錢麗華 尹舒雅 陸娜 阮松林 王賢波
摘要:白芨為我國傳統(tǒng)的藥用植物,兼具藥用和觀賞價(jià)值。在當(dāng)前白芨產(chǎn)業(yè)發(fā)展處于低潮期的現(xiàn)實(shí)下,基于近幾年白芨資源綜合利用的研究,綜述了白芨種苗繁育、栽培、加工、內(nèi)生菌分離應(yīng)用、藥用部位及非藥用部位的開發(fā)利用等6個(gè)層面的研究進(jìn)展,以期為白芨資源的綜合利用及產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展提供參考。
關(guān)鍵詞:白芨;繁育;栽培;加工;內(nèi)生菌;藥用部位;非藥用部位;綜合利用
中圖分類號(hào):S567.23+9.099 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2021)19-0064-08
白芨是白芨屬蘭科多年生地生草本植物白芨(Bletilla striata)的干燥塊莖,2020版《中國藥典》收錄品種,其假鱗莖為扁球形,呈三叉分枝,表面具有荸薺似的環(huán)帶,富黏性,花期4—5月,花為紫紅色或粉紅色[1]。其野生資源主要分布于陜西南部、甘肅東南部、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、湖北、湖南、廣東、廣西、四川和貴州地區(qū),生于海拔100~3 200 m的常綠闊葉林、棟樹林或針葉林下,路邊草叢或巖石縫中,朝鮮半島和日本也有分布[1]。白芨入藥歷史悠久,始載于漢代的《神農(nóng)本草經(jīng)》,之后唐、宋、元、明、清共29部、現(xiàn)代5部、《中國藥典》9部以及中藥飲片炮制規(guī)范15部中都對(duì)白芨粉末的入藥及主治功效進(jìn)行了記載[2],可見其藥用歷史悠久。
隨著白芨多種功能的挖掘,其應(yīng)用范圍不斷拓展,市場(chǎng)需求逐步擴(kuò)大,其野生資源遭到了無節(jié)制的人工采挖,經(jīng)過多年采挖,野生資源急劇減少,已被《中國植物紅皮書——稀有瀕危植物》第1冊(cè)收錄,同時(shí)也被寫入了《瀕危野生動(dòng)植物國際貿(mào)易公約》(CITES)保護(hù)種類[3]。近年來,市場(chǎng)上交易的白芨大多為野生資源,人工栽培的白芨市場(chǎng)占比較少,導(dǎo)致其野生資源仍在不斷減少,筆者所在課題組在收集白芨種質(zhì)資源時(shí)也了解到,已經(jīng)很難在野外生境中尋覓到它的身影了,因此白芨野生資源亟待保護(hù)。近年來,白芨市場(chǎng)價(jià)格在經(jīng)過急速攀升后呈滑鐵盧式下跌,從而導(dǎo)致白芨產(chǎn)業(yè)陷入低谷期。本文從白芨種苗繁育、栽培、加工、內(nèi)生菌分離應(yīng)用、藥用部位及非藥用部位的開發(fā)等方面進(jìn)行歸納總結(jié),以期為白芨產(chǎn)業(yè)的健康發(fā)展提供參考。
1種苗繁育
白芨種苗主要采用分株繁殖、種子繁殖和離體組織培養(yǎng)3種方式進(jìn)行繁育。
1.1分株繁殖
白芨傳統(tǒng)的繁殖方式主要為采用切分假鱗莖進(jìn)行繁殖,一是繁殖系數(shù)低,相比實(shí)生苗種植成本高,但藥材收獲周期會(huì)縮短,一般2年半至3年可收獲;二是與藥用部位競爭,消耗了部分藥材;三是常年采用切塊繁殖,會(huì)導(dǎo)致品質(zhì)退化、抗性和產(chǎn)量的下降。因此可適當(dāng)減少分株繁殖的次數(shù),或者輪換使用實(shí)生苗以保證種苗的生長、藥材產(chǎn)量及品質(zhì)。
1.2種子繁殖
種子繁殖包括無菌播種和大田直播2種方式。研究發(fā)現(xiàn)白芨種子在萌發(fā)過程中具有無休眠和非共生萌發(fā)的特性[4],這和多數(shù)蘭科植物需要真菌共生才能萌發(fā)不同。白芨種子萌發(fā)可能會(huì)因培養(yǎng)基配方不同而導(dǎo)致不同的發(fā)育途徑。目前已發(fā)現(xiàn)有3種發(fā)育途徑,一是通過原球莖階段發(fā)育成苗,其生長發(fā)育過程主要分為5個(gè)階段,即種子原胚-原球莖-幼苗-假鱗莖幼苗-小塊莖叢生苗[4];二是通過根狀莖階段發(fā)育成苗,主要分為4個(gè)階段,即種子原胚-原球莖-根狀莖-假鱗莖[5];三是既可通過原球莖階段發(fā)育成苗,又可通過根狀莖階段發(fā)育成苗[6]。
