血清維生素B12及維生素E含量與HELLP綜合征發(fā)生的關(guān)系*

薛 潔，郝紹英，馬海英，鄧冉冉

(1.河北省邯鄲市第一醫(yī)院產(chǎn)二科 056001；2.河北省武安市婦幼保健院產(chǎn)一科 056003)

溶血、肝酶升高及血小板減少綜合征(hemolysis，elevated liver enzymes，and low platelets count syndrome，HELLP綜合征)作為一種妊娠期高血壓(hypertensive disorder complicating pregnancy，HDCP)的罕見、嚴(yán)重并發(fā)癥，多數(shù)發(fā)生在產(chǎn)前，以微血管病性溶血、肝酶水平升高和血小板計(jì)數(shù)減低為特征，其典型臨床表現(xiàn)為乏力、右上腹疼痛、惡心嘔吐、體重驟增、脈壓增寬等，其中少數(shù)患者無典型高血壓、蛋白尿等臨床表現(xiàn)[1]，母嬰預(yù)后極差。維生素B12(vitamin B12，VitB12)絕大部分來源于肉類和海產(chǎn)品類，小部分來源于蛋奶及發(fā)酵產(chǎn)品，以輔酶形式參與各種代謝過程，具有促進(jìn)DNA和蛋白質(zhì)合成、維持神經(jīng)組織正常功能的作用，缺乏VitB12會(huì)導(dǎo)致貧血、心臟病、月經(jīng)紊亂、生育與出生缺陷等[2]。有研究認(rèn)為，懷孕期間VitB12缺乏可能是先兆子癇的危險(xiǎn)因素，未來發(fā)生心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)也將提高[3]。維生素E(vitamin E，VitE)又被稱為抗不育維生素，是人體所必需的一種脂溶性維生素，在植物的桿莖、葉、種胚、植物油脂、奶和蛋黃中均存在，VitE能夠促進(jìn)性激素分泌，提高生育能力，并具有預(yù)防流產(chǎn)的作用[4]。有研究認(rèn)為，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加用VitE能夠有效降低血脂濃度，從而改善妊娠結(jié)局[5]。由于VitB12、VitE與HELLP綜合征的相關(guān)研究較少，為豐富研究多樣性，本研究針對(duì)VitB12、VitE在HELLP綜合征患者血清中的含量進(jìn)行分析，以期作為臨床營(yíng)養(yǎng)指導(dǎo)及診斷的輔助參照。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年4月至2019年8月邯鄲市第一醫(yī)院產(chǎn)科收治并確診為HELLP綜合征的孕婦51例作為HELLP組。HELLP組納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合美國Tennessee大學(xué)HELLP綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]；(2)年齡18～45周歲；(3)單胎妊娠；(4)患者病例資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有原發(fā)性高血壓、冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病、急慢性腎炎、糖尿病等病史者；(2)全身感染性疾病或自身免疫性疾病者；(3)精神疾病者；(4)煙酒嗜好者。美國Tennessee大學(xué)HELLP綜合征診斷標(biāo)準(zhǔn)[6]：(1)溶血，外周血涂片可見變形紅、破碎紅細(xì)胞，總膽紅素水平大于或等于20.5 μmol/L，乳酸脫氫酶(LDH)≥600 U/L；(2)肝酶升高：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)或天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)≥70 U/L，LDH升高；(3)血小板減少：血小板計(jì)數(shù)小于100×109/L。以上3項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)均異常者為完全性HELLP綜合征，任意2項(xiàng)指標(biāo)異常者為部分性HELLP綜合征。本研究納入HELLP綜合征所有類型患者。另選取同期邯鄲市第一醫(yī)院收治并確診為HDCP但未發(fā)生HELLP的孕婦62例作為對(duì)照組。本研究中所有患者均由主治以上醫(yī)師明確診斷，研究經(jīng)邯鄲市第一醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有受試者由專業(yè)人員詳細(xì)告知研究?jī)?nèi)容自愿參加，并簽署知情同意書。

1.2 主要儀器與試劑

安捷倫高效液相色譜儀，購自長(zhǎng)沙在線儀器設(shè)備有限公司；Hypersil ODS色譜柱，購自上海熹垣生物科技有限公司；Wealtec紫外可見分光光度計(jì)，購自北京銘泰佳信科技有限公司；Eppendorf小型臺(tái)式高速離心機(jī)，購自上海恒斐生物科技有限公司；Thermo GenPure超純水儀，購自賽默飛世爾科技(中國)有限公司；分析純?nèi)燃淄?、色譜純甲醇均購自沈陽市華東試劑廠；Baomanbio VitB12標(biāo)準(zhǔn)品(貨號(hào)：D1181)、VitE標(biāo)準(zhǔn)品(貨號(hào)：D1187)購自上海寶曼生物科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1標(biāo)本采集

