高效液相色譜法測(cè)定飲料中的阿力甜含量

李 銳

（山西省檢驗(yàn)檢測(cè)中心食品與糧食檢驗(yàn)技術(shù)研究所，山西太原 030012）

阿力甜是一種人工合成的甜度高、口感好、熱量低的甜味劑，具有良好的貯存與加工穩(wěn)定性，作為代糖物質(zhì)被廣泛用于飲料、糖果等食品加工領(lǐng)域[1]。然而，人工合成甜味劑都有著嚴(yán)格的適用范圍與添加限量，超范圍使用或過(guò)量添加會(huì)引起食用者出現(xiàn)不同程度的毒性表現(xiàn)，對(duì)人們的身體健康與食品行業(yè)發(fā)展不利，所以加強(qiáng)對(duì)飲料等銷量較高、深受廣大消費(fèi)者追捧的日常食品中甜味劑的監(jiān)管與檢測(cè)非常必要[2-3]。GB 5009.263—2016[4]中規(guī)定了用高效液相色譜法檢測(cè)食品中阿斯巴甜與阿力甜含量的方法，推薦使用DAD檢測(cè)器和VWD檢測(cè)器，本研究參照該標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有設(shè)備，建立了HPLC-VWD法測(cè)定飲料中阿力甜含量的方法。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

雪碧、優(yōu)酸乳（購(gòu)自某超市）；阿力甜標(biāo)準(zhǔn)品（編號(hào)：99016-42-9，批號(hào)：B0002377）；甲醇、乙腈均為色譜純；乙醇為優(yōu)級(jí)純；試驗(yàn)用水為一級(jí)超純水。

Agilent 1260高效液相色譜儀（配紫外檢測(cè)器）；AL104電子天平（精度0.0001g）；恒溫水浴鍋；高速離心機(jī)；渦旋混合器；Synergy超純水機(jī)等。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試樣處理方法

（1）以碳酸飲料雪碧作為基質(zhì)，準(zhǔn)確稱取5 g試樣于50.0 mL燒杯中，在50 ℃恒溫水浴鍋中水浴除去CO2后轉(zhuǎn)入25.0 mL容量瓶中，用超純水定容，搖勻，經(jīng)0.45 μm水系濾膜過(guò)濾，上機(jī)檢測(cè)。

（2）以含乳飲料優(yōu)酸乳作為基質(zhì)，準(zhǔn)確稱取5 g試樣于50.0 mL離心管中，加入10 mL乙醇，輕輕振搖5次，靜置1 min，于4 000 r/min離心機(jī)中離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)入25.0 mL容量瓶中，用8 mL乙醇+水（2+1）洗滌沉淀，離心后將上清液合并至同一容量瓶，用乙醇+水（2+1）定容，搖勻，經(jīng)0.45 μm水系濾膜過(guò)濾，上機(jī)檢測(cè)。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

準(zhǔn)確稱取0.025 0 g阿力甜標(biāo)準(zhǔn)品，用超純水溶解并定容至50.0 mL，配制得濃度為0.5 mg/mL的阿力甜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

準(zhǔn)確移取0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL和2.0 mL阿力甜標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液至5支10.0 mL容量瓶中，用超純水定容至刻度，搖勻，配制成質(zhì)量濃度為5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、25.0 μg/mL、50.0 μg/mL和100.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作系列。

1.2.3 液相色譜條件

色譜柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），柱溫30 ℃；流動(dòng)相：甲醇+水（40+60），流速0.8 mL/min，等度洗脫；進(jìn)樣量：20 μL；檢測(cè)器為VWD（200 nm）。

2 結(jié)果與分析

2.1 阿力甜標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜分離分析

采用上述儀器條件，在25 min內(nèi)能完成色譜分析，阿力甜標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰型尖銳對(duì)稱，且與雜質(zhì)峰較好分離，阿力甜標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜圖如圖1所示。

圖1 阿力甜標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

2.2 線性范圍及檢出限

將配制的標(biāo)準(zhǔn)工作系列在上述色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，以標(biāo)準(zhǔn)系列點(diǎn)濃度為橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的色譜峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為f(x)=57.946 29x+15.991 24，相關(guān)系數(shù)r=0.999 96，由此可見(jiàn)，阿力甜在5.0～100.0 μg/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。根據(jù)3倍信噪比對(duì)應(yīng)的目標(biāo)物含量計(jì)算方法檢出限，得該方法的檢出限為0.006 g/kg。

2.3 方法回收率與精密度

向某雪碧試樣、優(yōu)酸乳試樣中添加低、中、高3種濃度水平的阿力甜標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照上述試樣處理方法、色譜分析條件將每個(gè)濃度水平平行測(cè)定6次，計(jì)算加標(biāo)回收率與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加標(biāo)回收率與精密度試驗(yàn)結(jié)果

該方法的回收率為99.7%～106.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為0.43～1.34%。

3 結(jié)論

本研究建立的HPLC-VWD法測(cè)定飲料中甜味劑阿力甜含量的方法，線性關(guān)系良好，檢出限、回收率、精密度符合GB 5009.263-2016及GB/T 27404-2008[5]的相關(guān)要求，能夠滿足實(shí)驗(yàn)室對(duì)飲料中阿力甜含量準(zhǔn)確、快速、高通量的檢測(cè)需求。