1.2.1無菌播種蘭科植物種子細(xì)小,胚發(fā)育不完全,缺乏供給營養(yǎng)成分的胚乳,自然條件下難以萌發(fā),因此近年來研究者紛紛開始白芨無菌播種技術(shù)的研究,發(fā)現(xiàn)種子貯藏溫度[7]、胚齡[8-9]、光條件[10-12]、基礎(chǔ)培養(yǎng)基[9,13-14]、培養(yǎng)基形態(tài)[13]、激素組合及配比[14-17]等對(duì)白芨種子萌發(fā)和生長都有一定的影響,認(rèn)為5 ℃是白芨果莢貯藏的最佳溫度,而冷凍和常溫條件保存均不利于白芨種子活力的保持[7];胚齡與白芨種子萌發(fā)率呈正相關(guān)關(guān)系,大胚齡(不少于20周)的白芨種子萌發(fā)率可達(dá)到100%,萌發(fā)時(shí)間也短[8-9],受培養(yǎng)基影響較小,而低胚齡種子則對(duì)培養(yǎng)基的依賴性較高,不同培養(yǎng)基上種子萌發(fā)率存在明顯差異[8];光照培養(yǎng)能促進(jìn)白芨種子的萌發(fā)[10-11],但也有學(xué)者發(fā)現(xiàn)先黑暗15 d再光照白芨種子的萌發(fā)率顯著優(yōu)于全黑暗或全光照培養(yǎng)[12];基礎(chǔ)培養(yǎng)基因無機(jī)鹽或營養(yǎng)成分的差異會(huì)對(duì)種子萌發(fā)和生長有影響,研究發(fā)現(xiàn)1/2MS培養(yǎng)基[13-14]或MS培養(yǎng)基[9]均適合白芨種子萌發(fā),液體培養(yǎng)基萌發(fā)率高于固體培養(yǎng)基[13];植物生長調(diào)節(jié)劑是關(guān)系植物形態(tài)建成的關(guān)鍵因子,單獨(dú)添加萘乙酸(NAA)或6-芐氨基嘌呤(6-BA)[15]均有利于白芨種子的萌發(fā)和原球莖的生長,增殖后的小苗粗壯且生長快,而同時(shí)添加6-BA和NAA會(huì)促進(jìn)白芨種子萌發(fā)[14,17],但抑制原球莖的生長,分化的小苗長勢(shì)細(xì)弱,不利于移栽[16];添加赤霉素則對(duì)白芨種子萌發(fā)作用不明顯[10],而噻苯?。═DZ)則能促進(jìn)白芨種子萌發(fā)后幼苗的生長,但苗易發(fā)生玻璃化[9];添加合適濃度的馬鈴薯[15]、香蕉泥[14]、椰汁[13-14]等物質(zhì)均有利于白芨種子的萌發(fā),但發(fā)現(xiàn)添加馬鈴薯提取液、椰汁能誘導(dǎo)白芨種子直接形成原球莖,卻抑制了幼苗生長[11];西紅柿汁[18]對(duì)白芨種子萌發(fā)和幼苗生長均效果不佳。因此在白芨種子無菌播種繁育中,應(yīng)把握好種子的成熟度和培養(yǎng)條件,即可實(shí)現(xiàn)白芨種苗的規(guī)?;庇?。目前白芨種子無菌萌發(fā)技術(shù)已經(jīng)基本成熟,國內(nèi)諸多種苗公司和科研院所均具備規(guī)?;庇哪芰Γ墙┠陙戆总阜N苗的主要生產(chǎn)方式之一。
1.2.2種子直播白芨種子直播技術(shù)的研究起步較晚,相關(guān)文獻(xiàn)較少?;诎总腹v種子量大的特點(diǎn),如能成功通過大田直播獲得種苗則會(huì)較無菌播種大大降低生產(chǎn)成本。??》宓韧ㄟ^不同基質(zhì)配比、種子處理、播種及育苗等環(huán)節(jié)的處理,研究形成了以樹皮粉、腐殖質(zhì)、營養(yǎng)土、雞糞、草炭土體積比為15 ∶20 ∶8 ∶1 ∶5的育苗基質(zhì),控制空氣溫度為20~35 ℃、濕度為60%~80%以及在種子萌發(fā)不同階段定期噴灑不同的營養(yǎng)液的適合秦巴山區(qū)及以南地區(qū)的白芨種子直播技術(shù),種子萌發(fā)率可由自然條件下的5%提升至(69.7±3.13)%,播種180 d植株長成4~5張真葉,高度達(dá)到10~15 cm,假鱗莖直徑可達(dá)1.0~1.5 cm,可作為成品苗移栽大田種植[19]。