對(duì)照組及HELLP組患者均于入院后第2天晨起空腹取外周靜脈血3 mL，注入生化促凝管，3 000 r/min離心10 min，分離血清后注入EP管，-20 ℃低溫冰箱保存待測(cè)定。

1.3.2血清VitB12、VitE含量檢測(cè)

采用高效液相色譜法(HPLC)檢測(cè)血清VitB12、VitE含量，血清標(biāo)本經(jīng)除蛋白質(zhì)及雜質(zhì)處理后，加入正己烷萃取有效成分，取上清液后充分吹干，待甲醇復(fù)溶后進(jìn)行VitB12、VitE含量測(cè)定，采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控方法判定質(zhì)控結(jié)果是否合格，每批次檢測(cè)標(biāo)本至少雙質(zhì)控。

1.3.3VitB12、VitE提取回收率及其血清含量測(cè)定

參考相關(guān)血清HPLC測(cè)定方法[7]建立血清VitB12、VitE HPLC檢測(cè)方法，血清內(nèi)標(biāo)對(duì)VitB12、VitE的提取回收率分別為(86.41±1.24)%、(73.15±3.67)%。血清VitB12含量在(647.36±325.46)ng/mL，線性關(guān)系較好(r=0.996)；血清VitE含量在(525.61±277.37)ng/mL，線性關(guān)系較好(r=0.994)。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

血清VitB12正常范圍：103～516 pmol/L；VitB12缺乏：<103 pmol/L。血清VitE正常范圍：5.0～20.0 mg/L；VitE缺乏：<5.0 mg/L。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 兩組一般資料比較

兩組受試者年齡、孕周對(duì)比，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與對(duì)照組相比，HELLP組患者收縮壓、舒張壓均明顯升高(P<0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料比較

2.2 兩組血清VitB12及VitE含量比較

HELLP組患者血清VitB12、VitE含量明顯低于對(duì)照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組血清VitB12及VitE含量比較

2.3 HELLP綜合征患者血清中VitB12與VitE含量的相關(guān)性分析

Pearson分析顯示，HELLP綜合征患者血清中VitB12與VitE含量呈正相關(guān)(r=0.606，P<0.05)，見圖1。

圖1 HELLP綜合征患者血清中VitB12與VitE含量的相關(guān)性分析

2.4 血清中VitB12與VitE含量對(duì)HELLP的診斷價(jià)值

ROC曲線顯示，HELLP綜合征患者血清中VitB12診斷HELLP綜合征的ROC曲線下面積(AUC)為0.896[95%CI(0.831,0.960)]，截?cái)嘀禐?74.04 pmol/L，靈敏度為94.9%，特異度為81.0%；VitE診斷HELLP綜合征的AUC為0.878[95%CI(0.815,0.942)]，截?cái)嘀禐?.78 mg/L，靈敏度為94.1%，特異度為69.4%；VitB12與VitE聯(lián)合檢測(cè)診斷HELLP綜合征的AUC為0.919[95%CI(0.863,0.976)]，靈敏度為96.2%，特異度為84.5%，見圖2。

圖2 血清中VitB12、VitE含量對(duì)HELLP綜合征的診斷價(jià)值

3 討 論

隨著我國基本國情及計(jì)劃生育政策的轉(zhuǎn)變，孕產(chǎn)婦數(shù)量增多，相關(guān)孕產(chǎn)疾病所暴露出的問題日益嚴(yán)重，如缺乏規(guī)律產(chǎn)前檢查、營(yíng)養(yǎng)不良或過剩等危害孕產(chǎn)婦健康的狀況頻繁出現(xiàn)，改善孕產(chǎn)婦營(yíng)養(yǎng)攝入狀況一直是相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)，以便于疾病的早期診斷和治療。HELLP綜合征是一種直接威脅母嬰生命安全的并發(fā)癥，病情進(jìn)展迅速，涉及全身多個(gè)重要臟器，目前HELLP綜合征的發(fā)病機(jī)制尚不明確。有學(xué)者認(rèn)為其發(fā)病是在全身小血管痙攣的基礎(chǔ)上發(fā)生血管內(nèi)皮功能失調(diào)及受損，膠原組織被暴露，使凝血功能被激活，血小板激活、聚集，進(jìn)而造成微血管血栓的形成、血管內(nèi)溶血、組織缺血，最終導(dǎo)致肝臟及其他器官受損[7]。李孌英[8]認(rèn)為，HDCP合并HELLP綜合征患者伴有嚴(yán)重的溶血現(xiàn)象，產(chǎn)婦并發(fā)癥、圍生兒并發(fā)癥、早產(chǎn)的發(fā)生率及圍生兒死亡率均較高，因此對(duì)于HDCP合并HELLP綜合征患者要格外重視。

