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    食品中沙門氏菌使用不同分離培養(yǎng)基檢測的效果比較

    2021-10-23 08:06:34高珮天津市河西區(qū)疾病預防控制中心天津300211
    首都食品與醫(yī)藥 2021年19期
    關鍵詞:副傷寒賴氨酸沙門氏菌

    高珮(天津市河西區(qū)疾病預防控制中心,天津 300211)

    沙門氏菌屬于常見的腸道致病菌群,可寄生于人類和動物的腸道中,是引發(fā)食源性疾病的主要致病菌之一。有研究表明[1],沙門氏菌引發(fā)的食物中毒事件數(shù)量位于世界食物中毒前列,沙門氏菌引發(fā)的食物中毒事件占我國食物中毒事件發(fā)生數(shù)量的70%-80%。沙門氏菌的主要傳播媒介是食品和飲用水,誤食含有沙門氏菌的食品和水源,會引發(fā)患者產(chǎn)生食物中毒癥狀,并發(fā)傷寒、胃腸炎、腸熱癥、敗血癥等疾病,若使用量較大,治療不及時,會危及患者生命安全[2-3]。鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌是三種食物中毒發(fā)病率較高的沙門氏菌。此次研究主要為觀察食品中沙門氏菌使用不同分離培養(yǎng)基檢測的效果,現(xiàn)報告如下。

    1 材料和方法

    1.1 實驗菌株來源 鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌三種沙門氏菌均由上海質量監(jiān)督檢驗技術研究院食化所微生物實驗室提供。

    1.2 培養(yǎng)基和試劑 沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)(法國科瑪嘉公司);木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)、亞硫酸鉍瓊脂(BS)、酚紅煌綠瓊脂(BGA)、HE瓊脂(HE)(OXOID公司)。試劑均經(jīng)有效性驗證合格。

    1.3 實驗方法

    1.3.1 沙門氏菌的復蘇 分別從鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌、甲型副傷寒沙門氏菌菌株管中挑取小的環(huán)狀菌苔,接種到5ml營養(yǎng)肉湯中,置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)20h。

    1.3.2 沙門氏菌的接種 復蘇后的沙門氏菌菌株劃線,取出沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)、木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)、亞硫酸鉍瓊脂(BS)、酚紅煌綠瓊脂(BGA)、HE瓊脂(HE)五種培養(yǎng)基,將沙門氏菌分別接種到五種分離培養(yǎng)基和顯色培養(yǎng)板上,置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h。

    1.3.3 生化實驗 挑取沙門氏菌菌落,取出三糖鐵瓊脂(TSI)、尿素酶瓊脂(URE)、賴氨酸脫羧酶瓊脂(LIA)、蛋白胨水培養(yǎng)基(SAA)生化管,將沙門氏菌分別接種到四種生化管中,置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。

    1.4 生化實驗結果判定 ①H2S:三糖鐵瓊脂(TSI)生化管變黑為“+”,不變黑為“-”;②尿素酶瓊脂(URE):培養(yǎng)基變紅為“+”,變黃為“-”;③賴氨酸脫羧酶瓊脂(LIA):生化管變紫色為“+”,變黃色為“-”;④蛋白胨水培養(yǎng)基(SAA):加入靛基質,生化管內(nèi)有紅環(huán)產(chǎn)生為“+”,無紅環(huán)產(chǎn)生為“-”。

    1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析,計數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗,計量單位用(±s),P<0.05顯示差異具有統(tǒng)計學意義。

