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    臘八蒜綠變過程中的品質(zhì)變化研究

    2021-09-10 08:43:42崔保偉秦廣利朱俊朋
    中國調(diào)味品 2021年9期
    關(guān)鍵詞:總酸總酚醋酸

    崔保偉,秦廣利,朱俊朋*

    (1.商丘職業(yè)技術(shù)學(xué)院,河南 商丘 476000;2.國家面粉及制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心,河南 商丘 476000)

    大蒜營養(yǎng)價值高,富含多種生物活性物質(zhì)[1],具有健胃消食[2]、抗氧化[3]、抗菌[4]、調(diào)節(jié)血糖[5]、增強機體免疫力[6]等功效。但由于大蒜鮮食時具有刺激性和辛辣味[7],也影響了大蒜產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。經(jīng)過食醋腌制變綠的臘八蒜因其通透脆綠,口感爽脆,辛辣味減輕[8],風(fēng)味更佳,受到消費者的青睞。一些科學(xué)研究也證明了臘八蒜的醫(yī)療保健作用,如Gao等[9]從臘八蒜中首次發(fā)現(xiàn)3種新型活性肽,這些活性肽具有抑菌、低毒、不易產(chǎn)生耐藥菌的特點。臘八蒜在腌制過程中需要綠變反應(yīng),其機理是細胞質(zhì)中的底物蒜氨酸與大蒜細胞液泡內(nèi)的蒜氨酸酶反應(yīng)生成大蒜素[10-11],大蒜素會與游離氨基酸反應(yīng)生成色素前體物質(zhì),后轉(zhuǎn)變?yōu)榫G色呈色物質(zhì)[12]。任何事物都是雙重的,大蒜綠變過程中這種受人喜愛的綠色素的同時,也會導(dǎo)致其他的品質(zhì)指標受到一些影響。因此,本文旨在研究影響臘八蒜綠變的因素,如溫度、醋酸使用量和該條件下臘八蒜品質(zhì)指標的變化,品質(zhì)指標包括臘八蒜色澤、總酸含量、大蒜素等,以期為大蒜的深加工提供一些參考意義。

    1 試驗材料與方法

    1.1 試驗材料與試劑

    大蒜:市售,在冷庫中貯藏4個月以上;白醋:購于商丘丹尼斯超市;大蒜素標準品(HPLC≥98%):北京世紀奧科生物技術(shù)有限公司;氫氧化鈉(分析純)、甲醇(分析純)、福林酚(分析純)、三氯化鐵(分析純)、維生素E:國藥集團;沒食子酸:上海源葉生物科技有限公司;TPTZ和DPPH:西格瑪公司。

    1.2 試驗儀器與設(shè)備

    WAY-2S阿貝折光儀 上海精密科學(xué)儀器有限公司;SMY-2000色差儀 北京盛名揚科技開發(fā)有限公司;TU-1901分光光度計 北京普析通用儀器有限責任公司;CPA224S電子天平 賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;H2050R臺式高速冷凍離心機 長沙湘儀離心機儀器有限公司;LC-20AT 高效液相色譜儀 日本島津公司。

    1.3 綠蒜試驗方法

    將大蒜去皮后進行篩選,挑取體型大小基本一致、無傷殘、無畸形的蒜瓣。將挑取出來的蒜瓣用蒸餾水清洗干凈,瀝干后分裝在玻璃容器中。將100%醋酸稀釋成 4%、6%、8%、10%的醋酸溶液,取250 g不同濃度的醋酸溶液分別放入裝有250 g蒜瓣的玻璃容器中進行腌制,分別在 5,15,25,35 ℃溫度下進行試驗。

    1.4 臘八蒜色澤的測定[13]

    稱取臘八蒜30 g,加入蒸餾水30 g,混合打漿后。采用色差法,分別測定樣品的紅綠值a*、藍黃值b*和色澤明亮度值L*,測定3次,取平均值。

    1.5 臘八蒜中總酸含量的測定

    參照GB/T 12456-2008的方法。取臘八蒜20 g,加入30 g蒸餾水,用粉碎機打磨成漿狀,再用高速冷凍離心機在10000 r/min的條件下離心10 min,之后吸取1 mL上清液用蒸餾水定容至25 mL,混合均勻后,倒入燒杯,滴入酚酞指示劑2滴,用氫氧化鈉標準溶液進行測定。

    總酸=c×V×0.06/m×100%。

    式中:V為消耗NaOH標準溶液的體積(mL);c為NaOH標準溶液的濃度(mol/L);m為樣品重量(g)。

    1.6 臘八蒜可溶性固形物的測定[14]

    稱取20 g臘八蒜,加入30 g蒸餾水用粉碎機打磨成漿狀后,用高速冷凍離心機在10000 r/min的條件下離心10 min,吸取上清液,用阿貝折光儀進行測定。

    1.7 臘八蒜大蒜素的測定

    高效液相色譜檢測大蒜素條件:稱取5 g樣品,加入30 g蒸餾水,用打漿機粉碎。取10 g樣品于50 mL離心管中,在40 ℃水浴鍋中加熱40 min,之后加入20 mL甲醇,振蕩提取30 min,然后離心(5000 r/min,20 min),取上清液過0.22 μm濾膜后上機。

