美成人午夜免费资源| 一级爰片在线观看| 搞女人的毛片| 寂寞人妻少妇视频99o| 免费看a级黄色片| 亚洲自拍偷在线| 国国产精品蜜臀av免费| 一区二区三区乱码不卡18| 三级毛片av免费| 内地一区二区视频在线| 亚洲丝袜综合中文字幕| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国产精品国产三级国产av玫瑰| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 99在线视频只有这里精品首页| 91精品国产九色| 精品久久久噜噜| 看免费成人av毛片| 午夜福利在线在线| 成人国产麻豆网| 久久综合国产亚洲精品| 简卡轻食公司| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久久a久久爽久久v久久| 伦理电影大哥的女人| 最近中文字幕2019免费版| 中文字幕av成人在线电影| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲av不卡在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 日本熟妇午夜| 国产午夜福利久久久久久| 91av网一区二区| 国产精品av视频在线免费观看| 亚洲av成人av| 一边摸一边抽搐一进一小说| 久久人人爽人人片av| 又爽又黄a免费视频| 国产精品不卡视频一区二区| 小说图片视频综合网站| 亚洲精品日韩av片在线观看| 久久精品影院6| 日日摸夜夜添夜夜爱| 简卡轻食公司| 内地一区二区视频在线| 看片在线看免费视频| 内射极品少妇av片p| 伦理电影大哥的女人| 两个人的视频大全免费| 日韩精品有码人妻一区| 国产一区二区在线av高清观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久久久久久国产电影| 国产色婷婷99| 欧美97在线视频| kizo精华| 天堂中文最新版在线下载 | 亚洲精品色激情综合| 一区二区三区四区激情视频| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产免费又黄又爽又色| 国产老妇女一区| 亚洲欧美精品专区久久| 欧美高清性xxxxhd video| 午夜免费男女啪啪视频观看| 黄片无遮挡物在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 久热久热在线精品观看| av福利片在线观看| 精品午夜福利在线看| 能在线免费观看的黄片| 中文字幕久久专区| 国产爱豆传媒在线观看| 久久久精品94久久精品| a级毛色黄片| 国产又色又爽无遮挡免| 波野结衣二区三区在线| eeuss影院久久| 丰满乱子伦码专区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲国产精品成人久久小说| 丝袜喷水一区| 一级黄色大片毛片| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 免费大片18禁| 少妇人妻精品综合一区二区| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 大香蕉久久网| 国产午夜福利久久久久久| 久久这里只有精品中国| 欧美精品国产亚洲| 亚洲国产最新在线播放| 欧美另类亚洲清纯唯美| 国产精品99久久久久久久久| 亚洲av日韩在线播放| 精品一区二区免费观看| 超碰av人人做人人爽久久| 国产成人aa在线观看| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 白带黄色成豆腐渣| 久久久午夜欧美精品| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 亚洲综合精品二区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 亚洲精品久久久久久婷婷小说 | 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久精品91蜜桃| 亚洲精品日韩av片在线观看| 日日干狠狠操夜夜爽| 国产亚洲一区二区精品| 国产激情偷乱视频一区二区| 日韩人妻高清精品专区| 国产成人精品婷婷| 91在线精品国自产拍蜜月| 日韩一区二区三区影片| 欧美97在线视频| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲自偷自拍三级| 国产在视频线精品| 日本一本二区三区精品| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 久久人人爽人人爽人人片va| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 亚洲成人久久爱视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂 | 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产精品99久久久久久久久| 黄片无遮挡物在线观看| 免费大片18禁| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久久久久中文| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 老司机影院成人| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲18禁久久av| 午夜老司机福利剧场| 久久精品国产亚洲av天美| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 久久久成人免费电影| 成人无遮挡网站| 欧美成人午夜免费资源| 国产亚洲精品av在线| 久久久久久九九精品二区国产| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲人成网站高清观看| 国产极品精品免费视频能看的| 国产精品日韩av在线免费观看| 国产在视频线精品| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 久久精品人妻少妇| 99国产精品一区二区蜜桃av| 高清在线视频一区二区三区 | 国产真实伦视频高清在线观看| 天天躁日日操中文字幕| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 欧美最新免费一区二区三区| 99久久中文字幕三级久久日本| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 国产精品人妻久久久影院| 能在线免费看毛片的网站| 国产大屁股一区二区在线视频| 欧美最新免费一区二区三区| 黑人高潮一二区| 亚洲人与动物交配视频| 天堂网av新在线| 亚洲精品亚洲一区二区| 综合色av麻豆| 国产精品伦人一区二区| 少妇高潮的动态图| 高清日韩中文字幕在线| av女优亚洲男人天堂| 日韩成人伦理影院| 男人舔女人下体高潮全视频| 久久午夜福利片| 日本一本二区三区精品| 国产精品综合久久久久久久免费| 天美传媒精品一区二区| 亚洲一区高清亚洲精品| 欧美不卡视频在线免费观看| 青青草视频在线视频观看| 国产v大片淫在线免费观看| 人体艺术视频欧美日本| 一边亲一边摸免费视频| 人妻系列 视频| 国产黄片美女视频| 亚洲av男天堂| 国产美女午夜福利| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 