清熱涼血法聯(lián)合加味烏藜消白湯治療白癜風(fēng)臨床研究

耿春杰，寇曉麗，黃俊會(huì)，李增剛，馮曉英，尹志輝

(1.邢臺(tái)市第三醫(yī)院，河北 邢臺(tái) 054000； 2.河北省中醫(yī)藥科學(xué)院，河北 石家莊 050031)

白癜風(fēng)是臨床常見色素脫失性皮膚黏膜病，以局限性或泛濫性色素脫失為主要特征，毛囊或皮膚黑素細(xì)胞內(nèi)酪氨酸系統(tǒng)功能退化、喪失是導(dǎo)致發(fā)病的主要原因。隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展，白癜風(fēng)發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。相關(guān)資料顯示，白癜風(fēng)以青壯年較為多見，但沒有特定發(fā)病群體及發(fā)病位置，任何年齡、皮膚部位均可發(fā)生，且多發(fā)于頸部、顏面部、手背等暴露部位，目前臨床尚無完全根治的方法，且治療較為困難，對(duì)患者生活質(zhì)量及心理狀態(tài)造成嚴(yán)重影響[3-4]。本病發(fā)病機(jī)制尚未明確，但易于診斷。相關(guān)研究顯示，精神、遺傳及神經(jīng)內(nèi)分泌、自身免疫等因素均對(duì)白癜風(fēng)發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生作用，但更多研究認(rèn)為，自身免疫性疾病在發(fā)病過程中起到重要作用。隨著中醫(yī)不斷發(fā)展，中藥在臨床多種疾病治療中得到廣泛應(yīng)用[5-6]。為尋求更加安全有效的治療方式，觀察以清熱涼血法、加味烏藜消白湯聯(lián)合治療白癜風(fēng)患者，對(duì)硫酸脫氫表雄酮(Dehydroepiandrosterone sulfate，DHEA-S)、攝食抑制因子(Nesfatin-1，NSF-1)、甲狀腺球蛋白抗體(Thyroglobulin antibody，Anti-TG)水平的影響進(jìn)行研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年11月在邢臺(tái)市第三醫(yī)院收治的白癜風(fēng)患者146例，按隨機(jī)數(shù)字表法分為單藥組73例，男性35例，女性38例；年齡18～53歲，平均(35.5±14.8)歲。聯(lián)合組73例，男性33例，女性40例；年齡20～52歲，平均(36.1±13.5)歲。所有受試患者基線資料均衡完整，具有可比性。患者簽署知情同意書，并獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

病例納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合失眠健忘、頭暈耳鳴、舌質(zhì)紅、少苔、脈細(xì)弱等中醫(yī)癥候診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。排除標(biāo)準(zhǔn)：①病例資料不全；②合并心、肝、腎等重要器官功能不全者；③患有自身免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病者；④伴有內(nèi)分泌疾病者；⑤近1個(gè)月內(nèi)使用過糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、性激素者；⑥妊娠期、哺乳期婦女；⑦精神疾病、溝通障礙者。

1.2 治療方法

1.2.1 單藥組:采用加味烏藜消白湯對(duì)單藥組患者進(jìn)行治療。烏藜消白湯方劑由甘草6 g，紅花、黃芩各10 g，赤芍、丹參、紫草、補(bǔ)骨脂、女貞子、制何首烏、菟絲子、旱蓮草、紫蘇葉各15 g，白蒺藜30 g組成。根據(jù)患者癥狀不同加減藥物。所有藥物熬制前于水中浸泡0.5 h，加水400 ml文火熬制90 min，煎湯代水飲，200 ml/次，每日1劑，分早晚兩次服用，20 d為1個(gè)療程。