史文旋等采用體積比為9 ∶1 ∶1的混合基質(zhì)(營養(yǎng)土 ∶蛭石 ∶珍珠巖),經(jīng)高錳酸鉀滅菌,活性炭拌種(活性炭與種子體積比為30 ∶1),成苗數(shù)可達(dá)到9 個(gè)/cm2,每隔30 d噴灑MS+1.0 mg/L 6-BA 營養(yǎng)液有利于促進(jìn)白芨幼苗的生長[20],按照文獻(xiàn)中每個(gè)播種盒播種量8 mg、每粒種子質(zhì)量約為4 μg[21]、成苗數(shù)9 個(gè)/cm2以及播種盒面積 190.38 cm2 來計(jì)算,則每盒成苗數(shù)達(dá)到1 713 株,則理論成苗率可達(dá)到85.7%。汪夢(mèng)婷等對(duì)白芨大棚直播育苗進(jìn)行了初步的研究,采取對(duì)白芨種子進(jìn)行室內(nèi)催芽的方式,待白芨種子萌發(fā)后撒播于紅土與腐殖土的混合土中,保持20~30 ℃溫度以及一定的空氣濕度,則種子能萌發(fā)成苗,直播180 d后幼苗具有3~4 張葉片,植株高度達(dá)到(8.74±1.27) cm[22],但文中未對(duì)直播萌發(fā)率、成苗率以及營養(yǎng)管理等進(jìn)行描述。上述研究使得白芨直播變得可行,可大大提高白芨種苗生產(chǎn)效率和縮短繁育周期,可作為白芨種苗生產(chǎn)的主要方式進(jìn)行應(yīng)用。
1.3離體組織培養(yǎng)
離體組織培養(yǎng)具備不受氣候限制、周年可在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)規(guī)?;a(chǎn)以及提純復(fù)壯的優(yōu)勢(shì)。對(duì)于一些采用常規(guī)方法無法大量繁殖的植物品種或珍稀的品種一般都會(huì)采用組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行。對(duì)于白芨的組織培養(yǎng),研究人員以莖尖[23-24]、側(cè)芽[24]、幼根為外植體誘導(dǎo)出擬原球莖[25]或直接誘導(dǎo)出叢芽[26],從而實(shí)現(xiàn)快繁;而塊莖[23,27]由于污染率高且誘導(dǎo)叢生芽周期長,花芽[27]由于污染率高、難以誘導(dǎo)出愈傷組織或芽而不適合作為離體培養(yǎng)的外植體材料。雖然通過側(cè)芽、莖尖和幼根建立了組培快繁技術(shù)體系,但由于其周期偏長、成本高以及組培苗移栽成活率偏低等問題未能在生產(chǎn)上進(jìn)行規(guī)?;瘧?yīng)用,而種子無菌播種則由于萌發(fā)和生長快、成本較低而成為白芨種苗現(xiàn)階段主要的生產(chǎn)方式之一,比如劉春雷等研究建立了以白芨種子為材料的“兩段式”組培快繁技術(shù),即種子無菌萌發(fā)-鱗莖誘導(dǎo)及壯苗培養(yǎng)共2步,篩選出了2個(gè)階段合適的培養(yǎng)基配方,經(jīng)培養(yǎng)后鱗莖分化時(shí)間僅為20.7 d,培養(yǎng)60 d后,鱗莖分化率為91%,鱗莖直徑達(dá)6.91 mm,組培苗生長健壯,移栽至大田后成活率達(dá)到95%,大大降低了育苗成本[28]。
2栽培技術(shù)
白芨應(yīng)選擇有機(jī)質(zhì)、全氮、堿性氮以及有效磷含量豐富的土壤栽培,并適當(dāng)提高有效鋅和有效鐵含量,有利于白芨生長和品質(zhì)的提高[29]。野生白芨主要分布區(qū)域的海拔梯度跨度較大,不同海拔高度下植物生長以及有效成分的積累則不同,有學(xué)者認(rèn)為800~1 300 m海拔高度有利于白芨中4-羥基苯基葡萄糖苷、4-(葡糖糖氧基)-肉桂酸葡萄糖氧基芐酯、1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯-2-[4-O-肉桂?;?6-O-乙酰基]葡萄糖苷等9個(gè)成分含量的積累[30]。白芨是喜氮作物[31-33],氮肥對(duì)白芨產(chǎn)量的影響最大,其次為磷肥,而鉀肥影響最小,因此在白芨栽培中應(yīng)以施氮肥為主,9月底開始適當(dāng)增加磷比例降低鉀比例[33],還可適當(dāng)添加蚯蚓糞[34]和真菌類肥料[35],以促進(jìn)白芨增產(chǎn),蚯蚓糞還可促進(jìn)白芨多糖、白芨膠的合成。