我國巴西橡膠樹炭疽病的研究進(jìn)展

林春花，張 宇，劉文波，李 瀟，繆衛(wèi)國

（海南大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院/熱帶農(nóng)林生物災(zāi)害綠色防控教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，?？?570228）

炭疽菌屬（ColletotrichumCorda），又稱為刺盤孢屬，是子囊菌門糞殼菌綱肉座菌亞綱小叢殼科小叢殼屬（Glomerella）的無性態(tài)。炭疽菌屬真菌廣泛分布于熱帶、亞熱帶和溫帶地區(qū)，其寄主范圍十分廣泛，包括蔬菜、牧草、果樹、花卉等重要經(jīng)濟(jì)作物，是一類重要的植物病原菌[1]。炭疽菌危害各種農(nóng)林作物，能夠引起寄主植物葉斑、枝枯、果實(shí)腐爛、死苗等炭疽病癥狀，造成重大的經(jīng)濟(jì)損失?；谄浣?jīng)濟(jì)意義和科學(xué)研究意義，炭疽菌已經(jīng)被列為世界八大重要病原真菌之一[2]。天然橡膠是重要的工業(yè)原料和戰(zhàn)略物資，含有天然橡膠的植物有2 000多種，巴西橡膠樹（Hevea brasiliensisMuell. Arg.，簡稱橡膠樹）是大面積商業(yè)化種植生產(chǎn)天然橡膠的植物，其產(chǎn)量占目前世界天然橡膠總產(chǎn)量的99%以上[3]。全世界有40多個(gè)國家和地區(qū)種植巴西橡膠樹[3]。截至2018年，亞洲橡膠產(chǎn)量占91.13%、非洲占6.49%、美洲占2.38%[4]。其中亞洲以印度尼西亞植膠面積居第一，泰國第二，馬來西亞和中國面積相近，并列第三，越南和印度位居第五和第六，這6國植膠面積約占世界種植總面積的72%[3]。我國橡膠樹種植過程中受到各種病蟲害危害，橡膠樹炭疽病是其中危害最普遍且嚴(yán)重的葉部“兩病”之一[5]。該病害在國內(nèi)外流行范圍逐年擴(kuò)大，發(fā)病趨勢越來越嚴(yán)重，造成橡膠產(chǎn)量損失不斷增加，一直以來都受到科技工作者的重視。近年來，我國橡膠樹炭疽菌取得了較好的研究進(jìn)展，尤其是在病原種類鑒定及田間優(yōu)勢種的確定、病原菌致病機(jī)制研究等方面。筆者對近年來橡膠樹炭疽病發(fā)展趨勢、癥狀類型、病原種類、病原菌生物學(xué)特性、分子機(jī)制和防治措施等研究現(xiàn)狀進(jìn)行概述，旨在為深入研究橡膠樹炭疽病提供參考。

1 發(fā)生與危害

1905年，PETCH首次報(bào)道橡膠樹炭疽病在斯里蘭卡發(fā)生危害[6]。隨后在馬來西亞、印度、泰國和中國橡膠樹種植地都有報(bào)道，為橡膠樹種植區(qū)的常見病害[7?8]。在我國，最初記載橡膠樹炭疽病害只在苗圃和新植幼樹上有少量發(fā)現(xiàn)[9]，屬次要病害。1962年在海南大豐農(nóng)場橡膠樹炭疽病害引起個(gè)別品系開割樹落葉、不能割膠，此為我國首次記錄；1992年在海南暢好農(nóng)場發(fā)生橡膠樹炭疽病的大面積流行，發(fā)病面積占開割林地面積75%，造成4～5級落葉的有20多萬株，導(dǎo)致割膠推遲，該農(nóng)場當(dāng)年損失干膠250 t[10]。由于大量更新和推廣高產(chǎn)品系，該病發(fā)生日趨嚴(yán)重，1996年僅海南墾區(qū)炭疽病發(fā)生面積達(dá)73萬hm2，損失干膠15 000 t[11]。2004年，在云南西雙版納、紅河、普洱、臨滄、文山等橡膠種植區(qū)不同程度發(fā)生橡膠樹老葉炭疽病和開割樹冬春新抽枝葉炭疽病，造成大量落葉和個(gè)別林段干膠減產(chǎn)，橡膠炭疽病已經(jīng)從次要病害上升為重要病害[12]。