    Insert Sustain C18色譜柱;流速:1 mL/min;柱溫:30 ℃;流動相:乙腈-水(75∶25);分析時間:15 min;檢測波長:215 nm;進樣量:20 μL。

    準確稱取20 mg大蒜素標準品,置于10 mL 容量瓶中,用甲醇溶解并定容,配制成濃度為2000 μg/mL的標準品儲備液,并依次稀釋成濃度為 200,100,50,20,10 μg/mL的系列標準品溶液,以大蒜素峰面積為縱坐標,大蒜素濃度為橫坐標,繪制標準曲線,獲得線性方程:Y=66271X-103280,相關(guān)系數(shù)R2=0.9992,見圖1。

    圖1 大蒜素濃度與大蒜素峰面積的關(guān)系Fig.1 The relationship between allicin concentration and allicin peak area

    1.8 總酚含量的測定

    參照張陽的方法,并作適當調(diào)整。

    1.8.1 待測樣品溶液的制備

    取大蒜2 g,加入10 mL含有70%甲醇溶液進行研磨,渦旋輔助振蕩提取 30 min,用高速冷凍離心機在10000 r/min的條件下離心10 min,吸取上清液用于總酚含量的檢測。

    1.8.2 總酚含量的測定

    吸取提取液0.2 mL,加入 0.3 mL含有70%甲醇溶液,與2.0 mL稀釋10倍的Folin-酚溶液混合均勻在室溫下避光反應(yīng) 30 min,然后加入1.8 mL含有7.5%碳酸鈉溶液,在室溫避光的環(huán)境下反應(yīng)15 min,之后在765 nm處測定吸光值,配制沒食子酸標準系列溶液濃度為50,40,30,20,10 mg/L,標準曲線為:y=0.0143x-0.029,R2=0.9992,見圖2。

    圖2 沒食子酸標準曲線Fig.2 The standard curve of gallic acid

    1.9 抗氧化能力的測定

    參照陶丹丹[15]的方法,用清除DPPH自由基能力及還原鐵離子能力表示抗氧化能力。Trolox標準溶液與清除DPPH自由基的關(guān)系見圖3中A,標準曲線為:y=586.7x+10.473,R2=0.9954。Trolox標準溶液與還原鐵離子的關(guān)系見圖3中B,標準曲線為:y=0.0574x-0.002,R2=0.9994。

    圖3 Trolox標準溶液與清除DPPH自由基能力的關(guān)系(A)及Trolox標準溶液與還原鐵離子能力的關(guān)系(B)Fig.3 The relationship between Trolox standard solution and scavenging DPPH free radical capacity(A) and the relationship between Trolox standard solution(B) and reducing iron ion capacity

    2 結(jié)果與討論

    2.1 大蒜綠變最佳試驗條件的確定

    以大蒜變綠時間及產(chǎn)品的口味為指標, 選取最佳的試驗條件。

    由圖4可知,大蒜變綠的速度隨醋酸濃度的升高而變快。隨著腌制溫度的升高,大蒜變綠速度受醋酸濃度的影響逐漸減弱。綜合試驗結(jié)果表明,6%濃度下的醋酸液液在35 ℃腌制成的臘八蒜綠變時間短,口感適宜。8%、10%的醋酸溶液腌制成的臘八蒜口味過酸,而4%的醋酸溶液制成的臘八蒜需要的時間太長。

    圖4 醋酸濃度、溫度對臘八蒜變綠時間的影響Fig.4 Effect of acetic acid concentration and temperature on the greening time of Laba garlic

    2.2 臘八蒜綠變過程中色澤的變化

    由表1可知,隨著腌制時間的延長,臘八蒜的紅綠值 a*、藍黃值 b*、明亮度 L*值快速下降,這說明臘八蒜的外觀色澤在變綠、變藍、變暗。在試驗過程中,我們也發(fā)現(xiàn)臘八蒜在腌制12 h后,先從根部變藍,24 h后已經(jīng)擴大到整個大蒜蒜瓣的50%,48 h后已經(jīng)基本變綠,72 h后全部變綠,在腌制過程中臘八蒜的外觀色澤先變藍之后再變綠。

    表1 臘八蒜綠變過程中L*、 a*、 b*值的變化Table 1 The changes of L*, a* and b* values of Laba garlic during the greening process

    2.3 臘八蒜中在綠變過程中總酸含量的變化

    臘八蒜在腌制過程中,醋酸的主要作用是降低腌制溶液的pH,使臘八蒜細胞膜的通透性在短時間內(nèi)增加,進而發(fā)生崩解破碎。使位于臘八蒜細胞液泡中的蒜氨酸酶和細胞質(zhì)中的底物接觸,經(jīng)過一系列化學(xué)變化后,產(chǎn)生了綠變物質(zhì)。由圖5可知,鮮蒜在腌制前測得總酸含量為9.75%,說明大蒜本身也含有一些酸性物質(zhì),隨著腌制時間的延長,總酸含量不斷上升,最終達到25.21%,說明在腌制過程中醋酸溶液不斷滲透進大蒜細胞中。由于臘八蒜經(jīng)醋酸腌制并產(chǎn)生一系列感官和風(fēng)味上的變化,因此總酸含量也是評價臘八蒜品質(zhì)的一個重要因素。

