葡萄糖酸鈣鋅口服液聯(lián)合布拉酵母菌散劑治療輪狀病毒性腹瀉的效果

吳 用，孫 冕，黃淑芹，林 容

輪狀病毒感染是引起嬰幼兒腹瀉的常見原因之一，如患兒腹瀉癥狀得不到有效控制，一旦發(fā)生脫水癥狀甚至可引起患兒死亡。由于輪狀病毒感染性腹瀉的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，臨床上尚缺乏特效治療藥物[1]。常規(guī)的抗病毒、補(bǔ)液等方法可在一定程度上控制腹瀉病情，但不能糾正患兒腸道菌群紊亂狀態(tài)。布拉酵母菌散劑是一種真菌類口服微生態(tài)制劑，在感染性腹瀉、非特異性腹瀉、腸易激綜合征等疾病的治療中比較常用，可糾正腸道菌群紊亂、抗毒素、保護(hù)腸道上皮細(xì)胞[2]。鋅是維持小腸上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整性的重要微量元素，鋅缺乏可進(jìn)一步加重腹瀉的嚴(yán)重程度[3]。葡萄糖酸鈣鋅口服液是臨床上常用的鋅制劑，有研究將其應(yīng)用于輪狀病毒性腹瀉的輔助治療中，發(fā)現(xiàn)其可縮短患兒高熱、嘔吐、腹瀉等癥狀持續(xù)時間，有利于提高療效[4]。但其對患兒胃腸功能是否存在保護(hù)作用相關(guān)研究較少。本研究收集三亞市人民醫(yī)院120例輪狀病毒感染患兒作為研究對象，觀察葡萄糖酸鈣鋅口服液聯(lián)合布拉酵母菌散劑對其癥狀控制及胃腸功能的影響，以期為臨床治療提供參考，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2017年8月—2019年10月三亞市人民醫(yī)院收治的120例輪狀病毒感染患兒作為研究對象，根據(jù)治療方法分為常規(guī)組與聯(lián)合組，各60例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《諸福棠實用兒科學(xué)》[5]中輪狀病毒的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，即腹瀉多呈水樣或蛋花湯便，大便培養(yǎng)無致病菌生長，大便輪狀病毒抗原陽性，大便輪狀病毒弱陽性或陽性；②腹瀉時間12～72 h；③入院前未服用過相關(guān)治療藥物；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝腎功能障礙、先天性心臟病、先天性腸道發(fā)育不全者；②嚴(yán)重營養(yǎng)不良者；③伴有明顯的重要器官衰竭癥狀者；④嘔吐不能口服給藥者；⑤過敏體質(zhì)。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 常規(guī)組給予飲食指導(dǎo)、合理補(bǔ)液、抗病毒[口服利巴韋林5 mg/（kg·次），2次/d]、預(yù)防或糾正電解質(zhì)紊亂等常規(guī)治療。聯(lián)合組在常規(guī)組治療基礎(chǔ)上給予葡萄糖酸鈣鋅口服液（澳諾制藥有限公司）聯(lián)合布拉酵母菌散劑（法國百科達(dá)制藥廠）治療。布拉酵母菌散劑1袋/次，1次/d，溫涼水沖服。葡萄糖酸鈣鋅口服液3 ml/次，3次/d，口服。連續(xù)治療3 d。

1.2.2 胃腸激素檢查方法 分別于治療前、治療3 d后抽取患兒外周靜脈血3 ml，在4 ℃下以轉(zhuǎn)速3000 r/min、離心半徑8 cm、離心時間10 min分離血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血清胃泌素（gastrin,GAS）、胃動素（motilin,MOT）、血管活性腸肽（vascularly active intestinal peptide,VIP）水平。檢測儀器：美國Beckman免疫分析儀，試劑盒生產(chǎn)廠家：上海酶聯(lián)生物科技有限公司。上述實驗操作步驟嚴(yán)格遵照試劑盒說明書。

1.2.3 腸道菌群檢查方法 分別于治療前、治療3 d后取患兒新鮮糞便1 g置于無菌采集管，采用實時熒光定量PCR法檢測腸道菌群。采用CA公司QIAamp DNA Stool Mini Kit試劑盒提取糞便中菌群總DNA。設(shè)計腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌特異性引物，并在BLAST基因庫對比引物特異性，引物設(shè)計由上?；倒竞铣伞２捎觅|(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。分別進(jìn)行上述3種細(xì)菌的實時熒光定量PCR，結(jié)果以細(xì)菌拷貝數(shù)的常用對數(shù)/g濕糞表示。

