王書(shū)祥 戴東文* 楊英魁 王 迅 柴沙駝**
(1.青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院,西寧 810016;2.青海省高原放牧家畜營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,西寧 810016;3.青海省牦牛工程技術(shù)研究中心,西寧 810016)
牦牛主要棲息在青藏高原及周?chē)貐^(qū),是青藏高原的優(yōu)勢(shì)畜種,也是當(dāng)?shù)啬撩裰匾纳a(chǎn)生活資料[1]。由于青藏高原獨(dú)特的地理環(huán)境,一年只有“冷季”與“暖季”之分,冷季長(zhǎng)達(dá)7~9個(gè)月,牧草產(chǎn)量與營(yíng)養(yǎng)水平不能滿(mǎn)足牦牛營(yíng)養(yǎng)需要量,導(dǎo)致牦牛掉膘嚴(yán)重,養(yǎng)殖效益低下[2-3]。目前,已有大量研究表明,冷季補(bǔ)飼能夠提高放牧牦牛的生長(zhǎng)性能,但是鮮有涉及補(bǔ)飼對(duì)其瘤胃發(fā)酵及菌群結(jié)構(gòu)影響的研究[4-5],且已有研究表明瘤胃微生物與反芻動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育有密切的聯(lián)系[6-7]。瘤胃是反芻動(dòng)物消化飼糧的重要場(chǎng)所,其含有大量微生物,包括細(xì)菌、真菌、原蟲(chóng)和古生菌等[8]。影響反芻動(dòng)物瘤胃菌群結(jié)構(gòu)組成的因素除了動(dòng)物品種、年齡、生理階段等內(nèi)部因素外,最主要的外部因素就是飼糧營(yíng)養(yǎng)水平[9]。周力等[10]研究發(fā)現(xiàn),補(bǔ)飼降低了藏羔羊瘤胃細(xì)菌多樣性與豐富度,但提高了相關(guān)淀粉降解菌的相對(duì)豐度。Mao等[11]研究表明,隨著飼糧精粗比的提高,奶牛瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)濃度和淀粉降解菌的相對(duì)豐度呈上升趨勢(shì),而瘤胃液pH和纖維降解菌相對(duì)豐度呈下降趨勢(shì)。由此可見(jiàn),通過(guò)調(diào)控飼糧營(yíng)養(yǎng)水平,能夠改善瘤胃發(fā)酵,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率,進(jìn)而提高生產(chǎn)性能。因此,本試驗(yàn)擬通過(guò)16S rDNA高通量測(cè)序技術(shù),從微生物角度闡述補(bǔ)飼精料對(duì)冷季放牧牦牛生長(zhǎng)性能、瘤胃發(fā)酵和菌群結(jié)構(gòu)的影響,以期為青藏高原冷季放牧牦牛精準(zhǔn)補(bǔ)飼提供理論依據(jù)。
試驗(yàn)于2019年11月至2020年2月在青海省貴南縣老扎西牧場(chǎng)的冬季草場(chǎng)進(jìn)行。該草場(chǎng)屬于高寒草甸草地,優(yōu)勢(shì)種有小嵩草、高山嵩草、矮嵩草、線(xiàn)葉嵩草等。
選取3周歲左右、體重[(204.90±10.65)kg]相近、體況良好的公牦牛24頭,隨機(jī)分為2組(每組12頭):對(duì)照組僅放牧,不補(bǔ)飼;試驗(yàn)組在放牧的基礎(chǔ)上每頭每天精料補(bǔ)飼量為體重的1.2%。試驗(yàn)期為100 d,其中預(yù)試期10 d,正試期90 d。
所有試驗(yàn)牦牛在同一草場(chǎng)放牧,設(shè)置2個(gè)面積大小一樣的圍欄小區(qū),每個(gè)圍欄小區(qū)的面積大小約為300畝(1畝≈667 m2),08:00出牧,18:00收牧,試驗(yàn)組在出牧前和收牧后分2次進(jìn)行補(bǔ)飼,所有試驗(yàn)牦牛自由飲水。補(bǔ)飼精料參照我國(guó)《肉牛飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》(NY/T 815—2004),結(jié)合放牧牦牛采食量[12]配制。牧草營(yíng)養(yǎng)水平、精料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
