響應(yīng)面法優(yōu)化當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯提取工藝研究

張瑜 李欠 黃翔 馮彥梅 楊蘭 邱黛玉

摘 要： 為優(yōu)化中藥材當(dāng)歸中主要活性成分阿魏酸和藁本內(nèi)酯同時(shí)提取的最佳工藝條件，該文以超聲波輔助響應(yīng)面優(yōu)化當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯提取工藝，采用氫核磁共振定量方法同時(shí)測(cè)定當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯的含量。優(yōu)化工藝以阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量的綜合評(píng)分為考察指標(biāo)，選取乙醇濃度、提取時(shí)間、液料比三個(gè)主要因素，采用單因素篩選結(jié)合Box-Behnken中心組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝參數(shù)。結(jié)果表明：優(yōu)化的最佳提取工藝條件為乙醇濃度80.87%，液料比13.04 mL·g-1，提取時(shí)間30.14 min，驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果與預(yù)測(cè)值一致。氫核磁共振定量方法以氘代二甲基亞砜為測(cè)試溶劑，吡嗪為內(nèi)標(biāo)物，其中吡嗪、阿魏酸和藁本內(nèi)酯的定量共振峰分別為δ 8.66 ppm、δ 6.37～6.35 ppm和δ 5.55～5.53 ppm。該方法的精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性和加標(biāo)回收率良好，定量限和檢測(cè)限較低，能夠滿足實(shí)際分析測(cè)試需要。綜上所述，利用響應(yīng)面法對(duì)提取工藝條進(jìn)行優(yōu)化，實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性良好，適用于當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯的同時(shí)提取;氫核磁共振定量方法操作簡(jiǎn)單、分析速度快、專屬性強(qiáng)，可用于當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯的同時(shí)測(cè)定。

關(guān)鍵詞： 提取工藝， 當(dāng)歸， Box-Behnken響應(yīng)面法， 氫核磁共振

中圖分類號(hào)： Q946 ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A ?文章編號(hào)： 1000-3142（2021）07-1188-08

Abstract： In order to optimize the optimum technological conditions for the simultaneous extraction of ferulic acid and ligustilide， the extraction process of ferulic acid and ligustilide from A. sinensis were optimized by ultrasonic assisted response surface. Taking the comprehensive score of ferulic acid and ligustilide content as the evaluation index and the ethanol concentration， extraction time and liquid-to-solid ratio were selected as the three main factors， and the contents of ferulic acid and ligustilide in A. sinensis were determined by 1H-qNMR. Single factor screening combined with Box-Behnken central combination design test was used to optimize the parameters of extraction process. The single-factor screening results showed that a high comprehensive score was obtained under the three conditions of 80% ethanol concentration， liquid-to-solid ratio was 12 mL·g-1， or 30 min extraction duration. Based on this， the Behnken center combination design test was designed and implemented. The results showed that the influence degree of each experimental factor on the comprehensive score was the ethanol concentration， the liquid-to-solid ratio was the second， and the extraction time was the least. The best optimum extraction conditions were as follows： ethanol concentration was 80.87%， liquid-to-solid ratio was 13.04 mL·g-1， extraction duration was 30.14 min. The verification test results were consistent with the predicted values. The quantitative resonance peaks of pyrazine， ferulic acid and ligustilide were δ 8.66 ppm， δ 6.37-6.35 ppm and δ 5.55-5.53 ppm， respectively， using DMSO-d6 as solvent and pyrazine as internal standard substance by 1H-qNMR. The precision， stability， repeatability and recovery of the method were good， and the limits of quantification and detection were low， which can meet the needs of practical analysis and testing. To sum up， the optimization method of response surface method was used to optimize the extraction process， the experimental results were accurate and reliable， good reproducibility， and suitable for the simultaneous extraction of ferulic acid and ligustilide in A. sinensis. The 1H-qNMR method had the advantages of simple operation， fast analysis speed and strong specificity， and could be used for the simultaneous determination of ferulic acid and ligustilide in A. sinensis.