1.2.2 聯(lián)合組:在單藥組治療基礎(chǔ)上結(jié)合清熱涼血法對(duì)患者進(jìn)行治療。清熱涼血法方劑由生地5 g,茜草、丹參、丹皮、白鮮皮各10 g，赤芍12 g，紫草根15 g，馬齒莧30 g組成，根據(jù)患者癥狀不同加減藥物。所有藥物熬制前于水中浸泡0.5 h，加水400 ml文火熬制90 min，煎湯代水飲，200 ml/次，每日1劑，分早晚兩次服用，20 d為1個(gè)療程。所有患者連續(xù)治療兩個(gè)療程。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 中醫(yī)癥候評(píng)分：失眠健忘、頭暈耳鳴或腰膝酸軟，按無、輕、中、重度分別計(jì)為0、2、4、6分，其余次癥按照無、輕、中、重度分別計(jì)為0、1、2、3分，中醫(yī)癥候總分=主癥得分+次癥得分。對(duì)兩組患者中醫(yī)癥候總分及主癥得分進(jìn)行比較。

1.3.2 雙抗夾心酶法檢測(cè)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白介素(IL-6、IL-33)、攝食抑制因子(NSF-1)水平：于治療前、治療后40 d清晨空腹抽取受試患者6 ml靜脈血，要求血液標(biāo)本無脂血和溶血，置于無抗凝劑試管中，2000 r/min離心處理20 min，分離上清，-20 ℃下保存待檢。將血清樣本混于1%BSA的PBS溶液中稀釋為工作濃度，96孔板中加入100 μl/孔，覆蓋潔凈粘條，4 ℃孵育過夜。去除孔內(nèi)抗體，TBST溶液重復(fù)洗滌，加入200 μl 1% BAS的PBS溶液封閉反應(yīng)2 h，洗滌拍干。將96孔板中多余板條移除，在第1列中加入100 μl標(biāo)準(zhǔn)品，剩余的96孔板中加入100 μl樣品，覆蓋潔凈粘條，常溫孵育2 h。洗滌反應(yīng)板拍打除去多余緩沖劑，每孔內(nèi)加入TNF-α、IL-6、IL-33、NSF-1二抗，覆蓋粘條，常溫下孵育2 h，洗滌反應(yīng)板，加入100 μl底物溶液，粘條覆蓋，常溫孵育40 min，加入50 μl顯色液/孔，孵育45 min，加入50 μl中止液。酶標(biāo)檢測(cè)儀450 nm處讀取A值，計(jì)算TNF-α、IL-6、IL-33、NSF-1濃度。ELISA試劑盒均購(gòu)自上海淳麥生物科技有限公司。

1.3.3 化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)Anti-TG水平:將待測(cè)血清統(tǒng)一取出溶化后進(jìn)行檢測(cè)，每份標(biāo)本凍融1次。采用羅氏E411全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及配套試劑盒(購(gòu)自瑞士羅氏公司)對(duì)血清Anti-TG水平進(jìn)行檢測(cè)，采用盲法、復(fù)孔測(cè)定。

1.3.4 抑郁、焦慮評(píng)分比較：采用漢密爾頓抑郁量表(Hamilton depression rating scale，HAMD)[8]、漢密爾頓焦慮量表(Hamilton anxiety rating scale，HAMA)[9]評(píng)估患者心理焦慮、抑郁狀況，HAMD評(píng)分、HAMA評(píng)分均為4個(gè)等級(jí)。HAMD評(píng)分：嚴(yán)重抑郁癥>35分；一定患有抑郁癥為21～35分；可能患有抑郁癥為8～0分；無抑郁癥<8分。HAMA評(píng)分：嚴(yán)重焦慮癥>30分；患有一定焦慮癥23～30分；可能患有焦慮癥8～22分；無焦慮癥<8分。HAMD評(píng)分、HAMA評(píng)分與心理狀況呈正比。

1.4 療效標(biāo)準(zhǔn) 顯效：白癜風(fēng)癥狀消失、肝功能恢復(fù)；有效：臨床癥狀好轉(zhuǎn)，體征逐漸好轉(zhuǎn)；無效：臨床體征無明顯改善甚至加重。總有效率=(顯效+有效)例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用卡方檢驗(yàn)；計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者治療前后中醫(yī)癥候評(píng)分比較 見表1。兩組治療前主癥評(píng)分及中醫(yī)癥候總分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與單藥組相比，聯(lián)合組中醫(yī)癥候評(píng)分主癥評(píng)分及中醫(yī)癥候總分較低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 兩組患者治療前后中醫(yī)癥候評(píng)分比較(分)

