馬拉色菌感染對尋常型銀屑病患者血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子的影響及與病情關(guān)聯(lián)性

曾令斌 陸捷潔 吳偉偉 韓秋月 王愛民

[摘要]目的：探討馬拉色菌感染對尋常型銀屑病（Psoriasis vulgaris，PV）患者血清P物質(zhì)（Substance P，SP）、Th1/Th2有關(guān)因子的影響及與病情關(guān)聯(lián)性。方法：選取2017年4月-2019年10月筆者科室就診的62例馬拉色菌感染PV患者為感染組，同期62例未感染馬拉色菌PV患者為未感染組。對比兩組患者一般資料、血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子[白細(xì)胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、白細(xì)胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白細(xì)胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、干擾素-γ（Interferon-γ，INF-γ）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）]水平，Spearman相關(guān)系數(shù)分析馬拉色菌感染與患者血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子表達(dá)的關(guān)聯(lián)性，并比較不同馬拉色菌密度感染患者病情程度，分析馬拉色菌密度與病情程度的相關(guān)性。結(jié)果：感染組血清SP、Th2有關(guān)因子水平高于未感染組，血清Th1有關(guān)因子水平低于未感染組（P<0.05）;感染組病情程度為重度患者馬拉色菌密度顯著高于中度、輕度患者（P<0.05）;血清SP、Th2有關(guān)因子水平與馬拉色菌感染呈正相關(guān)，血清Th1因子水平與馬拉色菌感染呈負(fù)相關(guān)，馬拉色菌密度與感染組患者病情程度呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：馬拉色菌感染PV患者存在血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子異常波動情況，其機(jī)制可能是馬拉色菌感染后引起的免疫異常，進(jìn)一步增加馬拉色菌增殖活性，加重病情，臨床可根據(jù)上述因子表達(dá)情況制定治療方案。

[關(guān)鍵詞]馬拉色菌;尋常型銀屑病;P物質(zhì);Th1;Th2;白細(xì)胞介素-4;干擾素-γ

[中圖分類號]R758.63? ? [文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2021）07-0058-04

Effect of Malassezia Infection on Serum SP， Th1/Th2 Related Factors in Patients with Psoriasis Vulgaris and Its Correlation with the Disease

ZENG Ling-bin， LU Jie-jie， WU Wei-wei， HAN Qiu-yue， WANG Ai-min

[Department of Dermatology Ward 1， Hainan Provincial Dermatology Hospital （Hainan Provincial Center for Dermatology and Venereal Disease Control）， Haikou 570000， Hainan，China]

Abstract： Objective? To investigate the effect of Malassezia infection on substance P （SP） and Th1/Th2 related factors in patients with psoriasis vulgaris （PV） and their relationship with disease. Methods? From April 2017 to October 2019， 62 patients with PV infected with Malassezia in our hospital were selected as the infection group， and 62 patients without PV infected with Malassezia were selected as the uninfected group in the same period.Compare the general information of two groups， serum SP， Th1/Th2 related factors [Interleukin-10 （IL-10）， Interleukin-4 （IL-4）， Interleukin-2 （IL-2）， Interferon-γ （INF-γ）， Tumor necrosis factor-α （TNF-α）] levels of the two groups.Spearman correlation coefficient analysis of the correlation between Malassezia infection and the expression of SP， Th1/Th2 related factors in patients' serum，the disease severity of patients with different Malassezia density infections was compared， and the correlation between the density of Malassezia bacteria and the disease severity was analyzed. Results? The levels of serum SP and Th2 related factors in the infected group were higher than those in the uninfected group， and the levels of serum Th1 related factors were lower in the uninfected group （P<0.05）.The severity of the infection group was that the density of malassezia in severe patients was significantly higher than that of moderate and mild patients （P<0.05）.The levels of serum SP and Th2 related factors were positively correlated with Malassezia infection， the serum Th1 factor levels were negatively correlated with Malassezia infection， and the density of Malassezia bacteria was positively correlated with the disease severity of patients in the infection group （P<0.05）. Conclusion? The abnormal fluctuations of serum SP and Th1/Th2 related factors in patients with PV infected by Malassezia may be caused by the immune abnormality after Malassezia infection，it may further increase the proliferation activity of Malassezia and aggravate the disease，clinical treatment can be formulated according to the expression of the above factors.