2012—2013年，李濤等在云南河口對橡膠樹炭疽病觀察發(fā)現(xiàn)，橡膠樹炭疽病一般在橡膠樹嫩葉期、高濕度的情況下發(fā)生危害，每年有2～3個(gè)發(fā)病高峰期，病情有逐年加重現(xiàn)象[13]。近年來，橡膠樹炭疽病和橡膠樹白粉病并稱為我國橡膠樹葉部重要“兩病”[14]，是我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部指定的橡膠樹“兩病”春防工作的防治對象之一[15]。橡膠樹炭疽病從早期危害苗圃，到頻頻危害不同地區(qū)開割膠林，近年來被列為橡膠樹重要春防對象之一。橡膠樹炭疽病的發(fā)生有越來越嚴(yán)重的趨勢，已成為我國橡膠樹重要葉部病害之一。

2 危害癥狀

橡膠樹炭疽病可危害苗圃小苗、大田幼樹直至成齡開割膠樹，侵染嫩葉、葉柄、嫩梢和膠果等部位，引起嫩葉脫落、嫩梢回枯、果實(shí)腐爛，甚至形成僵果掛在樹上。嚴(yán)重時(shí)會引起膠樹的重復(fù)落葉和嫩梢回枯，推遲開割時(shí)間。

通常，橡膠樹炭疽病危害不同部位呈現(xiàn)的癥狀各異。炭疽病主要危害部位是葉部，嫩葉和老葉均可危害。古銅色嫩葉染病后，初期葉尖葉緣呈不規(guī)則暗綠色水漬狀病斑，隨后變黑壞死、扭曲，最終導(dǎo)致葉片脫落枝條干枯[10,12,16]（圖1-A）。淡綠色嫩葉染病后，葉尖、葉緣呈現(xiàn)圓形或不規(guī)則形（圖1-B），暗綠色似開水燙過一樣的水漬狀病斑，病斑較大，有時(shí)在病斑邊緣可見黑色壞死錢[17]。在高濕條件下，常在病部長出的粉紅色粘稠孢子堆[10,12,17]。淡綠色后期或老化葉染病后，可呈現(xiàn)多種不同類型癥狀：1）圓形和半圓形型（圖1-C），初期呈現(xiàn)水漬狀小斑，隨后病斑擴(kuò)大，病斑多在葉尖葉緣處呈半圓形，或在葉片上呈圓形[12,17?18]。2）不規(guī)則型（圖1-D），病斑初期呈現(xiàn)灰褐色或紅褐色近圓形，病健交界明顯，后期病斑相連成片，形狀不規(guī)則，有的有穿孔[10]。3）葉緣枯型（圖1-E），受害初期葉尖或葉緣退綠變黃，隨后病葉葉緣由外向內(nèi)表現(xiàn)出先黃后枯，病斑呈現(xiàn)灰白色，病健交界呈鋸齒狀[10,12,18]。4）凸起圓錐型（圖1-F），病斑凸起成小圓錐體，病斑邊緣皺縮，嚴(yán)重時(shí)可看到整張葉片布滿向上凸起的小點(diǎn)，有穿孔[10,18]。炭疽病在老葉上容易產(chǎn)生小黑點(diǎn)（分生孢子器），小黑點(diǎn)有呈輪紋排列分布，也有分散分布（圖1-G）。嫩稍、葉柄、葉脈染病后，出現(xiàn)黑色下陷小點(diǎn)或者黑色條斑（圖1-H）。嫩稍染病后除了葉片掉落，還容易發(fā)生頂芽回枯（圖1-I）。綠果染病后，病斑暗綠色，水漬狀腐爛。在高濕條件下，發(fā)病部位長出粘稠狀的粉紅色孢子堆[17]。

