組織常駐記憶T細(xì)胞在銀屑病發(fā)病中的作用研究進(jìn)展

周玉嬋，溫炬，鄭榮昌，李華潤，李婷，黃錦萍，盧鎮(zhèn)宇，秦思，李思慧，李先文，李慕錦

1.廣東醫(yī)科大學(xué)研究生院，廣東 湛江 524023；2.廣東省第二人民醫(yī)院皮膚性病科，廣東 廣州 510317

銀屑病是一種常見并易復(fù)發(fā)的免疫介導(dǎo)的慢性炎癥性皮膚病，它與遺傳易感性、自身免疫性疾病、精神病和心理健康、環(huán)境因素(如感染、壓力、創(chuàng)傷)等相關(guān)，其典型的臨床表現(xiàn)為皮損處紅色丘疹或斑塊，上覆厚層鱗屑，病理特征以表皮角質(zhì)形成細(xì)胞增殖、角化不全、角化過度、真皮乳頭狀血管過度擴(kuò)張和炎性細(xì)胞浸潤為主[1-2]。全世界2%～3%的人口患有銀屑病[3]，同時(shí)合并克羅恩病[4]、2型糖尿病[5]、心血管疾病[6]、淋巴瘤[7]和抑郁癥[8]等并發(fā)癥使銀屑病患者承受著很高的心理和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，因此研究銀屑病的發(fā)病機(jī)制并研制出有效的治療藥物具有重大意義。白介素(interleukin，IL)-23/IL-17細(xì)胞因子軸在銀屑病的發(fā)生發(fā)展中起著核心作用，而IL-23/IL-17抑制劑在治療中也發(fā)揮了作用[9]。治療后皮損消退，但停止治療后易復(fù)發(fā)，皮損復(fù)發(fā)是銀屑病顯著的臨床特征和治療難點(diǎn)[10]，皮損易復(fù)發(fā)于原皮損消退部位，提示其復(fù)發(fā)可能與“免疫記憶”有關(guān)。TRM細(xì)胞是記憶性T細(xì)胞中的重要亞群，具有在外周組織中能夠長期存活和低遷移的兩大重要特點(diǎn)。在此本文將就TRM細(xì)胞在銀屑病發(fā)病中的作用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 銀屑病的發(fā)病機(jī)制

銀屑病的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。最近的研究發(fā)現(xiàn)，表觀遺傳因素包括DNA甲基化水平的失調(diào)，異常的組蛋白修飾和微小RNA表達(dá)與銀屑病的發(fā)生有關(guān)，免疫細(xì)胞和細(xì)胞因子的相互作用是銀屑病發(fā)病的另一個(gè)關(guān)鍵因素。此外，Th1/Th2比例、輔助性T細(xì)胞17(T helper type 17 cells，Th17)/Treg平衡亦有參與[11]。目前普遍認(rèn)為，IL-23/Th17炎性反應(yīng)軸參與銀屑病的發(fā)生、發(fā)展。樹突細(xì)胞在外界刺激下產(chǎn)生IL-23因子，IL-23是由一個(gè)特定的亞基p19和一個(gè)p40亞基組成的二聚體，與IL-12共享[12]，IL-23刺激Th17細(xì)胞的分化、增殖和存活，促進(jìn)效應(yīng)細(xì)胞因子如IL-17A和IL-22的產(chǎn)生，招募中性粒細(xì)胞導(dǎo)致銀屑病患者炎癥損傷。IL-17刺激角質(zhì)形成細(xì)胞產(chǎn)生抗菌肽、促炎細(xì)胞因子和趨化因子(IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-17C、CXCL1、CXCL3、CXCL5、CXCL8、CCL20)以及促增殖細(xì)胞因子(IL-19)。IL-17通過上調(diào)IL-6、IL-8和細(xì)胞間黏附分子1，相互作用促進(jìn)組織炎癥[13]。針對IL-23的p40亞基和特異性p19亞基的單克隆抗體以及IL-17受體抗體已被證明具有較高的臨床療效[12]。大多數(shù)人外周血循環(huán)Treg細(xì)胞(regulatory Foxp3+T cells，Treg cells)表達(dá)皮膚免疫受體皮膚淋巴細(xì)胞抗原(CLA)和趨化因子受體CCR6。HARTWIG等[14]認(rèn)為Treg細(xì)胞可抑制CD4+T細(xì)胞產(chǎn)生的粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)向受損皮膚的浸潤，在Treg細(xì)胞缺陷小鼠中GM-CSF可以逆轉(zhuǎn)過度炎癥，使皮損消退，相反，Treg細(xì)胞的缺失會加重皮膚炎癥，表明Treg細(xì)胞在抑制皮膚炎癥和調(diào)節(jié)皮膚穩(wěn)態(tài)方面可能發(fā)揮關(guān)鍵作用。