表1 牧草營(yíng)養(yǎng)水平、精料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Pasture nutrient levels,composition and nutrient levels of the concentrate (DM basis) %
1.4.1 牧草樣品
在試驗(yàn)中期,觀察試驗(yàn)耗牛所吃的牧草,然后驅(qū)離試驗(yàn)牦牛采集該區(qū)域牧草樣品,采集方法采用模擬采摘法。在同一草場(chǎng)隨機(jī)選取10個(gè)1 m×1 m樣方,齊地面刈割取樣,65 ℃烘干后計(jì)算地上生物量,經(jīng)計(jì)算牧草地上生物量為71.46 g/m2。
1.4.2 瘤胃液樣品
在正試期第90天,參考Geishauser[13]的方法,晨飼前采用胃管式采樣器采集瘤胃液150 mL,4層紗布過(guò)濾后立即測(cè)定pH,剩余的瘤胃液樣品分裝至15 mL離心管中,置于-80 ℃凍存?zhèn)溆谩?/p>
1.5.1 牧草及精料營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定
牧草、精料中的干物質(zhì)(DM)含量采用GB/T 6435—2014中的方法測(cè)定,粗蛋白質(zhì)(CP)含量采用GB/T 6432—2018中的方法測(cè)定,鈣(Ca)含量采用GB/T 6436—2002中的方法測(cè)定,磷(P)含量采用按照GB/T 6437—2002中的方法測(cè)定,中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)含量采用Van Soest等[14]的方法測(cè)定,所用儀器為ANKOM 200i半自動(dòng)纖維分析儀。
1.5.2 生長(zhǎng)性能的測(cè)定
正試期開(kāi)始前和結(jié)束時(shí)于晨飼前連續(xù)2 d空腹稱(chēng)重,計(jì)算總增重(TWG)、平均日増重(ADG)。
1.5.3 瘤胃發(fā)酵參數(shù)的測(cè)定
使用HANNA HI221型臺(tái)式酸度計(jì)測(cè)定瘤胃液pH,測(cè)定前對(duì)該酸度計(jì)使用相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行校正;參照馮宗慈等[15]改進(jìn)的比色法測(cè)定瘤胃液氨態(tài)氮(NH3-N)濃度,儀器為紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(TU-1810),預(yù)熱30 min,在波長(zhǎng)625 nm處測(cè)定溶液吸光度(OD)值,利用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定樣品的氨態(tài)氮濃度;瘤胃液微生物蛋白(MCP)濃度采用考馬斯亮藍(lán)法[16]在595 nm波長(zhǎng)處比色測(cè)定(試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所);瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度測(cè)定參考文獻(xiàn)[17-18],使用日本島津GC-2014型氣相色譜儀測(cè)定,其中揮發(fā)性脂肪酸濃度測(cè)定條件為:氫火焰離子化(FID)檢測(cè)器,色譜柱為毛細(xì)管柱(FFAP,30.00 m×0.32 mm×0.50 μm);升溫條件為初始60 ℃,以10 ℃/min升溫至120 ℃,保留2 min,以15 ℃/min升溫至180 ℃,保留5 min;汽化室溫度250 ℃;FID溫度250 ℃;進(jìn)樣量1 μL,載氣為高純氮?dú)?99.99%),壓力0.7 MPa;氫氣壓力0.4 MPa,空氣壓力0.4 MPa,毛細(xì)管柱壓力0.6~0.8 MPa,分流比40∶1。
1.5.4 瘤胃微生物DNA提取、測(cè)序
