新疆阿勒泰地區(qū)O、A型口蹄疫血清抗體監(jiān)測

呂雙燕，羅鵬飛，舒 展

（新疆阿勒泰地區(qū)動(dòng)物疾病控制與診斷中心，新疆阿勒泰836500）

口蹄疫（FMD）是一種高度傳染性的疾病，會(huì)給養(yǎng)殖業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失?？谔阋呤怯煽谔阋卟《荆╢oot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV）感染偶蹄動(dòng)物（馴養(yǎng)和野生的反芻動(dòng)物和豬）引起的一種烈性傳染病[1-3]，導(dǎo)致急性發(fā)熱性疾病，并在唇、舌、蹄、乳房等無毛部位出現(xiàn)水皰、潰瘍、爛斑等病癥[4-5]?？谔阋卟《竟灿?個(gè)血清型：A、O、C、SAT 1～3及Asia 1。A型和O型主要在亞洲、中東和非洲流行，C型主要在亞洲、非洲及南美洲等地區(qū)流行，SAT 1～3型主要出現(xiàn)在非洲，Asia 1型多流行于亞洲[6]。我國以O(shè)型為主，A型和Asia 1型較少[7]?？谔阋弑M管死亡率很低，但發(fā)病率高達(dá)100%，感染畜群的生產(chǎn)性能也大大降低[8-9]。因此，OIE將其確定為必須報(bào)告的動(dòng)物傳染病，我國將其列為一類動(dòng)物疫病及進(jìn)境動(dòng)物一類傳染病之首[10]。雖然疫苗可能引起亞臨床感染和攜帶者狀態(tài)的發(fā)生，但是合適的疫苗可以預(yù)防臨床疾病，并減少經(jīng)濟(jì)損失[11-12]。在非洲、中東和亞洲的部分地區(qū)，通過定期大規(guī)模疫苗接種試圖控制口蹄疫。

本研究采用液相阻斷ELISA方法對新疆阿勒泰地區(qū)7個(gè)區(qū)域動(dòng)物（牛、羊、豬）進(jìn)行O、A型口蹄疫抗體合格率情況調(diào)查，以評估現(xiàn)在使用免疫方案的合理性，為防疫該病制定出較為合理的防控建議提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

2021年1月至5月對阿勒泰地區(qū)7個(gè)區(qū)域（A～G區(qū)）采集血樣1 586份，其中，牛、羊血樣各540份，豬血樣506份，分離血清，同時(shí)記錄動(dòng)物基本信息。-20℃冷凍保存，待檢。

1.2 試劑及儀器

ELISA抗體檢測試劑盒由中國農(nóng)科院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)（生產(chǎn)批號：A型20210107103-3、O型20210107101-5）。

移液器、臺(tái)式低速離心機(jī)（AXTD5A）、MK3酶標(biāo)儀（Thermo Fisher）。

1.3 結(jié)果判定

牛、羊抗體效價(jià)≥128，豬抗體效價(jià)≥64，判為合格。血清合格個(gè)體即為口蹄疫抗體合格個(gè)體。

免疫合格個(gè)體數(shù)量占群體總數(shù)的70%以上為免疫合格群體。

群體免疫合格率=群體合格數(shù)/群體樣本數(shù)×100%（1）

2 結(jié)果與分析

2.1 O型口蹄疫抗體檢測結(jié)果（見表1、表2）

由表1可知，合格血樣1 372份，O型口蹄疫免疫合格率為86.51%；其中，牛O型口蹄疫免疫合格率為90.19%，羊O型口蹄疫免疫合格率為85.37%，豬O型口蹄疫免疫合格率為83.79%。

表1 阿勒泰地區(qū)O型口蹄疫抗體檢測結(jié)果Tab.1 Results of O-type foot-and-mouth disease antibodies in Altay area

由表2可知，牛、羊、豬的個(gè)體免疫合格率均高于70%。雖然達(dá)到我國規(guī)定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%以上，但G區(qū)域合格率均較低，必要時(shí)仍需加強(qiáng)免疫一次。

表2 阿勒泰各區(qū)域O型口蹄疫抗體檢測結(jié)果Tab.2 Test results of O-type foot-and-mouth disease antibodies in various regions of Altay

2.2 A型口蹄疫抗體檢測結(jié)果（見表3、表4）

表3 阿勒泰地區(qū)A型口蹄疫抗體檢測結(jié)果Tab.3 Rresults of A-type foot-and-mouth disease antibodies in Altay area

由表3可知，合格血樣1 366份，A型口蹄疫免疫合格率為86.13%。其中，牛A型口蹄疫免疫合格率為88.70%，羊A型口蹄疫免疫合格率為84.44%，豬A型口蹄疫免疫合格率為85.18%。

由表4可知，各區(qū)域的O型口蹄疫抗體檢測結(jié)果中，牛、羊、豬的個(gè)體免疫合格率均高于70%，達(dá)到我國規(guī)定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%以上。僅有G區(qū)域羊免疫合格率低于80%，其余區(qū)域均高于80%。

表4 阿勒泰地區(qū)各區(qū)域A型口蹄疫抗體檢測結(jié)果Tab.4 Test results of A-type foot-and-mouth disease antibodies in various regions of Altay