Key words： malassezia; psoriasis vulgaris; substance P; Th1; Th2; Interleukin-4; Interferon-γ

目前，尋常型銀屑?。≒soriasis vulgaris，PV）發(fā)病機(jī)制尚未明確，有研究認(rèn)為，可能與多種炎性因子大量聚集在組織皮損處誘發(fā)局部炎癥、免疫損害有關(guān)[1-2]。此外，還有研究顯示，真菌可作為超抗原或交叉抗原介導(dǎo)PV發(fā)生、發(fā)展過程，常見真菌為馬拉色菌[3]。馬拉色菌是寄生在正常人體皮膚的一種嗜脂性酵母菌，若宿主皮膚微環(huán)境異常改變或防御功能減弱，馬拉色菌可大量繁殖并誘發(fā)多種皮膚疾病，其致病機(jī)制源自菌體分解細(xì)胞脂質(zhì)引起細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變、凋亡，且可通過影響機(jī)體Th細(xì)胞亞群分化誘發(fā)免疫損害，加重皮膚疾病[4-5]。本研究通過探究馬拉色菌感染對PV患者血清P物質(zhì)（Substance P，SP）、Th1/Th2有關(guān)因子的影響及與病情關(guān)聯(lián)性，旨在為臨床病情評估、完善治療方案提供參考。現(xiàn)報道如下。

1? 資料和方法

1.1 一般資料：選取2017年4月-2019年10月筆者醫(yī)院就診的62例馬拉色菌感染PV患者為感染組，同期62例未感染馬拉色菌PV患者為未感染組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合PV診斷標(biāo)準(zhǔn)[6];②經(jīng)真菌鏡檢明確是否存在馬拉色菌感染，感染組馬拉色菌密度“+”及以上;③患者知情研究并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①近2個月內(nèi)接受相關(guān)治療者;②伴嚴(yán)重營養(yǎng)不良者;③伴惡性腫瘤或其他系統(tǒng)性疾病者;④伴其他皮膚疾病者。本研究經(jīng)筆者醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批通過。

1.2 方法：兩組均檢測血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子水平。

1.2.1 血清SP檢測：以真空非抗凝管采集空腹肘靜脈血2ml，離心15min（半徑8cm，轉(zhuǎn)速3 000r/min），取血清，置液氮保存，待測。武漢默沙克生物科技有限公司化學(xué)發(fā)光免疫分析法試劑盒測SP水平。

1.2.2 同法檢測血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子[白細(xì)胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、白細(xì)胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白細(xì)胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、干擾素-γ（Interferon-γ，INF-γ）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）]水平。操作步驟同血清SP檢測，均由資深?？漆t(yī)師參考試劑盒說明書規(guī)范完成。

1.3 觀察指標(biāo)：①對比兩組一般資料，采取自制一般資料調(diào)查問卷，包括年齡、性別、體質(zhì)量、病程、合并癥、疾病分期、病情程度、銀屑病皮損面積和嚴(yán)重程度指數(shù)（PASI）。PASI評分：重度PASI評分>12分;中度PASI評分6～11分;輕度PASI評分<6分;②對比兩組血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子（IL-10、IL-4、IL-2、INF-γ、TNF-α）水平;③分析馬拉色菌感染與患者血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子表達(dá)關(guān)系;④對比不同病情程度患者馬拉色菌密度。馬拉色菌密度檢測：用1cm寬透明膠帶在皮損處取材，以相同力度將膠帶緊貼皮膚5s，此后將膠帶均勻貼附于滴有真菌熒光染色液的載玻片上，熒光顯微鏡（日本奧林巴斯BX51TF）觀察馬拉色菌，計數(shù)，于孢子密集區(qū)讀取5個高倍鏡視野菌量，取均數(shù)，≤5個記“-”;6～15個記“+”;16～30個記“++”;>30個記“+++”;⑤分析馬拉色菌密度與患者病情程度相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析：采用SPSS 22.0統(tǒng)計分析軟件，計數(shù)資料以率表示，兩組間比較采用χ2檢驗;相關(guān)性以Spearman分析，符合正態(tài)分布的計量資料以（x?±s）表示，兩組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1 兩組一般資料：兩組年齡、體質(zhì)量、病程、性別、合并癥及疾病分期相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;感染組病情程度、PASI評分高于未感染組（P<0.05）

