對抑郁癥患者外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平進(jìn)行檢測的臨床意義

趙 軼，米秋蓉，王斌紅，任智勇，孔臨萍，趙紅偉，劉五華，朱亞宏

（1.太原市精神病醫(yī)院臨床心理科，山西 太原 030001；2.山西省兒童醫(yī)院麻醉科，山西 太原 030001；3.太原市精神病醫(yī)院精神分裂癥女科，山西 太原 030001）

抑郁癥是一種以顯著、持久的心境低落為主要特征的精神疾病，具有發(fā)病率高、復(fù)發(fā)率高、治愈困難及危害大等特點(diǎn)。世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)，抑郁癥在全球范圍內(nèi)的發(fā)病率約為4.4%，全世界約有3.22億人遭受抑郁癥的困擾[1]?，F(xiàn)階段，臨床上尚未徹底闡明抑郁癥的確切病因，一般認(rèn)為此病的發(fā)生可能與生物因素、心理因素、社會環(huán)境因素等有關(guān)。目前臨床上已發(fā)現(xiàn)多種因子（如生長因子、細(xì)胞因子、內(nèi)分泌因子）與抑郁癥的發(fā)生發(fā)展存在相關(guān)性，但用此類因子診斷抑郁癥的敏感性和特異性有限[2]。因此，臨床上迫切需要找到一種敏感性和特異性高的生物標(biāo)志物來診斷抑郁癥。miRNA作為廣泛分布于人體各組織器官中的一類單鏈非編碼RNA，在轉(zhuǎn)錄后可通過反向調(diào)控基因的表達(dá)來參與生物多種生命活動的調(diào)節(jié)過程[3]。有研究指出，miRNA的差異性表達(dá)與包括抑郁癥在內(nèi)的多種疾病的發(fā)生密切相關(guān)。本文主要是探討對抑郁癥患者外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平進(jìn)行檢測的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2019年1月至2020年5月期間我院收治的77例抑郁癥患者與同期在我院進(jìn)行體檢的80例健康人作為研究對象。將其中77例抑郁癥患者設(shè)為病例組，將其中80例健康人設(shè)為對照組。病例組患者的納入標(biāo)準(zhǔn)是：病情符合《精神疾病診斷與統(tǒng)計(jì)手冊》第5版（the diagnostic and statistical manual of mental disorders，DSM-5）中關(guān)于抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；入院時(shí)漢密頓抑郁量表（Hamilton depression Scale，HAMD）17項(xiàng)的評分≥17分；既往未使用過任何抗抑郁藥物或抗精神病藥物；其本人（或其家屬）簽署了自愿參與本研究的知情同意書。其排除標(biāo)準(zhǔn)是：合并有其他精神疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、嚴(yán)重的軀體疾病或有顱腦外傷史；對酒精、其他物質(zhì)依賴或?yàn)E用；有雙相情感障礙、精神分裂癥等精神疾病家族史；處于妊娠期或哺乳期女性。對照組健康人的納入標(biāo)準(zhǔn)是：身體健康，無重大疾??；性別、年齡等與病例組患者匹配；自愿參與本研究。其排除標(biāo)準(zhǔn)是：有抑郁發(fā)作史；患有精神疾病或嚴(yán)重的軀體疾??；有雙相情感障礙、精神分裂癥等精神疾病家族史；處于妊娠期或哺乳期女性。在病例組中，有男性40例，女性37例；其年齡為21～48歲，平均年齡為（32.12±5.68）歲；其病程為3～10年，平均病程為（6.51±2.34）年。在對照組中，有男性47例，女性33例；其年齡為21～40歲，平均年齡為（28.26±5.34）歲。兩組研究對象的年齡、性別相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。本研究已通過我院醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準(zhǔn)。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 采集兩組研究對象清晨（8:00～9:30之間）空腹?fàn)顟B(tài)下的靜脈血，對血液標(biāo)本進(jìn)行離心處理，分離出血清，提取血清中的外周血細(xì)胞作為標(biāo)本，并將分離提取的標(biāo)本置于-80℃的冰柜中保存待檢。采用國產(chǎn)的Thmorgan G2000 PCR儀及實(shí)時(shí)熒光定量法（Quantitative Real-time PCR）檢測外周血細(xì)胞中miRNA-26a/b的表達(dá)水平，提取DNA的試劑盒由美國Sigma公司生產(chǎn)，SYBR定時(shí)定量試劑由德國Gene公司生產(chǎn)。將β-actin作為內(nèi)參，以特異性結(jié)核分枝桿菌插入序列IS6110作為目的基因，β-actin的正向引物為5′-AGTTGCGTTACCCTTTCTTH-3′，反向引物為5′-TCACCTTCACCGTTCCAGTTT-3′，結(jié)核分枝桿菌的正向引物為5′-TTGGAAAGGATGGGGTCA-3′，反向引物為5′-CGCAGCCAACACCAAGTAG-3′。以上所有引物均由日本TaKaRa公司設(shè)計(jì)合成。