2 TRM細(xì)胞

皮膚是人體最大的器官，在皮膚中建立免疫記憶是適應(yīng)性免疫反應(yīng)的重要組成部分，一旦原始T細(xì)胞被抗原呈遞細(xì)胞激活，其中小部分細(xì)胞就會分化為前體記憶T細(xì)胞，這些前體細(xì)胞最終發(fā)展成為記憶T細(xì)胞的幾個(gè)亞群[15]。記憶T細(xì)胞通過對病原體的快速反應(yīng)來保護(hù)宿主[16]，根據(jù)分化狀態(tài)和遷移方式，記憶T細(xì)胞可分成三個(gè)群體，首先是在二級淋巴器官循環(huán)的中央記憶T細(xì)胞(central memory T cells，TCM)；第二是存在于血液和外周組織的效應(yīng)記憶T細(xì)胞(effector memory T cells，TEM)；第三是只存在于非淋巴組織的組織常駐記憶T細(xì)胞(TRM)[17]。TRM細(xì)胞最顯著的特征是長期存活和在外周組織中的低遷移，TRM細(xì)胞可以存活數(shù)月(如在肺部)或數(shù)年(如在皮膚中)；一般情況下，TRM細(xì)胞一旦進(jìn)入外周組織，就不會再通過血液循環(huán)[15]。在沒有抗原刺激的情況下，TRM細(xì)胞在外周組織中存活很長一段時(shí)間；當(dāng)再次遇到同種抗原時(shí)，TRM細(xì)胞會在局部組織微環(huán)境中立即觸發(fā)免疫反應(yīng)，并為宿主提供第一道防線。TRM細(xì)胞是非循環(huán)的，長期存在于組織中，對入侵的病原體提供即時(shí)保護(hù)。然而，TRM細(xì)胞的過度激活可能參與自身免疫性疾病和炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)制[18]。據(jù)報(bào)道，TRM在宿主抗感染、癌癥免疫治療和許多人類自身免疫性疾病如銀屑病、白癜風(fēng)、多發(fā)性硬化癥和特應(yīng)性皮炎的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用[19-20]。研究發(fā)現(xiàn)，在人類皮膚中，感染后可產(chǎn)生CD8+TRM細(xì)胞；而當(dāng)小鼠被白色念珠菌感染時(shí)，在皮膚中發(fā)現(xiàn)了分泌IL-17的CD4+TRM細(xì)胞[21]。CHEUK等[22]發(fā)現(xiàn)在白癜風(fēng)患者的皮膚中，黑色素細(xì)胞被局部清除，組成性表達(dá)穿孔素和顆粒酶B的CD8+CD49a+TRM細(xì)胞在表皮和真皮中積累；而銀屑病皮損中的CD8+CD49a-TRM細(xì)胞主要產(chǎn)生IL-17，促進(jìn)銀屑病皮損的局部炎癥。TIAGO等[23]發(fā)現(xiàn)銀屑病和蕈樣真菌病均是由皮膚TRM細(xì)胞引起的，它們的特征都是炎性皮膚病變，經(jīng)過治療后皮損完全消失，一旦停止治療后經(jīng)常在同一解剖部位復(fù)發(fā)，這一現(xiàn)象表明，大多數(shù)傳統(tǒng)治療方法可能不會根除致病T細(xì)胞，而是抑制這些細(xì)胞的活性，停止積極治療可以使這些T細(xì)胞重新激活并引發(fā)炎癥。TRM細(xì)胞表達(dá)低水平的淋巴結(jié)歸巢分子CD62L和CCR7(chemokine receptor 7)，缺乏CD62L和CCR7使它們能夠停留在外周組織中并下調(diào)轉(zhuǎn)錄因子KLF2和鞘氨醇-1-磷酸受體(sphingosine-1-phosphate receptor，S1PR1)[20，24]。從感染和非感染動(dòng)物的各個(gè)非淋巴組織中識別出TRM細(xì)胞有賴于兩個(gè)重要標(biāo)記物，即CD69(C型凝集素)和CD103(E鈣黏蛋白受體)，它們在絕大多數(shù)TRM細(xì)胞中都有表達(dá)[17]。CD69拮抗S1PR1，從而阻止細(xì)胞從組織中遷移，CD69可以在T細(xì)胞被抗原激活后短暫表達(dá)，并可被多種炎癥細(xì)胞因子上調(diào)；CD103則與上皮細(xì)胞上高表達(dá)的E鈣黏蛋白結(jié)合[25]。TRM細(xì)胞可分為CD8+和CD4+亞群，其中CD8+細(xì)胞主要分布在表皮，而CD4+細(xì)胞則傾向于真皮[26]。目前，CD8+CD69+CD103+/-TRM細(xì)胞廣泛分布于腸、皮膚、腦、肺、女性生殖道、唾腺、胸腺、脾臟和淋巴結(jié)；CD4+TRM被證實(shí)存在腸道固有層、皮膚真皮層、肺實(shí)質(zhì)和女性生殖道的淋巴群中[24]。