白芨作為典型的C3植物,人工栽培中需要適當(dāng)遮光降溫[36],遮光率以40%~55%為宜[37-38],但也有學(xué)者認(rèn)為遮光率50%~70%有利于白芨生長發(fā)育[39]。因此在生產(chǎn)上大多會(huì)采用林下種植、大棚種植加外遮陰處理以及大田種植與其他作物間作,其中白芨與玉米間作是最常見的模式[40],白芨在郁閉度為 0.2~0.7 的林下栽培均可,闊葉林下栽培郁閉度可達(dá)到0.6,效果最佳[41],若選擇毛竹林下栽培,則郁閉度以0.40~0.59有利于白芨生長和產(chǎn)量提升,坡位可選擇下坡位[42]。水分、栽培密度、年限對(duì)植物的生長、產(chǎn)量和品質(zhì)具有重要影響。白芨生產(chǎn)中,土壤相對(duì)含水量過低(25%)會(huì)導(dǎo)致光合碳同化能力下降,進(jìn)而引起生物量和多糖含量下降,而土壤相對(duì)含水量在中高水平(50%、80%)時(shí)則相反,因此白芨生產(chǎn)中土壤相對(duì)含量需保持在中高水平[43],以滿足白芨對(duì)水分的需求。白芨栽培密度(2 萬、4 萬株/667 m2)對(duì)其根冠比和折干率無明顯影響,但對(duì)多糖、淀粉、蛋白質(zhì)、總黃酮、總酚含量有一定的影響,低密度稍高于高密度,上述各成分積累的最佳時(shí)期則不盡相同,白芨多糖含量在每年9月、10月較高,淀粉含量在每年8月、9月較高,蛋白質(zhì)含量在每年4月較高,總酚與總黃酮含量在每年4月、5月較高[44],因此可根據(jù)收獲的目標(biāo)來確定收獲的時(shí)間。當(dāng)白芨采收后,帶泥的假鱗莖無需清洗,放置陽光下照射迅速曬干后,即可轉(zhuǎn)入越冬貯藏處理,貯藏時(shí)也可采用消毒過的濕鋸末作包埋介質(zhì),于 6~8 ℃冰柜或冷庫中安全越冬[45]。白芨連作栽培會(huì)引起土壤板結(jié)、病蟲害加重以及品質(zhì)、產(chǎn)量下降,可通過施加煙稈炭[46]進(jìn)行土壤改良,從而促進(jìn)白芨生長。由此可見,白芨生產(chǎn)中要嚴(yán)格控制其生長條件和收獲時(shí)期,同時(shí)不應(yīng)僅局限于對(duì)不同林下郁閉度、坡位、肥、水等對(duì)白芨產(chǎn)量的影響,需對(duì)其假鱗莖中活性成分積累的影響進(jìn)行深入系統(tǒng)的研究,以完善白芨栽培技術(shù)體系。
3產(chǎn)后初加工
產(chǎn)后加工是影響藥材質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。而白芨中富含多糖,且白芨多糖已在多個(gè)領(lǐng)域展現(xiàn)了它的作用和價(jià)值,2020版《中國藥典》還增加了1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯(C34H46O17)為質(zhì)量指標(biāo),因此研究人員以白芨多糖或C34H46O17作為主要考察指標(biāo),研究蒸、煮、烘、切片、去皮等加工方式對(duì)其含量的影響,以期更好地保證白芨的藥效。宋智琴等研究認(rèn)為,白芨最適產(chǎn)地加工方法為新鮮塊莖蒸10~12 min后60 ℃烘干,折干率為24.65%,提取率為18.40%,多糖含量為37.43%,塊莖皮折干率也較高,且多糖提取率和含量表現(xiàn)較好[47]。邢麗花等研究認(rèn)為,鮮白芨采用去皮、切片、60 ℃烘干方法加工多糖含量最高,達(dá)到32.31%[48]。唐修靜等研究認(rèn)為,白芨以蒸制切片后其1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯(militarine)含量和浸出物含量最好,分別為3.09%和19.51%[49]。饒文霞等還研究了干燥工藝對(duì)白芨飲片特性的影響,分別建立了適合處方飲片和藥廠投料的干燥工藝,并首次提出白芨飲片共晶點(diǎn)為-11.6 ℃[50]。上述大多都限于鮮白芨的初加工,應(yīng)考慮加工方式等對(duì)白芨質(zhì)量控制指標(biāo)的影響,從而保證加工環(huán)節(jié)藥材的質(zhì)量。
