膽酸類物質(zhì)的檢測方法與臨床應(yīng)用的文獻(xiàn)綜述

張國玉 陳佳樂 宋麗麗

摘要：膽酸是一種固醇，是人類四種主要膽汁酸中含量最豐富的一種，作為牛、羊等動(dòng)物膽汁中的主要有效成分，具有解熱、抗菌、抗炎等作用，它存在于動(dòng)物膽汁中，少數(shù)以游離狀態(tài)存在，大多數(shù)與甘氨酸或?；撬峤Y(jié)合為酰胺，生物體內(nèi)的膽酸是從膽甾醇轉(zhuǎn)化生成的。文章對膽酸類藥物的HPLC分析測定方法以及臨床應(yīng)用進(jìn)行綜合評述。

關(guān)鍵詞：膽酸類;HPLC;臨床應(yīng)用

【中圖分類號】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2107-2306（2021）06-205-01

1 膽酸類物質(zhì)的研究現(xiàn)狀

牛黃的有效成分主要包括膽汁酸、膽紅素、牛磺酸、甘氨酸及多種微量元素等。膽酸類物質(zhì)，如豬去氧膽酸（HDCA）、牛磺熊去氧膽酸 （TUDCA）、熊去氧膽酸 （UDCA）、牛磺酸，都得到了較廣泛的研究和應(yīng)用，發(fā)揮了強(qiáng)大的腦保護(hù)作用[1]，中醫(yī)常把它用于治療口舌生瘡、咽喉腫痛、高熱神昏、驚厥抽搐等病癥[2]，國內(nèi)外以膽酸作為原料的藥物種類繁多，所以研究膽酸類藥物的檢測方法和臨床應(yīng)用具有重要意義。

2 膽酸類成分研究主要成果與存在問題

劉正明等[3]所建立的TLC及HPLC-MS/MS法檢測CA的方法具有簡便、快速、靈敏度高、專屬性好、穩(wěn)定性高等特點(diǎn)，適用于牛羊膽汁中CA的定性及定量測定。已有文獻(xiàn)報(bào)道將液質(zhì)聯(lián)用法應(yīng)用于體外培育牛黃和天然牛黃的測定[4]，但是測定膽汁酸種類少，且未對膽汁酸含量差異做可視化的模式識別分析。

3 膽酸類成分檢測方法的發(fā)展

膽酸的高效液相色譜分析開始于1976年后，隨著HPLC的迅速發(fā)展，在藥物分析和生物分析領(lǐng)域日漸成熟，HPLC法逐漸成為膽汁酸分析的主要方法。?

3.1 膽酸類物質(zhì)的HPLC分析方法

近年來，膽酸藥物的HPLC法分析十分活躍，比如：?；切苋パ跄懰崾切苣懼挠行С煞?，而且僅在熊膽汁酸中含有，是目前發(fā)現(xiàn)的人體內(nèi)親水性最強(qiáng)的膽汁酸 ， 是熊去氧膽酸在膽汁中的生理活性形式。劉小雙等[5]采用高效液相色譜法 （HPLC） 測定?；切苋パ跄懰崮z囊含量 ， 該方法簡便準(zhǔn)確、精密度和重復(fù)性良好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。Genta Kakiyama等[6]采用HPLC方法，用于使用非結(jié)合膽汁酸的苯?；苌餃y量糞便膽汁酸，并將其應(yīng)用于測量肝硬化患者的糞便膽汁酸。

4 膽酸類物質(zhì)的臨床應(yīng)用

熊去氧膽酸（ UDCA） 是名貴中藥熊膽的主要有效成分，主要用于膽結(jié)石、原發(fā)性硬化性膽管炎、病毒性肝炎等多種膽汁淤積性肝病的治療，是美國 FDA 批準(zhǔn)治療原發(fā)性膽汁性肝硬化（ PBC） 的唯一藥物[7]。UDCA 在治療脂肪肝方面上有其獨(dú)特的療效，得到醫(yī)學(xué)界廣泛認(rèn)可。

