IL-17E在結腸癌中的表達及與腫瘤分期的相關性

趙興洋，袁逸林，楊學良，王明華，黃維莉，婁 洋

(1.北華大學附屬醫(yī)院，吉林 吉林 132011；2.吉林市中心醫(yī)院，吉林 吉林 132011)

白介素-17(IL-17)是重要的炎癥細胞因子，其中IL-17E是新近發(fā)現(xiàn)的IL-17家族成員，IL-17E異常表達可促進輔助型T細胞的免疫應答，并增加IL-4和IL-13等炎性因子表達，加重局部炎癥[1-2].既往報道[3]顯示：IL-17E參與了消化性潰瘍和潰瘍性結腸炎等疾病的炎癥病變過程，胃黏膜中IL-17E表達水平與胃腸組織損傷程度具有顯著相關性.結腸癌是消化道常見惡性腫瘤，目前，有關IL-17E在結腸癌中的報道較少[4].有研究[5]顯示：IL-17E異常增加可能促進食管鱗狀細胞的癌變.但也有研究[6]發(fā)現(xiàn)：IL-17E聯(lián)合化療有助于增強抗腫瘤效果，可見IL-17E在惡性腫瘤中可能存在雙重作用.本研究分別納入100例結腸癌患者和100例體檢健康者作為研究對象，分析IL-17E與結腸癌分期的關系.

1 材料與方法

1.1 一般資料

納入2017年8月—2020年8月于北華大學附屬醫(yī)院100例結腸癌患者作為觀察組，另納入同期100例體檢健康者作為對照組.本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，兩組基本資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05).見表1.

表1 兩組基本資料Tab.1 Basic information of the two groups

1.2 納入與排除標準

納入標準：觀察組經(jīng)MRI和腸鏡病理活檢確診為結腸癌；對照組為體檢健康者；臨床資料完整.

排除標準：合并其他感染性疾病、免疫性或慢性疾病；合并嚴重軀體性疾??；肝腎功能不全.

1.3 血清IL-17E檢測

兩組受試者均于入院當日采血進行檢測.

實驗準備：按IL-17E試劑盒(江蘇江萊生物科技有限公司，規(guī)格48T/96T)說明書依次溶解捕獲IL-17抗體、二抗體、標準品及氧化物酶結合物，低溫保存?zhèn)溆?用PBS稀釋捕獲抗體，在ELISA板中加入100 μL二抗，封板棄液，再以每孔300 μL重復吸板4次，完成后每孔加入300 μL封閉液，溫室孵育2 h，拍干.

ELISA實驗：分別將100 μL標準品和血清標本加入反應孔，溫室孵育2 h，再用稀釋液稀釋二抗體濃度至0.25 μg/mL，加入100 μL氧化物酶，孵育2 h.吸板4次后，加底物100 μL，常溫顯色10 min，加終止液50 μL，在450 nm波長條件下記錄結果.

1.4 MRI檢查

檢查前8 h口服清腸藥，應用飛利浦Achieva 3.0T磁共振成像系統(tǒng)進行MRI檢查，囑患者取平臥位，平靜呼吸，依次進行矢狀位和冠狀位掃描，參數(shù)設置：TR=3 000 ms，TE=100 ms，層厚3 mm，層間距0.3 mm，明確腫瘤位置，然后垂直腫瘤腸管，依次行橫斷面T1WI和T2WI掃描，層厚3 mm，層間距0.3 mm，TR依次為573 ms和3 824 ms，TE依次為8 ms和110 ms.完成后平行腫瘤腸管，行冠狀面T2WI掃描，參數(shù)同橫斷面T2WI掃描.

1.5 觀察指標

記錄并比較觀察組、對照組患者的血清IL-17E水平，采用受試者工作特征曲線(ROC)分析血清IL-17E對結腸癌的預測價值.根據(jù)結腸癌TNM分期標準對結腸癌進行分期，通過ROC曲線得到的最佳截斷值，將患者分為IL-17E高表達組、IL-17E低表達組，比較兩組研究對象的臨床特征，包括性別、年齡、BMI、腫瘤分期、腫瘤大小、貧血、淋巴結轉移、腫瘤侵襲深度、分化程度，分析血清IL-17E與臨床特征的關系.參考《結直腸癌TNM分期(2010)》第7版[7]對患者腫瘤進行分期，采用Spearman相關性檢驗分析血清IL-17E與腫瘤分期的相關性.

