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    透骨草提取物對小麥葉蜂的毒殺活性初步研究

    2021-12-06 08:22:40邢浩春魏娜李同慶白浩偉郭淑霞付靜李志亮謝全森
    河北農(nóng)業(yè) 2021年11期
    關(guān)鍵詞:透骨草葉蜂殺蟲

    □文/邢浩春魏娜李同慶白浩偉郭淑霞付靜李志亮謝全森

    小麥葉蜂(Dolerus tritici C.)屬于膜翅目葉蜂科昆蟲,是小麥抽穗前最常見的害蟲。在北方3~4月份發(fā)生一代,幼蟲主要危害小麥葉片,每平方米30多頭時發(fā)生較嚴(yán)重,會使小麥減產(chǎn)。目前農(nóng)村要求用低毒的高效氫氯菊酯來防治麥葉蜂,但也有用禁用農(nóng)藥的情況,而且供選用的生物農(nóng)藥種類比較少。因此研發(fā)高效低毒環(huán)保、廣譜、成本低、符合老百姓心意的生物農(nóng)藥很有必要,近幾年植物源農(nóng)藥的研發(fā)更是受到科研工作者的青睞,比如白屈菜、透骨草、川烏等。透骨草(Phryma leptostachya L.)為我國傳統(tǒng)中藥材,有一定毒性。國內(nèi)外學(xué)者陸續(xù)研究了透骨草全株、根、地上部分的提取物對家蠅、黏蟲、淡色庫蚊、菇蠅和小菜蛾幼蟲等的毒殺活性,表明透骨草對上述害蟲均有明顯的活性。對有殺蟲活性的透骨草提取物進(jìn)行了進(jìn)一步分離鑒定和分析,顯示不同提取、萃取方法和萃取劑等條件分離出來的化學(xué)成分也不同,分離得到的主要化學(xué)成分有木質(zhì)素類化合物、黃酮類化合物、三萜類化合物等。其中木質(zhì)素類化合物具有極高的殺蟲活性,對家蠅的觸殺活性和商業(yè)化的擬除蟲菊酯相當(dāng),雙氧木質(zhì)素A主要對多種鱗翅目害蟲有效。目前透骨草提取物對小麥葉蜂的毒殺作用還未見報道。本實驗采用透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物對小麥葉蜂進(jìn)行毒殺實驗,了解其殺蟲活性,為中草藥的利用及生物農(nóng)藥的開發(fā)提供參考依據(jù)。

    一、實驗材料和方法

    1.實驗材料

    透骨草:全株,購自藥店。

    小麥葉蜂幼蟲:采集于未噴灑藥液的小麥田中,在實驗室飼養(yǎng)。

    2.實驗方法

    (1)透骨草的甲醇提取物制備

    將全株透骨草干品打粉過60目篩。準(zhǔn)確稱取透骨草干燥粉末與90%甲醇溶液混合冷漬1天,60℃條件下超聲波輔助提取,再抽濾,完成后收集濾液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮成浸膏,干燥后收集稱重計算得率。放入4℃冰箱中保存。得到浸膏即為透骨草甲醇提取物。

    (2)甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物制備

    將透骨草甲醇提取物浸膏加水溶解,加入等量乙酸乙酯溶液,用超聲波輔助萃取,分離水相和乙酸乙酯相,最后將乙酸乙酯相用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮得到浸膏稱重,計算萃取得率,公式如下:

    (3)透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物殺蟲活性測定方法

    殺蟲活性測定采用載毒葉片法。用丙酮將透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物配成1毫克∕毫升、2毫克∕毫升、4毫克∕毫升、8毫克∕毫升四個濃度梯度的藥液作為實驗組,用等量的蒸餾水和丙酮溶劑作為對照組,每組三個重復(fù),每個重復(fù)用10頭小麥葉蜂,共30頭。將新鮮麥葉浸入藥液20秒拿出,等溶劑揮發(fā)后,放置在盛有濾紙的干凈培養(yǎng)皿中,然后放入停食一天、健康活潑、等大的小麥葉蜂。觀察小麥葉蜂在食用葉片2小時、12小時、24小時后的反應(yīng)。如觀察到發(fā)生麻痹現(xiàn)象用解剖針觸其身體不再作出反應(yīng)即為死亡。計算小麥葉蜂死亡率和校正死亡率。(如表1)

    表1 透骨草提取物的乙酸乙酯萃取物對小麥葉蜂的處理效果

    (4)數(shù)據(jù)統(tǒng)計和分析

    用excel軟件統(tǒng)計數(shù)據(jù)及分析。

    二、結(jié)果討論

    1.透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物對小麥葉蜂的中毒特征

    通過載毒葉片法處理小麥葉蜂,發(fā)現(xiàn)正常的小麥葉蜂活潑健康,喜歡啃食葉片,身體微透明淺米色。藥液處理后出現(xiàn)掙扎、蜷曲、聚堆、遠(yuǎn)離葉片的現(xiàn)象,死亡時身體柔軟收縮、不動、顏色發(fā)黑等。

    2.不同濃度梯度乙酸乙酯萃取物對小麥葉蜂的毒殺活性

    不同濃度梯度透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物處理小麥葉峰24小時后,1毫克∕毫升、2毫克∕毫升、4毫克∕毫升、8毫克∕毫升濃度時死亡數(shù)為10頭、12頭、18頭、20頭,可以發(fā)現(xiàn)藥液對小麥葉蜂有比較明顯的胃毒、觸殺活性。濃度在8毫克∕毫升24小時校正死亡率最高為58.32%。實驗中也發(fā)現(xiàn),除了透骨草提取物對小麥葉蜂的毒殺作用外,丙酮因為沒有完全揮發(fā)也起了一些作用,丙酮對照組死亡率就達(dá)20%,所以24小時校正死亡率相對死亡率來說小一些。

    上圖分析看出,隨著透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物濃度的增加,小麥葉蜂的24小時死亡率和校正死亡率也逐漸上升。但在本實驗條件下4毫克∕毫升和8毫克∕毫升濃度處理組相比,沒有太多增加,可能是因為8毫克∕毫升濃度處理時透骨草提取物的浸膏摻雜了雜質(zhì)所致,也可能濃度過高效果也不太明顯,因此濃度等于或高于8毫克∕毫升其毒殺活性還有待進(jìn)一步研究。

    圖1 透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物對小麥葉蜂的毒殺活性折線圖

    三、結(jié)論

    本實驗利用甲醇提取和乙酸乙酯萃取方法得到透骨草的有效化學(xué)物質(zhì),即透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物,用載毒葉片法次檢測了其對北方3~4月份危害小麥比較嚴(yán)重的小麥葉峰的毒殺活性。結(jié)果顯示:害蟲表現(xiàn)出一定的中毒特征。藥液濃度為1毫克∕毫升、2毫克∕毫升、4毫克∕毫升和8毫克∕毫升梯度時,隨濃度的增加其死亡率和校正死亡率也增加,8毫克∕毫升時校正死亡率最高達(dá)58.32%。從本實驗條件下初步研究結(jié)果顯示,透骨草甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物對小麥葉蜂有一定的殺蟲活性,殺蟲活性與其濃度呈正相關(guān)。而高濃度時或其他不同溶劑提取物的活性及透骨草化學(xué)成分分離和鑒定還有待進(jìn)一步研究。

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