酵母硒和益生菌對雞蛋品質(zhì)及抗氧化性能的影響

謝燕妮，彭輝才，覃建基，周貞兵，黃華慧，謝樹桃，王海波，奚玉蓮

（1.廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術大學，動物科學技術學院，廣西南寧 530007；2.南寧德輝飼料有限責任公司，廣西南寧 530011）

規(guī)?；半u飼養(yǎng)過程中，不合理應用抗生素使動物產(chǎn)品中藥物殘留超標，影響人類健康；飼料配制不科學會造成蛋雞的消化率低，禽舍內(nèi)有毒有害氣體超標，引起機體激素水平分泌失調(diào)，從而影響蛋的品質(zhì)與蛋的風味。研究表明，益生菌可改善動物腸道菌群平衡、預防和治療疾病、促進動物生長和提高飼料消化率[1]，并調(diào)節(jié)免疫和抑制腫瘤細胞或致病細菌生長[2]。硒是人和動物必需的微量元素，具有提高機體免疫力、清除機體自由基、抗氧化、抗衰老、調(diào)節(jié)機體新陳代謝等功能[3-4]。酵母硒在動物體內(nèi)具吸收率高、生物活性強、毒性低、環(huán)境污染小等特點[5]。Rotruck 等[6]發(fā)現(xiàn)，很多硒蛋白參與動物機體代謝作用，如抗氧化作用、調(diào)節(jié)維生素的吸收與代謝、參與輔酶和輔酶的合成、剌激免疫球蛋白及抗體產(chǎn)生。本試驗旨在研究日糧中添加益生菌和酵母硒對蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、抗氧化性能的影響，為生產(chǎn)中合理應用益生菌和酵母硒及生產(chǎn)高品質(zhì)雞蛋提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 試驗雞由廣西玉林農(nóng)貝貝農(nóng)牧公司提供。酵母硒，淺黃色粉末，硒含量為0.1%，由湖北安琪酵母股份有限公司生產(chǎn)。益生菌由滄州旺發(fā)生物技術研究所有限公司生產(chǎn)，1 g 益生菌含枯草芽孢桿菌（活菌數(shù)1.5×109CFU）、乳酸片球菌（活菌數(shù)3.0×109CFU）、沼澤紅假單胞菌（活菌數(shù)2.5×109CFU、產(chǎn)朊假絲酵母菌（活菌數(shù)1.0×109CFU），總活菌數(shù)為8.0×109CFU/g。

1.2 試驗設計及試驗日糧 將健康、產(chǎn)蛋性能相近、26 周齡的處于產(chǎn)蛋高峰期（產(chǎn)蛋率＞ 90%）的羅曼粉殼蛋雞800 只，采用單因素試驗設計隨機分成4 個組，每組200 只，每組設5 個重復，每重復40 只雞。對照組飼喂基礎日糧，試驗組分別在基礎日糧基礎上添加1 g/kg益生菌（每千克日糧含總活菌數(shù)8.0×109CFU）、0.3 g/kg酵母硒（硒含量為0.000 3 g）、1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg酵母硒。試驗預試期4 周（即2019 年7 月4 日至8 月1 日），正試期8 周（即2019 年8 月2 日至9 月27 日）。基礎日糧配方（參考美國NRC 標準）及營養(yǎng)成分見表1。

表1 基礎日糧組成和營養(yǎng)成分（風干基礎）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗在廣西農(nóng)業(yè)職業(yè)技術學院養(yǎng)殖場進行。雞舍南北朝向，南北面均帶窗，通風透氣，水泥地板；雞籠是上、中、下3 層立體式；自動飲水，人工喂料和清糞；采用人工與自然光照相結(jié)合，總光照時間為16 h；按常規(guī)程序進行雞只免疫和欄舍消毒。試驗期，自由飲水，自由采食，人工清糞1 次/d，人工飼喂2 次/d（08:00 和17:00）；上、下午各收集雞蛋1 次；噴霧消毒2 次/周，日常噴霧降溫6 次/d。

1.4 樣品采集與指標測定

1.4.1 樣品采集與制備 在試驗期第14、28、42、56 天，每組每重復分別隨機采集10 枚雞蛋，做好標記，放入4℃冰箱保存，用于蛋品質(zhì)測定。

1.4.2 生產(chǎn)性能 試驗期間每天記錄各組試驗雞的產(chǎn)蛋個數(shù)、總蛋重、軟破蛋數(shù)和死淘數(shù)，計算平均蛋重、產(chǎn)蛋率、合格蛋率、死淘率和料蛋比。

平均蛋重=每組總蛋重/每組產(chǎn)蛋個數(shù)

平均采食量=每組采食量總量/每組雞存欄數(shù)

