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    綠豆芽防褐變技術(shù)的研究進(jìn)展

    2021-09-12 10:34:22閆星羽陳存坤薛文通
    食品研究與開發(fā) 2021年14期
    關(guān)鍵詞:綠豆芽褐變抗壞血酸

    閆星羽,陳存坤,薛文通*

    (1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與營(yíng)養(yǎng)工程學(xué)院,北京 100083;2.國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心(天津),天津 300384)

    豆類種子在一定條件下浸水發(fā)芽形成豆芽,也稱豆芽苗、芽菜等。豆芽具有良好的抗氧化能力,口感多汁清脆,深受廣大消費(fèi)者的喜愛。研究表明,綠豆種子發(fā)芽后其活性物質(zhì)如酚類和黃酮類化合物的含量顯著提高[1]。多酚類化合物具有良好的清除體內(nèi)自由基、抗氧化以及抗癌等特性[2],因此提高豆類發(fā)芽過程中多酚類化合物的含量,成為豆類科研領(lǐng)域中的一項(xiàng)熱門研究。提高綠豆芽中總酚的含量的確會(huì)增加綠豆芽的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和可食用價(jià)值,但是這些研究同樣也會(huì)帶來一些問題。例如,綠豆芽具有高含水量、低組織強(qiáng)度等特點(diǎn),在貯藏過程中容易出現(xiàn)微生物污染、褐變以及失水皺縮等不良反應(yīng),因此本文將對(duì)褐變的機(jī)理、褐變對(duì)綠豆芽的影響以及綠豆芽防褐變技術(shù)的研究現(xiàn)狀等進(jìn)行分析和闡述,以期對(duì)綠豆芽防褐變技術(shù)的相關(guān)研究提供一定的理論參考。

    1 綠豆芽概述

    1.1 綠豆芽的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值

    綠豆是一種富含淀粉、纖維素、蛋白質(zhì)、鉀、鈣、鋅、鐵、鎂、硒等多種營(yíng)養(yǎng)素和黃酮類化合物的豆科植物[3]。綠豆具有生長(zhǎng)周期短,適應(yīng)能力強(qiáng),播種次數(shù)多,抗逆性好等優(yōu)點(diǎn),在我國(guó)有幾千年的栽培史,具有清熱解毒,消暑利尿的功效[4]分。此外國(guó)內(nèi)外許多研究發(fā)現(xiàn),綠豆還具有抗腫瘤、保護(hù)肝臟、降血脂、降血糖以及抗氧化[5-6]的功能特性,而且這些功能特性都與綠豆中的多酚類化合物相關(guān)。

    綠豆芽是綠豆在適宜條件下萌發(fā)而成的幼嫩芽苗菜,可食用部分主要是下胚軸。綠豆發(fā)芽后不僅外觀會(huì)發(fā)生變化,其內(nèi)部營(yíng)養(yǎng)成分也會(huì)發(fā)生變化。綠豆發(fā)芽期間組織內(nèi)的蛋白質(zhì)、淀粉等大分子物質(zhì)會(huì)降解形成氨基酸和多糖等易于吸收的小分子物質(zhì),同時(shí)多酚類化合物含量增多,并釋放許多原綠豆中沒有的新物質(zhì),如維生素C[7]等。萌芽后的綠豆顯然比沒有萌芽的綠豆更具營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,產(chǎn)生許多次生代謝產(chǎn)物[8],功能性成分如多肽、酚類、左旋多巴、γ-氨基丁酸等的含量上升,長(zhǎng)期食用綠豆芽具有清熱除濕、防止冠心病、保護(hù)血管及皮膚、增強(qiáng)免疫力等功效[7-9]。此外,這些在萌芽過程中新產(chǎn)生、新合成的物質(zhì)往往都具有更為顯著的生物活性,因此不僅在食品領(lǐng)域中廣受歡迎,而且在醫(yī)學(xué)、制藥、化妝品等領(lǐng)域也有廣泛的應(yīng)用。綠豆發(fā)芽前后5 d的主要營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)比見表1[10]。

    表1 綠豆發(fā)芽前后營(yíng)養(yǎng)成分對(duì)比Table 1 Comparison of nutritional components of mung bean before and after germination