每組隨機(jī)選擇4個(gè)瘤胃液樣品置于冰上解凍并充分混合,使用CTAB方法提取瘤胃液樣品基因組DNA,用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)DNA的純度和濃度,取適量的樣本于離心管中,用無(wú)菌水稀釋樣本至1 ng/μL。根據(jù)細(xì)菌16S rDNA基因的V3~V4區(qū),合成帶有Barcode的特異引物。通用引物序列:515F,5′-GTGCCAGCMGCCGCGG-3′;806R,5′-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3′。PCR采用25 μL擴(kuò)增體系;DNA模板5 ng,5 μmol/L的上、下游引物各1 μL,2 ng/μL的牛血清白蛋白(BSA)3 μL,2×Taq Plus Master Mix 12.5 μL,雙蒸水(ddH2O)補(bǔ)加至25 μL;PCR擴(kuò)增條件:94 ℃預(yù)變性5 min;94 ℃變性30 s,50 ℃退火30 s,72 ℃延伸60 s,共30個(gè)循環(huán);72 ℃延伸7 min。PCR擴(kuò)增產(chǎn)物用1.0%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè),用QIAquickPCR純化試劑盒(德國(guó)Qiagen公司)純化回收,符合要求的DNA樣品送至北京奧維森基因科技有限公司測(cè)序,測(cè)序平臺(tái)為Mixed PE 300。
1.5.5 數(shù)據(jù)分析
測(cè)序平臺(tái)得到的原始數(shù)據(jù)使用軟件Trimmomatic(Version 0.36)軟件去除低質(zhì)量數(shù)據(jù),然后通過(guò)vsearch軟件和物種數(shù)據(jù)庫(kù)去除嵌合體,得到有效序列。篩選相似性在97%以上的序列歸類(lèi)為操作分類(lèi)單元(OTU),然后對(duì)OTU聚類(lèi)、物種分類(lèi)學(xué)、多樣性指數(shù)、群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2016初步整理后,采用SPSS 24.0軟件進(jìn)行單因素方差分析,并用Duncan氏法進(jìn)行組間的多重比較,P<0.05表示差異顯著,P<0.01表示差異極顯著,結(jié)果均以平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示。
由表2可知,試驗(yàn)開(kāi)始前對(duì)照組和試驗(yàn)組牦牛體重?zé)o顯著差異(P=0.872),經(jīng)過(guò)90 d的補(bǔ)飼后,冷季傳統(tǒng)放牧條件下,牦牛掉膘嚴(yán)重,補(bǔ)飼精料極顯著提高了牦牛的平均日增重(P<0.01)。
表2 補(bǔ)飼精料對(duì)冷季放牧牦牛生長(zhǎng)性能的影響Table 2 Effects of concentrate supplementation on growth performance of grazing yaks in cold season
由表3可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)組瘤胃液氨態(tài)氮、總揮發(fā)性脂肪酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸和異戊酸濃度極顯著提高(P<0.01),微生物蛋白和乙酸濃度顯著提高(P<0.05);pH和乙酸/丙酸值極顯著降低(P<0.01)。上述結(jié)果表明,補(bǔ)飼精料能夠促進(jìn)冷季放牧牦牛瘤胃發(fā)酵。
表3 補(bǔ)飼精料對(duì)冷季放牧牦牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響Table 3 Effects of concentrate supplementation on rumen fermentation parameters of grazing yaks in cold season
由圖1可知,2組共產(chǎn)生2 945個(gè)OTU,其中對(duì)照組和試驗(yàn)組分別檢測(cè)到2 627、2 415個(gè)OTU,相對(duì)應(yīng)的獨(dú)有OTU數(shù)目分別為528和316個(gè),共有OTU數(shù)目為2 099個(gè),占總OTU數(shù)目的79.90%。由圖2可知,隨著測(cè)序深度的增加,2組瘤胃細(xì)菌物種稀釋曲線(xiàn)趨于平緩,說(shuō)明測(cè)序程度已基本覆蓋到樣品中所有的細(xì)菌物種。通過(guò)alpha多樣性分析(表4)可知,試驗(yàn)組Shannon指數(shù)和譜系多樣性顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。通過(guò)主坐標(biāo)分析(PCoA,圖3)可知,2組放牧牦牛瘤胃菌群結(jié)構(gòu)具有明顯差異。以上結(jié)果表明,補(bǔ)飼精料降低了冷季放牧牦牛瘤胃菌群的多樣性與豐富度。