在线免费十八禁| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 日韩精品有码人妻一区| 一级毛片我不卡| 久久久久久久亚洲中文字幕| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 欧美激情在线99| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲中文字幕日韩| 男女国产视频网站| 99热这里只有精品一区| 日本-黄色视频高清免费观看| av在线天堂中文字幕| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 亚洲电影在线观看av| 我要搜黄色片| 精品久久久久久久久久久久久| 日韩欧美 国产精品| 欧美一区二区亚洲| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 日日啪夜夜撸| 能在线免费看毛片的网站| 国产精品不卡视频一区二区| 亚洲国产精品专区欧美| 日韩亚洲欧美综合| 国产伦理片在线播放av一区| 草草在线视频免费看| 国产美女午夜福利| 看免费成人av毛片| 亚洲精品乱久久久久久| 日本熟妇午夜| 亚洲av男天堂| 桃色一区二区三区在线观看| 最近中文字幕2019免费版| 中文字幕熟女人妻在线| 又爽又黄a免费视频| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 男人的好看免费观看在线视频| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 国产精品久久电影中文字幕| 久久久亚洲精品成人影院| av国产久精品久网站免费入址| 国产亚洲精品av在线| 国产精品,欧美在线| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久99热这里只频精品6学生 | av.在线天堂| 视频中文字幕在线观看| 99热精品在线国产| 美女国产视频在线观看| 乱系列少妇在线播放| 少妇熟女aⅴ在线视频| 变态另类丝袜制服| 欧美另类亚洲清纯唯美| 1000部很黄的大片| 亚洲国产精品成人综合色| 看片在线看免费视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 黄色欧美视频在线观看| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产精品熟女久久久久浪| 亚洲最大成人中文| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲人成网站在线播| 久久精品人妻少妇| 丰满少妇做爰视频| 麻豆成人av视频| 亚洲av福利一区| 午夜精品国产一区二区电影 | 爱豆传媒免费全集在线观看| 成人二区视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 两个人视频免费观看高清| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久 | 亚洲欧美精品自产自拍| 成人午夜高清在线视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产精品av视频在线免费观看| 最近的中文字幕免费完整| 插逼视频在线观看| 嫩草影院新地址| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 99热网站在线观看| 久久99热6这里只有精品| 熟女电影av网| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产淫语在线视频| 亚洲av免费在线观看| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 看非洲黑人一级黄片| 久久人人爽人人片av| 精品人妻偷拍中文字幕| 一本一本综合久久| 高清午夜精品一区二区三区| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产毛片a区久久久久| 国产黄色小视频在线观看| 国产亚洲精品av在线| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲在久久综合| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国语自产精品视频在线第100页| 美女内射精品一级片tv| 国产极品精品免费视频能看的| 国产精品嫩草影院av在线观看| 插逼视频在线观看| 亚洲国产最新在线播放| 亚洲av日韩在线播放| 51国产日韩欧美| 2022亚洲国产成人精品| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲国产成人一精品久久久| 美女大奶头视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 亚洲精品成人久久久久久| 久久久久久久国产电影| 亚洲av男天堂| 亚洲在线自拍视频| 亚洲欧洲日产国产| 高清视频免费观看一区二区 | 丝袜美腿在线中文| 老司机影院毛片| 好男人视频免费观看在线| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 我要搜黄色片| 日本熟妇午夜| 久久精品久久精品一区二区三区| 麻豆成人av视频| 一区二区三区免费毛片| 一个人看的www免费观看视频| 卡戴珊不雅视频在线播放| 久久精品国产亚洲av涩爱| 综合色丁香网| 成人鲁丝片一二三区免费| 热99在线观看视频| 午夜久久久久精精品| 国产精品久久久久久精品电影| 九九爱精品视频在线观看| 久久精品国产自在天天线| 中文字幕亚洲精品专区| 成人国产麻豆网| 日韩视频在线欧美| 青春草亚洲视频在线观看| 白带黄色成豆腐渣| 久久国内精品自在自线图片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 成年免费大片在线观看| 日本五十路高清| 中文字幕免费在线视频6| 黑人高潮一二区| 久久久久久久亚洲中文字幕| 99热网站在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 亚洲精品自拍成人| 久久6这里有精品| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 中文在线观看免费www的网站| 国内精品美女久久久久久| 一边摸一边抽搐一进一小说| 91精品一卡2卡3卡4卡| 欧美性猛交黑人性爽| 亚洲人成网站高清观看| 日韩三级伦理在线观看| 成年av动漫网址| 成人国产麻豆网| 婷婷色av中文字幕| 深夜a级毛片| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 国产在视频线精品| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 91aial.com中文字幕在线观看| 免费搜索国产男女视频| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 亚洲av免费在线观看| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产色婷婷99| 亚洲自拍偷在线| 老司机福利观看| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产精品久久电影中文字幕|