Key words： extraction process， Angelica sinensis， Box-Behnken response surface method， 1H-qNMR

中藥材當(dāng)歸是傘形科當(dāng)歸屬植物當(dāng)歸（Angelica sinensis）的干燥根（國(guó)家藥典委員會(huì)，2015），具有補(bǔ)血活血、調(diào)經(jīng)止痛、潤(rùn)腸通便的作用，是我國(guó)臨床最常用中藥之一（國(guó)家藥典委員會(huì)，2015;董晴和陳明蒼，2016）。當(dāng)歸中主要含有的生物活性成分有揮發(fā)油、有機(jī)酸類、多糖以及黃酮等（周桂生等，2012;趙雪嬌等，2013）。其中，阿魏酸是當(dāng)歸中有機(jī)酸類的代表，屬于較早分離出來(lái)的有效成分之一（趙雪嬌等，2013）。揮發(fā)油在當(dāng)歸中含量約為1%，是當(dāng)歸的重要有效成分之一，其中以藁本內(nèi)酯含量為最高。2015年版《中國(guó)藥典》以阿魏酸的含量測(cè)定和其他常規(guī)鑒別項(xiàng)目作為當(dāng)歸質(zhì)量控制的手段和指標(biāo)（國(guó)家藥典委員會(huì)，2015），而對(duì)藁本內(nèi)酯含量并未作出明確規(guī)定。

近年來(lái)，響應(yīng)面法和氫核磁定量方法分別在中藥有效成分的提取和含量測(cè)定方面得以廣泛應(yīng)用（Xu et al.，2013;林珊等，2014;王志偉等，2016;趙昱瑋等，2016;高偉等，2017;Tanaka et al.，2019;戶憲珍等，2019;黃翔等，2019;Sun et al.，2017;王紅等，2019;周吉等，2019）。氫核磁定量方法測(cè)試時(shí)間非常短（2～5 min即可完成），特征峰化學(xué)位移在不同儀器之間重現(xiàn)性好，且定量過(guò)程中不需使用對(duì)照品，通過(guò)廉價(jià)易得的內(nèi)標(biāo)物即可完成定量，可以有效降低成本（林珊等，2014;王志偉等，2016;高偉等，2017;Tanaka et al.，2017）。響應(yīng)面優(yōu)化提取方法與常用的正交實(shí)驗(yàn)法相比具有很多優(yōu)點(diǎn)：響應(yīng)面法的實(shí)驗(yàn)次數(shù)相對(duì)較少，檢測(cè)精確度高，預(yù)測(cè)的函數(shù)模型相對(duì)準(zhǔn)確，因其能夠準(zhǔn)確地反映實(shí)驗(yàn)因素和預(yù)測(cè)結(jié)果之間關(guān)系而得以廣泛應(yīng)用（Xu et al.，2013;趙昱瑋，2016;Sun et al.，2017; 戶憲珍等，2019;黃翔等，2019;王紅等，2019;周吉等，2019）。本文以阿魏酸和藁本內(nèi)酯成分含量的綜合評(píng)分為響應(yīng)值，使用Design-Expert 10.0.4.0軟件進(jìn)行試驗(yàn)設(shè)計(jì)，優(yōu)化當(dāng)歸提取工藝，為當(dāng)歸應(yīng)用和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料和儀器

對(duì)照品阿魏酸（批號(hào)：FD170255）購(gòu)自薩恩化學(xué)技術(shù)有限公司;藁本內(nèi)酯購(gòu)自北京庫(kù)來(lái)搏科技有限公司，純度>98%;吡嗪購(gòu)自上海麥克林生化科技有限公司;DMSO-d6（氘代純度，99.9%）購(gòu)自薩恩化學(xué)技術(shù)有限公司。當(dāng)歸藥材購(gòu)自甘肅岷縣經(jīng)甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)中藥學(xué)教研室邱黛玉副教授鑒定為中藥當(dāng)歸。