圖2 稀釋曲線(xiàn)Fig.2 Rarefaction curve
圖3 主坐標(biāo)分析Fig.3 PCoA
表4 補(bǔ)飼精料對(duì)冷季放牧牦牛瘤胃菌群alpha多樣性的影響Table 4 Effects of concentrate supplementation on alpha diversity of rumen microbial community of grazing yaks in cold season
由表5可知,在門(mén)水平上,試驗(yàn)組瘤胃中擬桿菌門(mén)和放線(xiàn)菌門(mén)豐度顯著高于對(duì)照組(P<0.05),疣微菌門(mén)和螺旋體門(mén)豐度極顯著高于對(duì)照組(P<0.01);對(duì)照組瘤胃中厚壁菌門(mén)豐度顯著高于試驗(yàn)組(P<0.05),黏膠球形菌門(mén)和纖維桿菌門(mén)豐度極顯著高于試驗(yàn)組(P<0.01)。由表6可知,在屬水平上,試驗(yàn)組瘤胃中普雷沃菌屬_1和瘤胃球菌科_NK4A214豐度極顯著高于對(duì)照組(P<0.01),克里斯滕森菌科_R-7和解琥珀酸菌屬豐度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。以上結(jié)果表明,補(bǔ)飼精料對(duì)冷季放牧牦牛瘤胃菌群結(jié)構(gòu)有一定的影響。
表5 補(bǔ)飼精料對(duì)冷季放牧牦牛瘤胃菌群組成的影響(門(mén)水平)Table 5 Effects of concentrate supplementation on rumen microbial community composition of grazing yaks in cold season (at phylum level) %
表6 補(bǔ)飼精料對(duì)冷季放牧牦牛瘤胃菌群組成的影響(屬水平)Table 6 Effects of concentrate supplementation on rumen microbial community composition of grazing yaks in cold season (at genus level) %
CK表示對(duì)照組,T表示試驗(yàn)組。下圖同。CK represented control group,and T represented test group.The same as below.圖1 OTU維恩圖Fig.1 OTU Venn diagram
由于青藏高原獨(dú)特的地理環(huán)境,一年“無(wú)四季之分,只有冷暖之別”,冷季長(zhǎng)達(dá)7~8個(gè)月,冷季牧草產(chǎn)量與營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)水平極度匱乏,導(dǎo)致牦牛的生長(zhǎng)一直處于“夏飽、秋肥、冬瘦、春死亡”的惡性循環(huán)中,生長(zhǎng)效率低下,經(jīng)濟(jì)效益差[2-3]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,傳統(tǒng)放牧條件下,冷季放牧牦牛體重嚴(yán)重下降,3個(gè)月體重?fù)p失率高達(dá)10.35%,補(bǔ)飼精料的試驗(yàn)組牦牛的ADG為453.32 g/d,與對(duì)照組相比顯著促進(jìn)了牦牛的生長(zhǎng),這與徐田偉等[19]、張建勛[20]和王威等[21]的研究結(jié)果相一致。其原因主要是:一方面,補(bǔ)飼精料直接為放牧牦牛提高了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的攝入量,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的增加可提高反芻動(dòng)物抵御冷應(yīng)激的能力[22];另一方面,補(bǔ)飼精料一定程度上滿(mǎn)足了放牧牦牛對(duì)礦物元素的需要,提高了瘤胃的消化能力,從而提高了牦牛對(duì)牧草的消化率[23-24],有利于促進(jìn)放牧牦牛的生長(zhǎng)發(fā)育。
