鼻敏方對變應(yīng)性鼻炎miRNA表達(dá)水平的影響

摘要：目的：對鼻敏感方對變應(yīng)性鼻炎模型大鼠的影響進(jìn)行觀察，探究鼻敏感方對變應(yīng)性鼻炎miRNA表達(dá)水平的調(diào)控作用。方法：本實(shí)驗(yàn)于2018年月1份～2018年11月進(jìn)行，取36只SD大鼠，按隨機(jī)分類表法分為常規(guī)組、模型組、研究組、氯雷他定組。除常規(guī)組外，其他三組以卵清蛋白為致敏原，建立大鼠變應(yīng)性鼻炎模型，成功后分別給予給予0.9%的NaCI溶液、鼻敏感方水提劑、氯雷他定水溶液，進(jìn)行灌胃處理。對用藥前、用藥7日、14日、28日后大鼠的行為進(jìn)行觀察，28日后對血清進(jìn)行檢測。結(jié)果：藥物治療7日、14日、28日后，使用鼻敏感方的研究組和氯雷他定組比模型組大鼠的鼻部癥狀改善較明顯，P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：鼻敏感方是治療變應(yīng)性鼻炎的有效方劑，對于miRNA的表達(dá)有所影響，治療機(jī)制是通過對IL-4、IL-17、IFN-γ、IL-10水平的影響，來調(diào)節(jié)Th1/Th2和Th17/Treg細(xì)胞間的平衡去實(shí)現(xiàn)的。

關(guān)鍵詞：鼻敏感方;變應(yīng)性鼻炎;miRNA表達(dá)

【中圖分類號】R246.8 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2107-2306（2020）01-055-01

變應(yīng)性鼻炎（allergic rhinitis，AR）是國內(nèi)外均比較多見的疾病，因其較高的發(fā)病率已受到高度重視，由于環(huán)境污染的不斷加重，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢[1]。中醫(yī)將其稱之為“鼻鼽”或“鼽嚏”。AR是發(fā)生在鼻粘膜的反應(yīng)性疾病，主要臨床癥狀有鼻癢、噴嚏、鼻分泌亢進(jìn)、鼻粘膜腫脹等，現(xiàn)階段多將其分類為季節(jié)性和常年性兩種[2]。AR的主要治療手段是藥物控制，使用糖皮質(zhì)激素和抗組胺藥物的有效性雖被認(rèn)可，但這種方式也有耐藥等缺陷。關(guān)于AR的發(fā)病機(jī)制研究，Th1、Th2和Th17、Treg細(xì)胞免疫的平衡，一直都是研究熱點(diǎn)[3]。

1資料與方法

1.1一般資料

（1）動(dòng)物： 36只SD大鼠，3月齡，重180-220g，雌性。

（2）藥物：卵清蛋白;氫氧化鋁;IL-17、IL-10試劑盒;氯雷他定片;鼻敏感方，水提后減壓濃縮，滅菌后 4 ℃ 瓶裝密封保存，生藥濃度為1.6g.ml。

（3）儀器：THZ-312臺(tái)式恒溫震蕩儀;冰箱;酶敏儀;顯微鏡;相機(jī);電腦。

1.2方法

將36只SD大鼠根據(jù)質(zhì)量排序，按隨機(jī)數(shù)字表法分為常規(guī)組、模型組、研究組和氯雷他定組，每組9只。常規(guī)組正常飼養(yǎng)，不予造模及給藥。其余三組建立AR模型，以卵清蛋白0.3mg為抗原，氫氧化鋁30mg為佐劑，調(diào)入0.9%NaCl溶液1ml，注射入腹腔，隔日一次，以8次為基礎(chǔ)，再用0.25%卵清蛋白生理鹽水溶液滴鼻，每側(cè)50μl，每日一次，連續(xù)7日。攻擊致敏7日后，觀察并評分。造模后，每組給予溶液灌胃，劑量為成人的常規(guī)服用量。氯雷他定組以氯雷他定溶液灌胃，研究組以鼻敏感方水提劑灌胃。常規(guī)組和模型組每天給予研究組等量0.9% NaCl溶液灌胃。連續(xù)28天。

