紅曲米酒糟對山羊養(yǎng)分消化率、血液抗氧化性能指標(biāo)的影響

許 可,簡仕燕,吳文旋*,陳鑫珠,劉 景,吳佳海(. 貴州大學(xué) 動物科學(xué)學(xué)院/高原山地動物遺傳育種與繁殖教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)研究所/ 新農(nóng)村發(fā)展研究院/貴州省山地畜禽養(yǎng)殖污染控制與資源化技術(shù)工程 實(shí)驗(yàn)室，貴州 貴陽55005；. 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧 獸醫(yī)研究所，福建 福州 500；. 貴州省畜牧獸醫(yī)研究所,貴州 貴陽 550006)

紅曲以粳稻、糯米為原料，經(jīng)紅曲霉發(fā)酵而成，紅曲中的紅曲霉屬子囊菌，能產(chǎn)生耐熱的子囊孢子，能在缺氧、高酸和高鹽濃度下生存[1]。紅曲米酒糟是紅曲米酒釀造的副產(chǎn)物，在我國東南沿海地區(qū)產(chǎn)量巨大、來源穩(wěn)定，被當(dāng)作功能性食品食用。紅曲米典型的代謝產(chǎn)物，如紅曲色素、洛伐他汀、麥角醇及各種酶類等，可改善機(jī)體血液循環(huán)，刺激細(xì)胞代謝和生化過程，使其具有預(yù)防癌癥、降低血糖及抗癌作用[2]，降血脂及預(yù)防動脈粥樣硬化[3]。顧澄琛等[4]研究表明，與同濃度的維生素C相比，紅曲的抗氧化性更好。Agarwal等[5]及Lin等[6]表明，紅曲中的他汀類藥物可以抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的生長，降低結(jié)腸癌的發(fā)病率。Lee等[7]證明紅曲米酒曲提取物可以通過抑制淀粉樣蛋白積累改善腦室內(nèi)淀粉樣蛋白融合大鼠的記憶障礙和學(xué)習(xí)能力。目前有關(guān)紅曲的研究主要集中于其中的功能性物質(zhì)，而在畜禽養(yǎng)殖方面的報(bào)道較少，且集中在禽類[8-9]、鼠類[10]及牛[11]，卻鮮見有關(guān)其在羊飼養(yǎng)效果上的報(bào)道。本課題組前期研究表明，紅曲米酒糟營養(yǎng)豐富，有利于改善山羊體外發(fā)酵狀況[12]及血液脂質(zhì)代謝能力[13]。在此基礎(chǔ)上，本試驗(yàn)研究紅曲米酒糟對山羊飼糧養(yǎng)分消化率、血液生化及抗氧化指標(biāo)的影響，為開發(fā)利用這一非常規(guī)飼料資源提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和應(yīng)用參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

選取28只健康的貴州白山羊?yàn)樵囼?yàn)動物(年齡3～5月齡，體重15.95±4.28 kg)，按照體重基本一致的原則，將其分為4組：對照組、處理Ⅰ組、處理Ⅱ組、處理Ⅲ組，每組7個重復(fù)，每個重復(fù)1只羊。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，不含紅曲米酒糟；處理Ⅰ組、處理Ⅱ組、處理Ⅲ組飼糧分別含10%、20%和30%紅曲米酒糟。各組山羊日糧精粗比均為50:50，山羊基礎(chǔ)飼糧組成與營養(yǎng)水平見表1。

表1 山羊基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Ingredients and nutrients level of diet fed for goats (DM basis)

試驗(yàn)持續(xù)38 d，包括10 d預(yù)飼期，28 d正試期，其中1～14 d為第一階段，15～28 d為第二階段。預(yù)飼期用于觀察試驗(yàn)羊的健康狀況以及飼料的適口性。試驗(yàn)羊單籠獨(dú)立飼養(yǎng)，每天9:00、18:00各飼喂1次。將紅酒糟混勻于精料中配制成精料混合料，與粗料同時投喂，且在采食過程中反復(fù)推料，保證每只羊自由采食，食槽內(nèi)略有余料。試羊自由飲水，保證籠舍光照、干燥通風(fēng)。

1.2 指標(biāo)檢測

1.2.1 養(yǎng)分消化率 采用內(nèi)源指示劑法(AIA法)測定養(yǎng)分消化率。在正試期的最后5 d對每只試羊連續(xù)收糞，取糞樣的10%，加入10%的HCl固氮，65 ℃烘干，粉碎，制成分析試樣，參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[14]測定概略養(yǎng)分含量。GE采用氧彈式熱量計(jì)測定(6400 CALORIMETER, Parr)，CP采用全自動凱氏定氮儀(K1100F，Hanon)測定，NDF及ADF采用Van Soest纖維素分析法(FIBRETHERM automatic system FT12, 德國)測定，AIA采用灼燒法檢測。養(yǎng)分消化率計(jì)算公式如下：

養(yǎng)分消化率(%)=100-100×[飼料中AIA含量(%)/糞中AIA含量(%)]×[糞中養(yǎng)分含量(%)/飼料中養(yǎng)分含量(%)]