圖1 橡膠樹炭疽病癥狀Fig. 1 The symptoms of rubber tree anthracnose

3 病原菌種類和田間優(yōu)勢種

炭疽菌屬種類繁多，遺傳多態(tài)性豐富。由于該屬真菌分類鑒定依據(jù)在不斷變化，對橡膠樹炭疽病病原菌的種類鑒定及名稱也隨之發(fā)生變更（表1）。

表1 我國橡膠樹炭疽病病原種類鑒定情況Tab. 1 Identification of pathogen of rubber tree anthracnose in China

早期炭疽菌依據(jù)寄主范圍或寄主上病原菌繁殖體顯微形態(tài)特征進(jìn)行分類和命名。1905年斯里蘭卡PETCH首次報(bào)道橡膠樹炭疽病時(shí)，根據(jù)寄主范圍和寄主上的分生孢子和產(chǎn)孢細(xì)胞，將病原菌鑒定為C.heveaePetch,Gloeosporium heveaePetch和G. alborubrumPetch[19]。戴芳瀾先生在《中國真菌總匯》中將福建橡膠樹炭疽菌記載為C. heveaePetch,將云南橡膠樹的炭疽菌記載為G. alborubrum[20]。根據(jù)寄主范圍進(jìn)行鑒定，易導(dǎo)致許多物種同物異名。隨后以炭疽菌純培養(yǎng)的形態(tài)特征（分生孢子、產(chǎn)孢細(xì)胞、附著胞等）和寄主范圍，將橡膠炭疽病病原菌無性世代鑒定為C. gloeosporioidesf.heveaePenz.,有性世代鑒定為Glomerella cingulata[21?23]。因此，2008年以前我國橡膠樹炭疽病病原菌主要鑒定為C. heveae或C.gloeosporioides。主要依據(jù)病原菌形態(tài)特征進(jìn)行鑒定，容易導(dǎo)致許多相近種難以區(qū)分。

隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，核糖體DNA基因轉(zhuǎn)錄隔離區(qū)（internal transcribed spacer, ITS）在真菌種類鑒定中得到廣泛應(yīng)用，學(xué)者逐步采用形態(tài)鑒定法結(jié)合分子鑒定方法對橡膠樹炭疽菌進(jìn)行鑒定。橡膠炭疽菌的鑒定逐漸采用形態(tài)特征結(jié)合ITS單基因序列分析進(jìn)行。2008年張春霞等[24]通過觀察分生孢子形態(tài)，鑒定出引起云南西雙版納橡膠樹的炭疽菌除了膠孢炭疽菌，還有尖孢炭疽菌(C.acutatum)。隨后李繼鋒（2010）、劉先寶（2011）等[25?26]分別采用rDNA-ITS序列相繼驗(yàn)證了在海南、廣東、廣西都可從橡膠樹上分離到尖孢炭疽菌。2014年，筆者基于ITS序列設(shè)計(jì)的特異性引物，對我國橡膠樹炭疽菌進(jìn)行分子鑒定和分布分析，結(jié)果顯示，來自海南、云南和廣東廣西的138株炭疽菌中，72.46%鑒定為膠孢炭疽菌[27]。因此，2008—2012年間，我國橡膠樹炭疽菌鑒定有C.gloeosporioides和C.acutatum2種，其中田間優(yōu)勢種為C.gloeosporioides[24?27]。