1.3觀察指標(biāo)

（1）對比鼻部癥狀評分;

（2）各組間血清IL-4、IFN-γ水平對比、血清IL-10、IL-17水平對比。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本研究所有數(shù)據(jù)使用SPSS 20.0軟件進(jìn)行分析。使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示計(jì)量數(shù)據(jù)，組間比較及治療前后差異對比使用t檢驗(yàn)，使用n表示計(jì)數(shù)資料，以 P<0.05代表差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1鼻部癥狀評分對比

給藥前：模型組、研究組、氯雷他定組的大鼠，激發(fā)出典型的變應(yīng)性鼻炎癥狀。如連續(xù)噴嚏、大量清涕、陣發(fā)性劇烈瘙癢抓鼻面。連續(xù)激發(fā)7日后給藥前，各組積分都大于5分，對比常規(guī)組P<0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明造模成功。

給藥7日后，對比模型組，研究組和氯雷他定組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組與氯雷他定組間對比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

給藥14日后，對比模型組，研究組和氯雷他定組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組與氯雷他定組間對比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

給藥28日后，對比模型組，研究組和氯雷他定組噴嚏等癥狀明顯減少，偶爾流涕，抓撓鼻面部的現(xiàn)象基本消失，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。研究組與氯雷他定組間對比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。附表1。

2.2組間血清IL-4、IFN-γ水平對比及血清IL-10、IL-17水平對比

與常規(guī)組對比，模型組IFN-γ水平降低， IL-4水平升高（P<0.05）。與模型組對比，研究組IFN-γ水平升高， IL-4水平降低（P<0.05）;氯雷他定組IFN-γ水平升高， IL-4水平降低（P<0.05）。研究組與氯雷他定組對比，IL-4、IFN-γ水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。詳情附表2。

與常規(guī)組對比，模型組IL-10水平降低，IL-17水平升高（P<0.05）。與模型組對比，研究組IL-10水平升高，IL-17水平降低（P<0.05）;氯雷他定組IFN-γ水平升高， IL-4水平降低（P<0.05）。研究組與氯雷他定組對比，IL-10、IL-17水平差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。詳情附表2。

3討論

鼻敏感方是在益氣溫陽方的基礎(chǔ)上變化而來的，有相關(guān)研究顯示，鼻敏感方對AR的療效明顯，相對西藥而言，有療效持久、副作用小等優(yōu)點(diǎn)[4.5]。miRNA在免疫系統(tǒng)中具有重要的調(diào)控作用，特別是對CD4+T向Th1/Th2分化極性進(jìn)行調(diào)控，可能與AR的發(fā)病的Th1/Th2失衡有關(guān)。

Th1細(xì)胞主要產(chǎn)生干擾素IFN-γ、腫瘤壞死因子TNF-β、白細(xì)胞介素-2等細(xì)胞因子;Th2細(xì)胞主要產(chǎn)生細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-10等細(xì)胞因子[6]。鼻敏感方通過益氣散寒的功效，對變應(yīng)性鼻炎患者血清中的IL-4起到調(diào)節(jié)使其降低，對IFN-γ調(diào)節(jié)使其升高。從而對miRNA的表達(dá)水平產(chǎn)生影響[7]。

變應(yīng)性鼻炎的發(fā)生時(shí)抗原呈遞細(xì)胞攝取變應(yīng)原后，將其加工處理，變?yōu)樽儜?yīng)原肽，傳遞給Th細(xì)胞。Th細(xì)胞誘導(dǎo)B細(xì)胞釋放IgE。當(dāng)相同的變應(yīng)原再次進(jìn)入體內(nèi)時(shí)，與IgE相結(jié)合，肥大細(xì)胞脫顆粒后，釋放組胺、前列腺素、白三烯等炎性遞質(zhì)，引起毛細(xì)血管擴(kuò)張、腺體分泌增強(qiáng)、通透性增強(qiáng)、嗜酸性粒細(xì)胞哦浸潤等情況，因此AR癥狀便會(huì)出現(xiàn)[8]。早期研究認(rèn)為，AR的發(fā)病機(jī)制是Th1/Th2細(xì)胞免疫失衡，AR的發(fā)生源于變應(yīng)特異性Th細(xì)胞的分化發(fā)生偏移，導(dǎo)致體內(nèi)Th1及Th2反應(yīng)失去平衡[9]。又有研究者認(rèn)為Th17介導(dǎo)炎癥反應(yīng)屬于促炎性細(xì)胞，Treg介導(dǎo)免疫耐受屬于抑炎性細(xì)胞，在兩者功能及分化的過程，出現(xiàn)相互對抗，會(huì)保持兩者的平衡，這有利于維持機(jī)體穩(wěn)定的免疫狀態(tài)[10]。