    1.2 綠豆芽的研究進(jìn)展

    隨著人們生活水平提高和對(duì)營(yíng)養(yǎng)健康食品的追求,綠豆芽及其加工產(chǎn)物因具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值受到消費(fèi)者的廣泛關(guān)注。綠豆在浸水萌芽的過程中原有的胰蛋白抑制素、植酸、單寧等有害成分在酶的作用下被除去,更多的鈣、磷、鐵等礦物質(zhì)被釋放出來[1,11],酚類化合物、維生素和纖維素類化合物含量顯著升高[5],使得綠豆芽具有更高的生物價(jià)值。目前已有多位學(xué)者對(duì)綠豆芽萌芽過程中產(chǎn)生的微量元素或者生物活性物質(zhì)的富集進(jìn)行研究,以增強(qiáng)綠豆芽的保健功能和利用價(jià)值。

    CEVALLOS-CASALS等[12]對(duì)綠豆、蠶豆等13種可食種子在萌芽過程中多酚化合物含量及活性的變化進(jìn)行分析研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)發(fā)芽后13種種子的活性物質(zhì)及抗氧化活性均有提高。EBERT等[13]比較了多種改良品種的成熟綠豆谷物和其綠豆芽中的植物營(yíng)養(yǎng)素水平,結(jié)果表明,與成熟綠豆谷物相比,發(fā)芽綠豆中維生素C的含量提高了2.7倍,異黃酮的含量和抗氧化性也有明顯提升。AMITRANO等[14]在不同光照和濕度下培養(yǎng)綠豆芽,通過分析其抗氧化性、可溶性糖和淀粉含量,發(fā)現(xiàn)相對(duì)低的濕度和光照下會(huì)改善綠豆芽的水分傳輸并提升抗氧化性。Alkaltham等[15]研究了發(fā)芽和加熱對(duì)綠豆的生物活性、酚類化合物和礦物質(zhì)含量的影響,結(jié)果表明,熱處理是改變綠豆芽中酚類含量的主要原因,短期微波加熱處理的綠豆發(fā)芽后酚類化合物的含量會(huì)明顯增加,抗氧化性活性較好,烘焙處理則會(huì)導(dǎo)致發(fā)芽綠豆中總黃酮含量和抗氧化性活性顯著降低。Zhou等[16]在綠豆發(fā)芽的過程中添加外源亞精胺和二環(huán)己胺,增加了綠豆芽中總酚和抗壞血酸的含量,增強(qiáng)抗氧化系統(tǒng),改善能量代謝,提高了綠豆芽的功能性。AMPOFO等[17]利用超聲波輔助誘導(dǎo)豆類種子發(fā)芽,結(jié)果表明,超聲波輔助誘導(dǎo)發(fā)芽會(huì)增加豆芽?jī)?nèi)部酚類物質(zhì)含量和抗氧化能力,可以作為一種綠色的方法來生產(chǎn)富含酚類的有機(jī)營(yíng)養(yǎng)豆芽。孟君等[18]以黃豆、綠豆為原料,通過單因素和正交試驗(yàn)考察黃豆和綠豆發(fā)芽過程中的富硒能力,試驗(yàn)表明,黃豆和綠豆在發(fā)芽過程中對(duì)不同濃度的硒元素都有一定的富集作用,且綠豆芽的富硒能力強(qiáng)于黃豆芽。史鈾等[19]以豆芽為載體,通過豆類發(fā)芽的過程使無機(jī)鐵、鋅轉(zhuǎn)換為有機(jī)鐵、鋅。在發(fā)芽之前通過控制培養(yǎng)基添加劑的方式形成高鐵和高鋅豆芽,使豆芽成為一種更容易被人們接受的鐵源和鋅源,為鋅、鐵微量元素缺乏癥的治療與預(yù)防提供新的治療手段。