核磁共振波譜儀（Bruker Advance Ⅲ 600），AL-104電子分析天平（慈溪市天東衡器廠）、KQ-500B超聲波清洗儀（深圳市得康科技有限公司）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀R-101N（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）、恒溫水浴鍋（江蘇正基有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 氫核磁共振測(cè)試條件 DMSO-d6為測(cè)試溶劑，吡嗪為內(nèi)標(biāo)物。吡嗪、阿魏酸和藁本內(nèi)酯的定量共振峰分別為δ 8.66、δ 6.37～6.35 ppm、δ 5.55～5.53 ppm。

采用zg30脈沖序列，譜寬（SWH）為11 904.8 Hz，弛豫時(shí)間（D1）為1 s，脈沖寬度（P1） 14.90 s，樣品掃描次數(shù)（NS） 32次。所有數(shù)據(jù)均使用MestReNova軟件處理。

1.2.2 溶液的制備 內(nèi)標(biāo)溶液的制備：準(zhǔn)確稱取19.70 mg內(nèi)標(biāo)物吡嗪溶解至3.94 mL DMSO-d6中，制得5.00 mg·mL-1內(nèi)標(biāo)溶液，作為用于1H-qNMR樣品定量的內(nèi)標(biāo)樣品;準(zhǔn)確稱取7.50 mg內(nèi)標(biāo)物吡嗪溶解至0.75 mL DMSO-d6中，制得10.00 mg·mL-1內(nèi)標(biāo)溶液，作為用于線性關(guān)系考察時(shí)1H-qNMR定量的內(nèi)標(biāo)樣品。

對(duì)照品溶液的制備：準(zhǔn)確稱取22.00 mg阿魏酸對(duì)照品溶解至2 mL DMSO-d6溶液中，制得11.00 mg·mL-1阿魏酸對(duì)照品溶液;準(zhǔn)確稱取59.00 mg藁本內(nèi)酯對(duì)照品溶解至2 mL DMSO-d6溶液中，制得29.50 mg·mL-1藁本內(nèi)酯對(duì)照品溶液備用。

當(dāng)歸提取物的制備：取藥材粉末（過(guò)40目篩）約10.00 g，精密稱定，置于容量瓶中，加入90%乙醇100 mL，超聲處理（40 min，40 ℃），抽濾，重復(fù)2次，合并濾液，于50 ℃減壓回收溶劑至無(wú)醇味，用2倍量乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯，于70 ℃ 水浴上旋干得粗浸膏并稱重。

供試品溶液的制備：取上述浸膏20 mg，精密稱定，加內(nèi)標(biāo)溶液吡嗪50 μL（吡嗪19.70 mg，溶于3.94 mL DMSO-d6），再加入450 μL DMSO-d6，超聲溶解，移置核磁管，用于氫核磁共振法測(cè)定（圖1）。

1.2.3 方法學(xué)考察

1.2.3.1 線性關(guān)系考察 取“1.2.2”項(xiàng)下對(duì)照品儲(chǔ)備液400、200、100、50、25和13 μL裝入核磁管，加入內(nèi)標(biāo)溶液吡嗪50 μL（吡嗪7.5 mg，溶于0.75 mL DMSO-d6），再依次加入DMSO-d6 50、250、350、400、425、437 μL，即得8.80、4.40、2.20、1.10、0.550、0.286 mg·mL-1阿魏酸對(duì)照品溶液和23.6、11.8、5.90、2.95、1.48、0.767 mg·mL-1藁本內(nèi)酯對(duì)照品溶液系，進(jìn)行1H-NMR測(cè)定。