綜上所述，鼻敏感方是治療變應(yīng)性鼻炎的良效方劑，鼻敏感方通過影響AR模型大鼠血清IL-10、IL-17、IL-4、IFN-γ的水平，來調(diào)節(jié)Th1/Th2和Th17/Treg細(xì)胞的平衡，從而發(fā)揮抗變應(yīng)性鼻炎的作用。這一影響會(huì)改變miRNA的表達(dá)。

然而，細(xì)胞平衡與細(xì)胞因子的關(guān)系和影響細(xì)胞因子分泌的因素都較為復(fù)雜，從細(xì)胞因子的角度對細(xì)胞平衡進(jìn)行分析，有一定的局限性，今后仍需進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]李泉. 變應(yīng)性鼻炎治療探討[J]. 智富時(shí)代， 2017（2）.

[2]熊斯怡， 楊洋， 阮昊. 變應(yīng)性鼻炎免疫治療的研究進(jìn)展[J]. 免疫學(xué)雜志， 2018（1）：86-92.

[3]霍美旭， 劉謙虛. 變應(yīng)性鼻炎的特異性免疫治療與IgG4研究新進(jìn)展[J]. 臨床醫(yī)學(xué)工程， 2017（12）：1789-1791.

[4]狄楊， 于睿莉， 王學(xué)艷， 等. 生物標(biāo)志物在變應(yīng)性鼻炎特異性免疫治療療效評價(jià)中的應(yīng)用[J]. 國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志， 2018， 42（2）：102-105.

[5]陳玉蓮， 王雪華， 黃雪琨. 變應(yīng)性鼻炎皮下免疫治療的心理護(hù)理體會(huì)[J]. 家庭醫(yī)藥.就醫(yī)選藥， 2017（7）.

[6]張文馨. 變應(yīng)原特異性免疫治療在兒童變應(yīng)性疾病中的應(yīng)用[J]. 國際兒科學(xué)雜志， 2017， 44（2）：104-107.

[7]宋慶均[1， 2]， 楊秀海[1， 等. 變應(yīng)性鼻炎致病因素及治療的研究進(jìn)展[J]. 中國耳鼻咽喉顱底外科雜志， 2017（1）：83-88.

[8]許海艷， 楊見明， 汪維慶. 舌下免疫治療對變應(yīng)性鼻炎患者鼻黏膜重塑變化的研究[J]. 健康之路， 2017（3）.

[9]王虹， 吳靜， 章如新. 速激肽-1受體小干擾RNA對變應(yīng)性鼻炎多種炎性因子表達(dá)的影響[J]. 中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志， 2019， 54（4）：280-285.

[10]王微， 趙春源， 姚鴻超， 等. miRNA在變應(yīng)性鼻炎中的作用[J]. 醫(yī)學(xué)臨床研究， 2017（34）：2141.

作者簡介：彭文靜，女，1986年6月出生，研究生學(xué)歷，民族：漢;籍貫：山東泰安;研究方向：主要從事耳鼻喉專業(yè)研究。

基金名稱：佛山市自籌經(jīng)費(fèi)類科技計(jì)劃項(xiàng)目合同書（編號20161021010035）

項(xiàng)目名稱：鼻敏方對變應(yīng)性鼻炎miRNA表達(dá)水平的影響

（佛山市第二人民醫(yī)院 廣東佛山 528000）