PEAR1 基因多態(tài)性與服用阿司匹林缺血性腦卒中患者復(fù)發(fā)的相關(guān)性分析＊

申利娜，姬利紅

（鶴壁市人民醫(yī)院藥學(xué)部，河南 鶴壁 458030）

缺血性腦卒中是由于腦的供血動脈（頸動脈和椎動脈）狹窄或閉塞、腦供血不足導(dǎo)致的腦組織壞死的總稱，其已成為威脅人類健康的重要疾病，復(fù)發(fā)率較高，據(jù)報道[1]，我國缺血性腦卒中年復(fù)發(fā)率達(dá)17.7%，有效的二級預(yù)防是減少復(fù)發(fā)和死亡的重要手段。阿司匹林是一種常用的抗血小板聚集藥物，在缺血性腦卒中二級預(yù)防中占重要地位，但部分缺血性腦卒中患者長期規(guī)律服用阿司匹林仍有復(fù)發(fā)，其是由多種因素共同導(dǎo)致的[2]。隨著藥物基因檢測技術(shù)的發(fā)展，越來越多的研究集中探討遺傳因素與阿司匹林反應(yīng)的相關(guān)性[3]。有研究報道，血小板內(nèi)皮聚集受體1（PEAR1）基因多態(tài)性可能影響阿司匹林療效[4]，但類似的研究主要集中在國外患者，且研究結(jié)果尚不一致[5]。目前，關(guān)于我國人群PEAR1 基因多態(tài)性與阿司匹林療效相關(guān)性研究較少，且很少有研究報道PEAR1 基因多態(tài)性與腦血管事件的相關(guān)性?；诖?，本研究通過檢測PEAR1 基因多態(tài)性，探討其與長期服用阿司匹林的缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的相關(guān)性，以期為臨床識別復(fù)發(fā)性缺血性腦卒中高風(fēng)險患者提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2018 年10 月—2019 年10 月我院腦卒中中心收治的148 例長期服用阿司匹林且已進(jìn)行PEAR1 基因多態(tài)性檢測的缺血性腦卒中患者的詳細(xì)臨床資料。該研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，且患者簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)影像學(xué)檢查確診為缺血性腦卒中。排除標(biāo)準(zhǔn)：患有心源性栓塞，創(chuàng)傷，血管畸形，腦腫瘤，腦出血或先天性腦部疾病的患者。

1.2 分組

根據(jù)入院時是否有缺血性腦卒中既往病史，將患者分為缺血性腦卒中首發(fā)組和復(fù)發(fā)組。

1.3 方法

收集患者一般資料（包括性別、年齡、高血壓史、糖尿病史、高脂血癥史）、實驗室檢測結(jié)果（同型半胱氨酸、血管內(nèi)皮生長因子及PEAR1 基因情況）。PEAR1基因檢測：使用一次性EDTA 抗凝管采血2～3 ml，于4 ℃低溫保存，保存時間不宜超過24 h，采用熒光染色原位雜交技術(shù)對PEAR1 基因型進(jìn)行檢測，具體操作如下：用NH4Cl 預(yù)處理液處理血樣，離心、制備白細(xì)胞懸液，加入PEAR1 基因耀金分試劑反復(fù)吹打后混勻，室溫靜置30 min 后用熒光檢測儀測定，結(jié)果由軟件自動分析判讀，以上操作均嚴(yán)格按試劑盒和儀器標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床資料比較

缺血性腦卒中復(fù)發(fā)組與首發(fā)組男性比例、年齡、高血壓、血管內(nèi)皮生長因子比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；而復(fù)發(fā)組糖尿病、高脂血癥比例、同型半胱氨酸水平、PEAR1 基因變異與首發(fā)組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩組臨床資料比較[±s，n（%）]

表1 兩組臨床資料比較[±s，n（%）]

項目 復(fù)發(fā)組（n=48） 首發(fā)組（n=100） t 值或χ2 值 P年齡（歲） 66.54±12.65 62.65±11.79 1.327 0.245性別（男） 32（66.67） 64（64.00） 1.315 0.296高血壓 37（77.08） 83（83） 1.552 0.124糖尿病 18（37.50） 29（29） 3.562 0.046高脂血癥 13（27.08） 15（15.00） 3.983 0.037同型半胱氨酸（μmol/L） 28.3±10.81 19.85±9.35 4.135 0.026血管內(nèi)皮生長因子（pg/ml） 107.35±33.52 115.27±41.62 1.116 0.396 PEAR1 基因變異 29（60.42） 46（46.00） 9.253 0.009

2.2 缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的多因素分析

將單因素分析中存在統(tǒng)計學(xué)差異的影響因素：糖尿病、高脂血癥比例、同型半胱氨酸水平、PEAR1 基因變異納入Logistic 回歸方程進(jìn)行多因素分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PEAR1 基因變異是缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的危險因素（P＜0.05），見表2。

表2 缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的多因素分析

2.3 兩組PEAR1 基因型分布情況比較

148 例患者PEAR1 檢出野生型GG、雜合突變型GA、純合突變型AA 三種基因型，其中GG 占49.32%，GA 占42.57%，AA 占8.11%。缺血性腦卒中復(fù)發(fā)組野生GG 基因型頻率低于首發(fā)組，突變純合AA 基因型頻率高于首發(fā)組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；兩組突變雜合型GA頻率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表3。

