水產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)丁香酚類麻醉劑殘留現(xiàn)狀及評(píng)價(jià)

文/王鵬 李濤 賈立平 李鋒剛 王綠洲

丁香酚類對(duì)魚有麻醉作用，因而近年來(lái)被廣泛用于活魚運(yùn)輸，但其在水產(chǎn)品中的應(yīng)用我國(guó)目前暫無(wú)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。為給水產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為相關(guān)政策法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)，本研究對(duì)某地市出售水產(chǎn)品中五類丁香酚類麻醉劑殘留進(jìn)行檢測(cè)，丁香酚類麻醉劑總檢出率為82%。從食用安全性評(píng)價(jià)結(jié)果看，本次監(jiān)測(cè)水產(chǎn)品中丁香酚類麻醉劑殘留對(duì)人體健康尚未構(gòu)成風(fēng)險(xiǎn)。

隨著生活水平的提高，人們對(duì)優(yōu)質(zhì)蛋白的需求不斷增加，水產(chǎn)品作為日常生活中不可或缺的優(yōu)質(zhì)蛋白源之一，人們對(duì)其需求不再停留在品種上，而更注重質(zhì)量和鮮活度。我國(guó)地域遼闊，加之水產(chǎn)品重點(diǎn)養(yǎng)殖區(qū)主要分布在東南沿海一帶，要將鮮活的水產(chǎn)品輸送到北方城市不得不進(jìn)行長(zhǎng)距離的活體運(yùn)輸。有硬鰭的活魚在運(yùn)輸中，由于空間狹小，魚類產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致魚類不停地碰撞和摩擦，魚鱗脫落，皮膚損傷，甚至死亡，大大地增加了魚類長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)某杀荆瑴p少了經(jīng)濟(jì)收益。在石斑魚、鱖魚、羅非魚等名貴品種的運(yùn)輸途中使用鎮(zhèn)靜劑可以增加成活率，提高商品價(jià)值。由于麻醉劑具有良好的鎮(zhèn)靜作用，因而近年來(lái)被廣泛用于活魚運(yùn)輸中。

丁香酚（Eugenol），即4-烯丙基2-甲氧基苯酚，是一種無(wú)色或蒼黃色液體，有強(qiáng)烈丁香香氣，難溶于水，廣泛存在于丁香油、肉桂葉油、肉桂皮油、樟腦油、肉豆蔻油等芳香油中，在醫(yī)學(xué)上被廣泛應(yīng)用于牙科鎮(zhèn)痛和防腐。1972年，日本遠(yuǎn)藤發(fā)現(xiàn)丁香酚這種香料對(duì)魚有強(qiáng)烈的麻醉作用，開(kāi)始將它作為麻醉劑進(jìn)行研究。丁香酚已多次用于虹鱒等名貴水產(chǎn)品的麻醉，但針對(duì)丁香酚可使用的水產(chǎn)品種、含量范圍等報(bào)道不多。

國(guó)際上對(duì)于丁香酚是否可作為漁用麻醉劑及其對(duì)人體的危害還存在爭(zhēng)議。美國(guó)的FDA沒(méi)有規(guī)定丁香酚可以在水產(chǎn)品中使用，但可將其作為食品添加劑使用；日本、澳大利亞、韓國(guó)、新西蘭等國(guó)認(rèn)為丁香酚可作為合法的水產(chǎn)麻醉劑，但要經(jīng)過(guò)一定的休藥期才可上市。我國(guó)對(duì)丁香酚在水產(chǎn)品中的使用并沒(méi)有相關(guān)政策法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)，這給水產(chǎn)品中丁香酚的合理使用及殘留監(jiān)控帶來(lái)了很大的不便。本文通過(guò)研究，希望為水產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，為相關(guān)政策法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的制定提供依據(jù)。

一、材料和方法

（一）樣品采集

采集按照《水產(chǎn)品抽樣方法SC/T 3016-2004》進(jìn)行。根據(jù)各種水產(chǎn)品養(yǎng)殖習(xí)性及流通環(huán)節(jié)特點(diǎn)，于春（4月）、夏（8月）季對(duì)水產(chǎn)品批發(fā)市場(chǎng)進(jìn)行了調(diào)查，對(duì)石斑魚、鱖魚、羅非魚等3個(gè)水產(chǎn)品種進(jìn)行了樣品采集，共計(jì)采集樣品78個(gè)。采樣后立刻將樣品送回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行前處理及冷藏。每份水產(chǎn)品均取3個(gè)平行樣進(jìn)行檢測(cè)。

（二）儀器與試劑

Waters2695型液相色譜儀、2487紫外檢測(cè)器、超聲波提取儀、渦旋混勻器、LXJ-II型大容量低速離心機(jī)和旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