由于ITS序列分析在炭疽菌分類研究中仍存在一定局限性，對于多數(shù)近緣相似種，仍不能準(zhǔn)確反映和有效識別其親緣關(guān)系。多基因系統(tǒng)分類方法在炭疽菌等真菌種類鑒定中得到廣泛應(yīng)用和認(rèn)可。當(dāng)前，炭疽菌鑒定主要利用多基因序列拼接分析法結(jié)合形態(tài)觀察對其進(jìn)行種類鑒定。學(xué)者們紛紛利用該方法對各種作物炭疽病病原菌種類進(jìn)行鑒定。本課題組率先對來自海南的橡膠樹炭疽菌進(jìn)行多基因序列拼接分析，顯示田間有膠胞炭疽菌復(fù)合群（C. gloeosporioidesspecies complex）和尖孢炭疽菌復(fù)合群(C.acutatumspecies complex），其中膠胞炭疽菌復(fù)合群下主要有C. siamense和C. fructicola2個(gè)種，以C.siamense為田間優(yōu)勢種[28?29]。CAO X鑒定出尖孢炭疽菌復(fù)合群有C. wanningense[30?31]。LIU X B 分析了來自我國的62株炭疽菌，顯示膠孢炭疽菌復(fù)合群下有C. siamense（28株）、C. fructicola（10株）和C.ledongense（2株），尖孢炭疽菌復(fù)合群主要有C. bannanense（3株）和C. australisinense(19株）[32]。此外，還有學(xué)者鑒定出尖孢炭疽菌復(fù)合群下有C. laticiphilum[33]和另一新種存在[34]。除此兩大復(fù)合群外，橡膠樹炭疽菌還有博寧炭疽菌復(fù)合群的C. karstii[35]和C. boninense[36]危害。以上研究結(jié)果表明，我國橡膠樹炭疽菌主要有膠胞炭疽菌復(fù)合群、尖孢炭疽菌復(fù)合群和博寧炭疽復(fù)合群(C.boniensespecies complex)，復(fù)合群下有多個(gè)種組成，膠孢炭疽菌復(fù)合群下有C. siamense、C. fructicola、C. ledongense，尖孢炭疽菌復(fù)合群下有C. bannanense，C. australisinense，C.laticiphilum和C. wanningense，博寧炭疽復(fù)合群下有C. karstii、C.boninense。其中，我國橡膠樹種植區(qū)以膠孢炭疽菌復(fù)合群的C. siamense為田間優(yōu)勢種。

4 橡膠樹炭疽菌生物學(xué)特性

對橡膠樹炭疽菌生物學(xué)特性的研究，包括病原菌菌落形態(tài)和生長速率、分生孢子形態(tài)大小、病原菌培養(yǎng)最佳條件、致病能力及對殺菌劑的敏感性等方面[11,23?24,37?40]。普遍認(rèn)為橡膠樹炭疽菌存在豐富的生物學(xué)特性多樣，主要表現(xiàn)在菌落生長速率、分生孢子形態(tài)、營養(yǎng)利用、對藥劑的敏感性以及致病性等方面。菌落生長速率和營養(yǎng)利用方面的研究結(jié)果表明，在適生范圍內(nèi)C.gloeosporioides的菌落直徑普遍大于C.acutatum，C.gloeosporioides在全光照條件下菌落直徑最大，C.acutatum在光照交替的環(huán)境性菌落直徑略大些，C.gloeosporioides在麥芽糖上生長最好，C.acutatum在甘露醇和乳糖上生長較好[11,24,38?39]。藥劑敏感性方面，C.gloeosporioides和C.acutatum對甲基托布津的敏感性具有差異顯著，C.acutatum對苯并咪唑類農(nóng)藥有較強(qiáng)的抗藥性[10]。筆者監(jiān)測發(fā)現(xiàn)橡膠樹炭疽菌對咪鮮胺具有較高的敏感性，不同地域來源的菌株藥劑敏感性有一定差異，例如來自海南的C.acutatum對咪鮮胺敏感性顯著高于來自云南的菌株[41]；致病性方面，尖孢炭疽菌和C.gloeosporioides也具有致病力差異，在同類群炭疽菌中，不同菌株間也存在差異[10]。