4內(nèi)生菌分離及應(yīng)用
內(nèi)生菌是指其生活史中的某一段時(shí)期生活在健康植物組織內(nèi)部,不引起植物組織明顯侵染及癥狀改變的一類菌[51]。研究植物內(nèi)生菌的多樣性,對(duì)揭示植物內(nèi)生菌的相互作用機(jī)制,有效利用內(nèi)生菌資源具有重要意義。比如20世紀(jì)90年代在印度塔爾沙漠中2株灌木的根部分離到了印度梨形孢(Piriformospora indica),經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)對(duì)200多種植物具有促生長和提高植物抗逆性作用[52],比如叢枝菌根(Arbuscular mycorrhizae,AM),它是土壤共生真菌中分布最廣泛的一類真菌,至少可以與200個(gè)科的20萬種以上的植物建立共生關(guān)系,從而促進(jìn)植物生長、提高植物品質(zhì)和抗逆性[52]。植物內(nèi)生菌作為生物活性物質(zhì)篩選的重要來源已引起人們的廣泛關(guān)注[53-54],這對(duì)于以生物活性成分為標(biāo)志的藥用植物來說尤為重要,自Strobel等1993年從短葉紅豆杉的樹皮中分離得到1株能產(chǎn)紫杉醇的內(nèi)生真菌安德氏紫杉霉(Taxomyces andreanae)[55]以來,藥用植物內(nèi)生真菌成為研究熱點(diǎn)。白芨作為藥用蘭科植物,已從其根、莖、葉、假鱗莖等組織中分離到大量內(nèi)生菌,已鑒定出31個(gè),隸屬于16個(gè)屬(表1),并篩選到了少量有益菌株,具有開發(fā)和利用價(jià)值。
研究發(fā)現(xiàn)鞘脂單胞菌屬、地桿菌屬、鹽單胞菌屬和土壤桿菌屬是白芨內(nèi)生細(xì)菌的優(yōu)勢(shì)種群[56],并基于鞘脂單胞菌屬可利用多種底物合成有價(jià)值的高分子物質(zhì)比如β-胡蘿卜素、結(jié)冷膠等[57]推測(cè)其可降解復(fù)雜有機(jī)物,具有開發(fā)價(jià)值;鐮刀菌屬是白芨內(nèi)生真菌系統(tǒng)中的優(yōu)勢(shì)菌種,經(jīng)抗菌活性測(cè)試發(fā)現(xiàn)內(nèi)生細(xì)菌(b9)菌株[58]對(duì)芽孢桿菌和大腸桿菌都具有抗菌活性,內(nèi)生菌株T21[59]對(duì)大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌和銅綠假單胞菌均有較好的抑菌活性,可作為具有廣譜抗菌活性藥物的潛力微生物菌種;從白芨中還分離得到了屬于枝孢菌屬2個(gè)不同種的菌株,能與白芨苗根部形成菌根聯(lián)合體,其中1個(gè)菌株對(duì)植株長勢(shì)、原球莖膨大和莖干加粗有良好的促進(jìn)作用,而另一菌株則對(duì)根的促生效應(yīng)更佳,新根粗壯,假鱗莖處叢芽分化較早[60]。從白芨根部分離得到的Fusarium solani(茄病鐮刀菌)胞外多糖總還原力,清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基活性、清除羥基自由基活性、清除2,2-聯(lián)氯-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)自由基均較好[61];從白芨根和原球莖中分離得到的菌株JST-13和 SL15-7[62]在種子萌發(fā)前期(未形成葉子)與原球莖共暗培養(yǎng),對(duì)其萌發(fā)具有顯著的促進(jìn)作用,且萌發(fā)的幼苗較其他處理組強(qiáng)壯,生根良好,經(jīng)染色檢測(cè)發(fā)現(xiàn)定殖的菌絲團(tuán)較多,應(yīng)是與幼苗建立了良好的共生關(guān)系從而促進(jìn)其生長;韓雪花等對(duì)白芨中分離到的草酸青霉菌(Penicillium oxalicum)進(jìn)行發(fā)酵并提取分離獲得15個(gè)單體化合物,經(jīng)質(zhì)譜、核磁共振鑒定為α-亞麻酸甲酯(1)、亞油酸甲酯(2)、benzoic acid (3)、4-hydroxybenzaldehyde (4)、ganodermasides D(5)、dankasterone A(6)、calvasterol B(7)、cyclo-(Pro-Phe) (8)、A penioxalicin (9)、5a-麥角苗-7,22-二烯-3β,5,6β-三醇(10)、cis-4-hydroxyscytalone (11)、3,4-dihydroxyphenylacetic acid methyl ester (12)、protocatechuic acid (13)、cyclo-(4-S-hydroxy-R-proline-R-isoleucine)(14)、cyclo-L-(4-hydroxyprolinyl)-L-leucine (15)[63]。其中化合物1以及4~15均為首次從P. oxalicum中分離得到,經(jīng)查閱文獻(xiàn),化合物5能顯著延長酵母菌株K6001的壽命,化合物6具有抑制癌細(xì)胞生長的作用,化合物7有一定的抑菌活性,化合物9對(duì)人類早幼粒細(xì)胞白血病細(xì)胞(HL-60)細(xì)胞系顯示出弱的細(xì)胞毒活性,以化合物10為代表的植物香醇類物質(zhì),除了具有較強(qiáng)的抗腫瘤、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力的作用外,還具有降血脂、抑制乳腺增生等作用,化合物11對(duì)大腸桿菌和枯草芽孢桿菌都顯示出抗菌活性,化合物15具有刺激植物生長的作用,基于該研究利用白芨內(nèi)生菌生產(chǎn)活性成分值得探索與研究[63]。曾茜等針對(duì)白芨生產(chǎn)中塊莖腐爛病情況,通過腐爛病病原菌的拮抗測(cè)試,從貴州小白芨137株內(nèi)生真菌中初步篩選到抗病能力較強(qiáng)的2株菌株GZFJ021和GZLG033,可作為生防菌資源儲(chǔ)備[64]。上述結(jié)果顯示,白芨內(nèi)生菌資源豐富,且部分菌株已經(jīng)顯示出良好的開發(fā)潛力和前景,一方面可進(jìn)一步分離篩選到具備功能向好的有益菌株用于農(nóng)業(yè)或其他領(lǐng)域;另一方面基于白芨內(nèi)生菌草酸青霉菌發(fā)酵產(chǎn)物顯示的良好功能案例和前景,可進(jìn)一步開展利用白芨內(nèi)生菌生產(chǎn)活性成分的研究。
5藥用部位的開發(fā)利用
白芨地下塊莖為我國傳統(tǒng)中藥,具有較高的藥用價(jià)值,同時(shí)白芨多糖膠具有特殊的黏度特性,可作為增稠劑、潤滑劑、乳化劑和保濕劑應(yīng)用于石油工業(yè)、食品工業(yè)和醫(yī)藥化妝品工業(yè)[65]。隨著藥理學(xué)領(lǐng)域的不斷研究,白芨的應(yīng)用范圍還在不斷開發(fā)中。
5.1臨床入藥及藥用原材料
白芨醫(yī)藥用途廣泛,主要用于斂瘡止血、補(bǔ)肺、消腫生肌、支氣管擴(kuò)張等。近年來,也用于治療食管炎、血管瘤、體表腫瘤、鼻竇炎、肺結(jié)核、十二指腸潰瘍出血、胃靜脈曲張出血等;并作為很多藥物原材料應(yīng)用于臨床治療,如治療胃潰瘍的胃康顆粒[66]、及術(shù)顆粒[67]、潰平寧顆粒[68];治療血小板減少癥的利血康軟膠囊[69];治療手足癬的復(fù)方白芨膏[69];治療手足皸裂的復(fù)方白芨乳膏[69];治療口腔潰瘍的復(fù)方白芨口腔潰瘍洗劑[70]。
5.2醫(yī)用材料
5.2.1耦合劑和血管栓塞劑以白芨提取液、尼泊金、瓊脂液、香精等為原料制備的無油醫(yī)用超聲耦合劑[69],已經(jīng)在臨床上應(yīng)用并取得良好效果。白芨作為血管栓塞劑也在臨床治療中得到了廣泛應(yīng)用,但目前為止主要應(yīng)用于腫瘤供養(yǎng)血管的栓塞治療,且局限動(dòng)脈栓塞。1996年白芨首次應(yīng)用于栓塞肝動(dòng)脈治療無手術(shù)指征的肝癌患者,顯示出白芨粉顆粒具有強(qiáng)大的永久性、中心性血管栓塞作用,效果明顯優(yōu)于明膠栓塞[69],近年研究表明白芨加明膠海綿混合栓塞效果最佳[71];此外還被用于栓塞子宮動(dòng)脈治療子宮肌瘤骨骼腫瘤及Graves病栓塞治療[71];但白芨被用于栓塞腎動(dòng)脈、栓塞門靜脈治療門靜脈高壓癥仍處于試驗(yàn)動(dòng)物階段,已取得了良好的效果,尚未進(jìn)入臨床應(yīng)用。
