中藥枸杞提取液對糖尿病模型小鼠治療效果的實(shí)驗(yàn)研究

唐金詰 鄧錦霞 黃靜 黃鷗飛 李文仕

摘要：目的 探討中藥枸杞提取液對糖尿病模型小鼠治療效果. 方法 用鏈佐霉素對小鼠腹腔注射，建立糖尿病模型. 鏈佐霉素， 劑量按55mg/kg體重腹腔注射， 連續(xù)5次（日）。待血糖升高后，將造模小鼠分為：模型組（不治療），治1組，治2組， 另設(shè)一組為正常組。治1組用舒糖寶口服液治療，治2組用枸杞提取液治療， 模型組和正常組為對照組。測定造模前、造模后和治療后血糖、尿糖含量。治療結(jié)束，從眼球取血，測定血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、尿素等生化指標(biāo). 結(jié)果 按模型組、治1組、治2組、正常組依次排列，造模前血糖， 4.45±0.82、5.02±1.37、5.28±1.33、5.58±1.44（mmol/L），P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義;造模后（治療前）血糖，26.65±7.49★★、28.43±5.40★★、27.77±5.25★★、5.68±0.25（mmol/L），、★★P<0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后血糖，20.52±4.45★★、17.06±5.87★★、16.59±4.58★★、4.95±0.51★★P<0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療前尿糖，0.79±0.82★、40.00±53.17、12.92±11.80★ 、0，（mmol/L），★P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后第2次尿糖，128.19 ±42.05、53.90 ±36.17★★△△、97.74 ±10.61★★、0，（mmol/L），★★P<0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 血清尿素 ， 10.90±1.45▲▲、11.63±3.24▲▲、11.22±1.76▲▲、8.31±1.17 （mmol/L），▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義;血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力，36.50±22.90、30.33±14.06▲、47.38±16.71 、27.22±5.04▲▲（U/L），▲P<0.05，▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。血清總蛋白， 48.75±5.08▲50.98±3.83 49.90±5.28▲54.07±2.51（g/L）與正常組比較，▲ P<0.05;差異有統(tǒng)計學(xué)意義;結(jié)論 造模后血糖、尿糖含量明顯升高， 提示造模是成功的， 治療后血糖有明顯降低， 尿糖治療組也明顯低于模型組（不治療），以治1組最低。綜合分析，說明二組均有一定療效，以治1組較顯著.

關(guān)鍵詞：糖尿病模型;血糖;枸杞;治療;

【中圖分類號】R587.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】1673-9026（2021）08-060-01

1.試劑與方法

1.1試劑與材料 鏈佐霉素，分析鈍，國產(chǎn)產(chǎn)品（成都艾科化工試劑公司產(chǎn)品）;檸檬酸、檸檬酸鈉，硫脲、飽和硼酸、鄰甲苯胺、冰乙酸、標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖，均為國產(chǎn)分析鈍?？偰懝檀迹═C）、甘油三酯（TG）、尿素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶測定試劑盒，購自南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

1.2藥品 舒糖寶，用酸荔枝、番石榴、沙田柚等果類提取制成，由本院海爾福研制中心提供。枸杞提取液，為本市中藥店購買的于品.水提取，制得提取液0.1g/ml.1.3動物 53只小白鼠，昆明種，雌雄各半，健康，鼠齡3個月，體重25-35克.由學(xué)院動物室提供（動物使用許可證：syxk桂2011-0010， 動物生產(chǎn)許可證號：scxk桂2012-0003）。

1.4動物實(shí)驗(yàn) 53只小白鼠， 42只造模，注射鏈佐霉素，劑量按55mg/kg體重/每天，用0.1mol/L檸檬酸緩沖液（pH4.2）溶解后進(jìn)行腹腔注射，每日一次，連續(xù)5日。測定造模后3日血糖。造模組分成3組：模型組10只、治1組（16只）、治2組16。另設(shè)正常組（11只）。按成人劑量折算，治1組用舒糖寶治療，每鼠取原液0.1ml加蒸餾水稀釋至0.4ml灌胃，每日一次，。治2組用枸杞提取液治療，每鼠取枸杞提取液原液0.1ml加蒸餾水稀釋至0.4ml灌胃，每日一次治療10天; 正常組、模型組用等體積蒸餾水代替，方法相同。測定造模前、后和治療后血糖。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，從眼球取血，分離血清， 測定血清TG、TC和尿素。

1.5測定方法 血糖，用鄰甲苯胺微量法測定，從小鼠尾巴取全血20ul，按文獻(xiàn)操作（5）。TC用COD-CE-PAP法測定;TG用GPO-PAP法測定;尿素，用脲酶波氏法測定;具體操作按試劑盒說明書。

1.6統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)用軟件統(tǒng)計，方差分析，Q檢驗(yàn)。結(jié)果用（）表示。

2.結(jié)果

2.1一般情況 模型組開始10只小鼠， 至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，無死亡; 治療1組16只小鼠， 死亡2只， 治療2組16只小鼠， 死亡1只， 正常組11只小鼠， ，無死亡.