瘤胃液中的揮發(fā)性脂肪酸主要來(lái)自飼糧中淀粉、纖維等物質(zhì)的發(fā)酵,其主要包括乙酸、丙酸和丁酸等短鏈脂肪酸,是反芻動(dòng)物的主要能量來(lái)源[25]。蔡晶晶等[26]研究發(fā)現(xiàn),隨著飼糧非纖維性碳水化合物(NFC)/中性洗滌纖維(NDF)的提高,奶牛瘤胃液pH顯著降低。本研究結(jié)果表明,試驗(yàn)組牦牛瘤胃液pH極顯著低于對(duì)照組,與蔡晶晶等[26]的研究結(jié)果相一致。這可能是由于補(bǔ)飼精料后牦牛攝入的NFC的比例增加,在瘤胃中迅速發(fā)酵產(chǎn)生大量的揮發(fā)性脂肪酸主和乳酸等物質(zhì),導(dǎo)致瘤胃液pH下降。瘤胃液氨態(tài)氮是瘤胃微生物利用飼料中的蛋白質(zhì)合成的,也是瘤胃微生物蛋白合成的前體,其濃度反映了瘤胃微生物分解飼糧中含氮物質(zhì)產(chǎn)生氨態(tài)氮的速度及對(duì)其攝取利用情況。本試驗(yàn)條件下,試驗(yàn)組瘤胃液氨態(tài)氮和微生物蛋白濃度顯著或極顯著高于對(duì)照組,這與董利鋒等[27]和朱昊鵬等[28]的研究結(jié)果基本一致,原因可能是補(bǔ)飼精料中可溶性蛋白質(zhì)、易消化碳水化合物和非蛋白含氮物含量高,且降解速率緩慢,有利于氨態(tài)氮和微生物蛋白的合成。Giger-Reverdin等[29]研究發(fā)現(xiàn),隨著飼糧中精料比例的提高,奶山羊瘤胃液丙酸、丁酸和總揮發(fā)性脂肪酸濃度顯著提高,而乙酸濃度和乙酸/丙酸值顯著降低。Murphy等[30]研究也發(fā)現(xiàn),降低飼糧中精料比例降低了奶牛瘤胃液中丙酸、丁酸、戊酸和總揮發(fā)性脂肪酸濃度,而提高了乙酸濃度。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組牦牛瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸、乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸和異戊酸濃度顯著或極顯著高于對(duì)照組,而乙酸/丙酸值顯著低于對(duì)照組,與以上研究結(jié)果不一致。其可能原因是冷季牧草產(chǎn)量與營(yíng)養(yǎng)水平極度降低,不能滿(mǎn)足放牧牦牛正常的采食量需要,無(wú)法為瘤胃微生物提供足夠的發(fā)酵底物,從而導(dǎo)致瘤胃液中揮發(fā)性脂肪酸濃度降低。
Chao1指數(shù)是衡量菌群豐富度的指標(biāo),Shannon指數(shù)是衡量菌群多樣性的指標(biāo)。Chao1指數(shù)越大,表明菌群豐富度越高;Shannon指數(shù)越大,表明菌群多樣性越高。周力等[10]研究發(fā)現(xiàn),補(bǔ)飼精料降低了藏羔羊瘤胃菌群多樣性與豐富度;Liu等[31]研究也發(fā)現(xiàn),提高飼糧中精料的比例,顯著降低了牦牛瘤胃菌群Chao1和Shannon指數(shù),這可能是增加飼糧中精料比例導(dǎo)致瘤胃液pH下降,而瘤胃液pH降低則會(huì)抑制瘤胃液中不耐酸的纖維降解菌的生長(zhǎng)與繁殖[32]。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組牦牛瘤胃菌群Shannon指數(shù)較對(duì)照組顯著降低,Chao1指數(shù)呈下降的趨勢(shì),與以上研究結(jié)果基本一致。
飼糧結(jié)構(gòu)是影響反芻動(dòng)物瘤胃微生物區(qū)系組成的首要因數(shù),營(yíng)養(yǎng)組成不同會(huì)直接影響瘤胃微生物的種類(lèi)與數(shù)目[33]。大量研究表明,厚壁菌門(mén)和擬桿菌門(mén)是反芻動(dòng)物瘤胃中的優(yōu)勢(shì)菌門(mén),擬桿菌門(mén)是降解碳水化合物的主要細(xì)菌,而厚壁菌門(mén)主要參與纖維物質(zhì)的分解,兩者在瘤胃發(fā)酵過(guò)程中起著至關(guān)重要的作用[34-35]。本研究結(jié)果表明,試驗(yàn)組和對(duì)照組牦牛瘤胃液中擬桿菌門(mén)和厚壁菌門(mén)豐度和占整個(gè)細(xì)菌門(mén)的85%,與以上研究結(jié)果相一致。Kim等[36]研究表明,粗料組肉牛瘤胃中厚壁菌門(mén)豐度顯著低于高谷物組。李蔣偉等[37]研究也發(fā)現(xiàn),降低飼糧精料比例有提高藏羔羊瘤胃厚壁菌門(mén)豐度的趨勢(shì)。