產(chǎn)蛋率=統(tǒng)計期內(nèi)產(chǎn)蛋總數(shù)/（存欄雞只數(shù)×統(tǒng)計期天數(shù)）×100%

合格蛋率=（每組產(chǎn)蛋個數(shù)－每組軟破殼蛋數(shù)）/每組產(chǎn)蛋數(shù)×100%

死淘率=（死亡或淘汰雞數(shù)/入舍雞數(shù)）×100%

料蛋比=耗料量/總蛋重

1.4.3 雞蛋品質(zhì) 用蛋殼強度測定儀（廣州潤湖儀器有限公司產(chǎn)）測定蛋殼強度（N）。分別取蛋的大頭、小頭和中間部分的蛋殼，用鑷子剔除內(nèi)殼膜，用蛋殼厚度測定儀分別測其厚度，再將3 點的值平均即為蛋殼厚度（mm）。取蛋黃邊緣與濃蛋白邊緣的中間點均勻分布的3 個等距離點（避開蛋白系帶）用蛋白高度測定儀測量蛋白高度（mm），計算均值，然后查表得到哈夫單位。去除蛋白及系帶后蛋黃的重量即為蛋黃重（g）。

1.4.4 雞蛋硒含量和脂肪含量 按照《食品中硒的測定》（GB5009.93-2017）的方法測定雞蛋硒含量；采用《食品中脂肪的測定》（GB5009.6—2016）中索氏抽提法測定雞蛋脂肪含量。

1.4.5 血清抗氧化性 試驗結(jié)束前12 h 絕食，正常飲水，次日隨機從每個組抽取10 只雞，翅靜脈采血，靜置，離心（3 000 r/min，20 min），-4℃冰箱保存待測。血清中的谷胱甘肽過氧化酶（GSH-Px）、硫氧還蛋白氧化還原酶（TRXR）、過氧化氫酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）用紫外可見光分光度計（北京普析儀器有限公司生產(chǎn)的T6 型）測定，所用試劑盒為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品。

1.5 統(tǒng)計分析 使用 Excel 2007 進行試驗數(shù)據(jù)理，采用SPSS 18.0 軟件進行單因素方差分析及 LSD 檢驗，數(shù)據(jù)均以平均值±標準差表示，以P＜0.05 為顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 酵母硒和益生菌對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可見，1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg 酵母硒組的合格蛋率比對照組提高了2.21%（P＜0.05）；1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg酵母硒組平均采食量比對照組提高2.23%（P＜0.05）；0.3 g/kg 酵母硒組和1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg 酵母硒組的料蛋比分別比對照組降低4.8%和4.0%（P＜0.05）。而產(chǎn)蛋率、平均蛋重和死淘率在不同日糧處理之間無顯著差異。結(jié)果表明，日糧中添加1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg酵母硒可顯著提高合格蛋率和平均采食量、降低料蛋比。

表2 酵母硒和益生菌對蛋雞生產(chǎn)性能的影響（n=5）

2.2 酵母硒和益生菌對雞蛋品質(zhì)的影響 表3 結(jié)果顯示，1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg 酵母硒組的蛋殼強度和哈氏單位分別比對照組提高12.6%和8.86%（P＜0.05）；蛋重、蛋殼厚度、蛋白高度和蛋黃重在不同日糧處理之間無顯著差異。結(jié)果表明，日糧中添加1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg酵母硒對蛋殼強度和哈氏單位的改善效果較佳。

表3 酵母硒和益生菌對雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 酵母硒和益生菌對雞蛋硒含量和脂肪含量的影響由表4 可見，0.3 g/kg 酵母硒組與1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg酵母硒組雞蛋硒含量均高于對照組（P＜0.05），其中1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg 酵母硒組比對照組提高50%；而各組間脂肪含量無顯著差異。結(jié)果表明，日糧中聯(lián)合添加1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg 酵母硒能顯著提高雞蛋硒含量。

表4 酵母硒和益生菌對雞蛋硒含量和脂肪含量的影響 g/kg

2.4 酵母硒和益生菌對蛋雞血液抗氧化性能的影響 由表5 可見，0.3 g/kg 酵母硒組與1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg酵母硒組蛋雞血液GSH-Px 和SOD 含量均高于對照組和1 g/kg 益生菌組（P＜0.05），其中，1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg 酵母硒組的GSH-Px 和SOD 含量分別比對照組提高29.7%和33.4%；而各組間CAT 和TRXR 含量無顯著差異。結(jié)果表明，日糧中添加1 g/kg 益生菌和0.3 g/kg酵母硒能顯著提高蛋雞血液抗氧化性能。

表5 酵母硒和益生菌對蛋雞血液抗氧化性的影響 U/mL

3 討 論

3.1 酵母硒和益生菌對蛋雞生產(chǎn)性能的影響 硒是動物機體必需的營養(yǎng)素，可通過在動物飼料中添加有機硒和無機硒滿足機體需要。無機硒含有一定的毒副作用，生產(chǎn)上通常選擇有機硒作為硒源，有機硒包括酵母硒、麥芽硒等。研究表明，添加酵母硒能降低海蘭褐蛋雞的料蛋比[7]，提高蛋雞的產(chǎn)蛋率、日均產(chǎn)蛋重和平均蛋重[8-9]。但也有報道指出，日糧中添加硒對蛋雞的生產(chǎn)性能沒有顯著影響[10-11]。本研究結(jié)果表明，添加酵母硒能顯著提高合格蛋率和平均采食量、降低料蛋比，主要原因是甲狀腺素5'-脫碘酶是一種含硒酶，硒是脫碘酶的活性中心，硒在調(diào)節(jié)甲狀腺激素代謝方面也發(fā)揮重要作用，改善機體的代謝，促進養(yǎng)分吸收，從而提高蛋雞的生產(chǎn)性能[12]。另外，枯草芽孢桿菌等益生菌在禽腸道定植可產(chǎn)生纖維素酶、蛋白酶及各種碳水化合物酶等，有利于機體發(fā)揮其生理生化機能，從而提高蛋雞生產(chǎn)性能[13]。因此，日糧中聯(lián)合添加1 g/kg 益生菌和0.3 g/kg 酵母硒可提高蛋雞的生產(chǎn)性能。