筆者還比較分析了橡膠樹C.gloeosporioides和C.acutatum在侵染結(jié)構(gòu)發(fā)育分化過程差異。結(jié)果表明，橡膠樹兩類群炭疽菌不同菌株間分生孢子萌發(fā)時(shí)間、孢子萌發(fā)率、附著胞形成時(shí)間和形成率有一定差異，但種間無明顯差異；研究還發(fā)現(xiàn)炭疽菌菌絲可誘發(fā)形成大量附著枝。分生孢子極易產(chǎn)生，可在菌絲頂端成簇或菌絲側(cè)面排列產(chǎn)生，也可由分生孢子形成的芽管產(chǎn)生，或在芽管分化附著胞過程分枝形成分生孢子；附著胞多著生于芽管頂端，少數(shù)附著胞頂端可繼續(xù)萌發(fā)類似短芽管結(jié)構(gòu)，再次分化形成可黑色化的次級附著胞。以上結(jié)果表明，橡膠樹炭疽菌具有極強(qiáng)的適生性，這在一定程度解釋了炭疽菌株田間分布廣、危害面積大及炭疽病病情逐年嚴(yán)重的原因[42]。

近期，江濤等[34,43]測定了尖孢炭疽菌復(fù)合群下4個(gè)種（C. bannanense、C.laticiphilum、C.australisinense和歸為新類群的YHLC510）的生物學(xué)特性，結(jié)果說明，不同種的菌株對不同碳源、氮源利用，在不同溫度、pH、水活度下的生長情況等存在顯著差異；各菌株致病譜也存在明顯差異，C. bannanenseYNML52菌株具有強(qiáng)寄主分化型，其寄主范圍較窄[43]。施玉萍等[44]認(rèn)為C. laticiphilum最適合生長溫度為26 ℃，最適合生長pH值為6，菌絲致死溫度為50 ℃、10 min，分生孢子致死溫度為51 ℃、10 min，能利用多種碳氮源，咪鮮胺和丙環(huán)唑?qū)ζ渚哂泻軓?qiáng)毒力。

鑒于炭疽菌分類鑒定的依據(jù)發(fā)生多次變化，導(dǎo)致不同時(shí)期生物學(xué)特性測定結(jié)果不具有很好的可比性。早期認(rèn)為的C.gloeosporioides和C.acutatum，現(xiàn)歸入復(fù)合群下的不同種。因此，前期測定的“同種”炭疽菌生物學(xué)特性結(jié)果可能是多個(gè)種的結(jié)果。因而早期認(rèn)為炭疽菌存在生物學(xué)多樣性，可部分歸因于病原菌種類分類不一致。此外，對橡膠樹炭疽菌生物學(xué)測定研究中，通常以1個(gè)菌株或者少數(shù)幾個(gè)菌株代表一類群，供試菌株數(shù)量有限，在一定程度限制了結(jié)果的代表性。關(guān)于橡膠樹炭疽菌的生物學(xué)特性，仍需結(jié)合炭疽菌新的鑒定方法，補(bǔ)充完善不同種間的生物學(xué)特性異同，為防治策略制定奠定基礎(chǔ)。

5 橡膠樹病原菌致病分子機(jī)制研究現(xiàn)狀

炭疽菌屬屬于半活體營養(yǎng)寄生菌，在侵染寄主植物前期，并不立即殺死植物，營活體營養(yǎng)寄生；在入侵后期，隨著侵染菌絲的蔓延，殺死植物，營死體營養(yǎng)寄生[45]。關(guān)于炭疽菌的致病分子機(jī)制在C.gloeosporioides侵染錦葵科Malvaceae雜草[46]、C.dematium侵染豇豆[47]、C.higginsianum侵染擬南芥[48]、C.orbiculare侵染瓜類作物[49?50]、C.graminicola侵染玉米[51]等互作體系得到了廣泛的研究，內(nèi)容涉及炭疽菌分生孢子粘附在寄主表面所需的黏蛋白及糖蛋白、分生孢子在寄主表面定殖和萌發(fā)所需的調(diào)控蛋白、穿透寄主的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)附著胞形成所需的黑色素合成相關(guān)酶、侵入寄主繼而產(chǎn)生侵入菌絲相關(guān)功能蛋白、抵御寄主防衛(wèi)反應(yīng)相關(guān)功能蛋白等[45]。