1.2.3.2 精密度考察 取“1.2.2”項(xiàng)下對(duì)照品溶液，按“1.2.1”項(xiàng)下核磁條件，重復(fù)測(cè)定5次，以對(duì)照品定量峰面積與內(nèi)標(biāo)物定量峰面積的比值計(jì)算阿魏酸和藁本內(nèi)酯的RSD值。

1.2.3.3 重復(fù)性試驗(yàn) 平行制備6份供試品溶液，在同一實(shí)驗(yàn)條件下測(cè)定，以樣品定量峰面積與內(nèi)標(biāo)物定量峰面積的比值計(jì)算阿魏酸和藁本內(nèi)酯的RSD值。

1.2.3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 將供試品溶液在室溫下放置，時(shí)間分別為0、2、4、8、10、12、24 h，然后進(jìn)行穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)測(cè)定，以樣品定量峰與內(nèi)標(biāo)物定量峰面積比值計(jì)算阿魏酸和藁本內(nèi)酯的RSD值。

1.2.3.5 加樣回收率試驗(yàn) 制備5份已知含量的當(dāng)歸藥材樣品浸膏供試液，分別加入藁本內(nèi)酯和阿魏酸對(duì)照品DMSO-d6溶液，按照“1.2.1”項(xiàng)下的條件測(cè)定，計(jì)算回收率和RSD值。

1.2.4 檢出限和定量限 1H-qNMR檢出限（LOD）和定量限（LOQ）可由LOD=3.3 σ/S，LOQ=10 σ/S計(jì)算得出（σ指回歸線的剩余標(biāo)準(zhǔn)差，S指非零截距線性回歸曲線斜率）。

1.2.5 樣品含量測(cè)定 按“1.2.2”項(xiàng)下“供試品溶液制備”方法平行制備試驗(yàn)樣品溶液2份，并按照“1.2.1”項(xiàng)核磁共振測(cè)試條件下進(jìn)行重復(fù)測(cè)定2次，計(jì)算樣品的含量平均值。

1.2.6 數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理 按照標(biāo)準(zhǔn)化處理公式，將單因素試驗(yàn)結(jié)果和響應(yīng)面試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理，最終得到2種指標(biāo)成分的綜合評(píng)分。

1.2.7 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì) 以藁本內(nèi)酯和阿魏酸2種成分提取含量作為綜合評(píng)分的考察指標(biāo)，分別考察提取溶劑乙醇濃度、提取時(shí)間和液料比三個(gè)因素對(duì)藁本內(nèi)酯和阿魏酸提取率的影響。

1.2.8 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì) 以上述優(yōu)化后的各單因素值為基礎(chǔ)，通過(guò)Design-Expert 10.0.4.0軟件Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計(jì)，對(duì)乙醇濃度、液料比、提取時(shí)間3個(gè)因素結(jié)果進(jìn)一步優(yōu)化，重復(fù)試驗(yàn)，并進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法學(xué)考察

2.1.1 線性關(guān)系考察 分別以對(duì)照品的積分面積X與對(duì)照品溶液濃度Y做線性回歸，得出回歸方程分別為阿魏酸Y=7.007X+0.016，R2=0.999，線性范圍0.286～8.80 mg·mL-1;藁本內(nèi)酯Y=7.223X+0.211，R2=0.999，線性范圍0.767～23.6 mg·mL-1。A. 吡嗪; B. 阿魏酸對(duì)照品; C. 藁本內(nèi)酯對(duì)照品; D. 當(dāng)歸提取物; 1. 阿魏酸定量峰; 2. 藁本內(nèi)酯定量峰; δ=8.66為內(nèi)標(biāo)物吡嗪定量峰。

2.1.2 精密度考察 以對(duì)照品定量峰面積與內(nèi)標(biāo)物定量峰面積的比值計(jì)算阿魏酸和藁本內(nèi)酯的RSD值分別為1.41%、0.34%。表明儀器精密度良好。

