細(xì)菌治療腫瘤的發(fā)展現(xiàn)狀及趨勢(shì)

馮 靜，柯章敏，王 麗，張秀偉，張?jiān)世?

（1. 南京醫(yī)科大學(xué)附屬江寧醫(yī)院呼吸與危重癥醫(yī)學(xué)科，南京 211100；2. 南京醫(yī)科大學(xué)生物醫(yī)學(xué)工程與信息學(xué)院，南京 211100）

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展依然無(wú)法攻克多數(shù)晚期腫瘤無(wú)法治愈的難題，這極大促進(jìn)了“非常規(guī)”治療手段如病毒［1］、細(xì)菌［2］和瘧原蟲(chóng)［3］等治療方法的發(fā)展。特別是Coley醫(yī)生在19世紀(jì)90年代發(fā)明的細(xì)菌混合物治療腫瘤的方法，因細(xì)菌簡(jiǎn)單易于操作的特點(diǎn)，再次成為21世紀(jì)的研究熱點(diǎn)［4］。

目前研究最多的腫瘤靶向細(xì)菌包括減毒諾維氏菌（Clostridiumnovyi-NT）［5］、鼠傷寒沙門(mén)氏菌（Salmonella typhimurium）［6］、雙歧桿菌屬（Bifidobacterium）［7］、大腸桿菌Nissle 1917（E. coliNissle 1917）［8］等，常被用于腫瘤的治療?；谝陨霞?xì)菌構(gòu)建的抗腫瘤工程菌可以單獨(dú)治療，聯(lián)合化療、放療和免疫治療等抑制或者殺死腫瘤細(xì)胞［9-11］。同時(shí)，多種細(xì)菌及其衍生物制備的腫瘤靶向制劑已經(jīng)進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段或者正在進(jìn)行相關(guān)的臨床招募［12-13］。伴隨著生物組學(xué)技術(shù)的發(fā)展，以及基因修飾技術(shù)的進(jìn)步和免疫治療的興起，細(xì)菌治療腫瘤出現(xiàn)了新的發(fā)展趨勢(shì)。本文對(duì)近期細(xì)菌治療腫瘤的最新研究進(jìn)展進(jìn)行了綜述，并對(duì)其發(fā)展趨勢(shì)、應(yīng)用前景和存在的問(wèn)題進(jìn)行了相關(guān)討論。

1 細(xì)菌對(duì)腫瘤的靶向性

1.1 實(shí)體腫瘤微環(huán)境

實(shí)體腫瘤微環(huán)境是設(shè)計(jì)和運(yùn)用細(xì)菌靶向治療腫瘤的基礎(chǔ)。實(shí)體腫瘤不同于機(jī)體的正常組織，其具有低氧、低營(yíng)養(yǎng)、低pH值和高滲透性的特點(diǎn)。在實(shí)體瘤體積不斷增大的過(guò)程中，正常組織的局部血管不足以維持腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，從而觸發(fā)腫瘤血管生成因子的釋放來(lái)形成新的血管網(wǎng)，失去正常的血管結(jié)構(gòu)［14］。這種混亂、不穩(wěn)定的新生血管網(wǎng)絡(luò)主要分布在腫瘤組織外圍，使得腫瘤內(nèi)部氧氣和營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)不足，腫瘤部位出現(xiàn)了暫時(shí)性或持久性的缺氧狀態(tài)，同時(shí)生成壞死組織［15］。為了應(yīng)對(duì)缺氧，腫瘤細(xì)胞會(huì)通過(guò)糖酵解和無(wú)氧呼吸來(lái)供給能量，但會(huì)產(chǎn)生乳酸，使腫瘤部位的pH值低于正常組織［16］。而實(shí)體瘤致密的細(xì)胞外基質(zhì)和較高的細(xì)胞密度，導(dǎo)致腫瘤內(nèi)部形成了較高的滲透壓，從而阻止藥物分子向缺乏血管的實(shí)體瘤內(nèi)部滲透［17］。由于實(shí)體腫瘤微環(huán)境的特殊性導(dǎo)致目前的臨床治療手段效果較差，因此，我們急需尋找新的高效的腫瘤治療手段。