1.2.2 血液生化指標(biāo) 在正試期第15天與試驗(yàn)結(jié)束后第1天，使用一次性肝素鈉抗凝血真空采血管，對試羊進(jìn)行空腹頸靜脈采血10 mL，3 000 r/min離心15 min，分離血漿于1.5 mL離心管，用全自動生化分析儀(BS-240VET，Mindray)測定葡萄糖(Glu)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、總蛋白質(zhì)(TP)、白蛋白(ALB)及尿酸(UA)等生化指標(biāo)。試劑盒購自深圳邁瑞公司。

1.2.3 血液抗氧化指標(biāo) 按照試劑盒操作步驟測定血漿抗氧化指標(biāo)谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。試劑盒購自南京建成生物工程研究所，檢測儀器為Thermo酶標(biāo)儀(賽默飛世爾科技有限公司)。

1.3 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)先用Microsoft Excel 2010軟件進(jìn)行初步處理，再用SAS 9.2進(jìn)行重復(fù)測量數(shù)據(jù)方差分析。采用Duncan's法進(jìn)行多重比較，各組間差異顯著性水平定為P<0.05。試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)分消化率

由表2可見，對照組、處理Ⅰ組GE、CP、NDF的消化率均高于處理Ⅱ組、Ⅲ組(P<0.05)。處理Ⅰ組、對照組、處理Ⅱ組、處理Ⅲ組ADF消化率依次降低，差異顯著(P<0.05)。對照組、處理Ⅰ組OM消化率分別比處理Ⅲ組高22.04%、22.42%，差異顯著(P<0.05)。總體來看，處理Ⅰ組養(yǎng)分消化率效果最佳。

表2 紅曲米酒糟對山羊飼糧養(yǎng)分消化率的影響 Table 2 Effects of red yeast rice distillers' grains on nutrients digestibility of goats

2.2 血液生化指標(biāo)

由表3可知，整個試驗(yàn)期，各組間Glu、ALT、AST、TP、ALB濃度差異均不顯著(P>0.05)。

表3 紅酒糟對山羊血液生化指標(biāo)的影響Table 3 Effects of red yeast rice distillers' grains on blood biochemical indexes of goats

2.3 血漿抗氧化指標(biāo)

由表4可知，第14天，各組間GSH-Px濃度差異不顯著(P>0.05)。處理Ⅰ組、對照組、處理Ⅱ組、處理Ⅲ組CAT濃度依次降低，差異顯著(P<0.05)。處理Ⅰ組SOD濃度顯著高于對照組、處理Ⅱ組、處理Ⅲ組(P<0.05)。處理Ⅲ組MDA濃度顯著高于對照組、處理Ⅰ組、處理Ⅱ組(P<0.05)。至第28天，對照組、處理Ⅰ組、處理Ⅱ組、處理Ⅲ組GSH-Px含量依次降低，差異顯著(P<0.05)；處理Ⅰ組>CAT濃度顯著高于處理Ⅲ組(P<0.05)；處理Ⅰ組SOD水平顯著高于對照組(P<0.05)；對照組、處理Ⅲ組MDA含量顯著高于處理Ⅰ組(P<0.05)。

表4 紅酒糟對山羊血液抗氧化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of red yeast rice distillers' grains on blood antioxidant indexes of goats

3 討 論

3.1 紅曲米酒糟對山羊養(yǎng)分消化率的影響

養(yǎng)分消化率是體現(xiàn)動物對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收能力的指標(biāo)。王斌星等[15]和吳小燕等[16]分別以發(fā)酵酒糟、含醬糟的微生物發(fā)酵飼料飼喂藏綿羊和泌乳奶牛，發(fā)現(xiàn)均可提高試驗(yàn)動物的日糧養(yǎng)分消化率。布登付等[17]試驗(yàn)表明，日糧中添加酒糟可顯著提高后備牛CP、NDF和ADF的表觀消化率。Mjoun等[18]的體內(nèi)試驗(yàn)和Kleinschmit等[19]的體外試驗(yàn)結(jié)果均表明，添加酒糟可以顯著提高日糧CP的消化率。本試驗(yàn)結(jié)果表明，與處理Ⅱ組和處理Ⅲ組相比，處理Ⅰ組具有較高的GE、CP及NDF消化率，同時處理Ⅰ組OM消化率高于處理Ⅲ組，均與對照組差異不顯著；相較于對照組、處理Ⅱ組及處理Ⅲ組，處理Ⅰ組的ADF消化率最高，與上述研究結(jié)果一致。這說明適宜的紅曲米酒糟濃度有利于提高飼糧養(yǎng)分消化率，其原因可能與紅曲米酒糟中含有其他益生菌、有機(jī)酸或酶類有關(guān)，這些物質(zhì)可調(diào)節(jié)動物腸道生態(tài)平衡，達(dá)到促進(jìn)飼料消化吸收的效果；而中高濃度組(處理Ⅱ組及處理Ⅲ組)山羊?qū)︷B(yǎng)分的消化率顯著低于低濃度組(處理Ⅰ組)，這可能是山羊體內(nèi)分泌的淀粉酶及麥芽糖酶等消化酶的量不能消化過多的紅曲米酒糟，導(dǎo)致消化底物與酶的不平衡進(jìn)而影響了消化率；另有可能是隨著紅曲米酒糟含量的增加，日糧中除蛋白質(zhì)含量增加外，同時結(jié)構(gòu)性碳水化合物，特別是ADF水平增加，這或許也是消化率降低的原因。將在以后的工作中從瘤胃微生物的適應(yīng)性來深入研究。