1.6 統(tǒng)計學分析

2 結 果

2.1 兩組血清IL-17E水平

觀察組血清IL-17E水平為(491.64±80.38)pg/mL，低于對照組的(789.52±206.75)pg/mL，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05).通過繪制ROC曲線，提示血清IL-17E預測結腸癌的曲線下面積為0.764(標準誤=0.046，P<0.001，95%CI=0.673～0.855)，最佳截斷值為546.745 pg/mL，敏感度為72.30%，特異度為58.50%.ROC曲線見圖1.

圖1 血清IL-17E預測結腸癌的ROC曲線Fig.1 Serum IL-17E predicts ROC curve of colon cancer

2.2 血清IL-17E與結腸癌病理特征的關系

根據(jù)最佳截斷值546.745 pg/mL將患者分為IL-17E高表達組(n=32，≥546.745 pg/mL)、IL-17E低表達組(n=68，<546.745 pg/mL)，其中，IL-17E高表達組的腫瘤Ⅰ期、無淋巴結轉移、腫瘤侵襲深度(T1+T2)、高分化比例分別為50.00%、90.63%、93.75%、90.63%，高于IL-17E低表達組的17.65%、72.06%、67.65%、63.24%，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05).見表2.

表2 血清IL-17E與結腸癌病理特征的關系Tab.2 Relationship between serum IL-17E and pathological characteristics of colon cancer

2.3 血清IL-17E與腫瘤分期的相關性

Spearman相關性檢驗提示：血清IL-17E與腫瘤分期的相關性系數(shù)為-0.523(P=0.013)，表明二者呈負相關，腫瘤分期越高，患者的血清IL-17E水平越低.

3 討 論

IL-17E是IL-17家族中的一員，它在免疫性疾病、過敏性疾病等多種疾病中具有一定診斷價值[8].研究[9-10]表明：IL-17E能與IL-17RA、IL-17RB相結合，進而促進異類二聚體形成，利用信號傳導使下游基因轉錄，形成生物學效應.本研究結果提示：結腸癌患者的血清IL-17E水平明顯下降，提示血清IL-17E下調可能參與了結腸癌進展.既往研究[11]發(fā)現(xiàn)：IL-17E可能對炎性浸潤有促進作用，它可使機體炎癥加重，促進炎癥進展.另有研究[12]發(fā)現(xiàn)：IL-17E還存在抑癌作用，這可能與中性粒細胞聚集密切相關，具體機制尚有待進一步證實.有學者[13]發(fā)現(xiàn)：良性膀胱息肉者的IL-17E表達增高，而膀胱癌、前列腺癌患者的IL-17E表達水平下調.本研究發(fā)現(xiàn)：結腸癌患者的血清IL-17E水平明顯下調，推測可能是因惡性腫瘤患者癌細胞活躍、IL-17E的抑癌作用有所削弱所致.

通過觀察血清IL-17E與病理特征的關系，發(fā)現(xiàn)IL-17E表達水平可能受腫瘤分期、淋巴結轉移、腫瘤侵襲深度、腫瘤分化程度的影響.由于本研究主要探討血清IL-17E與腫瘤分期的關系，故僅對二者進行Spearman相關性檢驗，結果提示二者呈負相關，患者腫瘤分期越高，血清IL-17E水平越低.腫瘤分期對評價癌癥患者預后至關重要，而血清IL-17E能在一定程度上反映患者的腫瘤分期，也間接表明它對癌癥患者預后具有評估價值[14].本研究的ROC曲線證實血清IL-17E預測結腸癌的曲線下面積為0.764，總體預測效果較理想.研究[15]表明：IL-17E對嗜酸細胞、細胞因子聚集有誘導作用，有利于趨化活性產(chǎn)生，從而參與炎癥進展.此外，還有學者[16]發(fā)現(xiàn)：IL-17E不僅對炎癥進展有促進作用，也可抑制炎癥.本研究發(fā)現(xiàn)：IL-17E在結腸癌中具有抑癌、抑制炎癥作用，結腸癌可導致血清IL-17E水平下調，這可能是其促進該病進展的重要機制.

本研究證實了血清IL-17E水平可用于結腸癌的預測，且明確了最佳截斷值.此外，本研究經(jīng)Spearman相關性檢驗證實血清IL-17E與結腸癌分期呈負相關，這可能為治療結腸癌提供新思路，在未來的臨床研究中，可將靶向IL-17E治療作為研究重點.另外，本研究也存在局限性，納入樣本量較少，未來還需擴大樣本量對此進行進一步證實.