1.3 觀察指標(biāo) ①臨床治療總有效率；②癥狀改善時間（退熱、止瀉、止吐、大便性狀正常）、住院時間；③用藥期間不良反應(yīng)發(fā)生情況。

1.4 療效判斷[6]①顯效：治療3 d后，體溫恢復(fù)正常，大便性狀、量和次數(shù)恢復(fù)正常，脫水、嘔吐、發(fā)熱等癥狀、體征完全消失。②有效：治療3 d后，體溫逐漸下降至正常，大便次數(shù)和性狀顯著改善，脫水、嘔吐、發(fā)熱等癥狀、體征未完全消失。③無效：未達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)，癥狀未改善或加重。總有效率=（顯效+有效）/患者例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 使用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù)，計量資料呈正態(tài)分布，用±s描表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗，組內(nèi)比較采用自身配對t檢驗。計數(shù)資料用例（%）表示，率的比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2組一般資料比較 2組性別、年齡、發(fā)病至入院時間、入院時體溫及脫水程度等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。見表1。

表1 2組一般資料比較Table 1 Comparison of general data between 2 groups

2.2 2組療效比較 聯(lián)合組總有效率為93.33%，明顯高于常規(guī)組的80.00%，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 2組療效比較[例（%）]Table 2 Comparison of curative effect between 2 groups[cases(%)]

2.3 2 組癥狀改善時間、住院時間比較 聯(lián)合組退熱時間為（1.69±0.42）d、止瀉時間為（2.28±0.45）d、止吐時間為（1.92±0.44）d、大便性狀正常時間為（2.30±0.45）d、住院時間為（4.82±1.37）d，均短于常規(guī)組，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P均＜0.05）。見表3。

表3 2組癥狀改善時間、住院時間比較（±s，d）Table 3 Comparison of symptom improvement time and hospitalization time between 2 groups(±s,d)

表3 2組癥狀改善時間、住院時間比較（±s，d）Table 3 Comparison of symptom improvement time and hospitalization time between 2 groups(±s,d)

組別 n退熱時間 止瀉時間 止吐時間 大便性狀正常時間 住院時間常規(guī)組 60 2.28±0.47 3.05±0.67 2.47±0.49 3.12±0.74 6.21±1.54聯(lián)合組 60 1.69±0.42 2.28±0.45 1.92±0.44 2.30±0.45 4.82±1.37 t值 7.251 7.390 6.469 7.334 5.224 P值 0.000 0.000 0.000 0.000 0.000

2.4 2 組腸道菌群含量比較 治療前，2組糞便標(biāo)本中腸道菌群含量組間比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。治療后，2組糞便標(biāo)本中雙歧桿菌、乳酸桿菌含量較治療前上升，腸桿菌含量較治療前下降，且聯(lián)合組糞便標(biāo)本中腸道菌群含量改善程度均高于常規(guī)組（P均＜0.05）。見表4。

表4 2組腸道菌群含量比較（±s，1og 拷貝數(shù)/g濕糞）Table 4 Comparison of intestinal flora contents between 2 groups(±s,log copies/ g wet manure)

表4 2組腸道菌群含量比較（±s，1og 拷貝數(shù)/g濕糞）Table 4 Comparison of intestinal flora contents between 2 groups(±s,log copies/ g wet manure)

注：常規(guī)組治療前后比較，自身配對t檢驗：腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌依次為t=9.006，P=0.000；t=4.214，P=0.000；t=4.022，P=0.000。聯(lián)合組治療前后比較，自身配對t檢驗：腸桿菌、雙歧桿菌、乳酸桿菌依次為t=13.230，P=0.000；t=11.523，P=0.000；t=8.573，P=0.000

組別 n 腸桿菌 雙歧桿菌 乳酸桿菌治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d常規(guī)組 60 7.71±0.36 7.15±0.32 0.56±0.04 7.48±0.45 7.85±0.51 0.37±0.06 7.15±0.56 7.58±0.61 0.43±0.05聯(lián)合組 60 7.64±0.58 6.54±0.28 1.10±0.30 7.52±0.48 8.64±0.58 1.12±0.10 7.11±0.52 8.04±0.66 0.93±0.14 t值 0.794 13.820 0.471 49.816 0.405 26.053 P值 0.629 0.000 0.639 0.000 0.686 0.000