我國橡膠樹炭疽菌致病分子機(jī)理研究起步晚，始于近十年，研究內(nèi)容主要集中于致病相關(guān)基因的鑒定和功能分析。初期，中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院環(huán)境與植物保護(hù)研究所利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)T-DNA轉(zhuǎn)化法（Agrobacterium tumefaciens-mediated Transformation, ATMT），主要采用構(gòu)建突變體庫的方法篩選致病力喪失或者減弱的相關(guān)突變體，進(jìn)而克隆和研究致病相關(guān)基因功能[52?63]。近年來海南大學(xué)在與橡膠炭疽菌病菌生長發(fā)育和致病力相關(guān)的分泌蛋白、效應(yīng)蛋白、G蛋白信號調(diào)控因子和轉(zhuǎn)錄因子等方面也取得了較好的研究進(jìn)展[64?79]。

橡膠樹炭疽菌已經(jīng)鑒定到的致病相關(guān)基因，主要影響菌株生長發(fā)育、孢子形成和萌發(fā)、附著胞形成和穿透寄主能力等方面。自噬相關(guān)蛋白CgATG4和CgATG8與菌絲生長、孢子萌發(fā)和致病力相關(guān)[62]；效應(yīng)蛋白CgSE1和CgSE2與膠胞炭疽菌的菌絲生長、分生孢子產(chǎn)量、穿透寄主能力相關(guān)[63]；分泌蛋白BAS2（a biotrophy-associated secreted protein）也在一定程度影響菌絲生長、分生孢子的產(chǎn)量和致病能力[65]；膠胞炭疽菌中一類二聚體蛋白（Dicer-like proteins）也參與調(diào)控病原菌菌絲生長、分生孢子形成和致病力[66]；富集半胱氨酸的分泌蛋白CgCP1不影響菌絲的生長，但與分生孢子的產(chǎn)生有密切關(guān)系，還會誘發(fā)寄主產(chǎn)生活性氧和造成過敏性壞死，影響病原菌致病能力[67]；G蛋白信號調(diào)控因子CgRGS1、CgRGS2和CgRGS7參與調(diào)控膠胞炭疽菌分生孢子產(chǎn)量及萌發(fā)[68?69]，多個(gè)P型ATP酶通過影響膠孢炭疽菌穿透寄主表皮能力來影響致病能力[52,60?60]。Cg4LysM參與膠孢炭疽菌的物質(zhì)能量代謝及生長發(fā)育過程，與致病性相關(guān)[70]。轉(zhuǎn)錄因子CgAP1影響菌體對滲透脅迫反應(yīng)、細(xì)胞壁緊密度和致病能力[71]；筆者所在團(tuán)隊(duì)證實(shí)了膠胞炭疽菌脂滴包被蛋白CgCap20通過調(diào)控附著胞細(xì)胞壁孔徑大小，影響附著胞膨壓進(jìn)而影響致病力[60?61]；證實(shí)了脂滴包被蛋白CgCap20受到PKAC1的調(diào)控，與疏水蛋白互作[72?73]；分析了解到炭疽菌HOG MAPK信號途徑下游轉(zhuǎn)錄因子CsATF1不僅影響滲透脅迫反應(yīng)能力、吡咯類藥劑的敏感性，還參與致病功能[76?79]。

近期，劉先寶等[80]利用比較基因組學(xué)的方法，比較分析了能引起橡膠樹炭疽病兩種不同癥狀類型的C. siamense（菌株HBCG01）和C. australisinense（菌株GX1655），揭示了C. siamense比C. australisinense具有更豐富的分泌性碳水化合物活性酶(CAZymes), 細(xì)胞色素氧化酶(CYP450)和次生代謝產(chǎn)物（secondary metabolites），而C. australisinense中具有植物毒性的NLP蛋白（Nep1-Like proteins）成員更多。橡膠樹炭疽菌致病分子機(jī)理的研究，從突變體庫的構(gòu)建、突變體的篩選、功能基因的克隆和分析，正逐步向調(diào)控機(jī)制、信號網(wǎng)絡(luò)分析及組學(xué)分析發(fā)展。

6 橡膠樹炭疽病的防治技術(shù)