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組牦牛瘤胃擬桿菌門(mén)豐度顯著高于對(duì)照組,而厚壁菌門(mén)豐度顯著低于對(duì)照組,這與以上研究結(jié)果相一致。放線(xiàn)菌門(mén)是一類(lèi)革蘭氏陽(yáng)性菌,具有分支的纖維和孢子,其大部分是腐生菌,也有寄生菌,可致病[38]。本試驗(yàn)中,補(bǔ)飼顯著提高了牦牛瘤胃放線(xiàn)菌門(mén)的豐度,表明生產(chǎn)中牦牛精料補(bǔ)飼量不宜過(guò)高。疣微菌門(mén)在哺乳動(dòng)物胃腸道免疫中具有重要的作用,其豐度的上升與機(jī)體免疫力增強(qiáng)有密切的聯(lián)系[39]。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組牦牛瘤胃疣微菌門(mén)豐度極顯著高于對(duì)照組,說(shuō)明了補(bǔ)飼精料一定程度提高了放牧牦牛的免疫力。研究表明,螺旋體門(mén)可以有效地降解果膠和磷酸酯,利用可發(fā)酵的碳水化合物合成揮發(fā)性脂肪酸,為反芻動(dòng)物機(jī)體提供能量[40]。徐曉鋒等[41]研究發(fā)現(xiàn),高精料飼糧提高了奶牛瘤胃螺旋體門(mén)豐度,這與本研究結(jié)果相一致。黏膠球形菌門(mén)和纖維桿菌門(mén)與纖維二糖的降解密切相關(guān),能夠促進(jìn)瘤胃對(duì)纖維物質(zhì)的降解[42]。本研究結(jié)果表明,試驗(yàn)組牦牛瘤胃黏膠球形菌門(mén)和纖維桿菌門(mén)豐度較對(duì)照組極顯著降低,原因可能是試驗(yàn)組牦牛瘤胃發(fā)酵的纖維物質(zhì)比例低于對(duì)照組。
在屬水平上,普雷沃菌屬是瘤胃中的優(yōu)勢(shì)菌屬,參與瘤胃內(nèi)的多種代謝活動(dòng),主要降解飼糧中的半纖維成分,并且普雷沃菌屬能夠產(chǎn)生大量的復(fù)合酶,促進(jìn)非纖維性多糖和蛋白質(zhì)的降解[43]?;艨『甑萚44]研究發(fā)現(xiàn),隨著飼糧精粗比的提高,努比亞山羊瘤胃普雷沃菌屬豐度呈上升的趨勢(shì)。陳蕓等[45]研究也表明,增加飼糧中精料的比例能顯著提高了山羊瘤胃普雷沃菌屬豐度。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組牦牛瘤胃普雷沃菌屬_1豐度極顯著高于對(duì)照組,這與以上研究結(jié)果相一致;試驗(yàn)組牦牛瘤胃克里斯滕森菌科_R-7豐度顯著高于對(duì)照組,與李嵐捷[46]研究結(jié)果相一致??死锼闺芲R-7與乙酸產(chǎn)量有關(guān),本研究中試驗(yàn)組牦牛瘤胃液乙酸濃度顯著高于對(duì)照組也驗(yàn)證這一點(diǎn)。瘤胃球菌科_NK4A214屬于瘤胃球菌屬,歸屬于厚壁菌門(mén),主要降解纖維物質(zhì)。Fernando等[47]研究發(fā)現(xiàn),高精料組奶牛瘤胃中瘤胃球菌屬豐度顯著低于粗料組,與本研究結(jié)果不一致。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組牦牛瘤胃中瘤胃球菌科_NK4A2豐度極顯著高于對(duì)照組,原因可能是冷季牧草產(chǎn)量低,牦牛采食的纖維物質(zhì)量低,補(bǔ)飼精料一定程度上促進(jìn)了牦牛對(duì)纖維物質(zhì)的攝入量,導(dǎo)致瘤胃球菌科_NK4A2的豐度有所上升。有研究報(bào)道,解琥珀酸菌屬豐度與飼糧纖維成分有密切聯(lián)系,可以降解纖維或纖維二糖產(chǎn)生琥珀酸和乙酸等物質(zhì)[48]。本試驗(yàn)中,補(bǔ)飼精料顯著提高了牦牛瘤胃解琥珀酸菌屬豐度,試驗(yàn)組瘤胃液乙酸濃度較對(duì)照組上升也驗(yàn)證這一點(diǎn)。
在本試驗(yàn)條件下,補(bǔ)飼精料量為體重的1.2%時(shí),能夠顯著提高冷季放牧牦牛的平均日增重,促進(jìn)瘤胃中微生物蛋白和揮發(fā)性脂肪酸的合成,降低瘤胃菌群豐富度與多樣性,提高瘤胃擬桿菌門(mén)、放線(xiàn)菌門(mén)、疣微菌門(mén)和螺旋體門(mén)豐度,降低瘤胃厚壁菌門(mén)、黏膠球形菌門(mén)和纖維桿菌門(mén)豐度,提高瘤胃普雷沃菌屬_1、瘤胃球菌科_NK4A214、克里斯滕森菌科_R-7和解琥珀酸菌屬豐度。
動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)2021年11期