    2 綠豆芽褐變研究進(jìn)展

    2.1 褐變概述

    2.1.1 褐變機(jī)理

    褐變現(xiàn)象從本質(zhì)上可分為酶促褐變和非酶促褐變兩種。酶促褐變是指在酶的作用下發(fā)生的褐變作用,主要發(fā)生在水果、蔬菜等新鮮植物性食物中。其發(fā)生機(jī)制是多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)在有氧條件下把酚類化合物氧化生成醌,醌類物質(zhì)進(jìn)一步聚合形成難溶的黑褐色高分子聚合物[20],機(jī)理見圖1[21]。此外,根據(jù)酶促褐變發(fā)生所需要的時(shí)間,又可以把酶促褐變分成立即型和延遲型[21]。立即型酶促褐變既是指如蘋果制成蘋果汁后會(huì)立刻生成褐色的現(xiàn)象,或者切碎的蘋果在空氣中放置數(shù)分鐘內(nèi)發(fā)生的褐變。與此相反,延遲型酶促褐變就是指需要幾天甚至更長(zhǎng)時(shí)間才會(huì)出現(xiàn)的褐變,比如生菜、豆芽等的褐變。

    圖1 酶促褐變的發(fā)生機(jī)理Fig.1 Mechanism of enzymatic browning

    非酶促褐變是指由于非酶作用引起的褐變,大多發(fā)生在食品的熱加工及長(zhǎng)期貯存過程中。非酶促褐變主要有3種類型,即羰氨反應(yīng)褐變、焦糖化褐變和抗壞血酸氧化褐變。羰氨反應(yīng)褐變又稱美拉德反應(yīng),是指蛋白質(zhì)、氨基酸的氨基與游離羰醛基反應(yīng),最終形成類黑素的過程;焦糖化褐變是指加熱情況下沒有氨基存在時(shí)糖發(fā)生的焦糖化反應(yīng);抗壞血酸氧化褐變是抗壞血酸自身氧化引起的褐變,酚類物質(zhì)在一些條件下發(fā)生的自動(dòng)氧化變色過程[22]。

    2.1.2 褐變發(fā)生條件

    從酶促褐變的機(jī)理中可看出酶促褐變必須具有3個(gè)條件,即有氧環(huán)境、PPO的作用以及存在酚類底物[23]。正常植物細(xì)胞中的酚類物質(zhì)存在于細(xì)胞液泡中,PPO存在于類囊體內(nèi)腔(包括葉綠體、有色體等)中,二者相互分離,如圖2所示,所以完整的植物細(xì)胞不會(huì)發(fā)生酶促褐變[24-25]。只有當(dāng)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受到損壞,酶原被氧氣激活并與底物大面積接觸時(shí),才會(huì)引起褐變反應(yīng)而且是立即型酶促褐變反應(yīng)[21]。

    圖2 植物細(xì)胞中PPO與多酚物質(zhì)的分布以及褐變反應(yīng)的原因Fig.2 The distribution of PPO and polyphenols in plant cells and the cause of browning reaction

    非酶促褐變的褐變因子有總酚、抗壞血酸、5-羥甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,5-HMF)、游離還原糖以及氨基酸等,果蔬貯運(yùn)、加工過程中的光照、氧環(huán)境、溫度、濕度、包裝容器以及不同的處理方式,都會(huì)對(duì)果蔬的非酶褐變產(chǎn)生不同程度的影響[26-27]。研究表明,新鮮果蔬貯藏前期的非酶促褐變主要是抗壞血酸氧化分解造成的,貯藏中后期,當(dāng)抗壞血酸被大量消耗后,多酚物質(zhì)的自氧化就會(huì)占據(jù)非酶褐變主要地位,同時(shí)美拉德反應(yīng)緩慢進(jìn)行,焦糖化反應(yīng)對(duì)果蔬非酶促褐變沒有顯著影響[28]。

    2.2 綠豆芽褐變機(jī)理

    采后的綠豆芽依舊是有一定生命活動(dòng)的有機(jī)體,其組織內(nèi)部仍會(huì)進(jìn)行一系列的生理代謝活動(dòng),比如呼吸作用[29]。此外,綠豆芽褐變、變質(zhì)、腐爛等現(xiàn)象都與豆芽的貯藏溫度有關(guān)[30],隨著貯藏溫度升高,綠豆芽的呼吸速率不斷增大。采后貯藏期間呼吸作用增強(qiáng),會(huì)加速綠豆芽中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗,促進(jìn)老化和變色。同時(shí),綠豆芽褐變也與許多酶的活性密切相關(guān),比如多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(peroxidase,POD)、過氧化氫酶(catalase,CAT)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia lyase,PAL)以及過氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)等。此外,綠豆芽褐變還與綠豆芽中多酚、抗壞血酸(ascorbicacid,AA)以及過氧化氫(hydrogen peroxide,H2O2)含量有很大關(guān)系[22]。研究表明綠豆芽在儲(chǔ)藏過程中SOD的含量會(huì)降低,褐變(hard black,HB)發(fā)生率與AA、總抗氧化劑活性(total antioxidant activity,TAA)、總酚(total phenols,TP)、總黃酮(total flavonoids,TF)以及SOD之間呈負(fù)相關(guān)[31]。同時(shí)POD和PPO含量會(huì)升高,褐變發(fā)生率與PPO、POD以及CAT活性之間呈正相關(guān)。

