中西醫(yī)治療動(dòng)脈粥樣硬化的新進(jìn)展

趙鳳婷，麻京豫，唐榮欣,任蕾元

(河南中醫(yī)藥大學(xué)1.第一臨床醫(yī)學(xué)院；2.第一附屬醫(yī)院心內(nèi)科，河南 鄭州 450000)

動(dòng)脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)作為心腦血管疾病的病理學(xué)基礎(chǔ)，嚴(yán)重危害著發(fā)達(dá)國(guó)家及發(fā)展中國(guó)家人類(lèi)的健康，造成世界經(jīng)濟(jì)的負(fù)擔(dān)，成為嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。動(dòng)脈粥樣硬化的特征是炎癥反應(yīng)的堆積，巨噬細(xì)胞與炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。巨噬細(xì)胞分為M1和M2兩種亞型，巨噬細(xì)胞M1型發(fā)揮促炎作用，通過(guò)分泌白介素-1(IL-1)、干擾素-γ(IFN-γ)、活性氧(ROS)等，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的發(fā)生；而M2型通過(guò)分泌IL-10等抗炎細(xì)胞因子發(fā)揮抗炎功能，促進(jìn)組織重建和修復(fù)[1]。當(dāng)體內(nèi)脂質(zhì)出現(xiàn)異常蓄積時(shí)，Kaplan等[2]發(fā)現(xiàn)CD36及清道夫受體表達(dá)上調(diào)，M2型巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出對(duì)氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)更高的吞噬能力，由于受ox-LDL對(duì)的毒性作用，M2型的抗炎作用消退，M1型的促炎作用將不再受制約，進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊的形成。本文就中西醫(yī)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)的研究進(jìn)行介紹，發(fā)現(xiàn)并探討這些研究為動(dòng)脈粥樣硬化的消退提供的新方法。

1 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的研究

1.1 黃芩素納米棒-抗miR155miR155是一類(lèi)內(nèi)源性非編碼單鏈RNA分子，作為MicroRNA的一種，其參與脈粥樣硬化的炎癥過(guò)程和發(fā)病機(jī)制現(xiàn)被廣泛研究，靶向?qū)咕奘杉?xì)胞miR155是治療動(dòng)脈粥樣硬化的新策略。DU等[3]以載脂蛋白E(APO-E)缺陷的小鼠作對(duì)照，發(fā)現(xiàn)APO-E和miR155雙基因敲除小鼠的主動(dòng)脈根部病變減輕，流式細(xì)胞儀分析顯示改組小鼠也無(wú)促炎因子的分泌。由于游離狀態(tài)的抗miRNA可能會(huì)受核酸酶的降解和腎臟清除而無(wú)法在血漿中穩(wěn)定存在，載體運(yùn)載抗miR155來(lái)實(shí)現(xiàn)靶向巨噬細(xì)胞治療的新興技術(shù)解決了這一難題，黃芩素納米棒-抗miR155是其中的一個(gè)代表。Chao[4]等利用共給給藥系統(tǒng)將抗miR155負(fù)載到黃芩素納米棒(BNRs)，再涂覆唾液酸(SA)制成復(fù)合物SA-BNR-Rplex來(lái)靶向巨噬細(xì)胞。解離出的抗miR155通過(guò)上調(diào)B細(xì)胞淋巴瘤6蛋白(Bcl-6)促進(jìn)巨噬細(xì)胞M1型向M2型的轉(zhuǎn)換，有效抑制炎癥，實(shí)現(xiàn)聯(lián)合治療。與對(duì)照組相比，SA-BNR-Rplex干預(yù)小鼠血清ROS(P<0.05)、核因子-κB(NF-KB)(P<0.01)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)(P<0.001)明顯減少。為抗miR155運(yùn)載體的搭建仍面臨技術(shù)困難，未來(lái)需要更加深入的研究。