丁香酚（CAS號(hào)：97-53-0）、異丁香酚（CAS號(hào)：97-54-1）、甲基丁香酚（CAS號(hào)：93-15-2）、甲基異丁香酚（CAS號(hào)：93-16-3）、乙?；惗∠惴樱–AS號(hào)：93-29-8）標(biāo)準(zhǔn)品（純度均≥97%）；甲醇（色譜純）；乙腈（色譜純）；正己烷、氯化鈉（均為分析純）；無(wú)水Na2SO4（分析純）；實(shí)驗(yàn)用水（超純水）。

二、實(shí)驗(yàn)方法

（一）水產(chǎn)品中丁香酚類麻醉劑檢測(cè)

參照J(rèn)incheng Li等人（2016）測(cè)定水產(chǎn)品中丁香酚殘留的方法，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況，對(duì)其進(jìn)行優(yōu)化。

（二）色譜條件

Symmetryshield TM RP18色譜柱（5μm，250mm×4.6mm），柱溫35℃；流動(dòng)相配比比例為甲醇：水（52:48）；進(jìn)樣流量大小為1.3mL/min；監(jiān)視器采用熒光檢測(cè)器；波長(zhǎng)為280nm。

三、結(jié)果

（一）丁香酚類麻醉劑檢出的總體情況

本次共抽檢3種水產(chǎn)品78份，檢出率為82%。丁香酚檢出值為3.28μg/kg～54.58μg/kg，異丁香酚檢出值為4.00μg/kg～9.40μg/kg，甲基異丁香酚檢出值為6.80μg/kg～16.00μg/kg，乙?；惗∠惴訖z出值為17.50μg/kg～54.00μg/kg。從陽(yáng)性樣本數(shù)量來(lái)看，石斑魚32例、鱖魚26例、羅非魚6例，陽(yáng)性率分別為88.9%、86.7%、50%，依次為石斑魚＞鱖魚＞羅非魚，檢出構(gòu)成比分別為石斑魚50.0%、鱖魚42.9%、羅非魚7.1%。詳見(jiàn)表1。

表1 陽(yáng)性樣品數(shù)量統(tǒng)計(jì)表 單位：個(gè)

測(cè)定結(jié)果表明，樣品中五種丁香酚類組分之間的檢出率沒(méi)有關(guān)聯(lián)，各種組分的檢出率高低不同，以丁香酚為主，由高到低順序?yàn)槎∠惴樱疽阴；惗∠惴樱炯谆惗∠惴樱井惗∠惴樱炯谆∠惴印?/p>

（二）不同品種中丁香酚類麻醉劑殘留情況

所采集樣品中，石斑魚中丁香酚、甲基異丁香酚含量分別為24.50μg/kg、7.51μg/kg，鱖魚中丁香酚、異丁香酚、乙?；惗∠惴雍糠謩e為8.48μg/kg、9.40μg/kg、35.80μg/kg，羅非魚中丁香酚、甲基異丁香酚、乙?；惗∠惴雍糠謩e為43.30μg/kg、6.80μg/kg、37.00μg/kg外，除此之外三個(gè)品種其余各組分均為未檢出。丁香酚在石斑魚、鱖魚、羅非魚肌肉組織中均有不同程度的殘留，分布在3.30μg/kg～118.00μg/kg之間，數(shù)據(jù)分布區(qū)間較寬，異丁香酚、甲基異丁香酚、乙?；惗∠惴釉趥€(gè)別樣品中檢出，含量范圍較窄，且殘留較?。ǔ阴；惗∠惴?4.00μg/kg外），甲基丁香酚全部為未檢出。表2顯示，石斑魚與鱖魚差異極顯著（p=0.003＜0.01）、與羅非魚（p=0.30＞0.05）無(wú)顯著性差異；鱖魚與羅非魚（p=0.06＞0.05）無(wú)顯著性差異。

表2 不同品種檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表 單位：μg/kg

（三）不同月份丁香酚類麻醉劑殘留情況

從表3可以看出，甲基丁香酚均未檢出。石斑魚、鱖魚在春、夏季丁香酚均有檢出，羅非魚僅夏季檢出丁香酚，其余組分在夏季樣品中有不同殘留程度的檢出現(xiàn)象，春季均為未檢出。試驗(yàn)研究期間，全部樣品尚未發(fā)現(xiàn)甲基丁香酚殘留。