3 銀屑病與TRM細(xì)胞

雖然生物制劑非常有效，但部分患者停用這些生物制劑往往會導(dǎo)致疾病復(fù)發(fā)。銀屑病斑塊經(jīng)常在最初受影響的部位復(fù)發(fā)，這表明即使病變消失，一些免疫細(xì)胞可能仍然存在[27]。眾多治療中，停止光化學(xué)療法(PUVA)光化療或抗IL-23抗體治療后的患者皮損無復(fù)發(fā)時(shí)間最長，其中PUVA的中位無復(fù)發(fā)時(shí)間為8個(gè)月，與抗IL-17或抗IL-23抗體時(shí)間相似[28]。有學(xué)者對銀屑病患者和健康對照者相同的皮膚病變進(jìn)行活檢后進(jìn)行了TCR基因的CDR3區(qū)域的高通量篩選(high-throughput screening)分析，以評估銀屑病患者在依那西普治療或UVB是窄譜紫外線B段(UVB)治療完全消除皮膚炎癥之前和之后的T細(xì)胞寡克隆群，結(jié)果表明活動(dòng)性皮損患者的每單位皮膚T細(xì)胞總數(shù)比非損傷性皮膚或健康對照者多，但臨床治療已消退的銀屑病皮損的T細(xì)胞密度顯著也高于非受損皮膚和健康對照，與治療前皮損的T細(xì)胞密度沒有顯著差異[23]，提示銀屑病復(fù)發(fā)與某種T細(xì)胞亞群相關(guān)。另有報(bào)道發(fā)現(xiàn)Th17型TRM細(xì)胞存在于復(fù)發(fā)性銀屑病皮損中，即使在有效治療后仍存在于消退的皮膚中[29]。研究證實(shí)，銀屑病緩解消退區(qū)存在較高數(shù)量的CD8+CD69+TRM細(xì)胞，并且在體外刺激下仍可分泌大量IL-17A和IL-22細(xì)胞因子，刺激后培養(yǎng)的上清液可使小鼠咪喹莫特銀屑病模型恢復(fù)期皮損再激活[30]。同樣，KHALIL等[18]研究發(fā)現(xiàn)銀屑病患者臨床已恢復(fù)的皮膚和疾病初期的非損傷性皮膚均表達(dá)CD103、CD69，當(dāng)抗原識別后，TRM細(xì)胞分泌IL-17和IL-22，導(dǎo)致銀屑病皮損的出現(xiàn)。GALLAIS等[31]研究發(fā)現(xiàn)表皮TRM細(xì)胞密度最高，在活動(dòng)期和已治愈的銀屑病皮損中，TRM細(xì)胞穩(wěn)定地產(chǎn)生IL-17A和IL-22。有學(xué)者分析，銀屑病皮損真皮層激活的T細(xì)胞可以遷移到表皮并識別表皮自身抗原，可能向CD69+CD103+CCR7-CD45RA-CD62-表型的TRM細(xì)胞分化，通過細(xì)胞毒性T細(xì)胞(cytotoxic T cells，Tc)1/Tc17識別表皮自身抗原可誘導(dǎo)IL-22的分泌，介導(dǎo)表皮增生的初始階段和角質(zhì)形成細(xì)胞的激活，這將產(chǎn)生趨化因子和抗菌肽，導(dǎo)致炎癥的發(fā)生[32]?？梢?，TRM細(xì)胞可能與銀屑病的發(fā)病及復(fù)發(fā)有關(guān)。深入研究致病性TRM細(xì)胞有望解決銀屑病復(fù)發(fā)問題，針對TRM的治療有望成為新的有效治療方法。