2.1.3 重復(fù)性試驗(yàn) 以樣品定量峰面積與內(nèi)標(biāo)物定量峰面積的比值計(jì)算阿魏酸和藁本內(nèi)酯的RSD值分別為1.50%、1.54%，表明該方法具有良好的重復(fù)性。

2.1.4 穩(wěn)定性試驗(yàn) 以樣品定量峰與內(nèi)標(biāo)物定量峰面積比值計(jì)算阿魏酸和藁本內(nèi)酯的RSD值分別為2.21%、1.62%，表明供試品溶液24 h穩(wěn)定。

2.1.5 加樣回收率試驗(yàn) 阿魏酸和藁本內(nèi)酯的回收率分別為95.2%～102.3% （ RSD=2.91% ）和97.7%～103.7% （RSD=2.41% ），平均回收率分別為98.6%和100.24%，加樣回收率良好。

2.2 檢出限和定量限

計(jì)算得出：阿魏酸LOD=21.11 μg·mL-1，LOQ=63.97 μg·mL-1;藁本內(nèi)酯LOD=58.76 μg·mL-1，LOQ=178.07 μg·mL-1。

2.3 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表1為單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)方案，平行提取3次。表2為數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理結(jié)果。從表2可以看出，綜合評(píng)分隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增大先上升隨后開始降低。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為80%左右時(shí)，綜合評(píng)分達(dá)到最高值，表明此時(shí)阿魏酸和藁本內(nèi)酯溶解度最大，因此選擇80%乙醇體積分?jǐn)?shù)作為最優(yōu)選擇。液料比在大于12 mL·g-1后，綜合評(píng)分變化趨于平緩，表明溶劑中阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量趨于平穩(wěn)，最佳液料比為12 mL·g-1時(shí)即可溶出大部分有效成分。綜合評(píng)分在10～30 min時(shí)逐漸增大，30 min左右趨于穩(wěn)定，40 min以后綜合評(píng)分有少許下降，因此30 min為最優(yōu)超聲時(shí)間。

2.4 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.4.1 響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案 以乙醇濃度（A）、液料比（B）、提取時(shí)間（C）作為該響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的三個(gè)自變量，以阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量的綜合評(píng)分作為響應(yīng)值（R），采用Box-Behnken方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案和結(jié)果見表3。

2.4.2 模型顯著性分析 本研究采用Design-Expert 10.0.4.0軟件對(duì)表3中數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，經(jīng)擬合得到回歸方程為R=2.09+0.47 A+0.13 B+0.19 C-0.12 AB+0.44 AC-0.38 BC-3.29 A2-0.73 B2-0.43 C2，調(diào)整系數(shù)為0.992 7，決定系數(shù)（r2）=0.996 8，表明回歸方程擬合度好，實(shí)驗(yàn)誤差小，此模型可用于該實(shí)驗(yàn)的分析。

表4為方差分析和顯著性檢驗(yàn)結(jié)果，結(jié)果說(shuō)明乙醇濃度、液料比、提取時(shí)間和乙醇濃度與液料比、提取時(shí)間與液料比的交互作用對(duì)綜合評(píng)分有顯著的影響。各實(shí)驗(yàn)因素對(duì)綜合評(píng)分影響順序?yàn)橐掖紳舛龋ˋ）>液料比（C）>提取時(shí)間（B）。