1.2 細(xì)菌自身特性及對(duì)腫瘤的靶向能力

在自然界中，部分細(xì)菌能夠特異性地靶向?qū)嶓w瘤，克服實(shí)體腫瘤低氧、高滲透壓的微環(huán)境，進(jìn)入腫瘤的壞死區(qū)生長(zhǎng)繁殖。例如，減毒諾維氏菌和雙歧桿菌屬偏愛(ài)無(wú)氧環(huán)境，靜脈注射后會(huì)自動(dòng)地聚集在腫瘤部位，而在正常組織中不能生存，這有效避免了細(xì)菌對(duì)正常組織細(xì)胞的損害［18-19］。正常情況下，藥物只能被動(dòng)地隨著血液流動(dòng)，導(dǎo)致到達(dá)腫瘤的藥物濃度隨著距離的增大而相應(yīng)地減少。同時(shí)，由于腫瘤內(nèi)部血管缺乏以及高滲透壓微環(huán)境使得藥物無(wú)法進(jìn)入腫瘤內(nèi)部［20］。而細(xì)菌作為生物體，在趨化因子和高滲透長(zhǎng)滯留效應(yīng)（enhanced permeability and retention effect，EPR）的作用下靶向聚集到腫瘤中［20］，借助于其鞭毛運(yùn)動(dòng)進(jìn)入實(shí)體瘤內(nèi)部生長(zhǎng)繁殖［21］。一些研究表明，鼠傷寒沙門(mén)氏菌不管是在體外還是體內(nèi)，其遺傳物質(zhì)經(jīng)多代繁殖后依舊保持穩(wěn)定，這為構(gòu)建腫瘤靶向工程菌奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)［22］。通過(guò)DNA重組技術(shù)可以對(duì)腫瘤靶向細(xì)菌進(jìn)行基因改造，產(chǎn)生腫瘤靶向性更高、毒性更小的細(xì)菌菌株，用于腫瘤的靶向治療。

事實(shí)上，兼性厭氧菌對(duì)腫瘤的靶向性低于專性厭氧菌，但是其更易于在體外進(jìn)行修飾改造的便利性使其成為主要的研究對(duì)象。通過(guò)基因改造可以有效提升兼性厭氧菌的腫瘤靶向性。例如，將鼠傷寒沙門(mén)氏菌株生長(zhǎng)所必需的基因asd置于低氧啟動(dòng)子 PpepT之后，使得該菌株只能在低氧的腫瘤環(huán)境中生長(zhǎng)繁殖，而當(dāng)在有氧的正常組織中，有氧啟動(dòng)子PsodA會(huì)促進(jìn)asd基因的反義轉(zhuǎn)錄，使得其無(wú)法在正常組織中存活［23］（圖1）。更重要的是，細(xì)菌不僅可以進(jìn)入實(shí)體瘤內(nèi)部，還可以隨著腫瘤細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)移。鼠傷寒沙門(mén)氏菌經(jīng)靜脈注射小鼠后，該細(xì)菌出現(xiàn)在腫瘤的每一個(gè)轉(zhuǎn)移灶中。其中，44.0%的細(xì)菌都分散在腫瘤轉(zhuǎn)移組織中，而只有0.5%的細(xì)菌存在于正常的肝組織［9］。另外，αvβ3整合素通常在活化的內(nèi)皮細(xì)胞和部分腫瘤細(xì)胞膜上高表達(dá)，而精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）對(duì)其具有高度靶向性。通過(guò)DNA技術(shù)在鼠傷寒沙門(mén)氏菌細(xì)胞膜上表達(dá)RGD多肽，可以顯著增加其對(duì)腫瘤的靶向性［24］（圖1）。另外，在細(xì)菌表面表達(dá)癌胚抗原的特異性抗體（antibody），不僅能增加細(xì)菌的腫瘤靶向性，而且可以顯著增強(qiáng)基于細(xì)菌構(gòu)建的癌癥疫苗的免疫原性［25-26］。而通過(guò)腫瘤靶向菌合成表達(dá)黏附素，可以顯著增加細(xì)菌對(duì)實(shí)體腫瘤的黏附性，從而提高細(xì)菌的腫瘤靶向性［27］。另外，針對(duì)腫瘤酸性微環(huán)境的特點(diǎn)，基因改造鼠傷寒沙門(mén)氏菌使STM1787啟動(dòng)子在酸性腫瘤微環(huán)境中優(yōu)先被激活，從而驅(qū)動(dòng)治療性基因的表達(dá)，并借助于沙門(mén)氏菌特異性地定位于原發(fā)腫瘤和體內(nèi)轉(zhuǎn)移灶的特點(diǎn)達(dá)到治療的目的［28］。除了利用腫瘤微環(huán)境低氧和低pH值的特點(diǎn)來(lái)改造細(xì)菌外，設(shè)計(jì)營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)菌也是提高細(xì)菌靶向腫瘤性的常用方法。將鼠傷寒沙門(mén)氏菌A1菌株設(shè)計(jì)為亮氨酸/精氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)菌，該菌在腫瘤中能獲得充足的營(yíng)養(yǎng)而定殖于腫瘤部位，而其在正常組織中由于缺乏必需氨基酸不能正常生長(zhǎng)［29］。脂多糖是導(dǎo)致細(xì)菌毒性反應(yīng)的重要組分，敲除脂多糖基因的鼠傷寒沙門(mén)氏菌缺失突變體具有較好的腫瘤特異性和顯著降低的致病性［30］。

