張 莉,柳 芹,張金林
(1.武漢華揚(yáng)動(dòng)物保健集團(tuán),湖北武漢 430000;2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué),湖北武漢 430000)
抗菌肽是一種具有廣譜抗細(xì)菌、病毒、真菌、寄生蟲和腫瘤細(xì)胞的多肽,在生物體內(nèi)天然免疫中發(fā)揮重大作用(董麗娜等,2017)。近些年來(lái),由于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)模不斷增大,抗生素的濫用導(dǎo)致動(dòng)物的耐藥性增加,進(jìn)而造成魚類大量死亡,給養(yǎng)殖戶帶來(lái)重大的經(jīng)濟(jì)損失(陳奕彬等,2015)??咕木哂蟹肿淤|(zhì)量小、環(huán)保、穩(wěn)定性強(qiáng)、耐藥性強(qiáng)和無(wú)殘留等特點(diǎn),在動(dòng)物免疫及生長(zhǎng)發(fā)育中起重要作用。因此,抗菌肽可作為動(dòng)物飼料添加劑的理想原料之一(董曉慶等,2017)。
目前,研究結(jié)果表明,飼料中添加抗菌肽能顯著提高魚類生長(zhǎng)性能,增強(qiáng)機(jī)體免疫功能(丁修良等,2018)。盡管抗菌肽作為飼料添加劑在魚類的應(yīng)用比較廣泛,但有關(guān)抗菌肽作為飼料添加劑在加州鱸魚的研究報(bào)道較少;本文主要以加州鱸魚為研究對(duì)象,分析飼料抗菌肽的不同添加量對(duì)加州鱸魚生長(zhǎng)性能的影響,為抗菌肽在加州鱸魚養(yǎng)殖基礎(chǔ)飼料的使用量提供理論依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料 加州鱸魚,抗菌肽,飼料原料和抗菌肽購(gòu)買于通威飼料有限公司,飼料原料都是來(lái)自濱州信通飼料有限公司。
1.2 飼料試驗(yàn)配方設(shè)計(jì) 飼料原料均是以玉米蛋白粉、魚粉和豆粕為主,其飼料添加劑為抗菌肽,所有原料都粉碎,混合水后制成2 mm的顆粒料,將飼料進(jìn)行烘干處理,放入冰箱備用。試驗(yàn)設(shè)計(jì)為5組,分別為對(duì)照組、抗菌肽試驗(yàn)1組、抗菌肽試驗(yàn)2組、抗菌肽試驗(yàn)3組、抗菌肽試驗(yàn)4組;添加量如表1所示。
表1 飼料添加劑試驗(yàn)設(shè)計(jì) mg/kg
表2 飼料原料成分
1.3 飼養(yǎng)管理 本次試驗(yàn)加州鱸魚苗來(lái)自教學(xué)試驗(yàn)養(yǎng)殖基地,養(yǎng)殖試驗(yàn)在學(xué)校試驗(yàn)基地中進(jìn)行試驗(yàn)。試驗(yàn)將健康無(wú)病的加州鱸魚放入水箱內(nèi)暫養(yǎng)2周,再放入養(yǎng)殖試驗(yàn)基地的水箱內(nèi),水箱水溫保持在20℃,水深保持30~45 cm。加州鱸魚分為5組,每組設(shè)置3組平行,每組平行放置48尾魚苗。試驗(yàn)期間,固定加州鱸魚每次投喂量,每天上午、中午和下午進(jìn)行投喂,根據(jù)天氣、水溫、攝食強(qiáng)度等及時(shí)調(diào)整餌料,定期巡查,每天對(duì)飼養(yǎng)水質(zhì)進(jìn)行監(jiān)測(cè),包括溶氧、氨氮、pH及水溫,保證養(yǎng)殖條件良好,飼養(yǎng)周期為8周。
1.4 飼養(yǎng)指標(biāo)監(jiān)測(cè) 在養(yǎng)殖試驗(yàn)開始與結(jié)束后,分別對(duì)加州鱸魚進(jìn)行計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì),同時(shí)測(cè)量其體重和體長(zhǎng),分別測(cè)定加州鱸魚的體長(zhǎng)、體高及體重,計(jì)算增重率(WGR)、成活率、特定生長(zhǎng)率(SGR)、相對(duì)增重率、餌料系數(shù)(FCR),公式如下:
特定生長(zhǎng)率(SGR,%/d)=(ln終末體重-ln初始體重)/飼養(yǎng)天數(shù)×100;餌料系數(shù)(FCR)=總投料量/增重量;肥滿度(CF)=體重(g)/體長(zhǎng)(cm)×100;成活率(SR,%)=存活尾數(shù)/初始尾數(shù)×100;增重率(WGR,%)=(末均重-初均重)/初均重×100。