1.2 IGF-1模擬肽胰島素樣生成因子-1(IGF-1)是一種內(nèi)分泌激素，體內(nèi)許多不同類(lèi)型的細(xì)胞中都有其受體，因此IGF-1成為靶向組織促進(jìn)細(xì)胞之間通訊、細(xì)胞分裂及信號(hào)傳導(dǎo)的主角。在參與動(dòng)脈粥樣硬化形成的巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞上均有IGF-1受體，體外研究表明，IGF-1抑制單核-巨噬細(xì)胞的聚集和轉(zhuǎn)化、炎性因子的釋放從而減少斑塊的負(fù)荷，增加其穩(wěn)定性。Svensson[5]用成年肝臟特異性IGF-1失活小鼠(Li-IGF-I(-/-)小鼠誘導(dǎo)脂質(zhì)條紋產(chǎn)生，較其對(duì)照組血清中IGF-1水平減少80%，且雌性(Li-IGF-I(-/-)小鼠脂紋面積增大、脂質(zhì)沉積和巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)增加，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果與IGF-1對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的保護(hù)作用保持一致。如何充分利用IGF-1的抗炎減負(fù)作用，將成為對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化的新的有效途徑。Shang等[6]研發(fā)了IGF-1的自組裝抗炎藥物(萘普生，NPX)修飾肽，組成的Npx-DFDFGSSSR水凝膠(H1)使AP0-E小鼠中主動(dòng)脈根部的斑塊面積減少61%，用巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物MOMA2SMA和MOMA2抗體免疫熒光染色，顯示H1促進(jìn)α平滑肌動(dòng)蛋白(αSMA)的表達(dá)，降低MAMO2mRNA的表達(dá)。IGF-1模擬肽既保留了天然蛋白IGF-1的生物活性，又以其高穩(wěn)定性、高組織保留率、高生物利用度為臨床治療動(dòng)脈粥樣硬化提供了新的靈感。

1.3 活性氧納米粒活性氧(ROS)由氧部分還原而成，參與動(dòng)脈粥樣硬化病變過(guò)程中的自噬信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路(AMPK-mTOR)[7]。Yang等[8]通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)顯示經(jīng)ROS清除劑處理的細(xì)胞自噬小泡的數(shù)量減少，非致死性聲動(dòng)力療法(NL-SDT)經(jīng)ROS-AMPK-mTORC1途徑降低了綠色熒光蛋白+人群17%的M1/M2比率，用RNA干擾(RNAi)后，ROS-AMPK-mTORC1途徑下調(diào)，阻止了NL-SDT誘導(dǎo)的M2極化作用，減緩斑塊形成進(jìn)程。Gao等[9]利用巨噬細(xì)胞膜包裹的ROS響應(yīng)性納米粒(NPs)的仿生藥物釋放系統(tǒng)(MM-NPs)，以阿托伐他汀(AT)為陽(yáng)性對(duì)照，結(jié)果顯示，受益于ROS反應(yīng)性，MM-AT-NPs較游離AT、AT-NPs表現(xiàn)出更高的縮小斑塊作用(斑塊分別縮小至總主動(dòng)脈組織面積的8%、15%、14%)。Ma等[10]通過(guò)ROS響應(yīng)性納米平臺(tái)構(gòu)建雙光子熒光載體-環(huán)糊精/強(qiáng)的松龍復(fù)合物(TPCDP@PMM)，該復(fù)合物通過(guò)受損的血管內(nèi)皮細(xì)胞在動(dòng)脈粥樣硬化組織中聚集，通過(guò)局部高表達(dá)的ROS和釋放的活性熒光團(tuán)雙重作用達(dá)到抗炎和清除脂質(zhì)的目的。ROS納米粒的研究和設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化的精準(zhǔn)靶向治療的前景性平臺(tái)。

2 傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的研究

根據(jù)中國(guó)古代藥典，中醫(yī)藥可以通過(guò)多途徑、多層次、多靶點(diǎn)作用于動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊，并表現(xiàn)出良好的治療效果。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展，中藥活性成分的作用愈發(fā)凸顯，用藥用植物調(diào)節(jié)炎癥成為動(dòng)脈粥樣硬化傳統(tǒng)治療策略的替代方案。