2.2 兩組血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子水平：感染組血清SP、Th2有關(guān)因子水平高于未感染組，血清Th1有關(guān)因子水平低于未感染組（P<0.05）。

2.3 馬拉色菌感染與患者血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子表達(dá)關(guān)系：Spearman相關(guān)性分析，血清SP、Th2有關(guān)因子水平與馬拉色菌感染呈正相關(guān)，血清Th1因子水平與馬拉色菌感染呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）。

2.4 不同病情程度患者馬拉色菌密度：感染組重度患者馬拉色菌密度顯著高于中度、輕度患者（P<0.05）

2.5 馬拉色菌密度與患者病情程度相關(guān)性：經(jīng)Spearman相關(guān)性分析顯示，馬拉色菌密度與感染組患者病情程度呈正相關(guān)（r=0.578，P<0.001）。

3? 討論

PV是臨床常見易復(fù)發(fā)性皮膚疾病，幾乎不可治愈，發(fā)病機(jī)制尚未明確，可能與感染、免疫等多種因素有關(guān)[7-8]。近年研究顯示，T細(xì)胞介導(dǎo)自身免疫異常與PV發(fā)病、發(fā)展關(guān)系密切[9]。

3.1 馬拉色菌感染與機(jī)體免疫關(guān)系：微生物感染是機(jī)體免疫異常的重要誘因，正常寄生真菌誘導(dǎo)PV逐漸引起臨床重視[10]。研究發(fā)現(xiàn)，急性發(fā)作期PV患者普遍存在馬拉色菌特異性抗體陽性情況[11]。本研究結(jié)果顯示，馬拉色菌感染患者病情程度、PASI評分高于未感染患者（P<0.05）。基于上述研究推測，馬拉色菌感染可能通過介導(dǎo)免疫損害加重PV患者易感性。馬拉色菌入侵機(jī)體初期可通過刺激非特異性免疫細(xì)胞生成細(xì)胞因子激活Th細(xì)胞增殖、分化，造成Th1/Th2平衡紊亂，繼而影響機(jī)體免疫功能[12-13]。本研究發(fā)現(xiàn)，PV患者普遍存在血清Th1、Th2有關(guān)因子異常表達(dá)情況，且感染組波動更顯著（P<0.05）。Th1主要介導(dǎo)細(xì)胞免疫，所生成細(xì)胞因子包括TNF-α、INF-γ、IL-2等。INF-γ是體內(nèi)具有雙向調(diào)節(jié)功能的重要免疫調(diào)節(jié)因子，可抵御真菌、細(xì)菌及病毒感染，抑制腫瘤細(xì)胞生成[14];IL-2為趨化因子家族成員，由活化T細(xì)胞生成，能刺激活化免疫細(xì)胞，增強(qiáng)機(jī)體抗微生物感染能力[15]。Th2所分泌IL-10、IL-4細(xì)胞因子，負(fù)責(zé)介導(dǎo)機(jī)體體液免疫過程，能下調(diào)抗原遞呈細(xì)胞、Th1細(xì)胞活性[16]。IL-10是同型二聚體細(xì)胞因子之一，功能主要體現(xiàn)在抑制Th1細(xì)胞活性、抗炎等方面，同時能阻斷IFN-γ、TNF-α分泌過程;IL-4在適應(yīng)性及體液免疫中扮演關(guān)鍵角色。正常情況，Th1/Th2處于動態(tài)平衡，一旦平衡打破，則表現(xiàn)機(jī)體免疫紊亂。所構(gòu)建豚鼠馬拉色菌感染模型中IL-10、IL-4表達(dá)顯著降低，TNF-α、INF-γ、IL-2表達(dá)顯著升高，說明馬拉色菌定植感染可導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生系統(tǒng)性免疫反應(yīng)[17]。本研究結(jié)果顯示，感染組血清Th2有關(guān)因子水平高于未感染組，血清Th1有關(guān)因子水平低于未感染組，且表達(dá)水平與馬拉色菌感染關(guān)系密切（P<0.05）。分析大面積或嚴(yán)重馬拉色菌感染可降低皮膚屏障功能及防御能力，不僅表現(xiàn)于局部皮膚，且能通過介導(dǎo)角質(zhì)層損害、脂質(zhì)分解作用下誘導(dǎo)Th1/Th2漂移。