表3 兩組PEAR1 基因型分布情況比較[n（%）]

3 討論

3.1 缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的影響因素分析

《中國缺血性腦卒中和短暫性腦缺血發(fā)作二級預(yù)防指南》指出，腦卒中可控的危險因素包括高血壓、脂代謝異常、糖代謝異常和糖尿病、吸煙、呼吸睡眠暫停、高同型半胱氨酸血癥，不可控的危險因素包括性別、年齡、家族史[1]。腦卒中復(fù)發(fā)的影響因素多樣，發(fā)病機(jī)制也較為復(fù)雜，明確腦卒中患者復(fù)發(fā)相關(guān)影響因素及其可能的機(jī)制，進(jìn)行有效的二級預(yù)防，是防控腦卒中復(fù)發(fā)的重要措施之一[6]。越來越多的研究探討與缺血性腦卒中復(fù)發(fā)相關(guān)的危險因素，由于納入的危險因素不同，研究結(jié)果尚不一致。朱江等[7]對比首發(fā)與復(fù)發(fā)組間尿酸（UA）、同型半胱氨酸（Hcy）、纖維蛋白原（FIB）水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)UA、Hcy、FIB 均為缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的危險因素。廖琴等[8]通過Meta 分析發(fā)現(xiàn)高同型半胱氨酸血癥可能是腦卒中復(fù)發(fā)的危險因素。張曉林等[9]應(yīng)用隨機(jī)森林算法對首發(fā)缺血性腦卒中患者出院90 天復(fù)發(fā)進(jìn)行預(yù)測，結(jié)果表明飲酒、糖尿病、高脂血癥、舒張壓、載脂蛋白A 是缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的獨立危險因素。國內(nèi)外關(guān)于腦卒中復(fù)發(fā)的研究較多，但大多數(shù)是針對影響腦卒中復(fù)發(fā)的獨立危險因素研究，缺少多因素聯(lián)合研究。本研究將PEAR1 基因多態(tài)性與常見影響因素納入缺血性腦卒中首發(fā)組與復(fù)發(fā)組，發(fā)現(xiàn)糖尿病、高脂血癥比例、同型半胱氨酸水平、PEAR1 基因變異明顯影響缺血性腦卒中的復(fù)發(fā)。李釗等[10]認(rèn)為血糖升高使血小板對阿司匹林的敏感性降低；同時增加阿司匹林介導(dǎo)的血小板蛋白的乙酰化反應(yīng)，增高血小板聚集黏附；血糖升高可使體內(nèi)阿司匹林水解增加，降低阿司匹林的療效，是缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的危險因素。Callaly 等[11]研究顯示，高脂血癥是腦卒中復(fù)發(fā)的危險因素，2 年的累計復(fù)發(fā)風(fēng)險為10.8%。代桂寧等[12]研究發(fā)現(xiàn)降低腦卒中患者血漿同型半胱氨酸的水平，可預(yù)防腦卒中再次發(fā)生。同樣有研究報道，PEAR1 基因多態(tài)性與長期服用阿司匹林腦梗死卒中復(fù)發(fā)相關(guān)[13]。

3.2 PEAR1 基因型分布與缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的關(guān)系

血小板內(nèi)皮聚集體1（platelet endothelialaggregation receptor 1，PEAR1）是一種Ⅰ型細(xì)胞表面受體，其基因由23 個外顯子和22 個內(nèi)含子組成，在血小板和內(nèi)皮細(xì)胞以及其他細(xì)胞類型中高度表達(dá)，可以參與并影響血小板的活化和聚集，在血栓的形成中起到重要作用[14]。不同的PEAR1 基因型可能決定了服用阿司匹林后的血小板聚集和血栓事件的發(fā)生，本研究發(fā)現(xiàn)PEAR1 基因純合突變增加缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的風(fēng)險，這與已有的研究結(jié)果一致。趙佳麗[15]研究發(fā)現(xiàn)PEAR1 突變型GA+AA 基因型可能是腦梗死復(fù)發(fā)或死亡的危險因素。錢鳳丹等[16]研究發(fā)現(xiàn)PEAR1 基因型中攜帶A 等位基因的患者服用阿司匹林更易發(fā)生血小板聚集。李建設(shè)[13]等認(rèn)為PEAR1 基因純合突變增加腦梗死復(fù)發(fā)的風(fēng)險。

3.3 本研究的局限性

本研究結(jié)果顯示PEAR1 基因多態(tài)性與服用阿司匹林缺血性腦卒中復(fù)發(fā)相關(guān)，PEAR1 基因純合突變增加缺血性腦卒中復(fù)發(fā)的風(fēng)險。但本研究存在一定局限性，納入的病例數(shù)較少，且納入的影響因素有限。在今后的研究中，可考慮納入更全面的影響因素，擴(kuò)大樣本量，為預(yù)防缺血性腦卒中的復(fù)發(fā)提供更全面、合理的依據(jù)。