2.5 2組胃腸激素水平比較 治療前，2組胃腸激素水平組間比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P均＞0.05）。治療后，2組GAS、MOT、VIP水平均較治療前下降，且聯(lián)合組GAS、MOT、VIP水平下降幅度均高于常規(guī)組（P均＜0.05）。見表5。

表5 2組胃腸激素水平比較（±s，μg/L）Table 5 Comparison of gastrointestinal hormone levels between 2 groups(±s,μg/L)

表5 2組胃腸激素水平比較（±s，μg/L）Table 5 Comparison of gastrointestinal hormone levels between 2 groups(±s,μg/L)

注：常規(guī)組治療前后比較，自身配對t檢驗：GAS、MOT、VIP依次為t=11.309，P=0.000；t=18.965，P=0.000；t=13.363，P=0.000。聯(lián)合組治療前后比較，自身配對t檢驗：GAS、MOT、VIP依次為t=14.028，P=0.000；t=19.419，P=0.000；t=17.280，P=0.000

組別 n GAS MOT VIP治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d 治療前 治療后 差值d常規(guī)組 60 1258.54±254.63 845.61±123.14 412.93±131.49 561.47±79.58 323.02±56.14 238.45±23.44 614.56±214.02 212.35±92.47 402.21±121.55聯(lián)合組 60 1238.56±261.11 728.59±105.44 509.97±155.67 549.96±101.44 271.56±45.19 278.40±56.25 628.46±198.88 152.37±77.42 476.09±121.46 t值 0.424 3.689 0.692 5.078 0.369 3.330 P值 0.672 0.000 0.491 0.000 0.713 0.001

2.6 2組用藥期間不良反應(yīng)情況 2組患兒均未發(fā)生不良反應(yīng)及變態(tài)反應(yīng)。

3 討 論

輪狀病毒是引起嬰幼兒秋、冬季腹瀉常見的病原體，由于3歲以下的嬰幼兒腸道功能尚未發(fā)育成熟，因此是輪狀病毒性腹瀉的高發(fā)群體[7]。目前，輪狀病毒性腹瀉的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，尚無特效治療方法[8]。因此尋找安全、有效的治療方案對改善輪狀病毒性腹瀉患兒預(yù)后有益[9]。

輪狀病毒性腹瀉具有一定的自限性，臨床治療以抗病毒、補(bǔ)液等綜合治療為主。布拉酵母菌是臨床常用的腸道微生態(tài)制劑，可干擾腸道致病菌定植、生長，促進(jìn)腸道分泌蛋白酶水解有害菌產(chǎn)生的毒素[10]。有研究發(fā)現(xiàn)，布拉酵母菌治療輪狀病毒腹瀉具有良好的效果，可減輕腹瀉癥狀，減少患兒住院時間，同時抑制患兒免疫炎癥反應(yīng)，降低血清TNF-α、IL-6等炎癥因子的表達(dá)，但仍有相當(dāng)一部分患兒的療效欠佳，腹瀉癥狀不能得到及時、有效的緩解[11]。

近年來關(guān)于輪狀病毒腹瀉的研究發(fā)現(xiàn)，鋅元素缺乏與腹瀉病情加重密切相關(guān)[12]。鋅是人體必需的微量元素，參與多種代謝酶合成，并與酶活性直接相關(guān)[13]。鋅缺乏可直接影響多種免疫細(xì)胞的分化，造成免疫應(yīng)答紊亂，進(jìn)一步加重小腸黏膜上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能損傷[14]。有學(xué)者提出，在輪狀病毒性腹瀉的治療中應(yīng)注重補(bǔ)充鋅元素[15]。葡萄糖酸鈣鋅是臨床上常用的鋅制劑，有研究證實其可縮短輪狀病毒性腹瀉病程，促進(jìn)不適癥狀消失[16]。本研究中依據(jù)說明書和臨床用藥經(jīng)驗，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上采用合適劑量的葡萄糖酸鈣鋅聯(lián)合布拉酵母菌治療，發(fā)現(xiàn)其總有效率高于常規(guī)治療組，退熱時間、止瀉時間、止吐時間、大便性狀正常時間、住院時間均短于常規(guī)治療組，以上結(jié)果與已有的臨床研究結(jié)論一致[17]。可能是由于葡萄糖酸鈣鋅中所含的鋅離子能促進(jìn)腸黏膜細(xì)胞再生、修復(fù)，改善腸道對水、電解質(zhì)的重吸收而緩解腹瀉癥狀。葡萄糖酸鈣鋅中所含的鈣離子還能補(bǔ)充腹瀉導(dǎo)致的鈣流失。