3.2 馬拉色菌感染與血清SP關(guān)系：SP是一種神經(jīng)肽，能通過刺激角質(zhì)生成、促進(jìn)細(xì)胞增殖等過程，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)、誘發(fā)皮膚瘙癢，PV患者臨床體征、癥狀均與炎癥因子大量聚集有關(guān)，本研究已證實，且部分患者自覺不同程度瘙癢。國外有研究顯示，PV患者外周血及皮損組織中SP含量顯著升高[18]。本研究顯示，感染組血清SP高于未感染組（P<0.05），說明馬拉色菌感染可進(jìn)一步誘導(dǎo)SP表達(dá)。分析機(jī)制可能是馬拉色菌感染侵害下含SP神經(jīng)被破壞，外周血釋放增加，引起Koebner現(xiàn)象;機(jī)體防御性反應(yīng)兒茶酚胺代謝紊亂，促使SP生成增加。本研究結(jié)果還顯示，馬拉色菌感染與患者血清SP表達(dá)呈正相關(guān)（P<0.05），說明馬拉色菌感染能進(jìn)一步介導(dǎo)SP表達(dá)，與上述機(jī)制分析一致。

3.3 馬拉色菌感染與PV病情程度關(guān)系：本研究結(jié)果還顯示，隨馬拉色菌密度升高，PV患者病情呈加重趨勢（P<0.05）。吳紅梅等[19]研究指出，中重度女性患者面部馬拉色菌密度多于輕度患者，但軀干上部、男性軀干及面部馬拉色菌密度與病情程度無關(guān)。有研究顯示，重度PV患者頭頸部皮損區(qū)馬拉色菌密度是健康者、中輕度患者的2～5倍[20]。本研究進(jìn)一步分析，馬拉色菌密度與感染組患者病情程度呈正相關(guān)（P<0.05）。與個別報道不一致，分析PV病情程度不僅取決于皮表馬拉色菌密度、皮損性質(zhì)，還受入侵體內(nèi)馬拉色菌量及各種細(xì)胞因子表達(dá)影響，需后期擴(kuò)大樣本容量，多因素分析馬拉色菌密度與PV病情程度的關(guān)系。

綜上可知，馬拉色菌感染PV患者存在血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子異常波動情況，其機(jī)制可能是馬拉色菌感染后引起免疫異常，進(jìn)一步增加馬拉色菌增殖活性，加重了病情，臨床可根據(jù)上述因子表達(dá)情況制定治療方案。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Coban M，Tasli L，Turgut S，et al.Association of adipokines，insulin resistance，hypertension and dyslipidemia in patients with psoriasis vulgaris[J].Ann Dermatol，2016，28（1）：74-79.

[2]Wang Y，Wang LL，Yang HY，et al.Interleukin-21 is associated with the severity of psoriasis vulgaris through promoting CD4+ T cells to differentiate into Th17 cells[J].Am J Transl Res，2016，8（7）：3188-3196.

[3]熊娟娟，畢健平，孫德祥，等.甲真菌病和甲銀屑病的皮膚鏡特征分析[J].中華皮膚科雜志，2019，52（2）：106-110.

[4]鐘白玉，徐艷，鄧向芬，等.熒光染色、PAS染色和美藍(lán)染色在馬拉色菌毛囊炎診斷中的比較[J].實用皮膚病學(xué)雜志，2018，11（3）：149-150，154.