近年來，對橡膠樹炭疽病防治技術(shù)的研究，主要集中在藥劑的篩選、劑型的研發(fā)、抗病育種、防治器械、生物防治等方面。生產(chǎn)上，重點(diǎn)防治歷年重病區(qū)和易感病品系林段橡膠樹炭疽病，結(jié)合預(yù)測測報(bào)，采用農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治相結(jié)合的防治措施。

6.1 預(yù)測預(yù)報(bào)橡膠樹嫩葉期為炭疽病易感期，每年春季橡膠新抽大量嫩葉時(shí)期，炭疽病容易和白粉病共同侵染，造成大量新抽嫩葉的落葉，因此，在此期間應(yīng)加強(qiáng)病害的預(yù)測預(yù)報(bào)，尤其是歷年重病區(qū)和易感病品系的林段。一般從橡膠樹抽葉30%開始進(jìn)行林段病情調(diào)查，若發(fā)現(xiàn)炭疽病發(fā)生，根據(jù)氣象預(yù)報(bào)在未來10 d內(nèi)，有連續(xù)3 d以上的陰雨或大霧天氣，則要在低溫陰雨天氣來臨前噴藥防治。噴藥后從第五天開始，若預(yù)報(bào)還有上述天氣出現(xiàn)，則應(yīng)在第一次噴藥后7～10 d內(nèi)機(jī)械第二次噴藥，指導(dǎo)病情控制為止[14]。

6.2 農(nóng)業(yè)防治對歷年重病林段和易感病品系林段，可在橡膠樹越冬落葉后到抽芽初期，施用速效肥，促進(jìn)橡膠樹抽葉整齊，以減少侵入機(jī)會。在病害流行末期，對病樹施用速效肥，促進(jìn)病樹迅速恢復(fù)生長[16]。苗圃地要注意不要在低洼積水地和山谷地建立苗圃，合理施肥，加強(qiáng)管理，使得膠苗生長健壯，提高膠苗的抗病能力[18]。

6.3 化學(xué)防治和防治器械根據(jù)預(yù)測預(yù)報(bào)結(jié)構(gòu)進(jìn)行噴藥防治，科學(xué)合理地輪換使用化學(xué)藥劑。目前防治的藥劑有28%復(fù)方多菌靈膠懸劑，用量為630 mL·hm?2, 兌水75 kg（每畝42 mL，兌水5 kg）；20%滅菌靈膠乳劑，用量為450 mL·hm?2，兌水75 kg（每畝30 mL，兌水5 kg）；80%的代森錳鋅兌水1 000倍液噴霧；10%百菌清熱霧劑、20%氟硅唑·咪鮮胺熱霧劑、15%咪鮮胺·晴菌唑熱霧劑、16%咪鮮·酮熱霧劑、30%嘧·咪·酮熱霧劑等[18,81?82]。于上午7：00前或下午7：00后，靜風(fēng)時(shí)施藥防治，每隔7～10 d噴1次，噴2～3次[18]。

由于橡膠樹樹體高，可濕性粉劑和水劑等難以送達(dá)樹冠層，目前使用藥劑的劑型為粉劑或煙霧劑，防病機(jī)械包括噴粉機(jī)和煙霧機(jī)。中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院近年來開展了橡膠樹無人機(jī)植保飛防技術(shù)，利用無人機(jī)噴施硫磺粉防治具有施藥效率高、噴藥均勻、易控制和專業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)[83]。該實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)稱，利用FBH300無人直升機(jī)每小時(shí)可以完成16.67 hm2（250畝）以上的作業(yè)面積，每公頃僅需要“保葉清”超低容量微乳劑加“熱飛”植物油飛防專用助劑60 L(每畝4 L)，藥劑利用效率高，施用安全、高效[83]。