5.2.2代血漿以白芨膠制成的白芨代血漿[71],臨床試驗(yàn)有維持血容量及提高血壓的作用,未發(fā)現(xiàn)抗原性,亦無明顯不良反應(yīng),對(duì)肝腎功能、血像、出血時(shí)間、凝血時(shí)間均無影響。
5.2.3制劑輔料白芨是優(yōu)良的天然高分子成膜材料,如以甲殼胺和白芨膠為成膜材料,制備成了甲硝唑藥膜[72];以白芨膠為成膜材料制成了復(fù)方養(yǎng)陰生肌雙層膜[72],在體液中可快速溶化,具有速效的作用;另外白芨多糖因具有很好的黏性,是很好的植物多糖高分子助懸劑[72],且能增加乳劑的穩(wěn)定性,是很好的天然乳化劑[72]。
5.3食品保鮮劑
白芨多糖膠因具有較高的食用安全性,可用于食品保鮮劑,有研究者將白芨涂膜應(yīng)用于櫻桃番茄果實(shí)的保鮮中發(fā)現(xiàn)能延緩櫻桃番茄采后呼吸躍變過程中呼吸高峰的到達(dá)時(shí)間,從而抑制櫻桃番茄的呼吸作用,減少有機(jī)成分的損耗,延長櫻桃番茄的保質(zhì)貯藏期,保鮮效果良好[65],顯示了白芨多糖膠在食品保鮮方面的應(yīng)用前景。
5.4日化原料
白芨塊莖含有大量的黏稠性葡甘露聚糖類物質(zhì),具有去腐生肌、保濕潤膚的作用,天然無毒無副作用,是很好的化妝品原料,有很多公司都將白芨作為原料,生產(chǎn)出了白芨護(hù)膚品[73],經(jīng)試用表明在消炎、止癢、消退色斑、消除痤瘡、防止粗糙、抗凍和防裂等方面具有良好的護(hù)膚美容作用,并經(jīng)安全性評(píng)價(jià),對(duì)皮膚無刺激、無變態(tài)性反應(yīng)和光毒反應(yīng);同時(shí)因具有抗菌消炎、斂瘡止血的作用,被應(yīng)用于牙膏的生產(chǎn)中[74]。
6非藥用部位的開發(fā)利用
白芨入藥部位主要是假鱗莖,已研究具有多種功效。近年來也有研究人員對(duì)白芨非藥用部位的功效進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)白芨花中花青素的含量達(dá)到了0.46 mg/g,主要包括飛燕草色素、牽?;ㄉ?、天竺葵色素、芍藥色素和錦葵色素,體外測(cè)定發(fā)現(xiàn)白芨花提取液具有抗氧化活性,經(jīng)沸水浸泡后具淡雅花香,滋味稍澀、回甘,可開發(fā)成功能飲料[75];真空50 ℃干燥工藝能較好地保存白芨花原有的鮮艷色彩和花青素含量,提高醇提物得率和減少多糖、總黃酮和總酚的損失[76]。白芨莖稈醇提物成分與塊莖醇提物中成分類似,能抑制A549細(xì)胞的增殖且呈劑量依賴關(guān)系,白芨莖稈有潛力成為塊莖的補(bǔ)充資源[77]。白芨須根醇提物能抑制A549細(xì)胞增殖,并有濃度效應(yīng),其機(jī)制可能是通過下調(diào)bcl-2、ICAM-1及上調(diào)bax的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)[78]。通過比較白芨須根和塊莖中多糖組成和含量,發(fā)現(xiàn)須根總糖含量雖然低于塊莖中含量,但總糖中還原性糖含量高于塊莖,白芨須根與塊莖中的多糖中都含有葡萄糖和甘露糖,但須根中還含有半乳糖[79]。由此可見,白芨花、莖稈、須根等非藥用部位具有一定的藥用作用,值得開發(fā)加以利用。
7展望
白芨作為一味入藥歷史悠久的中藥,其用途廣泛、功效顯著,是云南白藥、快胃片、白芨顆粒、白芨糖漿等30多種中成藥的主要原料,同時(shí)具有美容奇效,擁有“美白仙子”的美譽(yù),而且在食品和工業(yè)上都有很好的應(yīng)用。全國白芨工業(yè)及藥用年需求量已超過4 000 t,其中“胃康靈膠囊” “快胃片”的生產(chǎn)年消耗白芨藥材500 t以上,可見其產(chǎn)業(yè)價(jià)值和市場(chǎng)前景。白芨中含有聯(lián)芐類、菲類及其衍生物、多糖類物質(zhì),尤其是富含多糖,具有收斂止血、消腫生肌等功效,在醫(yī)學(xué)臨床上外治創(chuàng)傷出血、燙傷和療瘡,內(nèi)治吐血、肺病、咳血、慢性胃潰瘍以及腫瘤等,還具有較強(qiáng)的抗氧化和抗衰老作用,可用于保健、護(hù)膚及美容養(yǎng)顏。