圖1 基因修飾和腫瘤靶向分子鑲嵌增加細(xì)菌的腫瘤靶向性Fig. 1 Increasing bacterial tumor-targeting ability using gene modification and molecular decoration

2 細(xì)菌利用納米材料及自身衍生物靶向成像和治療腫瘤

納米材料具有良好的腫瘤滲透性、EPR效應(yīng)和較高的藥物裝載能力等特性，這使得納米材料在腫瘤治療方面具有重要的應(yīng)用潛力［31］。納米材料具有較小的顆粒尺寸使其可以自由穿越毛細(xì)血管。EPR效應(yīng)可以使納米材料較多地滯留在腫瘤部位，但是肝臟和脾臟會(huì)截留70%以上的納米顆粒［32］。為了增強(qiáng)納米顆粒的腫瘤靶向能力，可以在納米顆粒表面修飾腫瘤靶向分子，如腫瘤細(xì)胞表面受體的抗體、親合體、肽或者有機(jī)小分子物質(zhì)等［33］。但是這些靶向分子的純化與制備成本較高，修飾組分不穩(wěn)定，只有部分顆粒能夠到達(dá)腫瘤部位［34］。而利用細(xì)菌獨(dú)特的腫瘤靶向特性可以彌補(bǔ)納米材料在腫瘤治療中的不足。例如，研究者利用艱難梭狀芽孢桿菌（Clostridium difficile）的孢子來(lái)攜帶納米材料，通過(guò)納米材料的抗體將藥物和納米材料結(jié)合。艱難梭狀芽孢桿菌的孢子在有氧條件下無(wú)法生長(zhǎng)繁殖，只有到達(dá)缺氧的腫瘤微環(huán)境中才能萌芽生長(zhǎng)。這種以抗體為導(dǎo)向的策略顯示了較好的治療效果［35］。另外，通過(guò)電穿孔的方法將納米材料導(dǎo)入到細(xì)菌內(nèi)，同時(shí)在細(xì)菌表面鑲嵌葉酸（folic acid），使其可與腫瘤細(xì)胞表面高表達(dá)的葉酸受體結(jié)合而達(dá)到靶向腫瘤的目的，從而將更多的藥物遞送到腫瘤細(xì)胞中［36］（圖1）。為了提高腫瘤治療的療效和特異性，將低沸點(diǎn)全氟己烯包裹在與雙歧桿菌結(jié)合的納米顆粒中，在外界施加高強(qiáng)度聚焦超聲，在液-氣相變后破壞細(xì)胞來(lái)消除腫瘤［10］。同時(shí)，利用陽(yáng)離子聚合物包裹DNA形成陽(yáng)離子納米球，依靠靜電相互作用吸附于鼠傷寒沙門(mén)氏菌表面，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)菌靶向載運(yùn)DNA疫苗免疫治療腫瘤的目的［11］。