6.4 抗病育種品系的感病性是橡膠樹炭疽病發(fā)生的基礎(chǔ)，在病害流行頻率高的地區(qū)選種抗病高產(chǎn)品系，是預(yù)防橡膠樹炭疽病最經(jīng)濟(jì)有效的方法。各植膠地均重視品系抗病性評價(jià)工作。我國主要采用室內(nèi)離體接種鑒定法和大田調(diào)查法。華南熱帶作物學(xué)院肖倩莼通過苗圃鑒定和大田調(diào)查，從34個(gè)已推廣的橡膠品系中鑒定出對炭疽病具有較好抗性的品系有：“熱研44-9”、“熱研11-9”、“熱研88-13”、“熱研7-31-89”、“保亭933”、“南強(qiáng)1-97”[84]。蔡志英等[85]對我國46份我國大規(guī)模和中規(guī)模推廣品系進(jìn)行田間2年評價(jià)，顯示表現(xiàn)抗性的品系有8份，為“IAN873”、“幼1”、“熱研8-79”、“熱研88-13”、“文昌217”、“云研77-2”、“云研77-4”、“云研277-5”。

6.5 生物防治目前，針對橡膠樹炭疽病的生物防治還在室內(nèi)實(shí)驗(yàn)或盆栽苗實(shí)驗(yàn)探索過程中。賀春萍等[86?87]開展生防菌枯草芽孢桿菌Czk1與化學(xué)殺菌劑“根康”協(xié)同防治橡膠炭疽病，顯示Czk1與根康的協(xié)同作用在防治上效果均比施用單劑高；劉文波等[88]開展了解淀粉芽孢桿菌對橡膠炭疽菌的抑菌作用，等等。

7 展 望

橡膠樹炭疽病危害有逐年加重趨勢，目前是我國橡膠樹葉部重要“兩病”之一。現(xiàn)有研究結(jié)果表明，橡膠炭疽病田間危害癥狀、病原種類、病原菌生物學(xué)特性均呈多樣性。由于炭疽菌分類依據(jù)的變更，不同時(shí)期病原菌種鑒定結(jié)果不同，相應(yīng)的研究結(jié)果是否具有很好的可比性值得商榷，如早期病原菌生物學(xué)特性的研究主要是對C. gloeosporioides和C. acutatum進(jìn)行分析，隨著多基因序列分析法在炭疽菌種類中的應(yīng)用，已知我國橡膠炭疽病病原菌歸屬3個(gè)復(fù)合群下的多個(gè)種，早期報(bào)道C. gloeosporioides和C.acutatum的生物學(xué)特性實(shí)為復(fù)合群的生物學(xué)特性。病原菌的準(zhǔn)確鑒定及其對生物學(xué)特性等的了解可為田間防控提供指導(dǎo)。橡膠樹炭疽病危害部位和危害癥狀多樣，是否由不同的病原種引起？不同的橡膠樹栽培區(qū)，是否有不同的優(yōu)勢種？不同炭疽菌種侵染橡膠樹的致病力和致病機(jī)制是否有差異？病原菌不同種間流行規(guī)律和對藥劑的敏感性是否有差異？不同寄主對不同種炭疽菌的抗病性如何？等等，都值得進(jìn)一步分析。

炭疽菌種類繁多、遺傳多態(tài)性豐富。炭疽菌危害寄主多、地理分布廣，是重要病原真菌之一。近年對炭疽菌生長發(fā)育、致病和抗藥機(jī)制研究取得了較好的進(jìn)展，今后有關(guān)分子機(jī)制研究仍是重點(diǎn)。關(guān)于橡膠炭疽菌的致病分子機(jī)制研究已從單個(gè)基因的功能研究逐步發(fā)展為信號網(wǎng)絡(luò)、調(diào)控機(jī)制分析及組學(xué)分析。分析橡膠炭疽菌致病機(jī)理，有望為橡膠樹炭疽病的綠色防控提供參考，也有助于促進(jìn)人們更好理解植物病原菌炭疽菌的生長發(fā)育、致病、適生性等方面的分子機(jī)制。

目前，橡膠炭疽菌的防控技術(shù)仍以傳統(tǒng)的農(nóng)業(yè)防治和化學(xué)防治為主。隨著技術(shù)的不斷創(chuàng)新，安全高效的防治技術(shù)需求，將快速推進(jìn)無人機(jī)防治術(shù)、生物防治和選種抗病品系的發(fā)展。