3.2 酵母硒和益生菌對雞蛋品質(zhì)的影響 蛋殼強度可反映雞蛋的抗壓性。哈氏單位是衡量蛋白品質(zhì)和蛋品新鮮度的重要指標，濃蛋白因存放時間的延長導致蛋白質(zhì)的水解而變稀，哈氏單位相應會下降。本研究結(jié)果表明，酵母硒可顯著提高雞蛋的蛋殼強度和哈氏單位，與孫慶艷等[14]、丁金雪等[15]的研究結(jié)果一致。主要原因為硒可以增強輸卵管的抗氧化能力，增強能量和蛋白質(zhì)代謝的能力，促進蛋白的合成以及鈣和磷的吸收，進而影響蛋白、蛋殼形成的能力[16]；另外，乳酸菌可以合成多種維生素（如葉酸、煙酸、維生素 B1、維生素B2等），促進機體對蛋白質(zhì)、鈣、鐵和維生素 D 的吸收，從而改善蛋白和蛋殼品質(zhì)[17]。因此，聯(lián)合添加益生菌和酵母硒可改善雞蛋品質(zhì)。

3.3 酵母硒和益生菌對雞蛋硒含量和脂肪含量的影響 何柳青等[18]研究發(fā)現(xiàn)，蛋雞飼料中添加有機硒源可使蛋黃硒含量極顯著增加；虞澤鵬等[19]發(fā)現(xiàn)，硒酵母能顯著提高蛋硒含量。本試驗結(jié)果顯示，添加酵母硒均可顯著提高蛋硒含量。由于蛋白酶的參與，大分子的硒蛋白可被水解為小肽或硒氨基酸，提高硒在蛋雞腸道中吸收率，從而提高硒在雞蛋中的沉積率，因此蛋硒含量顯著提高。本研究的結(jié)果顯示，1 g/kg 益生菌+0.3 g/kg 酵母硒組的雞蛋脂肪含量比對照組有所降低，其原因是腸道吸收膽固醇時，膽鹽水解酶（BSH）把膽固醇水解成游離膽酸而排出體外，從而使肝臟中的膽固醇分解為膽汁酸，從而降低膽固醇。許多益生菌（如乳酸菌屬、桿菌屬、雙歧桿菌屬等）均可產(chǎn)生BSH，從而起到降低膽固醇的作用[20]。與對照組不顯著的原因可能與益生菌的添加量有一定關系，具體機制有待進一步研究。

3.4 酵母硒和益生菌對蛋雞抗氧化性能的影響 飼料中適量的硒可提高家禽體內(nèi)GSH-Px、SOD 和CAT 含量，從而提高機體抗氧化作用，保護細胞膜功能的完整性，降低機體內(nèi)由于脂質(zhì)過氧化作用造成的損害[21]。段穎等[22]、楊玉等[23]研究發(fā)現(xiàn)，在蛋雞日糧中添加硒源可顯著提高GSH-Px 和SOD 含量。本研究結(jié)果也顯示，添加酵母硒可顯著提高蛋雞血清的GSH-Px、SOD，其原因是復合微生物制劑可誘導抗氧化酶（如 SOD 和GSH-Px）的合成，從而提高機體的抗氧化性[24]；另外，由于疾病或者環(huán)境改變導致自由基大量聚集而引起蛋白質(zhì)的損傷，導致蛋白質(zhì)變性或功能喪失，而硒化合物能清除體內(nèi)多種活性自由基，并參與合成 GSH-Px。而本試驗中添加酵母硒后的CAT 和TRXR 水平雖然有增加趨勢，但差異不顯著，原因是硒雖然能清除氧自由基，但當組織內(nèi)硒過量時，過度氧化可能損傷膜結(jié)構，使細胞中超氧陰離子產(chǎn)量增加，降低了體內(nèi)自由基水平，同時使某些機體抗氧化酶活性降低[25]。因此，添加1 g/kg 益生菌和0.3 g/kg 酵母硒可提高機體的抗氧化性。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，蛋雞日糧中添加酵母硒和益生菌可提高蛋雞的平均采食量、雞蛋的蛋殼強度和哈氏單位及雞蛋的硒含量，降低料蛋比，可提高蛋雞血液GSHPx 和SOD 活性，且以蛋雞日糧中添加1 g/kg 益生菌和0.3 g/kg 酵母硒比較適宜。