3 討論

我國規(guī)定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%以上。試驗(yàn)自2021年1月至5月對阿勒泰地區(qū)采集血樣1 586份，并對其O型口蹄疫、A型口蹄疫進(jìn)行檢測。O、A型口蹄疫檢測結(jié)果顯示，O型免疫合格率為86.51%，A型免疫合格率為86.13%。其中，牛、羊、豬的O、A型口蹄疫免疫合格率為80.00%以上；各地區(qū)牛、羊、豬的個(gè)體免疫合格率均高于70%，但對于G區(qū)域，O、A型口蹄疫合格率均較低，必要時(shí)仍需加強(qiáng)免疫一次。此次調(diào)研結(jié)果顯示，當(dāng)?shù)貙υ摬〉拿庖吖ぷ髟鷮?shí)有效，免疫密度和質(zhì)量效果相對較好，但部分區(qū)域仍需要加強(qiáng)。

口蹄疫在我國列為一類動(dòng)物疫病及進(jìn)境動(dòng)物一類傳染病之首。除采取強(qiáng)制免疫、強(qiáng)化消毒滅源及采取改善飼養(yǎng)管理?xiàng)l件等措施外，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行動(dòng)物O、A型口蹄疫的免疫抗體監(jiān)測是目前控制和減少我國O、A型口蹄疫流行的重要手段[13-14]。感染性病毒顆粒的沉降系數(shù)為146S。在某些條件下，146S粒子可能會(huì)發(fā)生不可逆的解離，變成缺乏VP4的穩(wěn)定五聚體（12S）。雖然146S和12S顆粒均包含相同的蛋白質(zhì)，但是當(dāng)146S顆粒轉(zhuǎn)化為12S顆粒時(shí)，產(chǎn)生中和抗體所需的構(gòu)型會(huì)丟失[15]。

影響疫苗免疫因素有很多，主要存在以下幾方面的原因。

（1）疫苗的運(yùn)輸管理不到位。

如今的口蹄疫疫苗多采用滅活疫苗，抗原穩(wěn)定性差給口蹄疫疫苗的生產(chǎn)、儲(chǔ)存和應(yīng)用帶來很多困難，使用過程中必須全程冷鏈運(yùn)輸以保護(hù)滅活口蹄疫疫苗的免疫原性[16]。一旦疫苗產(chǎn)品中滅活FMDV發(fā)生裂解沒被及時(shí)發(fā)現(xiàn)，注射后將無法起到保護(hù)效果，導(dǎo)致免疫的失敗。如果工作人員不按照規(guī)定程序使用疫苗，如該冷藏的進(jìn)行冷凍或常溫放置時(shí)間太久、使用過期疫苗、注射部位偏差或走針、器械消毒不嚴(yán)等均有可能引發(fā)疫苗免疫失敗。

（2）受母源性抗體的干擾、隱性帶毒和排毒、免疫期使用免疫抑制的抗生素藥物等。

許多規(guī)模化和中小規(guī)模豬場將口蹄疫疫苗首免時(shí)間提前到20日齡，有些甚至提前至2周齡，并在2月齡進(jìn)行二次免疫。但是，正在哺乳階段的母豬在吃初乳的時(shí)候會(huì)產(chǎn)生先天性免疫，能夠說吃到初乳的小豬的口蹄疫抗體水平較高。若在20～23日齡前首免，母源抗體水平還相當(dāng)高，此時(shí)免疫，母源抗體和疫苗發(fā)生中和反應(yīng)，可能導(dǎo)致免疫失敗[17]。

（3）免疫程序不合理。

很多養(yǎng)殖場未建立合理的免疫程序，導(dǎo)致口蹄疫等重大動(dòng)物疫病免疫的時(shí)候未進(jìn)行免疫，造成疫病的發(fā)生和流行。很多地方未結(jié)合當(dāng)?shù)氐牧餍胁W(xué)情況和地理環(huán)境位置，而盲目套用網(wǎng)上公布的免疫程序，造成免疫的程序和方式混亂，免疫的時(shí)間間隔和免疫劑量差別大。

（4）疫苗的選擇。

市面上疫苗廠家因批次不同、生產(chǎn)時(shí)某些因素不穩(wěn)定，使得疫苗效果參差不齊、抗體水平高低不等，難以有效預(yù)防亞臨床感染，從而造成動(dòng)物隱形帶毒。

建議每年春秋兩季進(jìn)行集中基礎(chǔ)免疫，而后對新出生或補(bǔ)欄的動(dòng)物要及時(shí)進(jìn)行免疫，從而提高疫苗免疫效果和動(dòng)物體的抗病能力。規(guī)范疫苗的保存及管理，定期抽查養(yǎng)殖場的疫苗保存方式。對于不合理存放及過期產(chǎn)品應(yīng)及時(shí)清理。應(yīng)該規(guī)范免疫人員操作水平，防止操作不當(dāng)導(dǎo)致的免疫失敗。對于初生動(dòng)物，初免時(shí)間可適當(dāng)延后，有效避免母源抗體的干擾。

4 結(jié)論

阿勒泰地區(qū)牛、羊、豬的個(gè)體免疫合格率均符合我國規(guī)定的口蹄疫免疫抗體的群體免疫合格率70%標(biāo)準(zhǔn)，但部分地區(qū)仍需加強(qiáng)防控。