2.2造模前，后和治療后血糖含量測定結(jié)果。結(jié)果顯示， 造模前，各組血糖在正常范圍內(nèi)，組間無明顯差異; 造模后造模各組血糖明顯升高; 治療后乃然在高水平，未到正常.見表1.

方差分析：組間比較：造模前，各組比較，F(xiàn)=1.459，P=0.237，P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義;造模后（治療前），F(xiàn)=46.379，P=0.000，與正常組比較，★★P<0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 與正常組比較，△△P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后，F(xiàn)=21.082，P=0.000， 與正常組比較， ★★P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義;

2.3各組治療后血清甘油三酯、尿素、總蛋白含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測定結(jié)果。結(jié)果顯示， 甘油三脂， 差異無統(tǒng)計學(xué)意義;正常組尿素明顯低于其他各組; 正常組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶明顯低于其他各組，治1組谷丙轉(zhuǎn)氨酶接近正常組;血清總蛋白差異有統(tǒng)計學(xué)意義， 正常組明顯高于模型組和治2組， 模型組最低; 見表2。

甘油三脂， F=1.186，P=0.316， P>0.05，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。尿素， F=5.798，P=0.002，與正常組比較，▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義;谷丙轉(zhuǎn)氨酶， F=3.768，P=0.020，，與治療2組比較， ▲P<0.05，▲▲ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。血清總蛋白， F=2.721，P=0.057，，與正常組比較，▲ P<0.05;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.4治療前、后尿糖含量測定結(jié)果。結(jié)果顯示， 正常組治療前、后尿糖均為0。 治療前、 治療后第1次尿糖， 均為治療1組最高; 治療后第2次， 模型組最高。 見表3。

方差分析：尿糖， 組間比較：造模后，各組比較，F(xiàn)=3.069，P=0.040， P<0.05，與治1組比較， ★P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后第1次尿糖，F(xiàn)=15.166，P=0.000， 與治1組比較，★★P<0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 治療后第2次尿糖， F=46.831，P=0.000， 與模型組比較，★★P<0.01，差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 與治2組比較，△△P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義;

2.5治療后二種方法測定血糖含量比較， 結(jié)果顯示， 二種方法有較大誤差， 酶法測定明顯高于鄰甲苯胺法. 見表4.

方差分析：;治療后，組間比較，鄰甲苯胺法，F(xiàn)=14.444，P=0.000， 與正常組比較， ★★P<0.01; 差異有統(tǒng)計學(xué)意義; 酶法， F=89.956，，P=0.000，與正常組比較， ★★ P<0.01;差異有統(tǒng)計學(xué)意義。與治療1組比較， ▲ P<0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3討論

3.1造模后血糖、尿糖含量明顯升高， 提示造模是成功的。造模前各組血糖均在正常范圍內(nèi)，組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義;造模后各組血糖升至11.1mmol/l以上[4]， 明顯高于造模前， 而且明顯高于正棠組。同時各組出現(xiàn)了尿糖，以模型組較低， 正常組沒有尿糖。

3.2治療后血糖有明顯降低，但可能由于血糖太高，無法降至正常，仍處于較高水平上， 尿糖治療1，2組也明顯低于模型組（不治療），以治療1組尿糖最低， 明顯低于其他二組，效果較好.結(jié)果說明二組均有一定療效。

3.3糖尿病從臨床上可見，常出現(xiàn)各種并發(fā)癥，如脂類代謝異常、腎病、心血管病、眼病等。本實(shí)驗(yàn)，從血清其他指標(biāo)看， 甘油三酯各組間無明顯差異.說明脂類代謝可能尚未出現(xiàn)異常[4]，但糖尿病患者并非都有脂類代謝異常，文獻(xiàn)報道僅有部分患者出現(xiàn);糖尿病引起的腎功能障礙是糖尿病常見的并發(fā)癥，使血清尿素等排泄障礙而升高，本實(shí)驗(yàn)血清尿素正常組明顯低于其他三組，說明可能糖尿病高血糖已影到腎功能，使尿素排泄障礙。 血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和總蛋白，與肝功能密功相關(guān)，是肝功能常測的指標(biāo)之一， 肝功能異常常引起轉(zhuǎn)氨酶升高， 總蛋白下降;實(shí)驗(yàn)提示，正常組和治1組谷丙轉(zhuǎn)氨酶低而總蛋白高，說明肝功能良好，而模型組和治療2組正好相反， 說明肝功能受到一定程度損害。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果，并非十全十美，有些結(jié)果還需進(jìn)一步探討，尋找原因，如血糖測定， 鄰甲苯胺法測全血與酶法測血清，結(jié)果血糖含量酶法高了很多，前面測定的都是用鄰甲苯胺法測尾巴全血的，按道理推算，還要更高？還需進(jìn)一步探討。

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作者簡介：第一作者：唐金詰，出生年月：1998年10月。右江民族醫(yī)學(xué)院2017級中藥學(xué)本科班學(xué)生。通訊作者：李文仕3，副主任藥師，E-mail： sqzhang224@163.com