目前臨床常用的腸道益生菌包括細(xì)菌、真菌兩大類，其中真菌類微生態(tài)制劑并非胃腸道原籍菌，口服后不會被胃酸、膽酸、抗生素等破壞[18]。布拉酵母菌是一種真菌類微生態(tài)制劑，可激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、補(bǔ)體系統(tǒng)，促進(jìn)免疫球蛋白分泌而抑制腸道致病微生物生存[19]。本研究中2組患兒治療后糞便標(biāo)本中雙歧桿菌、乳酸桿菌含量均較治療前上升，腸桿菌含量較治療前下降，且聯(lián)合組糞便標(biāo)本中腸道菌群含量改善程度均高于常規(guī)組。以上結(jié)果提示，葡萄糖酸鈣鋅口服液聯(lián)合布拉酵母菌散劑可更好地促進(jìn)輪狀病毒感染患兒腸道菌群平衡重建，雙歧桿菌、乳酸桿菌含量升高后可迅速在腸黏膜表面形成保護(hù)性屏障，其腸道代謝產(chǎn)物具有抗菌活性，可抑制致病菌腸桿菌的繁殖。鋅作為多種酶的輔酶，可升高小腸上皮細(xì)胞刷狀緣的酶水平和活性，增加腸道抗感染能力，進(jìn)一步促進(jìn)腸道菌群平衡重建。

胃腸道不僅是消化器官，也是復(fù)雜的內(nèi)分泌器官，通過釋放胃腸激素而調(diào)控胃腸功能。GAS是由小腸上部黏膜、胃竇合成的激素，過高的GAS可引起腸道過度運(yùn)動而導(dǎo)致腹瀉[20]。MOT 可引起消化間期運(yùn)動綜合波，增加腸黏膜水電解質(zhì)分泌而引起腹瀉[21]。VIP 是一種胃腸神經(jīng)肽，可增強(qiáng)腸道神經(jīng)應(yīng)激反應(yīng)而引起腹瀉[22]。輪狀病毒感染后腸黏膜細(xì)胞被破壞，產(chǎn)生腸毒素，破壞腸功能，胃腸道激素分泌異常，引起腸蠕動功能異常、腸黏膜水電解質(zhì)分泌紊亂而發(fā)生腹瀉。本研究中2組患兒治療后血清GAS、MOT、VIP水平均較治療前下降，且聯(lián)合組GAS、MOT、VIP水平下降幅度均高于常規(guī)組，以上結(jié)果提示，葡萄糖酸鈣鋅口服液聯(lián)合布拉酵母菌散劑可更好地改善輪狀病毒感染患兒胃腸激素水平。可能是由于鋅元素能促進(jìn)腸道黏膜的修復(fù)、再生，促進(jìn)腸道上皮修復(fù)，糾正了胃腸激素分泌紊亂狀態(tài)。本研究中2組患兒均未發(fā)生不良反應(yīng)及變態(tài)反應(yīng)，說明葡萄糖酸鈣鋅口服液聯(lián)合布拉酵母菌散劑治療輪狀病毒感染的安全性良好。

本研究結(jié)果證實了葡萄糖酸鈣鋅口服液聯(lián)合布拉酵母菌散劑在治療輪狀病毒感染中的優(yōu)勢，但這兩種藥是何種在發(fā)揮作用以及發(fā)生了多少作用并不能確定，因此在后續(xù)治療中應(yīng)進(jìn)行細(xì)化分析，增加葡萄糖酸鈣鋅口服液組、布拉酵母菌散劑組以進(jìn)一步探討葡萄糖酸鈣鋅口服液、布拉酵母菌散劑在治療輪狀病毒感染中的作用。

綜上所述，葡萄糖酸鈣鋅口服液聯(lián)合布拉酵母菌散劑可促進(jìn)輪狀病毒感染患兒臨床癥狀的消失，改善胃腸激素水平，平衡腸道菌群，提高療效。