四妙丸對(duì)高尿酸血癥大鼠腎臟尿酸排泄及腎功能的影響

陳杰偉，戴 號(hào)，張永琪

（1.上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海 201203；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬光華醫(yī)院，上海 200052)

尿酸來源于人體內(nèi)外源性及內(nèi)源性嘌呤的代謝。人體存在嘌呤代謝紊亂的情況，可導(dǎo)致尿酸的生成量過多或排泄量減少，進(jìn)而可導(dǎo)致高尿酸血癥(hyperuricemia,HUA)的發(fā)生。目前，我國(guó)HUA的發(fā)病率約為8.4%～13.3%，僅低于糖尿病的發(fā)病率[1]。HUA是慢性腎病發(fā)生及進(jìn)展的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。血尿酸的水平每升高60 μmol/L,腎病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)可增加7%～11%[2]。促進(jìn)腎臟尿酸的排泄是降低機(jī)體血尿酸水平的主要方法。苯溴馬隆是一種促進(jìn)腎臟排泄尿酸的藥物，但此藥具有肝毒性及骨髓抑制等副作用。應(yīng)用中藥組方治療HUA的療效較好，且具有較高的安全性。四妙丸出自清代《成方便讀》，由蒼術(shù)、黃柏、牛膝及薏苡仁組成，是臨床上用于降低患者血尿酸水平的重要方劑[3]。在本次研究中，筆者主要探討四妙丸對(duì)高尿酸血癥大鼠腎臟尿酸排泄及腎功能的影響。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

48只SPF級(jí) 雄 性SD大 鼠，6周 齡，140～160 g，由上海中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，生產(chǎn)許可證號(hào)：SYXK(滬)2020-0009。

1.2 藥品和儀器

四妙丸浸膏粉（由蒼術(shù)、黃柏、薏苡仁及牛膝組成）；苯溴馬隆片（生產(chǎn)廠家：宜昌東陽光長(zhǎng)江藥業(yè)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H20040348)；氧嗪酸鉀粉及次黃嘌呤粉（由美國(guó)Sigma公司提供）。生化分析儀（生產(chǎn)廠家：德國(guó)西門子）；離心機(jī)（生產(chǎn)廠家：上海安亭儀器廠）。

1.3 動(dòng)物分組、造模及給藥

將48只雄性SD大鼠隨機(jī)平均分為正常組、模型組、苯溴馬隆組、四妙丸高劑量組、四妙丸中劑量組和四妙丸低劑量組。除正常組，用氧嗪酸鉀(100 mg/kg)對(duì)除正常組以外其余各組大鼠進(jìn)行腹腔注射，同時(shí)用次黃嘌呤(500 mg/kg）對(duì)其余各組大鼠進(jìn)行灌胃，1次/d，共造模21 d。在造模的第8 d，用4.7 mg/kg的苯溴馬隆對(duì)苯溴馬隆組大鼠進(jìn)行灌胃，用2260.6 mg/kg、1130.3 mg/kg及565.2 mg/kg的四妙丸分別對(duì)四妙丸高劑量組大鼠、四妙丸中劑量組大鼠及四妙丸低劑量組大鼠進(jìn)行灌胃，用與其余各組大鼠所用等量的溶媒對(duì)正常組大鼠及模型組大鼠進(jìn)行灌胃，1次/d，共灌胃14 d。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)

1）給藥2 h后，取大鼠的眼眶血，對(duì)其血液進(jìn)行血尿酸(serum uric acid,SUA)、血 肌 酐（Serum creatinine,Scr）及血尿素氮(Blood Urea Nitrogen，BUN)檢測(cè)。2）用代謝籠收集大鼠24 h的尿液，對(duì)其尿液進(jìn)行尿尿酸（urine uric acid，UUA）及24 hUUA檢測(cè)。3）計(jì)算大鼠尿酸清除率(Cua)。Cua=尿尿酸×每小時(shí)尿量/血尿酸。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

對(duì)本次研究中的數(shù)據(jù)均采用Prism 8.2.1統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，數(shù)據(jù)采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用Tukey檢驗(yàn)。以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平

在造模期，與正常組大鼠相比，其余各組大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平均較高，P＜0.05；其余各組大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平相比，P＞0.05。在給藥期，與正常組大鼠相比，模型組大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平均較高，P＜0.01；與模型組大鼠相比，苯溴馬隆組大鼠SUA的水平較低，Scr的水平較高，P＜0.01；與模型組大鼠相比，四妙丸各劑量組大鼠SUA的水平均較低，四妙丸低劑量組大鼠BUN的水平較低，P＜0.05。詳見表1。