表3 不同月份檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表 單位：μg/kg

四、分析與討論

（一）不同組分殘留比較分析

從天然植物中，通過(guò)乙醇蒸汽蒸餾法、超臨界CO2萃取法等方法，可提取丁香揮發(fā)油，提取物中主要組分為丁香酚（80.0%以上），并含有多種成分。本研究發(fā)現(xiàn)，水產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)樣品中主要?dú)埩粢矠槎∠惴?，其平均含量?4.50μg/kg，其他各組分、含量差異明顯，部分樣品中乙?；惗∠惴痈哂诙∠惴?。筆者分析認(rèn)為，存在丁香酚類麻醉劑殘留的水產(chǎn)品，其流通過(guò)程中使用的丁香酚麻醉劑是多種丁香酚類物質(zhì)摻雜在一起，形成的混合物；或者使用的是以甲基異丁香酚、乙?；惗∠惴拥榷∠惴宇愇镔|(zhì)為主的麻醉劑。

（二）不同季節(jié)之間的變化分析

石斑魚、鱖魚、羅非魚等水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，主產(chǎn)地分布在我國(guó)海南、廣東、湖北、廣西等南方、中部省份，屬熱帶、亞熱帶季風(fēng)性氣候區(qū)域，商品魚銷往國(guó)內(nèi)各地。銷往我國(guó)北方的鮮活水產(chǎn)品，要經(jīng)過(guò)長(zhǎng)途運(yùn)輸，對(duì)魚類的生命力、商販的經(jīng)濟(jì)效益是一個(gè)很大的考驗(yàn)，此為麻醉劑的使用先決條件。從表3可以看出，丁香酚類麻醉劑春、夏季間（p石斑魚=0.13、p鱖魚=0.08，p＞0.05）無(wú)顯著性差異。僅本研究而言，丁香酚類麻醉劑在春季、夏季均有使用，無(wú)季節(jié)性變化。

（三）不同品種之間的差異分析

實(shí)際生產(chǎn)中丁香酚使用劑量在40mg/L～50mg/L或100mg/L～150mg/L之間，范圍較寬。研究結(jié)果表明，所抽取品種石斑魚、鱖魚、羅非魚中均存在使用丁香酚的現(xiàn)象，品種間差異顯著性僅見(jiàn)于石斑魚與鱖魚之間，且石斑魚（24.50μg/kg）高于鱖魚（8.48μg/kg）。分析認(rèn)為造成以上結(jié)果有兩個(gè)原因，一是石斑魚主產(chǎn)地在我國(guó)南方地區(qū)，銷往北方地區(qū)，運(yùn)輸路途較遠(yuǎn)，一般需要30h～40h，可能造成其使用丁香酚的劑量較鱖魚大；二是可能存在低濃度多次使用現(xiàn)象，以確保運(yùn)輸期間魚類處于麻醉狀態(tài)。

（四）食用安全性評(píng)價(jià)分析

丁香酚使用后，經(jīng)過(guò)生物體內(nèi)血液、肌肉、肝臟等組織器官代謝，產(chǎn)生各種代謝物。Fischer等學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，丁香酚經(jīng)過(guò)人體代謝之后，可在24h內(nèi)通過(guò)尿液基本完全排除。尿液中未代謝的丁香酚含量低于0.1%。由此可見(jiàn)，丁香酚在人體中代謝效果好，但其代謝產(chǎn)物還需要進(jìn)一步證實(shí)。

JECFA（食品添加劑聯(lián)合專家委員會(huì)）規(guī)定丁香酚的ADI（每日允許攝入量）為0～2.5mg/（kg·bw）。根據(jù)WHO GEMS/Food Cluster Diets（2012）的調(diào)查結(jié)果顯示，中國(guó)居民水產(chǎn)品（未經(jīng)處理）的平均消費(fèi)量分別為淡水魚27.0g/d，海水魚1.29g/d，其他水產(chǎn)品7.16g/d，合計(jì)消費(fèi)水產(chǎn)品35.5g/d。根據(jù)本研究檢測(cè)結(jié)果，水產(chǎn)品中丁香酚殘留有較高的檢出率（88.9%、86.7%、50%），殘留量范圍為3.28μg/kg～54.58μg/kg。按照最高殘留量計(jì)算，每人每天從食用魚中攝入的丁香酚總量最多為1.94μg，僅為JECFA推薦ADI的0.78‰。歐盟藥品管理局對(duì)異丁香酚使用安全性進(jìn)行評(píng)估，建議其ADI為0.075mg/（kg·bw），最大殘留量為6mg/kg。本研究所檢樣品異丁香酚殘留均小于6mg/kg。因此，總體上看，本研究抽檢的水產(chǎn)品中存在使用丁香酚類麻醉劑的現(xiàn)象，但丁香酚類麻醉劑殘留對(duì)人體健康尚未構(gòu)成風(fēng)險(xiǎn)。