    圖5 臘八蒜中在綠變過程中總酸含量的變化Fig.5 The changes of total acid content of Laba garlic during the greening process

    2.4 臘八蒜在綠變過程中可溶性固形物含量的變化

    由圖6可知,隨著腌制時間的延長,臘八蒜中的可溶性固形物含量由腌制前的15.8%逐漸下降至腌制成綠色時的14.1%,可能的原因是醋酸在滲透進臘八蒜細胞內(nèi)的同時,細胞內(nèi)的一些成分溶出進入腌漬液。總而言之,臘八蒜在整個腌制過程中,可溶性固形物含量的變化并不大。

    圖6 臘八蒜在綠變過程中可溶性固形物含量的變化Fig.6 The changes of soluble solids content of Laba garlic during the greening process

    2.5 臘八蒜在綠變過程中大蒜素含量的變化

    大蒜素是臘八蒜細胞液泡中的蒜酶和細胞質(zhì)中的蒜氨酸接觸之后產(chǎn)生的,它是大蒜中主要生物活性物質(zhì),也是大蒜中辛辣味的主要來源。由圖7可知,隨著腌制時間增加,大蒜素的含量由3.14 g/kg逐漸降至1.25 g/kg。李雷的研究發(fā)現(xiàn),臘八蒜的綠變能力與大蒜素的含量成正比,與綠變程度成反比,證實了大蒜素參與綠變反應(yīng)。此試驗中大蒜素含量的降低說明臘八蒜在變綠過程中消耗大蒜素,為大蒜綠變反應(yīng)提供了條件。

    圖7 臘八蒜在綠變過程中大蒜素含量的變化Fig.7 The changes of allicin content of Laba garlic during the greening process

    2.6 臘八蒜在綠變過程中總酚含量的變化

    相對易于觀察到的感官品質(zhì)而言,食品中的生理活性不是那么顯而易見,但隨著消費者對飲食健康的關(guān)注,該指標也越來越受到重視。由圖8可知,新鮮大蒜在未加工之前總酚含量為54.3%,24 h之后變?yōu)?6.5%,48 h之后變?yōu)?3.6%,72 h大蒜完全變綠之后還含有42.2%總酚,這期間由于大蒜在腌制過程中,醋酸滲透進細胞中,破壞了細胞結(jié)構(gòu),對總酚有一定降解,另一方面,整個腌制過程是在加熱的條件下進行的,也對總酚有一定程度的破壞。

    圖8 臘八蒜在綠變過程中總酚含量的變化Fig.8 The changes of total phenol content of Laba garlic during the greening process

    2.7 臘八蒜在變綠過程中抗氧化能力的變化

    由圖9可知,臘八蒜在綠變過程中DPPH自由基清除能力(見圖9中A)和鐵離子還原能力(見圖9中B)都有所下降,DPPH自由基清除能力和鐵離子還原能力分別由13.3%下降至11.45%,由12.3%下降至10.3%。意味著在綠變過程中破壞了臘八蒜的抗氧化能力,和總酚含量的變化一致。Queiroz等[16]的研究也發(fā)現(xiàn)抗氧化能力和總酚含量有一定的正相關(guān),可能原因是大蒜中含有豐富的有機硫化合物,如蒜氨酸、大蒜素等,這些物質(zhì)具有較強的抗氧化能力,但這些物質(zhì)并不穩(wěn)定,隨著醋酸的不斷滲透和加熱的進行,對臘八蒜的抗氧化能力有一定的影響。

    圖9 臘八蒜在變綠過程中抗氧化能力的變化Fig.9 The changes of antioxidant capacity of Laba garlic in the greening process

    3 結(jié)論

    腌制臘八蒜的最佳條件為6%醋酸溶液、溫度35 ℃。臘八蒜在此條件下腌制:綠變時間短,口味適宜;外觀色澤先變藍后變綠,紅綠值 a*、藍黃值 b*、明亮度 L*值快速下降;總酸含量逐漸升高,由腌制前的9.75%升高至綠變后的25.21%;可溶性固形物含量變化并不大,由腌制前的15.8%逐漸下降至綠變后的14.1%;大蒜素的含量逐漸降低,由腌制前的3.14 g/kg下降至綠變后的1.25 g/kg;腌制過程會導(dǎo)致大蒜中總酚含量和抗氧化能力的降低,總酚含量由腌制前的54.3%下降至綠變后的42.2%;DPPH自由基清除能力和鐵離子還原能力分別由腌制前的13.3%、12.3%下降至綠變后的11.45%、10.3%。

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