VitB12是人體重要的微量元素，作為輔酶參與細(xì)胞內(nèi)多種反應(yīng)，如在哺乳動(dòng)物體內(nèi)，其參與同型半胱氨酸(Hcy)的合成代謝，Hcy在人體內(nèi)蓄積時(shí)會(huì)引起機(jī)體多系統(tǒng)功能障礙，因此當(dāng)VitB12缺乏或者不足時(shí)會(huì)影響機(jī)體多系統(tǒng)功能[9]。JIANG等[10]將新生兒按照胎兒生長(zhǎng)受限(fetal growth restriction，F(xiàn)GR)率分組，測(cè)量其母親血清VitB12含量、Hcy水平，發(fā)現(xiàn)FGR組VitB12含量降低、Hcy水平升高，VitB12缺乏組FGR發(fā)生率高于VitB12充足組，VitB12缺乏可能增加FGR敏感性。SENOUSY等[11]發(fā)現(xiàn)，與無神經(jīng)管缺損女性相比，妊娠過程中或曾患神經(jīng)管缺損的女性血清VitB12含量降低，這可能是胎兒神經(jīng)管缺損的危險(xiǎn)因素，在葉酸中添加VitB12可能有助于減少埃及人群神經(jīng)管缺陷的發(fā)生率。本研究中HELLP綜合征患者血清中VitB12含量與對(duì)照組相比下降，因此推測(cè)VitB12缺乏或與HELLP綜合征的發(fā)生有關(guān)，VitB12含量降低可能導(dǎo)致母嬰較差的結(jié)局，造成母體多系統(tǒng)功能障礙、胎兒生長(zhǎng)異常、神經(jīng)發(fā)育不健全等結(jié)果，影響母嬰健康。

妊娠期婦女處于特殊生理時(shí)期，機(jī)體及生理系統(tǒng)發(fā)生改變，孕婦及胎兒均需要更多、更豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，以保證母體正常生理功能，并為胎兒正常發(fā)育提供保障，合理補(bǔ)充維生素及其他微量元素必不可少。VitE是人體維持健康所必需的多功能脂溶性化合物，可保持細(xì)胞形態(tài)完整性，提高細(xì)胞抗脂質(zhì)過氧化能力，改善血管內(nèi)皮功能[12]。HDCP患者機(jī)體內(nèi)氧化物含量顯著增加，機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)加劇，VitE可能通過多種途徑保護(hù)血管內(nèi)皮，防止內(nèi)皮受損及功能失常[13]。有研究結(jié)果顯示，子癇前期及高血壓患者血清VitE含量明顯低于正常妊娠婦女，血清VitE含量與子癇前期的發(fā)生有關(guān)，可能是由于自然脂質(zhì)抗氧化劑的消耗造成抗氧化物質(zhì)有所減少[14]。本研究結(jié)果也顯示，HELLP綜合征患者血清中VitE含量與對(duì)照組相比較低，推測(cè)HELLP綜合征的發(fā)生過程中消耗自然脂質(zhì)抗氧化劑，導(dǎo)致抗氧化物質(zhì)VitE減少。HELLP綜合征作為HDCP的嚴(yán)重并發(fā)癥，對(duì)于孕婦機(jī)體是一種強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，HELLP綜合征發(fā)生血管痙攣后紅細(xì)胞出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，使血管內(nèi)皮損傷，推測(cè)VitE含量降低可能是由于HELLP綜合征應(yīng)激消耗VitE，且VitE對(duì)血管內(nèi)皮起到一定的保護(hù)作用。

本研究另行血清VitB12與VitE含量相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)二者呈正相關(guān)，即VitB12含量隨VitE下降而下降，這可能與HELLP綜合征患者長(zhǎng)期攝入蛋、奶等食物不足有關(guān)，也可能是由于在對(duì)抗HELLP綜合征的應(yīng)激反應(yīng)過程中VitB12和VitE均發(fā)生大量消耗，或參與某種對(duì)機(jī)體的保護(hù)機(jī)制。ROC結(jié)果顯示，HELLP綜合征患者血清中VitB12、VitE對(duì)HELLP均具有一定的診斷價(jià)值，其截?cái)嘀捣謩e為174.04 pmol/L、9.78 mg/L，即低于上述截?cái)嘀悼商崾綡ELLP綜合征發(fā)生，有一定預(yù)測(cè)作用，且聯(lián)合診斷價(jià)值更高。

綜上所述，VitB12、VitE在HELLP綜合征患者血清中含量較低，或與HELLP綜合征的發(fā)生有關(guān)，且血清VitB12與VitE含量呈正相關(guān)，并對(duì)HELLP綜合征有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，聯(lián)合診斷價(jià)值更高。本研究也具有一定的缺陷，如樣本量過小、未區(qū)分完全性與部分性HELLP綜合征，導(dǎo)致結(jié)果可能存在一定偏差，可擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步研究。