中藥水提物抗菌作用研究

劉鑫　安麗麗　彭瑋

摘要：細(xì)菌感染可以引起全身性感染，其中金黃色葡萄球菌和大腸桿菌是造成細(xì)菌感染的主要致病菌。中藥因其具有活性成分豐富、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)，已成為篩選研發(fā)新型抗菌藥物的一個(gè)重要來(lái)源。因此，本研究擬以臨床上常見(jiàn)的解表藥、清熱解毒藥、清熱燥濕藥等為研究對(duì)象，篩選具有抗菌活性中藥，進(jìn)而以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，篩選具有抗菌活性組方。為中藥抗菌臨床應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：細(xì)菌感染;中藥抗菌;敗醬草

細(xì)菌感染是一種由致病菌或條件致病菌侵襲機(jī)體，產(chǎn)生毒素和其他代謝產(chǎn)物引起的急性全身性感染的疾病。

中醫(yī)藥用于治療感染性疾病有著數(shù)千年歷史，積累深厚，療效卓越?！侗窘?jīng)》中記錄“連翹主寒熱，鼠痿，瘰疬，癰腫惡瘡，癭瘤，結(jié)熱”。隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究不斷深入，許多中藥在治療感染性疾病方面表現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，并且由于其具有來(lái)源廣、易獲取、價(jià)格低廉、活性成分豐富、不易產(chǎn)生耐藥性等特點(diǎn)，已成為篩選研發(fā)新型抗菌藥物的一個(gè)重要來(lái)源。本研究擬以臨床上常見(jiàn)的解表藥、清熱解毒藥、清熱燥濕藥等為研究對(duì)象，探究對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抗菌活性，進(jìn)而以中醫(yī)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo)，篩選具有抗菌活性組方。

1 方法

1.1中藥材水提取物制備

稱取中藥材各30g，以5倍體積水150mL，回流提取三次，每次2h，合并提取液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮后得到濃縮膏后置于 ZK-82B 型真空干燥箱中 60℃下濃縮至浸干得半成品，檢測(cè)后經(jīng)粉碎、過(guò)篩混合獲取干燥粉末3g，1g粉末相當(dāng)于原藥10g，低溫干燥處儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

1.2最小抑菌濃度（MIC）測(cè)定

根據(jù)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)（CLSI）規(guī)定的肉湯稀釋法敏感性試驗(yàn)執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，測(cè)定36種中藥水提物對(duì)金黃色葡萄球菌ATCC29213和大腸桿菌ATCC25922最小抑菌濃度（MIC）。

1.3抗菌組方篩選

根據(jù)上述抗菌篩選，對(duì)具有抗菌活性的中藥水提物進(jìn)行組方篩選。

2結(jié)果

2.1 MIC結(jié)果

36種中藥水提物對(duì)金黃色葡萄球菌有不同程度的抗菌效果，具體見(jiàn)表1。

據(jù)目前研究表明，中藥提取物對(duì)上述兩種菌株的MIC在7.82～31.25mg/mL之間。結(jié)合本研究結(jié)果，初步判定對(duì)金黃色葡萄球球菌具有較強(qiáng)抗菌活性的中藥水提物為金銀花（綠原酸），連翹敗，敗醬草，金銀花（1%木樨草苷），大黃（10：1），大黃（10%大黃素），野菊花（4%黃酮），蒲公英（5%黃酮），其MIC在0.625～5mg/mL之間。

36種中藥水提物僅有2種對(duì)大腸桿菌具有抗菌作用，具體見(jiàn)表1。

2.2抗菌組方確定

根據(jù)上述測(cè)定結(jié)果，初步確定組方中含有7種成分即敗醬草、金銀花、連翹、黃芩、蒲公英、野菊花、牡丹皮，進(jìn)而通過(guò)兩種不同得比例組方進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，組方1即每種藥物1：1，測(cè)定結(jié)果為對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC是10mg/mL，對(duì)大腸桿菌的MIC大于40mg/mL;由于對(duì)大腸桿菌的抗菌效果差，進(jìn)而測(cè)定組方2即連翹占比50%，其余6種藥物比例均分，測(cè)定結(jié)果為對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC是10mg/mL，對(duì)大腸桿菌的MIC 40mg/mL。

3討論

細(xì)菌性感染疾病在祖國(guó)醫(yī)學(xué)中多屬于濕、熱病證的范疇，且多將細(xì)菌歸屬為熱毒之邪。細(xì)菌性感染疾病涉及了呼吸、消化、泌尿等各大系統(tǒng)。根據(jù)證治理論，抗菌中藥多集中選取清熱解毒藥和清熱燥濕藥。本實(shí)驗(yàn)選取不同種類中藥對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌進(jìn)行抗菌活性的系統(tǒng)篩選，深入明晰不同類別中藥的具體抗菌活性。通過(guò)表1分析，大多數(shù)中藥水提物具有對(duì)金黃色葡萄球菌抗菌作用，但對(duì)大腸桿菌的抗菌效果卻不理想。從整體來(lái)分析，對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌都具有抑制效果的藥物集中在清熱解毒類，主要是連翹。因此，本研究在進(jìn)行組方篩選時(shí)，著重考慮連翹得抗菌作用，提高其在組方種得占比，從而使該組方對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均具有抗菌活性。

綜上所述，以連翹為主的中草藥組方對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸桿菌具有抑制作用，但是其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。加之，中醫(yī)方劑學(xué)特色即為運(yùn)用“君臣佐使”配伍組成的處方能更好的服務(wù)臨床，因此，后期我們將深入開(kāi)展機(jī)理研究的同時(shí)，考察藥物配方、劑量配比并開(kāi)展劑型研究，挖掘中草藥潛力，服務(wù)人民健康。

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基金項(xiàng)目：貴州省科技計(jì)劃項(xiàng)目（黔科合基礎(chǔ)-ZK[2021]一般 083）;貴州中醫(yī)藥大學(xué)博士啟動(dòng)基金（貴中醫(yī)博士啟動(dòng)[2019]123號(hào)）

作者簡(jiǎn)介：劉鑫（1990-），女，漢族，黑龍江省北安市，講師，博士研究生，中藥藥理。