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    蜂王漿中藥物殘留及其檢驗(yàn)方法

    2021-12-06 04:38:36劉玉玲蘭鳳明
    蜜蜂雜志 2021年10期
    關(guān)鍵詞:殺螨劑蜂王漿質(zhì)譜法

    王 琦,劉玉玲,蘭鳳明,王 志

    (吉林省養(yǎng)蜂科學(xué)研究所,吉林 吉林 132108)

    蜂王漿是主要蜂產(chǎn)品之一,是蜜蜂養(yǎng)殖業(yè)中的重要經(jīng)濟(jì)來(lái)源。它經(jīng)巢內(nèi)哺育蜂頭部的咽下腺和上顎腺分泌[1],呈漿狀,顏色為乳白色、淡黃色或橙色,用于哺育蜂王和工蜂幼蟲[2]。從19 世紀(jì)末開始,人們便開始對(duì)蜂王漿的主要成分進(jìn)行了研究[3]。隨著科技的發(fā)展,人們對(duì)蜂王漿的了解也逐漸加深。學(xué)者經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),蜂王漿中大部分由水組成,可占其總量的62.5%~70%,少部分為干物質(zhì)。干物質(zhì)含量雖少,但卻富含氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),還具有一定的生物學(xué)活性[4]。因此,蜂王漿也開始作為綠色保健食品進(jìn)入了人們的視野。

    蜂王漿的食品安全問(wèn)題一直受到人們的廣泛關(guān)注。現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)生產(chǎn)為了提高農(nóng)作物產(chǎn)量、減少病蟲為害,開始普遍使用化肥和農(nóng)藥,這也使蜜源植物常常攜帶各種有害化學(xué)物質(zhì)殘留;再加上蜂農(nóng)為了治療蜂病所使用的抗生素、除螨劑等蜂藥在蜂箱中均有殘留,使有害物質(zhì)被蜜蜂富集在其體內(nèi),最終影響蜂產(chǎn)品質(zhì)量,危害人類的身體健康。對(duì)蜂王漿中幾種主要的藥物殘留及其檢驗(yàn)方法進(jìn)行了綜述。

    1 有機(jī)磷農(nóng)藥

    1.1 簡(jiǎn)介

    從20 世紀(jì)開始,為防止農(nóng)作物的病、蟲、草害,農(nóng)藥被廣泛應(yīng)用于農(nóng)作物生產(chǎn)中。如今,大部分的除草劑、殺蟲劑均為更易降解的有機(jī)磷農(nóng)藥,典型的有機(jī)磷農(nóng)藥有敵敵畏、樂(lè)果、滅線磷、三唑磷等。

    有機(jī)磷農(nóng)藥是指含磷元素的有機(jī)化合物農(nóng)藥,絕大多數(shù)為殺蟲劑,對(duì)人體的危害從劇毒到低毒不等。農(nóng)民在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中使用農(nóng)藥,采集蜂在直接接觸后有很大概率死亡。而蜜源植物或從其體表、或從土壤、水源中將有機(jī)磷農(nóng)藥富集在植物體內(nèi),經(jīng)蜜粉傳遞至蜂群中制成蜂糧,最終由蜜蜂消化吸收,因此,其在蜂王漿、蜂蜜、蜂花粉等蜂產(chǎn)品中均可能存在一定殘留。

    1.2 檢測(cè)方法

    SN/T 2577-2010[5]中采用氣相色譜法測(cè)定蜂王漿中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量,該方法使用乙腈提取測(cè)試樣品中的有機(jī)磷農(nóng)藥,提取液經(jīng)凝膠色譜柱凈化,使用火焰光度檢測(cè)器的氣相色譜儀測(cè)定, 使用外標(biāo)法定量。 Emmanouel 等[6]將實(shí)驗(yàn)樣品經(jīng)C18 固相萃取技術(shù)純化并分離試驗(yàn)樣品,采用氣相色譜法進(jìn)行測(cè)定蜂王漿中有機(jī)磷和有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留量。李櫻紅等[7]將蜂王漿樣品通過(guò)乙腈提取并進(jìn)行初步處理后,采用HLB 固相萃取小柱富集凈化,使用高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定了蜂王漿中包括蠅毒磷在內(nèi)的7 種不同農(nóng)藥的殘留。

    2 殺螨劑

    2.1 簡(jiǎn)介

    蜂螨寄生在蜂體,以吸食蜜蜂血淋巴為生,造成蜜蜂壽命縮短、采集力下降等問(wèn)題,嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致群勢(shì)迅速降低,造成巨大損失。常見的蜜蜂寄生螨有大蜂螨、小蜂螨等。為了解決這一難題,殺螨劑應(yīng)運(yùn)而生,如氯殺螨、甲基克殺螨、殺螨酯、樂(lè)殺螨等。

    嚴(yán)格來(lái)說(shuō),殺螨劑也是屬于農(nóng)藥的一種,與上述有機(jī)磷農(nóng)藥有所重疊。但不同的是,殺螨劑直接在蜂巢中使用。殺螨劑雖然對(duì)蜜蜂無(wú)害,但仍會(huì)被蜜蜂吸收進(jìn)體內(nèi),同時(shí)在蜂產(chǎn)品中有所殘留,最終影響蜂產(chǎn)品品質(zhì)。