2.1 中藥生物活性成分(1)小檗堿：小檗堿(BBR)是從中藥黃連中提取的生物活性堿，由于其具有和動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的潛在靶點(diǎn)，所以被認(rèn)為是最有前途的中藥天然產(chǎn)物之一。Tan等[11]報(bào)道，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，小檗堿組小鼠的血脂水平明顯降低(P<0.05)，通過(guò)腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)途徑抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)展。Ma等[12]研發(fā)的BBR納米系統(tǒng)，使BBR分別增加了107.6%的肝臟沉積率和172.3%的脂肪沉積率，高濃度的BBR沉積改變了巨噬細(xì)胞的基因表達(dá)，減少了內(nèi)皮損傷導(dǎo)致的巨噬細(xì)胞激活和炎性細(xì)胞因子的釋放，從而改善了動(dòng)脈斑塊的形成。BBR為動(dòng)脈粥樣硬化提供了一種實(shí)用的治療策略。(2)槲皮素：槲皮素是從銀杏葉中提取的黃酮類(lèi)化合物。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，CLI095+槲皮素組小鼠的TLR-NF-κB信號(hào)通路下調(diào)抑制細(xì)胞因子TNF-α的釋放，可用于動(dòng)脈粥樣硬化的炎癥治療。類(lèi)似地，Cao等[13]用氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)培養(yǎng)RAW264.7巨噬細(xì)胞，建立體外泡沫細(xì)胞模型，發(fā)現(xiàn)自噬小體減少、自噬相關(guān)基因表達(dá)下調(diào)、脂質(zhì)沉積增加，槲皮素干預(yù)后，細(xì)胞存活率提高，自噬相關(guān)蛋白(LC3-II/I、Beclin1)的表達(dá)增加，脂質(zhì)堆積減少。Wang等[14]利用冷凍干燥法制備一種超順磁性納米二氧化硅@槲皮素PLGA納米復(fù)合材料，通過(guò)電鏡掃描SEM觀(guān)察和檢測(cè)，證實(shí)制備的槲皮素納米復(fù)合材料改善了其水溶性和穩(wěn)定性增加了槲皮素的釋藥分布。該技術(shù)有望開(kāi)發(fā)槲皮素在心血管疾病的應(yīng)用。(3)熊果酸：熊果酸是從枇杷葉中獲取的三萜類(lèi)化合物。Leng等[15]用熊果酸使脂多糖(LPS)預(yù)處理Raw264.7巨噬細(xì)胞Lc3蛋白(自噬相關(guān)蛋白)水平升高(P<0.05)，顯著減少動(dòng)脈粥樣硬化病變面積。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明，雖熊果酸和辛伐他汀均表現(xiàn)出縮小動(dòng)脈粥樣硬化斑壞死核心區(qū)的作用，但熊果酸組小鼠LPS誘導(dǎo)產(chǎn)物ROS和低密度脂蛋白受體1(LOX-1)表達(dá)降低，提示熊果酸通過(guò)抑制ROS/NF-κB信號(hào)通路發(fā)揮抗動(dòng)脈粥樣硬化作用[16]。

2.2 中藥穩(wěn)斑貼穩(wěn)斑貼是由我院心內(nèi)二科研制的中藥貼劑，此方由多種中藥配伍而成，以川芎、水蛭為君藥，以丹參、三七、杜仲、茯苓等為佐使藥[17]。Lu等[18]利用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，水蛭提取物預(yù)處理的實(shí)驗(yàn)組內(nèi)毒素誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞黏附因子(細(xì)胞間黏附分子1，ICAM1和血管細(xì)胞黏附分子1，VCAM1)及促炎因子(IL-6和TNF-α)水平表達(dá)降低。Ye等[19]用丹參提取物(SME)、川芎提取物(2，3，5，6-川芎嗪，TMP)及其二者復(fù)合物(丹參和川芎嗪注射液，SLI)干預(yù)TLR1/2-、TLR3-和TLR4誘導(dǎo)的骨髓巨噬細(xì)胞(BMMs)和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)。經(jīng)檢測(cè)促炎細(xì)胞因子IL-6、IL-12和TNF-α的表達(dá)和分泌減少。提示SLI可明顯減輕BMMS和HUVECs的炎癥反應(yīng)。三七總皂苷作為三七的有效成分，通過(guò)多靶點(diǎn)、多途徑發(fā)揮抗炎作用。該貼劑取天突、人迎、扶突三穴貼敷。天突，出《靈樞·本輸》中，屬任脈腧穴；人迎，屬陽(yáng)明胃經(jīng)穴，位于頸部喉結(jié)旁，平頸總動(dòng)脈搏動(dòng)處，取人迎、天突可消散胸中郁結(jié)之氣；扶突，屬手陽(yáng)明大腸經(jīng)，位于喉結(jié)旁開(kāi)3寸處。與穴位結(jié)合的藥物充分發(fā)揮藥理效能，腧穴-經(jīng)絡(luò)-臟腑間的關(guān)聯(lián)作用既避免了藥物副作用對(duì)肝腎脾胃等器官的傷害，又保證了高濃度的局部藥物快速高效的作用于頸動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊，彌補(bǔ)了中醫(yī)內(nèi)治之不及。此方多藥配伍，透肌而入，共行抑制炎癥、活血化瘀的功效。經(jīng)臨床試驗(yàn)，穩(wěn)斑貼對(duì)頸動(dòng)脈粥樣硬化的治療確切有效[20]，該方劑豐富了動(dòng)脈粥樣硬化中醫(yī)外治領(lǐng)域的研究成果，為中醫(yī)藥治療動(dòng)脈粥樣硬化提供新的方案。

3 小結(jié)

動(dòng)脈粥樣硬化由于病機(jī)不明，加大了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)和傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的治療難度。炎癥反應(yīng)參與動(dòng)脈粥樣硬化的形成和發(fā)展，正確認(rèn)識(shí)炎癥反應(yīng)可以有助于開(kāi)發(fā)新的治療手段。本文針對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化為進(jìn)行性炎癥反應(yīng)這一本質(zhì)入手，探討了中西醫(yī)靶向治療動(dòng)脈粥樣硬化新思路，未來(lái)有望更多地應(yīng)用于臨床。