另外，細(xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)分泌外膜囊泡（outer membrane vesicles，OMV），其通過(guò)細(xì)菌外膜突出而形成，攜帶有細(xì)菌的細(xì)胞質(zhì)以及周質(zhì)空間的物質(zhì)。大部分囊泡外層包裹著脂多糖，這種小尺寸的微型細(xì)菌可以強(qiáng)烈地激活宿主的免疫反應(yīng)［37］。有研究者將大腸桿菌W3110菌株中的msbB基因敲除，抑制脂多糖的合成，可以顯著降低細(xì)菌囊泡的毒性［38］。將DNA藥物結(jié)合在納米顆粒上，利用細(xì)菌囊泡將其攜帶進(jìn)入腫瘤部位，經(jīng)腫瘤細(xì)胞吞噬后，DNA藥物被釋放并可以在細(xì)胞中表達(dá)［39］。通過(guò)電穿孔技術(shù)將紡錘體驅(qū)動(dòng)蛋白的siRNA 導(dǎo)入到表達(dá)了 HER2（human epidermal growth factor receptor 2）affibody OMV 中，其可以有效降低腫瘤細(xì)胞中紡錘體驅(qū)動(dòng)蛋白的表達(dá)，阻滯細(xì)胞周期并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［40］。過(guò)繼轉(zhuǎn)移和基因敲除研究證實(shí)，大腸桿菌產(chǎn)生的OMV的免疫保護(hù)作用主要是通過(guò)刺激T細(xì)胞免疫，誘導(dǎo)Th1和Th17細(xì)胞反應(yīng)，從而有效降低細(xì)菌感染誘發(fā)的致死率［41］。敲除細(xì)菌的細(xì)胞周期調(diào)控基因minCD，導(dǎo)致細(xì)胞非正常分裂而產(chǎn)生更多的細(xì)菌囊泡。同時(shí)，將酸性微環(huán)境靶向多肽展示在細(xì)菌的表面，可以使細(xì)菌靶向腫瘤酸性微環(huán)境，提高微細(xì)胞對(duì)腫瘤的靶向性［8］。

另外，細(xì)菌納米級(jí)衍生物質(zhì)，如趨磁細(xì)菌產(chǎn)生的納米磁小體，因具有獨(dú)特的超順磁性、高分散性和良好的生物相容性等特點(diǎn)，近年來(lái)被廣泛用于腫瘤的成像和治療［42］。通過(guò)基因重組共表達(dá)抗HER2 affibody膜錨定蛋白 MamC，利用MamC和磷脂雙分子層的相互作用將affibody鑲嵌到納米磁小體的膜表面制備HER2靶向的納米磁小體。這種工程化納米磁小體可以通過(guò)與腫瘤細(xì)胞表面過(guò)表達(dá)的HER2相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)納米磁小體在腫瘤部位的靶向聚集和磁共振T2成像［43］。如果將納米磁小體注射到荷神經(jīng)膠質(zhì)瘤的小鼠顱內(nèi)，在交變磁場(chǎng)的作用下，納米磁小體會(huì)產(chǎn)生熱量殺死腫瘤細(xì)胞， 40% 的小鼠腫瘤會(huì)完全消退［44］。同時(shí)，基于趨磁細(xì)菌自身磁導(dǎo)向性而進(jìn)行的磁引導(dǎo)下的腫瘤靶向治療已經(jīng)興起。如Magnetococcus marinusMC-1趨磁細(xì)菌中每一個(gè)細(xì)胞都含有一個(gè)磁性氧化鐵納米晶體鏈，會(huì)沿著局部磁場(chǎng)線移動(dòng)，基于兩態(tài)氣動(dòng)傳感系統(tǒng)向低氧方向游動(dòng)，可以在腫瘤中分布均勻，利用其載運(yùn)含藥物納米脂質(zhì)體，可以顯著提高藥物在腫瘤缺氧區(qū)域的濃度［45］。