表1 各組大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平（± s）

表1 各組大鼠SUA的水平、Scr的水平及BUN的水平（± s）

注：*表示與正常組相比，P＜0.05；**表示與正常組相比，P＜0.01；△表示與模型組相比，P＜0.05；△△表示與模型組相比，P＜0.01。

組別 SUA(μmol/L) Scr(μmol/L) BUN(mmol/L)造模期 給藥期 造模期 給藥期 造模期 給藥期正常組（n=8） 131±32.0 84±24.0 25±1.4 27±1.8 7±0.6 6±0.4模型組（n=8） 709±227.7** 545±196.3** 31±3.1* 32±3.3** 13±5.8* 14±5.9**苯溴馬隆組（n=8） 794±92.8** 261±112.2△△ 35±4.5** 38±2.3△△ 14±3.5** 12±2.0四妙丸高劑量組（n=8） 893±196.3** 291±109.5△△ 39±5.4** 31±3.5 18±3.6** 11±2.1四妙丸中劑量組（n=8） 830±180.9** 291±123.8△△ 36±2.9** 32±3.0 17±3.5** 11±2.0四妙丸低劑量組（n=8） 888±112.3** 211±133.6△△ 37±5.7** 29±3.4 17±4.1** 9±1.0△

2.2 在給藥期各組大鼠腎臟尿酸排泄指標(biāo)的比較

在給藥期，與正常組大鼠相比，模型組大鼠UUA的水平及24 hUUA的水平均較高，其Cua的水平較低，P＜0.05；與模型組大鼠相比，苯溴馬隆組大鼠24 hUUA的水平及Cua的水平均較高，四妙丸高劑量組大鼠UUA的水平較高，四妙丸中劑量組大鼠UUA的水平及24 hUUA的水平均較高，四妙丸低劑量組大鼠UUA的水平、24 hUUA的水平及Cua的水平均較高，P＜0.05。詳見表2。

表2 在給藥期各組大鼠腎臟尿酸排泄指標(biāo)的比較（± s）

表2 在給藥期各組大鼠腎臟尿酸排泄指標(biāo)的比較（± s）

注：*表示與正常組相比，P＜0.05；**表示與正常組相比，P＜0.01；△表示與模型組相比，P＜0.05；△△表示與模型組相比，P＜0.01。

組別 UUA(μmol/L) 24 hUUA(μg) Cua(mL/h)正常組（n=8） 42.8±35.2 185.6±94.7 0.6±0.21模型組（n=8） 109.6±26.6* 509.4±164.3** 0.3±0.12*苯溴馬隆組（n=8） 349.9±176 1684±737.7△ 1.7±0.51△△四妙丸高劑量組（n=8）165.6±29.8△ 809.1±217.6 0.9±0.45四妙丸中劑量組（n=8）185.8±45.4△ 1130±435.3△ 1.3±0.80四妙丸低劑量組（n=8）207.8±41.0△△ 1282±490.2△ 2.0±0.92△

3 討論

人體內(nèi)超過70%的尿酸經(jīng)腎臟代謝，最后僅有6%～10%的尿酸隨尿液排泄。若出現(xiàn)腎小球?yàn)V過減少、腎小管重吸收或分泌異常，可減少腎臟排泄尿酸的量，進(jìn)而可使人體內(nèi)血尿酸的水平升高。同樣，人體內(nèi)血尿酸的水平較高，可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)皮功能異常、炎癥反應(yīng)、腎小球硬化、腎間質(zhì)性病變、腎損傷等疾病的發(fā)生[4]。本次研究的結(jié)果顯示，在給藥期，與模型組大鼠相比，四妙丸各劑量組大鼠及苯溴馬隆組大鼠SUA的水平均較低，四妙丸低劑量組大鼠BUN的水平較低，苯溴馬隆組大鼠Scr的水平較高，P＜0.05。這一研究結(jié)果提示，為大鼠使用低劑量四妙丸進(jìn)行灌胃，可降低其血尿酸的水平，進(jìn)而可改善其腎功能。此藥改善腎功能的機(jī)制可能與其腎臟有機(jī)陽離子/肉堿轉(zhuǎn)運(yùn)體的表達(dá)有關(guān)[5]。苯溴馬隆雖然具有降低血尿酸水平的作用，但可造成大鼠腎功能損傷。這可能是因?yàn)楸戒羼R隆可使腎臟超負(fù)荷排泄尿酸，導(dǎo)致腎小管中尿酸的濃度過高，使尿酸結(jié)晶堵塞腎小管。本次研究的結(jié)果顯示，在給藥期，與模型組大鼠相比，四妙丸低劑量組大鼠UUA的水平、24 hUUA的水平及Cua的水平均較高，P＜0.05。這一研究結(jié)果提示，四妙丸可促進(jìn)腎臟尿酸的排泄。與用中劑量及高劑量的四妙丸相比，用低劑量的四妙丸對(duì)大鼠進(jìn)行灌胃后其血尿酸的水平更低。該結(jié)果的產(chǎn)生可能與四妙丸的主要成份（小檗堿、藥根堿、牛膝皂苷等）有關(guān)[6-7]。本次研究為高尿酸血癥合并腎功能不全患者提供了新的治療思路。

綜上所述，四妙丸可降低高尿酸血癥大鼠血尿酸的水平，促進(jìn)其腎臟尿酸的排泄,改善其腎功能。