然而白芨在經(jīng)歷了價(jià)格歷劫后,大大打擊了中藥材產(chǎn)業(yè)主管部門以及藥農(nóng)的信心,白芨種植面積在逐步萎縮,有些地區(qū)雖將其納入到當(dāng)?shù)氐闹攸c(diǎn)培育品種,但有名無實(shí)。因此有必要強(qiáng)化白芨產(chǎn)業(yè)全產(chǎn)業(yè)鏈的發(fā)展,讓白芨重新回歸到社會(huì)視野中。一是要研究完善白芨栽培技術(shù)體系,重點(diǎn)針對(duì)產(chǎn)量提升、多糖以及2-異丁基蘋果酸葡萄糖氧基芐酯類化合物積累規(guī)律和調(diào)控開展研究,實(shí)現(xiàn)白芨產(chǎn)量和品質(zhì)的全面提升;二是進(jìn)一步完善白芨質(zhì)量評(píng)價(jià)體系。2020版《中國藥典》較2015版《中國藥典》增加了含量較高且區(qū)別于其他偽品的特征成分1,4-二[4-(葡萄糖氧)芐基]-2-異丁基蘋果酸酯(C34H46O17)含量不少于2.0%的規(guī)定,該物質(zhì)屬于2-異丁基蘋果酸葡萄糖氧基芐酯類化合物,具有神經(jīng)系統(tǒng)保護(hù)、益智及抗炎等活性,段營輝等利用液相質(zhì)譜法從白芨中分離到21個(gè) 2-異丁基蘋果酸葡萄糖氧基芐酯類化合物[80],可對(duì)該類物質(zhì)開展進(jìn)一步的研究,且鑒于白芨活性成分豐富,僅以單個(gè)化學(xué)指標(biāo)難以綜合評(píng)價(jià)白芨藥材的質(zhì)量,建議進(jìn)一步開展代謝組學(xué)、指紋圖譜等技術(shù),研究建立綜合多糖、C34H46O17以及其他成分含量的白芨質(zhì)量評(píng)價(jià)體系;三是加強(qiáng)白芨花、莖稈、須根等非藥用部位的開發(fā)與利用,提高白芨附加值,幫助農(nóng)戶增收;四是進(jìn)一步深化白芨內(nèi)生菌的開發(fā)與利用,包括內(nèi)生菌分離篩選和利用內(nèi)生菌生產(chǎn)活性成分;五是要加強(qiáng)白芨多糖的開發(fā)應(yīng)用,白芨中富含多糖,且安全、天然,具備抑菌保鮮作用,可挖掘其食品保鮮的潛力,同時(shí)可將多糖降解以后作為植物免疫誘抗劑的原料開發(fā)植物免疫誘抗劑及復(fù)配制劑,誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性,減少農(nóng)藥施用,達(dá)到綠色環(huán)保的作用,如中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所利用寡糖類為原料研制出多個(gè)植物免疫誘抗劑及復(fù)配制劑,獲得國家農(nóng)藥登記證多個(gè),在提高農(nóng)作物產(chǎn)量和品質(zhì)方面發(fā)揮了較大的作用,推廣應(yīng)用面積達(dá)到300萬hm2[81],作者所在單位以寡糖類為原料開發(fā)了2個(gè)植物免疫誘抗劑[82-83],在水稻、玉米、葡萄等應(yīng)用上表現(xiàn)出抗病和促生長功效,可提高產(chǎn)量和品質(zhì),對(duì)靶標(biāo)病原菌防效達(dá)到60%~95%,減施農(nóng)藥30%以上[83]。
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基金項(xiàng)目:杭州市農(nóng)業(yè)與社會(huì)發(fā)展科研自主申報(bào)項(xiàng)目(編號(hào):20191203B56);杭州市農(nóng)業(yè)與社會(huì)發(fā)展科研主動(dòng)設(shè)計(jì)項(xiàng)目(編號(hào):20190101A05);杭州市農(nóng)科院科技創(chuàng)新與示范推廣基金(編號(hào):2019HNCT-31)。
作者簡介:錢麗華(1975—),女,浙江杭州人,高級(jí)農(nóng)藝師,主要從事中藥材生物技術(shù)、遺傳多樣性分析及育種研究。E-mail:menoy@hz.cn。