3 細(xì)菌聯(lián)合化療、放療和免疫治療治療腫瘤

3.1 細(xì)菌載運(yùn)化療藥物靶向治療腫瘤

化療是轉(zhuǎn)移性癌癥最重要的治療手段，因?yàn)樗幬锟梢噪S著血液流動(dòng)到達(dá)全身的各個(gè)轉(zhuǎn)移灶，從而進(jìn)行全身治療［46］。但是，由于實(shí)體瘤內(nèi)部較高的間質(zhì)性內(nèi)壓以及較少的血管分布，使藥物無(wú)法進(jìn)入腫瘤內(nèi)部［47］。同時(shí)，化療藥物不僅會(huì)殺死腫瘤細(xì)胞，還會(huì)影響到毛囊、骨髓和胃腸道等正常細(xì)胞的生理功能，誘發(fā)機(jī)體嚴(yán)重的毒副作用［48］。而增加化療藥物的腫瘤靶向性，可以有效降低其對(duì)正常組織細(xì)胞的損傷。多個(gè)研究證明，細(xì)菌可以載運(yùn)化療藥物，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的靶向治療，減少藥物對(duì)機(jī)體的毒副作用。例如，脂質(zhì)體（lipidosome）包裹紫杉醇（paclitaxel）藥物，依靠鏈霉親和素（streptomycin）與細(xì)菌外膜的生物素（biotin）結(jié)合，可以促進(jìn)紫杉醇在腫瘤部位更多地聚集［49］（圖2）。此外，設(shè)計(jì)溫度敏感型的脂質(zhì)體來(lái)包裹多柔比星藥物，利用生物素-鏈霉親和素將脂質(zhì)體結(jié)合在鼠傷寒沙門(mén)氏菌的細(xì)胞膜上，通過(guò)鼠傷寒沙門(mén)氏菌的腫瘤靶向性將化療藥物更多地遞送到腫瘤中，再借助于高強(qiáng)度聚焦超聲進(jìn)行加熱誘導(dǎo)藥物的釋放，可以有效地抑制腫瘤的生長(zhǎng)［50］。而在小鼠黑色素瘤模型中，相比單獨(dú)使用環(huán)磷酰胺藥物，鼠傷寒沙門(mén)氏菌VNP20009與環(huán)磷酰胺聯(lián)合治療可以顯著降低腫瘤微血管密度和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的含量［51］。所以，相比于單獨(dú)的化療，細(xì)菌輔助化療不僅可以增強(qiáng)腫瘤的治療效果，而且可以降低化療的毒副作用。

3.2 細(xì)菌聯(lián)合放療治療腫瘤

放療主要是誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的DNA發(fā)生損傷而殺死腫瘤細(xì)胞，而實(shí)體瘤內(nèi)低氧微環(huán)境會(huì)顯著降低放療療效［52］。另外，有研究表明，放療會(huì)引起腫瘤細(xì)胞發(fā)生保護(hù)性自噬，從而維持內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性，使腫瘤繼續(xù)增殖轉(zhuǎn)移［53］。將放射性同位素188Re通過(guò)抗體與李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）結(jié)合，將其注射到荷有高度轉(zhuǎn)移胰腺癌的小鼠體內(nèi)，同位素僅在腫瘤原發(fā)部位少量存在，而在轉(zhuǎn)移灶中大量存在［54］（圖2）。通過(guò)饑餓反應(yīng)，將32P滲入到李斯特氏菌中并注射到荷瘤小鼠體內(nèi)，李斯特氏菌32P可以在腫瘤部位通過(guò)誘導(dǎo)的電離輻射和菌誘導(dǎo)的活性氧協(xié)同殺死腫瘤細(xì)胞［55］。

圖2 細(xì)菌聯(lián)合其它手段治療腫瘤Fig. 2 Bacteria combined with other methods to treat tumor

3.3 細(xì)菌聯(lián)合免疫治療殺死腫瘤細(xì)胞

免疫治療作為新型的臨床治療方法已經(jīng)逐漸成為癌癥治療的重要手段。有研究表明，接受免疫治療后很多患者發(fā)生了3級(jí)或4級(jí)的不良事件，包括肝臟、胃腸道和腎臟疾病，還會(huì)使機(jī)體產(chǎn)生免疫耐受［56］。癌細(xì)胞可以通過(guò)分泌免疫抑制細(xì)胞因子，募集免疫抑制細(xì)胞和呈遞免疫檢查點(diǎn)蛋白等途徑來(lái)逃避機(jī)體的免疫系統(tǒng)［57］。事實(shí)上，微生物對(duì)機(jī)體的免疫系統(tǒng)有著廣泛的影響，它們不僅可以調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)組織駐留免疫細(xì)胞的成熟與功能，還影響外周免疫細(xì)胞的活化［58］。利用細(xì)菌表達(dá)鞭毛蛋白與腫瘤抗原協(xié)同呈遞給T細(xì)胞達(dá)到最優(yōu)抗原呈遞效果，促進(jìn)CD4+和CD8+T細(xì)胞的活化，激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生適應(yīng)性免疫反應(yīng)來(lái)抑制腫瘤生長(zhǎng)［59］（圖2）。利用基因修飾技術(shù)使大腸桿菌編碼表達(dá)CD47等納米抗體拮抗劑，增加腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞的活化，可使腫瘤快速消退，并有效抑制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移［60］。