    2.3 褐變對(duì)綠豆芽的影響

    綠豆芽含水量高達(dá)95%[32],質(zhì)地清脆,組織嬌嫩,不耐貯藏,在采后保鮮、貯運(yùn)、銷售過程中,極易因溫度影響出現(xiàn)老化褐變、失水皺縮以及微生物污染產(chǎn)生黏腐、變味等現(xiàn)象,這些現(xiàn)象會(huì)影響綠豆芽的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失,其中最易產(chǎn)生感官價(jià)值損失且最常見的生理生化反應(yīng)就是褐變[33]。果蔬褐變主要是由多酚類物質(zhì)通過氧化聚合反應(yīng)引發(fā)的,是食品顏色隨時(shí)間逐漸變?yōu)楹稚蛏詈稚囊粋€(gè)過程。綠豆芽褐變主要是因?yàn)榻M織內(nèi)部發(fā)生了酶促褐變和抗壞血酸氧化反應(yīng)[34],這些反應(yīng)是綠豆芽貯藏期間最不希望出現(xiàn)的現(xiàn)象,不僅會(huì)影響綠豆芽的外觀給消費(fèi)者帶來不良的視覺感受,還會(huì)產(chǎn)生有毒物質(zhì),導(dǎo)致綠豆芽品質(zhì)下降,一旦誤食很可能會(huì)影響誤食者的身體健康,引起一系列的食品安全問題[32,35]。

    3 防褐變技術(shù)的研究進(jìn)展

    褐變會(huì)對(duì)新鮮果蔬產(chǎn)生品質(zhì)下降,貯藏期縮短等不良影響,如果沒有良好的解決方法則會(huì)加速食品的變質(zhì)和腐爛,防止褐變的方法本質(zhì)上就是抑制褐變的發(fā)生條件。

    3.1 酶促褐變的抑制方法

    酶促褐變的速率取決于PPO的活性[36],目前防止酶促褐變的研究方法比較完善,可以通過控制PPO的活性抑制酶促褐變的產(chǎn)生[37]。常用的方法可分為物理方法和化學(xué)方法,物理方法包括熱處理法[38]、高壓處理法[39]、電場(chǎng)處理法[33]、輻照法[40]、隔絕氧氣法[35]和低溫保藏法[41]等,化學(xué)方法有無機(jī)鹽法[42]、酸化劑法[43]、抗氧化劑法[42]、螯合劑法[44]和天然提取物法[45]等。熱水漂燙、微波處理或二者的結(jié)合、壓力處理、脈沖電場(chǎng)處理或者輻照處理都可以迅速降低果蔬中多酚氧化酶的活性,從而降低褐變指數(shù),減少抗氧化劑損失,達(dá)到較好的酶促褐變抑制效果。隔絕氧氣和低溫保藏限制了酶促褐變的反應(yīng)條件和反應(yīng)速率,能達(dá)到延長(zhǎng)貯藏時(shí)間、減緩褐變速率的目的。其次,偏重亞硫酸鈉、硫酸銨鹽、SO2、L-半胱氨酸、抗壞血酸、檸檬酸以及 Ca2+、Mg2+等金屬離子都是多酚氧化酶活性的抑制劑;低pH值環(huán)境下酚類氧化的速率會(huì)明顯降低,天然含羧酸類的物質(zhì)對(duì)酶也有抑制效應(yīng),使用這些化學(xué)試劑處理也可以有效減緩酶促褐變的發(fā)生。