4.1 熊去氧膽酸治療非酒精性脂肪肝

李有清[8]選取治療的非酒精性脂肪肝患者156例，隨機(jī)分成兩組，觀察組與對照組，對照組采用開展生活方式干預(yù)的方案，觀察組采用生活方式干預(yù)基礎(chǔ)上的熊去氧膽酸治療方案;改變生活方式基礎(chǔ)上的熊去氧膽酸藥物治療，可以使非酒精性脂肪肝患者有效降低 ALT、GGT、三酰甘油水平，改善肝酶學(xué)異常和胰島素抵抗。熊去氧膽酸具有促進(jìn)膽酸分泌、改變?nèi)梭w膽酸池組成、改善脂代謝、促進(jìn)膽固醇排泄與轉(zhuǎn)化;具備抗氧化、保護(hù)細(xì)胞、調(diào)節(jié)免疫力、保護(hù)肝功能的作用，熊去氧膽酸能有效緩解患者臨床癥狀、安全性高、毒副作用小，具有降低血脂、保護(hù)肝細(xì)胞的作用，是非酒精性脂肪肝臨床治療的理想選擇。

4.2 熊去氧膽酸治療妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥

妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥 （ICP） 是一種以膽汁酸及肝臟酶升高，皮膚瘙癢和黃疸為主要特征的妊娠并發(fā)癥[9]。ICP與自發(fā)性和醫(yī)源性早產(chǎn)，胎兒缺氧，胎糞污染的羊水和宮內(nèi)死亡率增加有關(guān)[10]。熊去氧膽酸對 ICP 的治療作用越來越被臨床醫(yī)生所重視，UDCA 為一種無毒、親水性二羥基膽酸化合物，可以減少妊娠期肝內(nèi)膽汁淤積癥婦女的瘙癢和肝功能異常，可以促進(jìn)內(nèi)源性膽汁酸分泌，降低血液和肝細(xì)胞中膽酸的濃度，減輕膽汁淤積 ，抑制內(nèi)源性膽酸在腸道內(nèi)的重新吸收，改善肝功能，從而達(dá)到緩解孕婦癥狀，改善胎兒預(yù)后的作用。研究結(jié)果顯示，輔以熊去氧膽酸治療 ICP 療效確切、明顯改善了孕婦和胎兒的妊娠結(jié)局[11]。

4.3 熊去氧膽酸治療乙型肝炎

肝硬化為臨床常見慢性進(jìn)行性肝病，熊去氧膽酸尚具有保護(hù)肝細(xì)胞膜和改善免疫，抗氧化作用，抑制肝細(xì)胞凋亡[12]。研究表明，對于乙型肝炎肝硬化患者，熊去氧膽酸在治療中應(yīng)用效果確切，可以促進(jìn)患者肝功能、臨床癥狀的改善，療效獨(dú)特，值得臨床使用。

4.4 熊去氧膽酸聯(lián)合用藥

袁淑芳等[13]研究表明，熊去氧膽酸大部藥物成分可被機(jī)體吸收，具有溶解膽固醇結(jié)石、保護(hù)肝細(xì)胞、消除淤膽、結(jié)合其他藥物抵抗病毒等重要作用。在應(yīng)用恩替卡韋強(qiáng)效長期抑制病毒復(fù)制基礎(chǔ)上，加用熊去氧膽酸治療，可明顯改善慢性重型肝炎患者臨床癥狀及肝功能、肝纖維化指標(biāo)（P < 0.05），且治療組改善情況優(yōu)于對照組（P < 0.05）。熊去氧膽酸與恩替卡韋片聯(lián)合用于治療慢性重型肝炎伴膽汁淤積患者，具有保肝、利膽、退黃、降酶協(xié)同作用?？梢赞卓箖?nèi)源性膽汁淤積導(dǎo)致的肝細(xì)胞毒害作用，以延緩甚至逆轉(zhuǎn)肝纖維化進(jìn)程。既能促進(jìn)水腫肝細(xì)胞再生，又增加膽汁的排泄和運(yùn)輸、轉(zhuǎn)化，且沒有嚴(yán)重的不良反應(yīng)，值得臨床進(jìn)一步研究和推廣。

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