4 銀屑病與γδT細(xì)胞

T淋巴細(xì)胞根據(jù)其表達(dá)的T細(xì)胞受體(TCR)可分為兩種T細(xì)胞：αβT細(xì)胞、γδT細(xì)胞(gamma delta T cells，γδT cells)，在獲得性免疫過程中，主要參與的是αβT細(xì)胞，而γδT細(xì)胞是一種有獲得性和先天免疫的特殊類型的免疫細(xì)胞，約占CD3+T細(xì)胞的1%～5%[9]。γδT細(xì)胞是T細(xì)胞的一個(gè)小子集，是分布在上皮組織的主要的T細(xì)胞群體；與αβT細(xì)胞相比，γδT細(xì)胞很少表達(dá)TCR。在小鼠的皮膚中，至少含有三種γδT細(xì)胞亞群:表皮γδT細(xì)胞(也稱為樹突表皮T細(xì)胞dendritic epidermal T cells，DETCs)、真皮Vγ4+細(xì)胞和真皮Vγ4-細(xì)胞[33]。與人類健康皮膚相比，在銀屑病皮損中真皮CD3+T細(xì)胞從1%增加到15%，真皮γδT細(xì)胞在總T細(xì)胞中也從15%增加到40%[34]。研究表明，在炎癥性疾病的小鼠模型中，γδ17細(xì)胞(IL-17-producingγδT cells)和Th17細(xì)胞是產(chǎn)生IL-17的主要細(xì)胞[35]。正常情況下皮膚效應(yīng)表達(dá)各種γδTCR，局部應(yīng)用咪喹莫特會導(dǎo)致皮膚產(chǎn)生IL-1β和IL-23，隨后真皮γδT細(xì)胞分泌IL-17A和IL-17F，并使Vγ4+Vδ4+T細(xì)胞增殖，中性粒細(xì)胞浸潤、表皮增厚。急性炎癥恢復(fù)后，γδT細(xì)胞數(shù)量與正常情況下相當(dāng)，但Vγ4+Vδ4+T細(xì)胞比例在真皮中占主導(dǎo)地位。研究表明，咪喹莫特誘導(dǎo)的銀屑病樣鼠模型中真皮層存在表達(dá)Vγ4+Vδ4+T細(xì)胞受體的γδT細(xì)胞，當(dāng)小鼠皮膚予咪喹莫特刺激時(shí)該細(xì)胞產(chǎn)生IL-17A和IL-17F[33，36]。值得注意的是，Vγ4+Vδ4+T細(xì)胞在皮損處及未予咪喹莫特刺激的皮膚真皮層中均存在很長一段時(shí)間[36]。研究表明，在銀屑病的咪喹莫特小鼠模型中，先天的Vγ4+Vδ4+T細(xì)胞能夠形成有記憶功能的皮膚TRM細(xì)胞，當(dāng)再次予咪喹莫特刺激時(shí)這些細(xì)胞快速產(chǎn)生IL-17細(xì)胞因子并產(chǎn)生快速的、明顯的炎癥反應(yīng)[37]。但銀屑病患者皮損中，IL-17的來源是γδ17細(xì)胞還是Th17細(xì)胞目前尚不清楚，γδT細(xì)胞參與銀屑病發(fā)病的具體機(jī)制、γδT細(xì)胞與TRM細(xì)胞的關(guān)系仍需進(jìn)一步研究。

5 結(jié)語

目前治療銀屑病的方法多樣，但治療后極易復(fù)發(fā),且尚缺乏治愈銀屑病的方法。銀屑病緩解皮損區(qū)域中長期存活的TRM細(xì)胞與銀屑病發(fā)病、復(fù)發(fā)關(guān)系密切，但TRM細(xì)胞參與銀屑病發(fā)病及影響銀屑病復(fù)發(fā)的具體機(jī)制尚需要進(jìn)一步研究。由于TRM細(xì)胞特殊的位置和對病原體的快速反應(yīng)，TRM細(xì)胞可能是復(fù)發(fā)性疾病的治療靶點(diǎn)，阻斷TRM細(xì)胞有望成為新的治愈銀屑病的方法。