    2.2 檢測(cè)方法

    SN/T 2571-2010[8]中采用氣相色譜- 質(zhì)譜法檢測(cè)殺螨劑殘留量,通過(guò)1 : 1 的正己烷和丙酮混合試劑提取殘留的殺螨劑,然后使用弗羅里硅土柱凈化,通過(guò)氣相色譜- 質(zhì)譜- 負(fù)化學(xué)源測(cè)定,外標(biāo)法定量。曾銀歡[9]將蜂王漿離心處理后使用乙腈+ 水進(jìn)行樣品萃取,建立了液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的測(cè)定方法,對(duì)市場(chǎng)購(gòu)買的蜂王漿樣品中的殺螨劑(四螨嗪、喹螨醚、吡螨胺、噻螨酮、乙螨唑等10 種) 殘留進(jìn)行了測(cè)定,相關(guān)系數(shù)均大于0.99。

    3 抗生素類

    3.1 簡(jiǎn)介

    抗生素類與殺螨劑類似,大多屬于直接用于蜂箱內(nèi)的蜂藥??股胤N類繁多,憑借其優(yōu)異的殺菌性能在多種蜂病的治療當(dāng)中均有應(yīng)用。如鹽酸土霉素可用于治療美洲幼蟲腐臭病和歐洲幼蟲腐臭病、使用制霉菌素治療白堊病、煙曲霉素治療孢子蟲病等[10]。

    3.2 檢測(cè)方法

    GB/T 22945-2008[11]中使用磷酸溶液提取鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡娜霉素,經(jīng)過(guò)三氯乙酸沉淀蛋白,苯磺酸和羧酸型固相萃取柱精華,采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定其在蜂王漿中的殘留量。李曉東等[12]將樣品采用QuEch-ERs 技術(shù)進(jìn)行提取凈化,UPLC-MS/MS 法同時(shí)定性、定量分析了蜂王漿中14 種喹諾酮類藥物殘留。葉有標(biāo)等[13]采用高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法分別對(duì)干粉和鮮王漿兩種不同狀態(tài)下的蜂王漿中四環(huán)素類抗生素進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果符合產(chǎn)品質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn)要求。SN/T 2664-2010[14]中對(duì)四環(huán)素類抗生素殘留量采用放射受體分析法測(cè)定,該方法通過(guò)提取出的四環(huán)素類抗生素與[3H]標(biāo)記的金霉素共同競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異的受體位點(diǎn),經(jīng)反應(yīng)后[3H]測(cè)定衰變發(fā)出的β 粒子數(shù)放射性量值對(duì)四環(huán)素殘留進(jìn)行定量分析。SN/T 3027-2011[15]中采用酶聯(lián)免疫法測(cè)定蜂王漿中氟喹諾酮類抗生素的殘留量。薄海波等[16]通過(guò)酸性Na2EDTA-Mcllvaine 緩沖溶液將蜂王漿中蛋白質(zhì)沉淀并提取其中的藥物殘留通過(guò)反相液相色譜柱分離,紫外檢測(cè)器監(jiān)測(cè),外標(biāo)法定量,結(jié)果滿足相關(guān)規(guī)定的要求。

    4 其他藥物

    侯建波等[17]使用液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定了蜂王漿中新煙堿類藥物及其代謝產(chǎn)物的殘留量。譚韓英等[18]利用氣相色譜法測(cè)定了蜂王漿中氟胺氰菊酯的殘留量。 SN/T 2573-2010[19]和SN/T 2574-2010[20]中介紹了氣相色譜- 質(zhì)譜法測(cè)定殺蟲脒和雙甲脒及其代謝產(chǎn)物殘留量的監(jiān)測(cè)方法。雙甲脒還可采用液相色譜- 質(zhì)譜法、質(zhì)譜法進(jìn)行測(cè)定。

    5 展望

    近年來(lái),隨著農(nóng)藥、化肥、食品添加劑等化學(xué)產(chǎn)品的大規(guī)模使用,食品安全問(wèn)題開始廣受人們關(guān)注。蜂王漿中各類農(nóng)藥、抗生素的殘留量直接影響著蜂王漿的產(chǎn)品質(zhì)量,也與人們的生命健康安全息息相關(guān)。因其巨大危害,蜂王漿中藥物殘留的允許檢出指標(biāo)均為mg/kg 量級(jí),屬于痕量分析,因此對(duì)監(jiān)測(cè)設(shè)備的精密度要求極高。目前,氣相色譜法、高效液相色譜法、質(zhì)譜法等高精度儀器分析方法應(yīng)用廣泛。此外,質(zhì)譜儀憑借其通用性、高精度等優(yōu)點(diǎn)也被作為氣相色譜、高效液相色譜的檢測(cè)器使用,即氣相色譜- 質(zhì)譜法和高效液相色譜- 質(zhì)譜法,高效、高精度,但也有價(jià)格昂貴等問(wèn)題。因此,更廉價(jià)、簡(jiǎn)單便捷、高效、高精度的檢測(cè)方法研究一直是該領(lǐng)域的研究方向。

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