    2 結果

    2.1 三種沙門氏菌在不同分離培養(yǎng)基上的生長情況及顯色情況比較 三種沙門氏菌分別在沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)、木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)、亞硫酸鉍瓊脂(BS)、酚紅煌綠瓊脂(BGA)、HE瓊脂(HE)五種不同的分離培養(yǎng)基上生長,經(jīng)過24-48h后,觀察其生長情況發(fā)現(xiàn),鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌在五種分離培養(yǎng)基的生長菌落大致相同。其中,木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)、亞硫酸鉍瓊脂(BS)、HE瓊脂(HE)分離培養(yǎng)基上的菌落中心均有黑色菌落出現(xiàn),即H2S產(chǎn)生;沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)、酚紅煌綠瓊脂(BGA)分離培養(yǎng)基上均無黑色菌落出現(xiàn)。甲型副傷寒沙門氏菌在培養(yǎng)24h后,菌落生長情況良好,但菌落中心沒有黑色菌落出現(xiàn);培養(yǎng)48h后,在木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂(XLD)、HE瓊脂(HE)分離培養(yǎng)基上的菌落中心均有黑色菌落出現(xiàn),即H2S產(chǎn)生;沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)、亞硫酸鉍瓊脂(BS)、酚紅煌綠瓊脂(BGA)分離培養(yǎng)基上均無黑色菌落出現(xiàn)。結果表明,甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產(chǎn)生H2S的特性。同時,三種沙門氏菌在沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)上的菌落均為紫紅色菌落,均無黑色菌落出現(xiàn),詳見表1。

    表1 三種沙門氏菌在不同分離培養(yǎng)基上的生長情況及顯色情況對比

    2.2 三種沙門氏菌的生化試驗結果比較 三種沙門氏菌分別在三糖鐵瓊脂(TSI)、尿素酶瓊脂(URE)、賴氨酸脫羧酶瓊脂(LIA)、蛋白胨水培養(yǎng)基(SAA)四種不同的生化管中生長,經(jīng)過24-48h后,觀察其生長情況發(fā)現(xiàn),甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產(chǎn)生H2S的現(xiàn)象,詳見表2。

    表2 三種沙門氏菌的生化試驗結果對比

    3 討論

    沙門氏菌屬于常見的腸道致病菌群,是引發(fā)食源性疾病的主要致病菌之一。沙門氏菌感染患者產(chǎn)生食物中毒癥狀,并發(fā)傷寒、胃腸炎、腸熱癥、敗血癥等疾病,嚴重者會危及患者生命安全。沙門氏菌屬于人畜共患疾病,尤其是生鮮食品中容易檢測到沙門氏菌[4-6];雖然經(jīng)過熱加工后的熟制食品含量較低,但在包裝、運輸過程中,很有可能受到沙門氏菌的污染[7-8]。因此,提高沙門氏菌檢測的精確度,是保障食品安全的關鍵。

    本次實驗結果表明:鼠傷寒沙門氏菌、豬霍亂沙門氏菌在XLD、BS、HE分離培養(yǎng)基上的菌落中心均有黑色菌落出現(xiàn),即H2S產(chǎn)生;CAS、BGA分離培養(yǎng)基上均無黑色菌落出現(xiàn)。甲型副傷寒沙門氏菌在培養(yǎng)24h后,菌落生長情況良好,但菌落中心沒有黑色菌落出現(xiàn);培養(yǎng)48h后,在XLD、HE分離培養(yǎng)基上的菌落中心均有黑色菌落出現(xiàn),即H2S產(chǎn)生;CAS、BS、BGA分離培養(yǎng)基上均無黑色菌落出現(xiàn)。結果表明,甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產(chǎn)生H2S的特性。同時,三種沙門氏菌在CAS上的菌落均為紫紅色菌落,均無黑色菌落出現(xiàn)。三種沙門氏菌分別在TSI、URE、LIA、SAA四種不同的生化管中生長,經(jīng)過24-48h后,觀察其生長情況發(fā)現(xiàn),甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產(chǎn)生H2S的現(xiàn)象。證明了沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)能夠有效檢測出食品中的沙門氏菌,避免了單純檢測H2S產(chǎn)生的誤差。分析其原因為:產(chǎn)生H2S是沙門氏菌的典型特性,但甲型副傷寒沙門氏菌具有延遲產(chǎn)生H2S的現(xiàn)象,因此,并不能以檢測H2S作為檢測沙門氏菌的唯一手段。沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)能夠有效檢測出甲型副傷寒沙門氏菌,大大提高了檢測準確率,降低了假陰性的發(fā)生。

    綜上所述,沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(CAS)對食品中沙門氏菌的分離檢測效果最好,可以有效提高檢測精度和檢測效率,值得推廣應用。

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