4 總結(jié)與展望

腫瘤靶向性細(xì)菌能夠特異性進(jìn)入原位癌和全身的轉(zhuǎn)移灶，并且能夠在壞死區(qū)生長(zhǎng)繁殖［61］。這種獨(dú)特的生長(zhǎng)繁殖方式可以有效克服現(xiàn)有臨床腫瘤治療手段的缺陷，包括化療、分子靶向治療、細(xì)胞治療和抗體治療等藥物無(wú)法進(jìn)入腫瘤內(nèi)部，以及放療、手術(shù)治療和其他物理治療方法無(wú)法定位潛在的癌癥轉(zhuǎn)移灶等。然而，已經(jīng)完成的部分臨床試驗(yàn)結(jié)果表明，單獨(dú)使用細(xì)菌治療腫瘤并沒(méi)有取得顯著的抗腫瘤效果［62-63］。這主要是因?yàn)槟[瘤靶向工程菌的細(xì)胞毒性無(wú)法完全殺傷腫瘤細(xì)胞，其分泌表達(dá)的藥物無(wú)法擴(kuò)散到實(shí)體瘤的全部腫瘤細(xì)胞。另外，部分細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖可能會(huì)促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移，這也成為了臨床應(yīng)用的一大重要障礙［64］。因此，細(xì)菌靶向治療與現(xiàn)有臨床治療手段的優(yōu)勢(shì)交叉互補(bǔ)是其最終走向臨床的唯一途徑。另外，微生物組學(xué)的快速發(fā)展深刻揭示了細(xì)菌與腫瘤微環(huán)境免疫互作的關(guān)系［65］。多數(shù)被改造為免疫刺激因子的細(xì)菌單獨(dú)或者聯(lián)合放化療等對(duì)腫瘤進(jìn)行綜合治療，取得了顯著的治療效果。同時(shí)，納米技術(shù)的發(fā)展為細(xì)菌靶向治療提供了新的輔助材料，其不僅增強(qiáng)了細(xì)菌的腫瘤靶向性，也可以顯著增強(qiáng)其抗腫瘤作用。

近年來(lái)，腫瘤免疫學(xué)全面揭示了腫瘤發(fā)生發(fā)展與機(jī)體免疫系統(tǒng)之間的復(fù)雜關(guān)系，也表明了癌癥治療是一個(gè)系統(tǒng)性工程［66］。非特異性免疫作為特異性免疫的重要補(bǔ)充在腫瘤的治療中具有巨大的應(yīng)用前景。而細(xì)菌是非特異性免疫的重要免疫原，細(xì)菌來(lái)源的 Flagellin B［67］和 CpG DNA［68］都已經(jīng)進(jìn)入了非特異性免疫治療腫瘤的臨床試驗(yàn)階段，這為細(xì)菌免疫治療腫瘤奠定了重要的理論基礎(chǔ)。因此，在細(xì)菌聯(lián)合放化療等常規(guī)治療手段的基礎(chǔ)上，多菌株結(jié)合病毒聯(lián)合治療以及利用腫瘤組織中被免疫細(xì)胞識(shí)別的細(xì)菌多肽免疫治療腫瘤將成為未來(lái)的研究發(fā)展方向。同時(shí)，細(xì)菌對(duì)腫瘤的靶向性，細(xì)菌與腫瘤微環(huán)境的相互作用以及細(xì)菌與免疫細(xì)胞的動(dòng)態(tài)互作還需要更深入的研究，這將為推動(dòng)細(xì)菌治療腫瘤提供堅(jiān)實(shí)的理論基礎(chǔ)和新的發(fā)展方向。