試驗(yàn)結(jié)束后,將其各組加州鱸魚肌肉成分進(jìn)行測(cè)定,粗蛋白質(zhì)含量采用其凱氏定氮法進(jìn)行測(cè)量,粗脂肪采用索氏提取法進(jìn)行測(cè)定,粗灰分采用加熱法進(jìn)行測(cè)定。
1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,所有數(shù)據(jù)差異性分析,均用SPSS22.0分析,使用單因素方差分析,采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較,P<0.05為差異顯著。
2.1 不同水平的抗菌肽飼料對(duì)加州鱸魚的生長(zhǎng)性能影響 由表3可知,隨著飼料中不同抗菌肽添加水平不斷增加,加州鱸魚增重率先上升后下降,試驗(yàn)組1和4加州鱸魚的增重率分別為417.3%和409.75%,均顯著高于對(duì)照組(P<0.05);隨著飼料中抗菌肽添加比例不斷增加,加州鱸魚的特定增長(zhǎng)率先上升后下降,在試驗(yàn)組2中,加州鱸魚特定增長(zhǎng)率達(dá)到最大的水平,為2.97%,顯著高于其他各組(P<0.05)。飼料中添加不同水平的抗菌肽,加州鱸魚的餌料系數(shù)不斷下降,試驗(yàn)組1~4中加州鱸魚的飼料系數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.05),抗菌肽作為飼料添加劑能顯著降低加州鱸魚的餌料系數(shù)。試驗(yàn)3~4組中加州鱸的存活率顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。
表3 不同添加水平抗菌肽飼料對(duì)加州鱸魚生長(zhǎng)性能的影響
2.2 不同添加水平抗菌肽飼料對(duì)加州鱸魚的營(yíng)養(yǎng)成分的影響 高水平抗菌肽組(試驗(yàn)組4)加州鱸魚臟體比顯著高于其他組(P<0.05),且加州鱸魚臟體比隨著飼料中抗菌肽的添加水平的升高而上升。高水平抗菌肽組(試驗(yàn)組4)加州鱸的肝體比顯著高于其他組(P<0.05);飼料中不同添加水平的抗菌肽對(duì)加州鱸的肥滿度沒有顯著影響(P>0.05);試驗(yàn)組3加州鱸魚體組成中粗蛋白質(zhì)含量最高,顯著高于其他試驗(yàn)組(P<0.05),試驗(yàn)組2次之,顯著高于對(duì)照組、試驗(yàn)組1和4(P<0.05);對(duì)照組加州鱸魚體組成中粗脂肪含量顯著高于試驗(yàn)組1~4(P<0.05);試驗(yàn)組3加州鱸魚體組成中水分顯著高于其他各組(P<0.05);試驗(yàn)組3加州鱸魚的粗灰分顯著高于其他各組(P<0.05),其他各組之間沒有顯著差異(P > 0.05)。
表4 不同添加水平抗菌肽飼料對(duì)加州鱸魚的營(yíng)養(yǎng)成分的影響
3.1 不同水平的抗菌肽飼料對(duì)加州鱸魚的生長(zhǎng)性能影響分析 在本試驗(yàn)結(jié)果中,飼料中添加不同水平的抗菌肽對(duì)加州鱸魚增重率有不同程度的影響。當(dāng)抗菌肽添加量為160 mg/kg時(shí),加州鱸魚的增重率最高,明顯高于對(duì)照組,當(dāng)添加量為200 mg/kg時(shí),加州鱸魚的增重率與對(duì)照組無(wú)顯著差異,這些研究結(jié)果表明,飼料中添加適量的抗菌肽可對(duì)加州鱸魚生長(zhǎng)產(chǎn)生顯著影響,與董曉慶(2017)等研究結(jié)果類似。水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育與周圍環(huán)境、飼料營(yíng)養(yǎng)成分、水溫及水質(zhì)等因素息息相關(guān)。但飼料中添加高水平營(yíng)養(yǎng)成分將會(huì)抑制其水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng),被稱為抗生長(zhǎng)因子,飼料中有效成分可能存在抗生長(zhǎng)因子,對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物起到一定抑制作用。