2.4.3 最佳提取工藝參數(shù)預(yù)測(cè)及實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 通過(guò)圖2可知，乙醇濃度與液料比、 乙醇濃度與提取時(shí)間的3D曲面圖的傾斜度較高，說(shuō)明因素間交互作用顯著，對(duì)當(dāng)歸中兩種有效成分提取的影響較顯著。以阿魏酸和藁本內(nèi)酯兩種成分評(píng)分最大值為目標(biāo)，由軟件分析，得出這兩種指標(biāo)成分的最佳提取條件為乙醇濃度80.87%，液料比13.04 mL·g-1，提取時(shí)間30.14 min。為了方便實(shí)際操作，將提取條件參數(shù)進(jìn)行合理修正：乙醇濃度81%，液料比13 mL·g-1，提取時(shí)間30 min，重復(fù)提取3次進(jìn)行驗(yàn)證，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表5所示，綜合評(píng)分的平均值為2.20，與預(yù)測(cè)值2.14相差2.80%，說(shuō)明該實(shí)驗(yàn)方法準(zhǔn)確度高，穩(wěn)定可靠，可用于當(dāng)歸中2種成分的含量測(cè)定。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)使用不同濃度的乙醇和甲醇分別對(duì)當(dāng)歸粉末進(jìn)行提取，研究發(fā)現(xiàn)采用乙醇提取制備的浸膏中阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量均比甲醇高，且由于乙醇毒性較小，更加綠色環(huán)保，適應(yīng)于工業(yè)化生產(chǎn)，所以選擇乙醇作為提取溶劑。

氘代溶劑和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的選擇：合適的氘代溶劑對(duì)樣品和內(nèi)標(biāo)均應(yīng)具有良好的溶解性。內(nèi)標(biāo)應(yīng)具有一個(gè)易于識(shí)別且不與待測(cè)峰重疊的譜峰。通過(guò)文獻(xiàn)比較和篩選實(shí)驗(yàn)，選擇廉價(jià)易得、性質(zhì)穩(wěn)定、不與待測(cè)物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)、不與待測(cè)物的譜峰重疊的吡嗪作為內(nèi)標(biāo)物，其氫核磁峰在8.66 ppm;此外，DMSO-d6能夠很好地溶解待測(cè)樣品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，且不與其他峰重疊，因此選擇DMSO-d6為溶劑。

本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)乙醇濃度、液料比、提取時(shí)間三個(gè)因素進(jìn)行考察，結(jié)果顯示這三個(gè)單因素對(duì)當(dāng)歸藥材中阿魏酸和藁本內(nèi)酯兩種成分同時(shí)提取有較大影響，并結(jié)合Box-Behnken中心組合設(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)行提取工藝優(yōu)化，優(yōu)選出最佳提取工藝，為當(dāng)歸的有效開發(fā)利用提供參考。

目前當(dāng)歸中有效成分含量測(cè)定主要采用HPLC法，其具有流動(dòng)相配備復(fù)雜、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)、使用對(duì)照品等缺點(diǎn)。氫核磁共振定量法具有檢測(cè)速度快，準(zhǔn)確性高，重現(xiàn)性好，無(wú)需昂貴的對(duì)照品，僅用少量廉價(jià)的內(nèi)標(biāo)物質(zhì)即可同步對(duì)多種成分進(jìn)行含量測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于中藥有效成分含量的測(cè)定（林珊等，2014;王志偉等，2016;Tanaka et al.，2017）。本研究采用氫核磁共振法同時(shí)測(cè)定當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量，可以有效地降低成本，并且整個(gè)檢測(cè)過(guò)程在3 min左右即可完成。

4 結(jié)論

本文以中藥當(dāng)歸為研究對(duì)象，以氫核磁定量方法測(cè)定當(dāng)歸提取物中阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量，以阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量的綜合評(píng)分為考察指標(biāo)，采用單因素篩選結(jié)合Box-Behnken中心組合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝參數(shù)，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：

（1）當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯的最佳提取工藝為乙醇濃度80.87%，液料比13.04 mL·g-1，提取時(shí)間30.14 min，在此條件下，2種成分提取綜合評(píng)分為2.14。

（2）在最佳提取工藝條件下，測(cè)得當(dāng)歸中阿魏酸和藁本內(nèi)酯含量分別為1.07 mg·g-1和6.98 mg·g-1，且該工藝條件操作簡(jiǎn)單，重復(fù)性好，對(duì)當(dāng)歸中有效成分提取有一定的參考價(jià)值。

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（責(zé)任編輯 李 莉）