    3.2 非酶促褐變的抑制方法

    非酶促褐變比酶促褐變更難控制,而且作用范圍比酶促褐變更加廣泛。非酶促褐變不僅可以和酶促褐變一同作用,甚至在酶鈍化失活后,依舊可以保持較高的反應(yīng)活性[46]。果蔬中含有豐富的多酚物質(zhì)和抗壞血酸,由抗壞血酸氧化和多酚引起的非酶促褐變是影響果蔬品質(zhì)的重要因素[27,47],雖然非酶促褐變的研究沒有酶促褐變成熟完善,但依然有許多相關(guān)的報(bào)道??傮w來說,果蔬非酶促褐變的抑制方法與酶促褐變相似,也可以分成物理方法和化學(xué)方法,常用的物理方法有低溫貯藏法[28]、避光干燥保存法[48]和蒸汽預(yù)處理法[49]等;化學(xué)方法有螯合劑法、抗氧化劑法和抑制劑法[46-47,50]等。此外,多項(xiàng)研究表明酸化劑法可以有效抑制PPO引起的酶促褐變,但是Pham等[51]發(fā)現(xiàn)pH值過低,即在pH1.5左右時(shí),反而會(huì)顯著提高抗壞血酸的降解率,提高5-羥甲基糠醛的形成速率,顯著增加非酶促褐變強(qiáng)度,因此果蔬及其果蔬制品長(zhǎng)時(shí)間保存時(shí),不宜使用酸化劑法。

    4 綠豆芽防褐變技術(shù)的研究進(jìn)展

    隨著人們對(duì)食品安全的重視,綠豆芽的貯藏保鮮技術(shù)也越來越受大家關(guān)注,目前綠豆芽貯藏技術(shù)的研究重點(diǎn)大多還停留在延長(zhǎng)豆芽的貯藏時(shí)間上,采用合理的保鮮技術(shù)和條件,豆芽可以保鮮1周~2周[32],常用的保鮮技術(shù)有:預(yù)冷處理、全程微生物控制、全程冷鏈管理、改良包裝方式、清洗瀝干以及控制貯藏溫度和濕度等。這些技術(shù)基本都可以延緩綠豆芽的腐爛和變質(zhì),但對(duì)于綠豆芽的褐變情況卻沒有深入研究,現(xiàn)在防止綠豆芽褐變的研究體系尚不完善,下面將對(duì)一些國(guó)內(nèi)外防豆芽褐變的相關(guān)報(bào)導(dǎo)進(jìn)行闡述見表2。

    表2 豆芽防褐變技術(shù)的闡述Table 2 Explaination of bean sprouts anti-browning technology

    續(xù)表2 豆芽防褐變技術(shù)的闡述Continue table 2 Explaination of bean sprouts anti-browning technology

    5 結(jié)論和展望

    綠豆芽褐變主要包括綠豆芽體內(nèi)含有的多酚類物質(zhì)和PPO引起的酶促褐變和部分多酚類物質(zhì)和抗壞血酸導(dǎo)致的非酶促褐變,褐變的影響因素復(fù)雜,貯藏溫度、濕度、光照強(qiáng)度、時(shí)間、氣調(diào)比例、采后的預(yù)處理、運(yùn)輸方式、加工方法以及包裝的方式等均能影響褐變,任意一種因素的不良改變都會(huì)對(duì)綠豆芽的褐變情況造成不一樣的影響。在實(shí)際生產(chǎn)銷售過程中不可能對(duì)這些因素達(dá)到完全控制,所以研究出最佳的豆芽防褐變處理技術(shù)對(duì)整個(gè)綠豆芽生產(chǎn)及加工都具有重要的意義和研究?jī)r(jià)值。采用化學(xué)抑制劑防止褐變的方法固然有效,但是會(huì)產(chǎn)生大量化學(xué)殘留物,干擾因素多,實(shí)際大規(guī)模生產(chǎn)中難以控制和操作。物理防褐變的方法相比化學(xué)方法而言成本更低、沒有多余殘留物,綠色環(huán)保、更易于控制操作。但目前綠豆芽的防褐變技術(shù)沒有更深入或更加系統(tǒng)的研究,綠豆芽的物理防褐變技術(shù)具有很大的研究空間,值得進(jìn)一步深入探索。本文詳細(xì)地介紹了綠豆芽褐變的原因、機(jī)理、影響因素,總結(jié)了相關(guān)的方法和技術(shù),為之后的深入研究提供思路和理論依據(jù)。

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