2.2 兩組患者治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-33水平比較 見表2。兩組患者治療前血清TNF-α、IL-6、IL-33水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組患者血清TNF-α、IL-6、IL-33水平均降低，且聯(lián)合組水平均低于單藥組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表2 兩組患者治療前后血清TNF-α、IL-6、IL-33水平比較

2.3 兩組患者治療前后血清DHEA-S、NSF-1、Anti-TG水平比較 見表3。兩組患者治療前血清DHEA-S、NSF-1、Anti-TG水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；與單藥組相比，聯(lián)合組治療后血清DHEA-S水平升高、NSF-1、Anti-TG水平均降低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表3 兩組患者治療前后血清DHEA-S、NSF-1、Anti-TG水平比較

2.4 兩組患者治療前后HAMA、HAMD評(píng)分比較 見表4。兩組HAMD、HAMA評(píng)分治療前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，與單藥組相比，聯(lián)合組HAMD、HAMA評(píng)分均較低，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表4 兩組患者治療前后HAMA、HAMD評(píng)分比較(分)

2.5 兩組患者臨床療效比較 見表5。與單藥組相比，聯(lián)合組患者臨床治療有效率略高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表5 兩組患者臨床療效比較[例(%)]

3 討 論

白癜風(fēng)作為自身免疫性疾病，在發(fā)病過程中多伴有橋本甲狀腺炎、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)、減退及銀屑病等多種自身免疫性疾病，對(duì)患者生活質(zhì)量造成影響[10-11]。目前，臨床尚未有根治方法，多以藥物干預(yù)為主，雖可有效緩解病情發(fā)展，但無法達(dá)到預(yù)期療效。隨著傳統(tǒng)中醫(yī)不斷發(fā)展，中醫(yī)藥廣泛應(yīng)用于臨床多種疾病[12-13]。

我國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)對(duì)白癜風(fēng)沒有明確診斷，但在白癜風(fēng)治療方面具有一定優(yōu)勢(shì)。中醫(yī)的“久病必瘀”之說，認(rèn)為白癜風(fēng)無論是何病因，以血瘀阻絡(luò)，肌膚失于榮養(yǎng)而色白為最終表現(xiàn)[14]。相關(guān)研究顯示，中藥具有調(diào)氣活血、補(bǔ)肝益腎的作用，對(duì)白癜風(fēng)癥狀具有良好地改善效果。中藥治療雖然過程緩慢，但可以做到對(duì)癥下藥，達(dá)到固本培元、治標(biāo)治本之效，且中藥治療安全性、有效性更高[15-16]。清熱涼血法方劑由茜草、丹皮、丹參、赤芍、生地、馬齒莧、白茅根、紫草根組成，茜草、白茅根活血化瘀；丹參、赤芍、紫草根具有清熱解毒之效；馬齒莧可涼血解毒清熱。烏藜消白湯方劑由制首烏、丹參、補(bǔ)骨脂、刺蒺藜、菟絲子、旱蓮草、赤芍、紫草、紫蘇葉、女貞子、甘草組成，菟絲子、制首烏、女貞子、補(bǔ)骨脂為君藥，具有益精血、滋補(bǔ)肝腎、壯根本、烏須發(fā)效果；紫草、丹參、旱蓮草、丹參為臣藥，可有效抑制君藥過熱之性；紫蘇葉、刺蒺藜能夠祛風(fēng)瀉熱，輔以臣藥調(diào)節(jié)血?dú)?，使君藥補(bǔ)而不滯。諸藥合用益中有泄、補(bǔ)中有通、祛瘀生新、調(diào)和氣血、榮膚祛白之功效。本文研究結(jié)果顯示，采用清熱涼血法聯(lián)合加味烏藜消白湯對(duì)白癜風(fēng)患者進(jìn)行治療，患者中醫(yī)癥候評(píng)分降低，治療效果顯著。