[5]Gelber JT，Cope EK，Goldberg AN，et al.Evaluation of malassezia and common fungal pathogens in subtypes of chronic rhinosinusitis[J].Int Forum Allergy Rhinol，2016，6（9）：950-955.

[6]Dressler C，Rosumeck S，Werner RN，et al.Methods report： european s3-guideline on the systemic treatment of psoriasis vulgaris - update apremilast and secukinumab-EDF in cooperation with EADV and IPC[J].J Eur Acad Dermatol Venereol，2017，31（12）：1964-1977.

[7]Cubillos S，Krieg N，Norgauer J.Effect of Vitamin D on peripheral blood mononuclear cells from patients with psoriasis vulgaris and psoriatic arthritis[J].PLoS One，2016，11（4）：e0153094.

[8]王靖，顧艷麗，張新萍，等.非編碼RNA在銀屑病中的研究進(jìn)展[J].中華生物醫(yī)學(xué)工程雜志，2017，23（1）：76-79.

[9]Di Cara F，Sheshachalam A，Braverman NE，et al.Peroxisome-mediated metabolism is required for immune response to microbial infection[J].Immunity，2018，48（4）：832-833.

[10]袁紅珊，孔慶濤，劉慧，等.銀屑病患者中甲真菌病患病率的病例對照研究[J].中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2019，35（8）：463-466.

[11]張宇，趙雅玲，王旻，等.長春地區(qū)馬拉色菌感染相關(guān)疾病的流行病學(xué)研究[J].中國地方病防治雜志，2016，31（5）：492-493.

[12]劉宇甄，曾榮，徐浩翔，等.痤瘡發(fā)病相關(guān)的重要皮膚微生物群研究進(jìn)展[J].中華皮膚科雜志，2019，52（5）：346-349.

[13]王潔，唐春萍，江濤，等.香鱗毛蕨有效部位對糠秕馬拉色菌的體外抗真菌作用研究[J].中成藥，2015，37（3）：642-645.

[14]Tokumoto M，Tanaka H，Tauchi Y，et al.Immunoregulatory function of lymphatic endothelial cells in tumor-draining lymph nodes of human gastric cancer[J].Anticancer Res，2017，37（6）：2875-2883.

[15]Kim N，Jeon YW，Nam YS，et al.Therapeutic potential of low-dose IL-2 in a chronic GVHD patient by in vivo expansion of regulatory T cells[J].Cytokine，2016，78（1）：22-6.

[16]張韶斌，陳斯亮，符青松，等.25-羥維生素D3與IL-10在系統(tǒng)性紅斑狼瘡中的臨床應(yīng)用研究[J].分子診斷與治療雜志，2018，10（3）：180-183，195.

[17]胡博，張豐川，李元文，等.槿柏洗劑抑菌效果評價及其對糠秕馬拉色菌感染豚鼠模型外周血中Th1/Th2相關(guān)因子的影響[J].環(huán)球中醫(yī)藥，2019，12（6）：831-835.

[18]Feng C，Wang T，Li SJ，et al.CARD14 gene polymorphism c.C2458T （p.Arg820Trp） is associated with clinical features of psoriasis vulgaris in a Chinese cohort[J].J Dermatol，2016，43（3）：294-297.

[19]吳紅梅，陸茂，歐美，等.特應(yīng)性皮炎患者皮膚馬拉色菌菌量及其與病情嚴(yán)重程度相關(guān)性研究[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報，2018，15（23）：96-99.

[20]陳春麗，王慧琴，劉新梅，等.51例新疆尋常型銀屑病患者皮損中FOXP1和hMSH2的表達(dá)[J].中國麻風(fēng)皮膚病雜志，2016，32（1）：4-6.

[收稿日期]2020-04-26

本文引用格式：曾令斌，陸捷潔，吳偉偉，等.馬拉色菌感染對尋常型銀屑病患者血清SP、Th1/Th2有關(guān)因子的影響及與病情關(guān)聯(lián)性[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2021，30（7）：58-61.