1.2.2 治療及療效判定方法 規(guī)范性使用選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（selective serotonin reuptake inhibitors，SSRI）對病例組患者進(jìn)行抗抑郁治療。治療前后，根據(jù)患者的HAMD-17評分用有效、緩解和無效評估其療效。有效：治療后患者的HAMD-17評分較治療前降低＞50%。緩解：治療后患者的HAMD-17評分較治療前降低25%～50%。無效：治療后患者的HAMD-17評分較治療前降低＜25%。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩組研究對象外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平。比較治療前后病例組患者中療效不同的患者外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 19.0軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用%表示，用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料用±s表示，兩組之間比較用t檢驗(yàn)，多組之間比較用F檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對象外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平

與對照組健康人相比，病例組患者外周血中miRNA-26a的表達(dá)水平更高，miRNA-26b的表達(dá)水平更低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表1。

表1 兩組研究對象外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平（±s ）

表1 兩組研究對象外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平（±s ）

組別 miRNA-26a miRNA-26b病例組（n=77） 0.031±0.009 0.189±0.012對照組（n=80） 0.004±0.001 0.751±0.098 t值 5.263 6.782 P值 ＜0.05 ＜0.05

2.2 治療前后病例組患者中療效不同的患者外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平

在病例組患者中，有42例患者的治療效果為有效，有35例患者的治療效果為緩解。其中，治療效果為有效和緩解的患者在治療前其外周血中miRNA-26a、miRNA-26b的表達(dá)水平相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療8周后、12周后及6個(gè)月后其外周血中miRNA-26a的表達(dá)水平均低于治療前，miRNA-26b的表達(dá)水平均高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；治療8周后、12周后及6個(gè)月后其中治療效果為有效的患者外周血中miRNA-26a的表達(dá)水平均低于治療效果為緩解的患者，miRNA-26b的表達(dá)水平均高于治療效果為緩解的患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。詳見表2、表3。

表2 治療前后病例組患者中療效不同的患者外周血中miRNA-26a的表達(dá)水平（±s ）

表2 治療前后病例組患者中療效不同的患者外周血中miRNA-26a的表達(dá)水平（±s ）

治療效果 治療前 治療8周后 治療12周后 治療6個(gè)月后有效（n=42）0.032±0.005 0.025±0.004 0.018±0.003 0.010±0.006緩解（n=35）0.033±0.004 0.031±0.005 0.026±0.004 0.019±0.005 t值 0.158 6.841 10.364 9.872 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

表3 治療前后病例組患者中療效不同的患者外周血中miRNA-26b的表達(dá)水平（±s ）

表3 治療前后病例組患者中療效不同的患者外周血中miRNA-26b的表達(dá)水平（±s ）

治療效果 治療前 治療8周后 治療12周后 治療6個(gè)月后有效（n=42）0.152±0.022 0.289±0.012 0.345±0.014 0.507±0.079緩解（n=35）0.164±0.038 0.202±0.008 0.279±0.028 0.432±0.056 t值 0.296 5.820 6.893 8.459 P值 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

3 討論

近年來，我國抑郁癥的發(fā)病率逐年升高。此病患者的早期癥狀不明顯，隨著其抑郁情緒的加重，可逐漸出現(xiàn)心境低落、抑郁悲觀、思維遲緩、興趣下降等表現(xiàn)，部分病情嚴(yán)重者可出現(xiàn)自殘、自殺的想法或行為[5]。有報(bào)道稱，miRNAs參與了抑郁癥的多個(gè)發(fā)病機(jī)制，尤其在突觸可塑性、神經(jīng)形成、信號傳導(dǎo)通路關(guān)鍵性元件的基因表達(dá)調(diào)控等方面發(fā)揮著重要作用[6]。張東子等[7]采用芯片篩選和熒光定量PCR后期驗(yàn)證法對抑郁癥患者進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，其體內(nèi)單核細(xì)胞中miRNA-26b的表達(dá)明顯上調(diào)。任倩等[8]研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-26a對于突觸傳遞長時(shí)程增強(qiáng)（long-term potentiation，LTP）的維持具有重要的調(diào)控作用。突觸傳遞LTP是突觸可塑性的一種重要表現(xiàn)形式，誘導(dǎo)突觸傳遞LTP可使部分miRNA上調(diào)和部分miRNA下調(diào)，這些改變可能會導(dǎo)致抑郁癥的發(fā)生。關(guān)于miRNA-26b的研究，大多報(bào)道稱其與人類惡性腫瘤的發(fā)生存在密切的相關(guān)性。另外，miRNA-26b在神經(jīng)發(fā)生和神經(jīng)元分化的過程中也發(fā)揮著重要作用。有研究指出，miRNA-26b參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)（central nervous system，CNS）的調(diào)控發(fā)育。阿爾茨海默病患者和精神分裂癥患者體內(nèi)的miRNA-26b均存在異常調(diào)控的現(xiàn)象[9]。張理義等[10]認(rèn)為，miRNA-26b的異常表達(dá)可能在神經(jīng)紊亂和精神疾病的發(fā)生中起到重要作用。

本研究的結(jié)果證實(shí)，對抑郁癥患者外周血中miRNA-26a/b的表達(dá)水平進(jìn)行檢測有助于診斷其病情，評估其療效及預(yù)后。