相關(guān)研究顯示，白癜風(fēng)的發(fā)生發(fā)展與自身免疫功能紊亂具有密切關(guān)系[17]。TNF-α由多種細(xì)胞分泌生成，其通過激活受體對(duì)細(xì)胞凋亡產(chǎn)生重要作用。相關(guān)研究顯示，TNF-α對(duì)黑素細(xì)胞凋亡途徑具有影響作用，其水平在白癜風(fēng)發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要意義。同時(shí)研究指出，TNF-α的增加對(duì)黑素細(xì)胞增殖具有抑制作用，使酪氨酸酶活性降低[18-19]。IL-33屬于雙重功能細(xì)胞因子，主要表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞受損后，其水平呈異常升高。同時(shí)其可作為細(xì)胞內(nèi)核因子抑制調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄，也可與相關(guān)受體結(jié)合，參與促炎癥反應(yīng)。而IL-6作為參與機(jī)體炎癥反應(yīng)及抗感染防御機(jī)制的重要因子，對(duì)中性粒細(xì)胞吸附黑素細(xì)胞具有促進(jìn)作用，造成黑素細(xì)胞受損[20-21]。本文研究結(jié)果顯示，采用清熱涼血法聯(lián)合加味烏藜消白湯對(duì)白癜風(fēng)患者進(jìn)行治療，有效抑制機(jī)體炎癥反應(yīng)。此結(jié)果提示，中藥聯(lián)合治療可降低白癜風(fēng)患者TNF-α、IL-6、IL-33水平，抑制炎性反應(yīng)，減輕黑素細(xì)胞受損，促進(jìn)疾病轉(zhuǎn)歸。

臨床實(shí)踐表明，內(nèi)分泌疾病與白癜風(fēng)的發(fā)生具有一定相關(guān)性。DHEA屬于甾體類物質(zhì)，通常以DHEA-S形式分布于血液循環(huán)中，是血液循環(huán)內(nèi)含量最高的類固醇激素，在多種生理、病理過程中均有參與，可促進(jìn)機(jī)體多種代謝[22]。黃珍等[23]研究表示，DHEA-S水平在白癜風(fēng)患者中明顯高于健康人，導(dǎo)致Th1-Th2免疫失衡，造成白癜風(fēng)皮損。NSF-1由激素原轉(zhuǎn)化酶裂解產(chǎn)生，參與能量穩(wěn)定及食物攝入調(diào)節(jié)。資料指出，NSF-1作為分泌蛋白，通過影響患者情緒，激活下丘腦黑皮質(zhì)素信號(hào)通路，導(dǎo)致黑素細(xì)胞生成減少，從而誘發(fā)白癜風(fēng)[24]。糖尿病、甲狀腺疾病、銀屑病等多種自身免疫性疾病與白癜風(fēng)具有相關(guān)聯(lián)系，而甲狀腺功能紊亂作為白癜風(fēng)患者常見疾病，其發(fā)病率是非白癜風(fēng)患者的3倍左右，甲狀腺抗體異常發(fā)病率約為5倍。因此檢測(cè)Anti-TG水平可幫助判斷白癜風(fēng)患者是否伴有甲狀腺疾病，且在女性及散發(fā)型白癜風(fēng)患者中效果更為突出[25-26]。本文研究結(jié)果顯示，采用清熱涼血法聯(lián)合加味烏藜消白湯對(duì)白癜風(fēng)患者進(jìn)行治療，血清DHEA-S水平升高、NSF-1、Anti-TG水平降低，說明二者聯(lián)合治療效果顯著。

綜上所述，采用清熱涼血法聯(lián)合加味烏藜消白湯對(duì)白癜風(fēng)患者進(jìn)行治療，患者中醫(yī)癥候評(píng)分降低，有效減輕炎癥反應(yīng)，提高自身免疫能力，改善心理狀態(tài)，安全性有效性更高，為臨床治療白癜風(fēng)提供一定參考依據(jù)。