而抗菌肽作為動(dòng)物機(jī)體天然防御系統(tǒng)的重要成分之一,對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育起到促進(jìn)作用。丁修良(2018)等研究發(fā)現(xiàn),抗菌肽作為添加劑能顯著提高抗菌肽的養(yǎng)分成分,促進(jìn)雞腸道絨毛增長(zhǎng),增加吸收面積,增強(qiáng)腸道吸收效率,促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)。這些研究結(jié)果表明:飼料中添加適量抗菌肽可能會(huì)促進(jìn)加州鱸魚的生長(zhǎng),可能與抗菌肽抑制腸道有害菌,促進(jìn)腸道吸收效率,提高機(jī)體腸道的消化能力,具體原因需要進(jìn)一步深入探究。
在水產(chǎn)養(yǎng)殖中,抗菌肽作為飼料添加劑進(jìn)行使用,并取得一定成效。王自蕊(2014)等研究抗菌肽作為鯽魚飼料的添加劑,能有效提高魚類生長(zhǎng)性能,當(dāng)飼料中抗菌肽添加量為300 mg/kg,能顯著提高鯽魚的生長(zhǎng)性能和鯽魚體內(nèi)溶菌酶活性。林鑫(2013)等研究抗菌肽作為錦鯉的飼料添加劑,當(dāng)抗菌肽添加量為150 mg/kg時(shí),顯著提高錦鯉的增重率和特定生長(zhǎng)率。姜珊(2011)等研究發(fā)現(xiàn),添加一定量抗菌肽能顯著提高羅非魚的增重率。柴仙琦(2012)等研究發(fā)現(xiàn),添加一定量抗菌肽能顯著提高凡納濱對(duì)蝦的增長(zhǎng)率、特定生長(zhǎng)率及餌料系數(shù)。這些試驗(yàn)結(jié)果也證明了抗菌肽作為飼料添加劑能顯著提高魚類生長(zhǎng)機(jī)能與免疫機(jī)能,在機(jī)體免疫中能發(fā)揮重大作用。這些試驗(yàn)結(jié)果魚類生長(zhǎng)發(fā)育與抗菌肽使用劑量、魚類養(yǎng)殖環(huán)境、種類及溫度變化等因素有關(guān)。
3.2 不同添加水平抗菌肽飼料對(duì)加州鱸魚營(yíng)養(yǎng)成分的影響分析 形態(tài)學(xué)研究是評(píng)估水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育狀態(tài)的重要指標(biāo)。形態(tài)學(xué)指數(shù)已被水產(chǎn)動(dòng)物廣泛應(yīng)用于評(píng)估水產(chǎn)動(dòng)物健康水平的指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn),飼料中添加不同水平抗菌肽對(duì)加州鱸魚的肝體比、臟體比有顯著影響。飼料中不同添加水平的抗菌肽對(duì)加州鱸魚肥滿度有顯著影響,表明抗菌肽的添加會(huì)促進(jìn)加州鱸魚的肥滿度。
蛋白質(zhì)及其他營(yíng)養(yǎng)成分是評(píng)估魚體健康重要的參考指標(biāo)(覃志彪等,2016)。在本研究中,飼料中抗菌肽的添加水平越高,加州鱸魚粗蛋白質(zhì)含量越高,抗菌肽添加量為160 mg/kg時(shí),加州鱸魚的粗蛋白質(zhì)含量最大,表明飼料中添加一定量的抗菌肽有助于氨基酸的消化與吸收,以及蛋白質(zhì)的合成和累積;本研究發(fā)現(xiàn),粗脂肪含量會(huì)隨抗菌肽添加水平的升高而下降,試驗(yàn)組粗脂肪含量低于對(duì)照組,表明飼料中添加不同水平抗菌肽對(duì)加州鱸魚的粗脂肪含量產(chǎn)生不同影響。這可能與抗菌肽有助于消化脂肪,促進(jìn)脂肪代謝,抑制脂肪形成有關(guān)。因而,飼料添加一定水平抗菌肽可能會(huì)提高加州鱸魚的蛋白水平,從而抑制其脂肪含量。
飼料抗菌肽的添加量為160 mg/kg將會(huì)促進(jìn)加州鱸魚的增重率及特定生長(zhǎng)率,降低餌料系數(shù),促進(jìn)加州鱸魚生長(zhǎng),提高飼料利用效率,對(duì)對(duì)魚類形態(tài)學(xué)特征有顯著影響,促進(jìn)加州鱸魚的生長(zhǎng)。