3.2 紅曲米酒糟對山羊血液生化指標(biāo)的影響

動物血液生化指標(biāo)能夠反映動物機(jī)體的健康和生理狀況。Glu與動物采食量、機(jī)體營養(yǎng)狀況和應(yīng)激水平密切相關(guān)；ALT和AST是存在于動物肝臟中的氨基轉(zhuǎn)氨酶，可直接反映肝臟的受損狀態(tài)[20]；血漿TP與ALB濃度越高，表明蛋白質(zhì)的合成代謝增強(qiáng)[21]；UA是嘌呤核苷酸分解代謝的產(chǎn)物，可在一定程度上反映腎臟的健康狀況，UA水平高，腎臟易受損。Chang等[22]、Su等[23]研究表明，紅曲可抑制糖尿病大鼠血糖濃度的升高，而本試驗(yàn)結(jié)果顯示山羊各組間Glu含量差異不顯著，這可能與兩個試驗(yàn)物種(大鼠vs.山羊)的血糖代謝途徑差異有關(guān)。鄒廣東等[24]發(fā)現(xiàn)，紅曲提取物制劑-血脂康能使ALT和AST含量下降。張旺宏等[25]研究也表明，5%、10%及15%的發(fā)酵白酒糟能降低育肥豬血漿ALT和AST濃度，提示紅曲可治療脂肪肝。本試驗(yàn)中，試羊的血液ALT和AST水平未受紅曲米酒糟的影響，說明紅曲米酒糟不影響試羊肝臟中的轉(zhuǎn)氨作用，未增加山羊肝臟的負(fù)擔(dān)，體內(nèi)肝臟代謝處于正常狀態(tài)。馬友彪等[26]在肉仔雞的飼糧中添加白酒糟發(fā)酵物，結(jié)果表明各組肉仔雞的血清TP、ALB及UA未發(fā)生顯著變化。王麗等[27]指出，白酒糟添加水平對羔羊TP的影響差異并不顯著。本試驗(yàn)總體結(jié)果顯示，各組血漿TP、ALB水平差異不顯著，表明紅曲米酒糟不影響山羊蛋白質(zhì)的代謝狀況，這得到上述研究結(jié)果的驗(yàn)證。此外，各組試羊試驗(yàn)前期UA濃度均高于試驗(yàn)后期，說明在延長試驗(yàn)周期后，紅曲米酒糟表現(xiàn)出了改善山羊腎臟健康狀況的潛力。

3.3 紅曲米酒糟對山羊血液抗氧化指標(biāo)的影響

血液中GSH-Px、CAT、SOD與MDA常用來衡量機(jī)體的抗氧化能力。GSH-Px能清除體內(nèi)過量的氧自由基，以減輕細(xì)胞的氧化損傷，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的完整性；SOD可清除體內(nèi)超氧陰離子自由基，也是參與轉(zhuǎn)換氧自由基的過氧化物酶，平衡機(jī)體氧化與抗氧化反應(yīng)；MDA是自由基作用于脂質(zhì)后發(fā)生過氧化反應(yīng)的終產(chǎn)物，反映脂質(zhì)過氧化的強(qiáng)度和膜系統(tǒng)損害的程度；CAT則主要參與活性氧的代謝過程。涂璐等[28]研究發(fā)現(xiàn)，燕麥紅曲酒中的總多酚和抗氧化活性比糯米黃酒更高；胡均亮[29]通過對紅曲酒抗氧化活性的研究得出，紅曲中含有如多酚類、黃酮等多種抗氧化物質(zhì)，這些物質(zhì)可以清除氧自由基的傷害；陸方菊等[30]報(bào)道，紅曲酒的總抗氧化能力和自由基清除能力可隨著紅曲米添加量的增大而增大；張紅林等[31]指出，古田紅曲米的抗氧化活性較強(qiáng)，以及古田紅曲相關(guān)提取物的抗氧化性也較好。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著紅曲米酒糟水平的增加，血漿中MDA濃度也增加，但處理Ⅰ組在14 d和28 d MDA濃度與對照組差異不顯著，說明紅曲米酒糟可提高試羊血漿抗氧化能力，這可能與紅曲米酒糟內(nèi)含有維生素C、維生素E、鋅和硒等具抗氧化物質(zhì)有關(guān)[32]。總體分析，結(jié)合CAT、SOD來看，日糧含10%(處理Ⅰ組)紅曲米酒糟處理效果最佳。

4 結(jié) 論

在本研究條件下，以飼喂10%水平組的紅曲米酒糟效果最好。在此水平下，可有效提高山羊養(yǎng)分消化率，改善血液生化指標(biāo)，增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。